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CLEC1B、DKK1、DRD4在原发性肝癌病变组织中的表达及临床意义探究
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作者 代云龙 黄纪伟 《医学分子生物学杂志》 CAS 2024年第3期224-230,共7页
目的分析C型凝集素结构域家族1成员B(C-type lectin domain family 1 member B,CLEC1B)、分泌型蛋白Dickkopf 1(DKK1)、多巴胺受体D4(dopamine receptor D4,DRD4)在原发性肝癌(primary hepatic cancer,PHC)患者病变组织中的表达及临床... 目的分析C型凝集素结构域家族1成员B(C-type lectin domain family 1 member B,CLEC1B)、分泌型蛋白Dickkopf 1(DKK1)、多巴胺受体D4(dopamine receptor D4,DRD4)在原发性肝癌(primary hepatic cancer,PHC)患者病变组织中的表达及临床意义。方法回顾性选取2022年1月~2023年1月在四川大学华西医院接受肝癌切除术且经术后病理证实为PHC的138例患者,取其癌组织与癌旁组织石蜡病理标本,分析其CLEC1B、DKK1、DRD4表达情况及和临床病理特征关联性,Pearson法分析CLEC1B、DKK1、DRD4的相关性。结果肝癌组织中CLEC1B、DRD4表达水平均低于癌旁肝组织,肝癌组织中的DKK1蛋白表达较癌旁肝组织更高(P<0.05),且3者均主要分布于细胞浆;CLEC1B低表达、DKK1高表达、DRD4低表达分别97例(70.29%)、91例(65.94%)、78例(56.52%),PHC患者的CLEC1B低表达与术前AFP水平、血管侵犯、远处转移、肿瘤出血等密切相关(P<0.05),DKK1高表达与术前AFP水平、BCLC Kinki分期、肿瘤数目、肿瘤大小密切相关(P<0.05),DRD4低表达与术前AFP水平、肿瘤数目、肿瘤大小、卫星结节、血管侵犯密切相关(P<0.05);Pearson相关分析显示,PHC患者CLEC1B、DRD4与DKK1表达水平呈负相关(r=-0.809、r=-0.774,P<0.001),CLEC1B与DRD4表达水平呈正相关(r=0.748,P<0.001)。结论CLEC1B、DRD4在PHC患者癌变组织中呈低表达,而DKK1呈高表达,且与临床病理参数有关,CLEC1B、DKK1、DRD4可能参与PHC发生发展,有一定检测意义。 展开更多
关键词 C型凝集素结构域家族1成员b 分泌型蛋白Dickkopf 1 多巴胺受体D4 原发性肝癌
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术前血清NF⁃κB、NLRP3水平对脑胶质瘤切除术患者的预后预测价值
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作者 武通帅 刘震洋 《中国肿瘤外科杂志》 CAS 2024年第4期344-348,共5页
目的探究术前血清核因子⁃κB(NF⁃κB)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)水平对脑胶质瘤切除术患者的预后预测价值。方法选取2020年1月至2023年1月山西白求恩医院收治的80例脑胶质瘤切除术患者为研究对象,随访1年,根据有无复... 目的探究术前血清核因子⁃κB(NF⁃κB)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)水平对脑胶质瘤切除术患者的预后预测价值。方法选取2020年1月至2023年1月山西白求恩医院收治的80例脑胶质瘤切除术患者为研究对象,随访1年,根据有无复发、死亡等预后情况分为预后良好组(63例)和预后不良组(17例)。对比两组患者术前血清NF⁃κB、NLRP3水平,采用多因素Logistic回归分析影响脑胶质瘤切除术患者预后的影响因素,并绘制受试者工作特征曲线(ROC)评估血清NF⁃κB、NLRP3水平对脑胶质瘤切除术患者预后的预测价值。结果预后不良组患者年龄、肿瘤最大径、肿瘤分级、血清NF⁃κB、NLRP3水平与预后良好组患者相比,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,年龄、肿瘤最大径、肿瘤分级、血清NF⁃κB、NLRP3水平均为脑胶质瘤切除术患者预后不良的危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,单一术前血清NF⁃κB、NLRP3水平及两者联合预测脑胶质瘤切除术患者预后不良的曲线下面积分别为0.734、0.746、0.812,特异度分别为68.91%、72.21%、78.63%,灵敏度分别为75.62%、73.05%、80.68%。结论术前血清NF⁃κB、NLRP3水平与脑胶质瘤切除术患者预后不良有关,可用于预测脑胶质瘤切除术患者的预后,且两项指标联合具有较好的预测效能。 展开更多
关键词 核因子⁃κb Nod样受体蛋白⁃3 脑胶质瘤切除术 预后
