罕见的B(A)表型血清学及基因检测

目的对1例B(A)表现型用血清学及基因检测进行鉴定。方法使用2个厂家的单克隆抗-A、抗-B血型定型试剂;进口单克隆抗-A、抗-B血型定型试剂;Diamed凝胶系统;人源抗-A、抗-B、抗-H血型试剂和试剂红细胞,用常规血清学方法对被检血样进行ABO血型定型。采用吸收放散方法;分子生物学PCR-RFLP方法;ABO基因第6、7外显子的PCR产物正反向测序方法进一步分析。结果被检血样红细胞及血清经2种单克隆抗-A、抗-B和试剂红细胞进行抗原抗体鉴定:正定型结果不一致;正反定型结果不符合。用吸收放散方法,人源抗-A、抗-B、抗-H;进口单克隆抗-A、抗-B血型定型试剂和Diamed凝胶系统检测:有弱A抗原、强H抗原检出;PCR-RFLP基因分型:检出B/O基因;基因克隆测序证实为:B(A)700/O*02。结论证实该例为B(A)700/O*02。

B(A)血型的血清学及分子遗传学研究——附2例报告

目的通过分子生物学方法鉴定2例罕见的B(A)血型,并进行家系调查。方法应用常规血清学方法鉴定ABO血型表型,应用PCR方法扩增2例先证者的ABO基因第6、7外显子,PCR产物采用直接测序和克隆测序的方法检测其基因型。结果血清学方法鉴定2例先证者的ABO血型正反定型不一致,正定型AB型,H抗原表达强,反定型血清中存在抗-A1,初定为AwB亚型;经过测序后发现2例均含有O02等位基因,且B等位基因在第7外显子存在700C>G突变,证实其为B(A)02等位基因。先证者2的儿子和母亲都携带B(A)02等位基因,而先证者1的2个儿子都未携带B(A)02等位基因。结论 2例血清学特性类似AwB亚型的先证者经进一步基因型鉴定为罕见的B(A)02/O02型。B(A)受血者输血一般可用O型或B型洗涤红细胞,B(A)血型献血者一经确定后可作为红细胞稀有血型库的特殊献血者保留。

双重复合型ABO糖基转移酶分子基础与表达产物的分析

为了查明ABO基因表达产物和分子遗传学背景,对7例ABO血型正反定型不相符、经初步分子生物学分析出现双重复合型ABO基因的血液标本进行了研究。血清学表达型运用单克隆、多克隆抗体鉴定,基因分型运用PCR产物直接和单倍体特异性引物法进行ABO基因的序列测定。结果表明:在中国人群中鉴定出6种具双重复合编码功能的ABO等位基因,B(A)和cis-AB血清型所表达的A抗原特征随着个体的不同而有所差异。结论:4个标本中有2对样本有不同的抗原表达却有着相同的ABO分子生物学基础。

B(A)血型的鉴定及其输血策略分析

目的探讨B(A)血型患者的血清学及其基因型鉴定分析方法。方法应用试管法(血清学)对3名患者的临床疑难ABO血型标本做ABO血型正反定型;应用实时荧光定量PCR技术对3例标本做ABO血型基因分型,并采用基因测序方法对其ABO基因1-7外显子测序确定基因型。结果3名患者血清学ABO血型正反定型均表现为“B(A)血型”的格局;3例ABO基因分型均为B/O2,测序均在第7外显子B等位基因基础上发生c.640A>G突变,符合ABO*BA.04基因型特点。结论对于ABO血型亚型等疑难血型的鉴定,采用血清学和基因检测相结合的方法可以准确鉴定血型,保证临床用血安全。

1例B(A)型孕产妇的定型与备血问题的解决

血液使用安全一直是目前临床输血治疗研究的重点,输血前的血型定型检测尤为重要,尤其是较为少见的血型,需要反复确定血型,防止差错的发生,积极处理影响血型定型的相关因素,并给予干预处理措施,保障用血安全。