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Jianpi Gushen Huayu decoction ameliorated diabetic nephropathy through modulating metabolites in kidney,and inhibiting TLR4/NF-κB/NLRP3 and JNK/P38 pathways
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作者 Zi-Ang Ma Li-Xin Wang +8 位作者 Hui Zhang Han-Zhou Li Li Dong Qing-Hai Wang Yuan-Song Wang Bao-ChaoPan Shu-Fang Zhang Huan-Tian Cui Shu-Quan Lv 《World Journal of Diabetes》 SCIE 2024年第3期502-518,共17页
BACKGROUND Jianpi Gushen Huayu Decoction(JPGS)has been used to clinically treat diabetic nephropathy(DN)for many years.However,the protective mechanism of JPGS in treating DN remains unclear.AIM To evaluate the therap... BACKGROUND Jianpi Gushen Huayu Decoction(JPGS)has been used to clinically treat diabetic nephropathy(DN)for many years.However,the protective mechanism of JPGS in treating DN remains unclear.AIM To evaluate the therapeutic effects and the possible mechanism of JPGS on DN.METHODS We first evaluated the therapeutic potential of JPGS on a DN mouse model.We then investigated the effect of JPGS on the renal metabolite levels of DN mice using non-targeted metabolomics.Furthermore,we examined the effects of JPGS on c-Jun N-terminal kinase(JNK)/P38-mediated apoptosis and the inflammatory responses mediated by toll-like receptor 4(TLR4)/nuclear factor-kappa B(NF-κB)/NOD-like receptor family pyrin domain containing 3(NLRP3).RESULTS The ameliorative effects of JPGS on DN mice included the alleviation of renal injury and the control of inflammation and oxidative stress.Untargeted metabolomic analysis revealed that JPGS altered the metabolites of the kidneys in DN mice.A total of 51 differential metabolites were screened.Pathway analysis results indicated that nine pathways significantly changed between the control and model groups,while six pathways significantly altered between the model and JPGS groups.Pathways related to cysteine and methionine metabolism;alanine,tryptophan metabolism;aspartate and glutamate metabolism;and riboflavin metabolism were identified as the key pathways through which JPGS affects DN.Further experimental validation showed that JPGS treatment reduced the expression of TLR4/NF-κB/NLRP3 pathways and JNK/P38 pathway-mediated apoptosis related factors.CONCLUSION JPGS could markedly treat mice with streptozotocin(STZ)-induced DN,which is possibly related to the regulation of several metabolic pathways found in kidneys.Furthermore,JPGS could improve kidney inflammatory responses and ameliorate kidney injuries in DN mice via the TLR4/NF-κB/NLRP3 pathway and inhibit JNK/P38 pathwaymediated apoptosis in DN mice. 展开更多
关键词 Diabetic nephropathy Jianpi Gushen Huayu Decoction Oxidative stress Inflammation Untargeted metabolomics Toll-like receptor 4/nuclear factor-kappa b/NOD-like receptor family pyrin domain containing 3 pathway c-Jun N-terminal kinase/P38-mediated apoptosis
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基于生物信息学筛查CLEC3B蛋白及其在脓毒症诊断中的作用
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作者 张雨婷 罗福龙 +2 位作者 胡迎春 陈睦虎 钟武 《中国医学装备》 2024年第1期119-122,129,共5页
目的:研究正常人与脓毒症患者血清差异表达蛋白中C-型凝集素域家族3成员B(CLEC3B)蛋白,探讨目标CLEC3B蛋白作为脓毒症分子标志物的可能性。方法:收集10名健康志愿者(健康组)和18例脓毒症患者(脓毒症组)外周血,利用数据独立采集法对外周... 目的:研究正常人与脓毒症患者血清差异表达蛋白中C-型凝集素域家族3成员B(CLEC3B)蛋白,探讨目标CLEC3B蛋白作为脓毒症分子标志物的可能性。方法:收集10名健康志愿者(健康组)和18例脓毒症患者(脓毒症组)外周血,利用数据独立采集法对外周血清蛋白数据进行采集,数据上传至i DEP在线平台分析脓毒症患者外周血中差异表达蛋白。并对这些差异蛋白进行生物信息学分析,筛选出脓毒症关键蛋白。酶联免疫吸附法(ELISA)验证并绘制关键蛋白受试者工作特征(ROC)曲线。结果:蛋白质组学分析筛选出138个差异表达蛋白(DEPs),其中34个蛋白显著下调,104个蛋白显著上调。DEPs主要富集在细胞过程、生物调节、生物过程调节、参与绑定、催化活化、分子功能监管、免疫系统、信号转导等。DEPs构建蛋白-蛋白相互作用网络(PPI)筛选出感兴趣的关键蛋白CLEC3B。ELISA实验表明脓毒症组患者CLEC3B蛋白浓度(297.73±22.00)ng/ml显著低于健康组(452.42±191.72)ng/ml,差异具有统计学意义(t=13.13,P=0.000)。CLEC3B蛋白的ROC曲线下面积为0.998,灵敏度为97.73%,特异度为100.0%。结论:CLEC3B蛋白在脓毒症组中显著降低,其灵敏度高,特异度高,可以作为脓毒症潜在的生物学诊断标志物。临床试验注册号中国临床试验注册中心,ChiCTR1900021261。 展开更多
关键词 脓毒症 生物信息学分析 蛋白质组学 C-型凝集素域家族3成员b(CLEC3b)蛋白
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基于BCMA突变体构建BCMA CAR-T细胞体外杀伤功能评价模型
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作者 张小雪 华静涵 +3 位作者 侯睿 刘丹 施明 曹江 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期493-500,共8页
目的:为解决野生型B细胞成熟抗原(BCMA)被γ分泌酶切割导致表达不稳定的问题,构建抵抗γ分泌酶切割的BCMA突变体并构建靶细胞,用于评价BCMA CAR-T细胞的杀伤功能。方法:将野生型BCMA的穿膜域替换为人CD8α穿膜域,构建抵抗γ分泌酶切割的... 目的:为解决野生型B细胞成熟抗原(BCMA)被γ分泌酶切割导致表达不稳定的问题,构建抵抗γ分泌酶切割的BCMA突变体并构建靶细胞,用于评价BCMA CAR-T细胞的杀伤功能。方法:将野生型BCMA的穿膜域替换为人CD8α穿膜域,构建抵抗γ分泌酶切割的BCMA突变体(BCMA-CD8αTM),构建过表达该突变体的U266(U266^(BCMA Mut))、K562(K562^(BCMA Mut))、SKOV3(SKOV3^(BCMA Mut))和CHO(CHO^(BCMA Mut))细胞;构建装载NFAT-EGFP报告基因的BCMA CAR Jurkat细胞(BCMA-CAR-Jurkat-Reporter)与U266^(BCMA Mut)细胞共培养,采用FCM检测该细胞中EGFP表达水平以指示NFAT激活水平,荧光素酶法检测BCMA CAR-T细胞对Luciferase标记的K562^(BCMA Mut)细胞的杀伤作用,实时无标记动态细胞分析技术(RTCA)检测BCMA CAR-T细胞对SKOV3^(BCMA Mut)和CHO^(BCMA Mut)细胞的杀伤作用。