罕见B(A)血型的血清学及基因检测研究

本研究旨在通过血清学和分子生物学方法研究1例ABO血型系统中罕见B(A)型,并分析造成多次检测结果不一致的原因。采用血型血清学方法鉴定ABO血型血清型,同时采用PCR测序方法检测其基因型。结果表明,该献血者血清学结果正反定型结果不符,正定型AB型,反定型B型,ABO基因型为B(A)04/O01型,存在nt640A>G点突变,导致214位甲硫氨酸被缬氨酸置换。结论:对ABO血型血清学正反定型不符的标本,可用分子生物学方法进行辅助验证,并能阐述ABO血型弱表达现象的分子基础。

B(A)02/O02亚型的血清学及分子遗传学研究——附报告1例

目的鉴定罕见的B(A)02/O02亚型,选择合适血液进行配血。方法应用血型血清学鉴定表型,利用分子生物学对血液标本第6、7外显子进行基因测序,并做家系调查。结果先证者和其父亲标本血清学鉴定疑似B(A),H物质较正常B型明显增强,血清中产生不规则抗-A;经基因测序后,2例标本的第6外显子有O02等位基因,其B等位基因的第7外显子发生700C>G突变。结论经血清学和分子生物学检测后,2例标本均证实为B(A)02/O02,为先证者选择O型洗涤红细胞和AB浆输血治疗。

B(A)04亚型的分子遗传学研究(附7例报告)

目的对血清学定型为AwB型的血样标本进行ABO基因检测，探讨其分子基础。方法采用PCR-SSP对常规血型血清学方法定型困难的7例标本进行初步的ABO基因分型检测，并对其ABO血型基因第6、7外显子扩增后进行直接测序及单体型测序，确定其基因型。结果7例标本血型血清学结果相似：表现为AwB，红细胞与抗-A1＋-2＋凝集，与抗-B4＋凝集，与抗-A1不凝集，血清中存在抗-A；PCR-SSP基因分型显示7例标本均为B／O1；直接测序和单体型测序显示：7例标本均含有O等位基因，其B等位基因均在第7外显子存在nt640A〉G突变，证实其为B（A）04等位基因。结论经测序和血清学结果证实，7例标本均为B（A）表现型，携带有B（A）04等位基因。

1例B（A）亚型的血型分子生物学鉴定

目的：对一例ABO血型正反定型不符,疑为B（A）亚型的患者样本进行血型分子生物学鉴定,以确定患者血型.方法：应用血型血清学和基因测序方法进行ABO血型鉴定和基因碱基序列检测.结果：血型血清学鉴定,红细胞上具有A抗原和B抗原,且凝集强度B〉A;血清中具有抗A1抗体;H抗原凝集强度大于对照组标准B细胞,低于标准O细胞.ABO基因Exon6和Exon7直接测序,Exon6显示nt261缺失G,表现为O基因特征性突变,为O01基因.Exon7显示nt526C/G、nt657C/T、nt700C/G、nt703G/A、nt796C/A、nt803G/C、930G/A杂合,nt700C/G为B（A）02特有的基因突变,测序结果确定为B（A）02/O01型.结论：对血清学鉴定困难的疑难血型患者应该进行基因分型,确保患者输血安全.

罕见B(A)04/O31亚型1例

目的对1例血清学定型为AwB型的血液标本进行ABO基因检测,探讨其分子遗传学基础。方法采用PCR-SSP方法对血清学定型困难的1例标本进行ABO基因分型,并对其ABO基因第6、7外显子扩增后,进行直接测序及单体型测序,确定其基因型。结果此例标本血清学表现为AwB,红细胞与抗-A 2+凝集,与抗-B 4+凝集,与抗-A1不凝集,血清中存在抗-A;PCR-SSP基因分型显示为B/O1;直接测序和单体型测序显示:此例标本其B等位基因在第7外显子存在nt640A>G突变,其O等位基因在第7外显子存在nt529G>A突变。结论经测序和血清学结果证实,此例标本为罕见的B(A)04/O31亚型。