结果:应用γ分泌酶抑制剂LY411575抑制γ分泌酶活性,显著增强野生型U266细胞表面BCMA表达水平,平均荧光强度上调10倍以上;但撤除抑制剂后BCMA表达水平逐渐降低(P<0.01);BCMA-CD8αTM突变体可抵抗γ分泌酶的切割作用,在U266细胞表面稳定表达(P>0.05);U266细胞及过表达BCMA-CD8αTM的U266细胞与BCMA-CAR-Jurkat-Reporter细胞共培养后都可激活Reporter系统、增强EGFP表达,但该效应在BCMA-CD8αTM过表达的U266细胞中更显著(P<0.01);BCMA-CD8αTM在BCMA表达阴性的K562、SKOV3和CHO 3种靶细胞中成功过表达,且在LY411575处理下该突变体的表达水平仅有小幅度升高;荧光素酶法检测结果显示,不同效靶比下,BCMA CAR-T细胞均可特异、高效杀伤过表达BCMA-CD8αTM的K562细胞;RTCA结果显示,不同效靶比下,BCMA CAR-T细胞均可有效识别、杀伤过表达BCMACD8αTM的SKOV3和CHO细胞,但同等效靶比下的Mock-T细胞无此效应。结论:本实验构建的BCMA-CD8αTM突变体能够抵抗γ分泌酶的切割,在多种靶细胞表面稳定表达,为评价BCMA CAR-T细胞体外杀伤的有效性和特异性提供多种检测手段。 展开更多
关键词 b细胞成熟抗原 Γ分泌酶 CD8α穿膜域 CAR-T细胞 杀伤功能评价
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Bcl-2 loop domain在Bcl-2蛋白结构中的作用初探
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作者 刘娜 孙志扬 +2 位作者 李杨 宋海燕 孙庆文 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期671-674,共4页
目的探讨B细胞淋巴瘤/白血病基因2(Bcl-2)Loop domain结构域在Bcl-2蛋白结构中的作用。方法应用PCR及Western blot方法检测Bcl-2 Loop domain结构域突变前后Bcl-2蛋白的表达情况。结果Bcl-2 Loop domain结构域突变后Bcl-2蛋白只在沉淀... 目的探讨B细胞淋巴瘤/白血病基因2(Bcl-2)Loop domain结构域在Bcl-2蛋白结构中的作用。方法应用PCR及Western blot方法检测Bcl-2 Loop domain结构域突变前后Bcl-2蛋白的表达情况。结果Bcl-2 Loop domain结构域突变后Bcl-2蛋白只在沉淀中检测到,在上清中未检测到。结论Bcl-2 Loop domain结构域被突变后,Bcl-2蛋白空间结构发生改变,推测Bcl-2 Loop domain结构域在Bcl-2蛋白结构中起到重要作用。 展开更多
关键词 b细胞淋巴瘤/白血病基因2 环状结构域 基因突变
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IKBKE、YAP1和TEAD2在结直肠癌中的表达及临床意义
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作者 舒莉珊 赵洋 +3 位作者 吴宁琪 刘梦梦 吴琼 欧玉荣 《浙江医学》 CAS 2024年第9期943-949,I0006,共8页
目的探讨核因子κb激酶亚基ε的抑制剂(IKBKE)、Yes相关蛋白1(YAP1)和转录增强结构域转录因子2(TEAD2)在结直肠癌(CRC)组织中的表达及其临床意义。方法收集2016年1月至2017年12月在蚌埠医科大学第一附属医院手术切除的142例CRC组织及对... 目的探讨核因子κb激酶亚基ε的抑制剂(IKBKE)、Yes相关蛋白1(YAP1)和转录增强结构域转录因子2(TEAD2)在结直肠癌(CRC)组织中的表达及其临床意义。方法收集2016年1月至2017年12月在蚌埠医科大学第一附属医院手术切除的142例CRC组织及对应癌旁组织,采用免疫组化法检测标本中IKBKE、YAP1和TEAD2的表达情况。分析3种蛋白在CRC组织中表达的相关性,分析蛋白阳性率与患者临床病理参数及预后的关系;绘制Kaplan-Meier生存曲线,比较这些蛋白不同表达情况患者的生存差异。采用Cox回归分析影响患者预后的危险因素。结果CRC组织中IKBKE、YAP1和TEAD2的阳性率均显著高于癌旁组织(65.5%比9.9%,73.9%比14.1%,66.9%比8.5%,均P<0.05)。IKBKE的表达与肿瘤的分化程度、浸润深度、淋巴结转移、肿瘤-淋巴结-远处转移(TNM)分期有关,YAP1和TEAD2的表达均与肿瘤的分化程度、浸润深度、淋巴结转移、远处转移及TNM分期有关。Spearman秩相关分析显示CRC组织中IKBKE与YAP1、TEAD2表达均呈正相关(均P<0.01)。Kaplan-Meier生存分析显示IKBKE、YAP1和TEAD2阳性表达组的总生存率降低。Cox回归分析显示IKBKE、YAP1和TEAD2阳性、肿瘤分化程度高、TNM分期高是CRC患者预后的独立危险因素。结论CRC中IKBKE、YAP1和TEAD2阳性表达与肿瘤的分化程度、TNM分期、转移等因素有关,可能成为CRC治疗的潜在靶点;检测这3个蛋白的表达有助于评估预后。 展开更多