一例稀有CisAB血型血清学及遗传机理分析

目的对1例献血者血型血清学鉴定为A2B血样进行基因型分析。方法应用常规血型血清学方法进行血型鉴定;采用PCR-SSP法进行ABO初步基因分型的检测,并对ABO基因第6和第7外显子的核苷酸序列进行扩增、测序和分析。结果血型血清学鉴定为A2B亚型,基因分型为BB型,初步判定为B(A)型;基因测序发现两条等位基因第6外显子均不存在261delG及297 G/G,判定该献血者血型为B与B基因的组合,经与A101核苷酸序列比对,对第7外显子的核苷酸序列分析发现,有一条核苷酸链上有526C>G,657C>T、703G>A及803G>C点突变,另一条核苷酸链上有297A>G、526C>G、657C>T、703G>A、796C>A、803G>C及930G>A点突变,确定该献血者血型基因型为CisAB02/B101。结论血型血清学对CisAB和B(A)判定有一定的局限性,通过核苷酸序列及分析能够明确本例献血者基因型为CisAB02/B101。

一例多位点突变导致的罕见B(A)型的血清学及分子遗传学研究

目的探讨1例ABO血型血清学正、反定型不符的血样标本的分子遗传学基础。方法采用试管法对此例血样进行ABO血型正、反定型,应用直接测序及单倍型测序的方法确定其基因型。结果此例样本血型血清学结果显示,其正定型为AwB型,反定型为B型;直接测序及单倍型测序最终结果显示,其中一条等位基因为O01,另一条等位基因与A101标准序列相比,存在c.297A>G、c.657C>T、c.796C>A、c.803G>C及c.930G>A碱基突变。结论经基因测序证实,此例血清学定型困难的样本基因型为O01/B(A)new型,此突变类型的B(A)型既往未见报道。

B(A)04型血清学与基因学分析及其与CisAB型文献对比

目的分析疑似B(A)血型的血清学与分子生物学的鉴定策略,回顾CisAB、A亚B型的区别与联系。方法采用血清学与分子生物学方法鉴定血型,凝聚胺介质和Liss-coombs卡交叉配血。结果血清学检查示:2例被检者红细胞与抗-A标准血清凝集(强度分别为1+~2+),抗-B凝集强度均为4+,抗A1均为阴性,抗H凝集强度均为3+~4+,试管法2例红细胞均B型人源性血浆无凝集;2例被检者血清血型反定型示,A1c均凝集(强度为3+~4+),A2c凝集均呈(±),Bc、Oc、自身红细胞不反应。分子生物学试验显示,2例被检者均为B(A)04/O01。配血试验显示被检者与B型和O型洗涤红细胞配血主次侧均无溶血、无凝集。结论2例被检者均为B(A)亚型[B(A)04/O01],红细胞可输注O型或B型洗涤红细胞,血浆可考虑AB浆或低效价的B浆。

一个新等位基因ABO＊B（A）07的鉴定

目的探讨一种新的B（A）型的分子机制。方法应用PCR-序列特异性引物检测一例ABO血型正、反定型不一致献血者的AB0基因型，同时扩增A．BO基因的第6和第7外显子，并进行直接测序和克隆测序。结果ABO血型正、反定型不一致献血者的红细胞不能吸收放散抗-A，血浆中未检出不规则抗体。PCR一序列特异性引物结果显示其基因型为AB0。B／0。测序结果显示一等位基因为ABO＊O02，另一等位基因的突变位点为297A〉G、526C〉G、657C〉T、701C〉T、703G〉A、796C〉A、803G〉C、930G〉A；该等位基因被GenBank收录（登录号KM974887），经检索血型抗原基因突变数据库证实为新的B（A）等位基因。结论鉴定了一新的等位基因ABO＊B（A）07，为深入研究血型抗原的异常表达和ABO血型的准确定型提供了依据。