关键词 结直肠癌 核因子κb激酶亚基ε的抑制剂 Yes相关蛋白1 转录增强结构域转录因子2 预后
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基于NF-κB/NLRP3/caspase-1通路研究白及多糖对溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜炎症损伤的保护作用 被引量:7
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作者 邱波 曾永鸿 +2 位作者 刘金海 袁志臻 刘荟娟 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期1623-1627,1632,共6页
目的:探究白及多糖对溃疡性结肠炎(UC)大鼠核因子κB(NF-κB)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)/半胱天冬酶-1(caspase-1)通路蛋白表达及对肠道屏障损伤的影响。方法:采用三硝基苯磺酸(TNBS)+乙醇法建立UC模型,并将SD大鼠随机... 目的:探究白及多糖对溃疡性结肠炎(UC)大鼠核因子κB(NF-κB)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)/半胱天冬酶-1(caspase-1)通路蛋白表达及对肠道屏障损伤的影响。方法:采用三硝基苯磺酸(TNBS)+乙醇法建立UC模型,并将SD大鼠随机分为空白组、模型组、白及多糖低(100 mg/kg)、中(200 mg/kg)、高(400 mg/kg)剂量组、柳氮磺胺吡啶阳性组(0.67 g/kg),除空白组外,其余各组均建立UC模型。白及多糖低、中、高剂量组和阳性组分别灌胃给予相应剂量白及多糖和柳氮磺胺吡啶,空白组和模型组灌胃给予10 ml/kg生理盐水,各组大鼠连续给药2周,1次/d。末次给药12 h后,观察大鼠一般行为并对大鼠进行疾病活动指数(DAI)评分;取大鼠结肠组织,苏木精-伊红染色观察组织病理形态;ELISA检测结肠组织髓过氧化物酶(MPO)、炎症因子IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平及肠道屏障功能受损指标二胺氧化酶(DAO)和肠型脂肪酸结合蛋白(i-FABP)水平;Western blot检测结肠组织通路蛋白NF-κB p65、磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)、NLRP3、caspase-1、cleaved caspase-1蛋白表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠形体消瘦、大便稀溏、结肠组织可见黏膜溃疡、充血、扩张及炎症细胞浸润等病理损伤,DAI评分、结肠组织MPO、IL-1β及TNF-α含量、p-NF-κB p65/NF-κB p65、NLRP3、caspase-1、cleaved caspase-1蛋白表达均升高(P<0.05),DAO和i-FABP含量均降低(P<0.05)。与模型组比较,白及多糖各剂量组及柳氮磺胺吡啶组大鼠DAI评分、结肠组织病理损伤程度、MPO、IL-1β及TNF-α含量、p-NF-κB p65/NF-κB p65、NLRP3、caspase-1、cleaved caspase-1蛋白表达均降低(P<0.05),DAO和i-FABP含量均升高(P<0.05),且呈剂量依赖性,高剂量白及多糖改善效果与柳氮磺胺吡啶相近(P>0.05)。结论:白及多糖可抑制NF-κB/NLRP3/caspase-1通路激活,降低炎症反应和肠屏障损伤,改善UC症状和肠黏膜损伤。 展开更多
关键词 白及多糖 溃疡性结肠炎 核因子-κb 核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3 半胱天冬酶-1 肠道屏障损伤
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含笑内酯通过抑制NF-κB/NLRP3轴改善单侧输尿管梗阻模型小鼠的肾脏病变
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作者 雷向宏 严文君 +2 位作者 熊梅梅 龙海波 陈斯佳 《天津医药》 CAS 北大核心 2023年第10期1059-1064,共6页
目的探究含笑内酯(MCL)对单侧输尿管梗阻(UUO)模型小鼠肾脏病变的干预作用及机制。方法将雄性C57BL/6J小鼠随机分为假手术(Sham)组、UUO组、UUO+MCL组,UUO+MCL组建立UUO模型前1 d以25 mg/kg MCL灌胃。术后8 d采集肾组织标本进行HE、Mas... 目的探究含笑内酯(MCL)对单侧输尿管梗阻(UUO)模型小鼠肾脏病变的干预作用及机制。方法将雄性C57BL/6J小鼠随机分为假手术(Sham)组、UUO组、UUO+MCL组,UUO+MCL组建立UUO模型前1 d以25 mg/kg MCL灌胃。术后8 d采集肾组织标本进行HE、Masson、TUNEL染色;蛋白免疫印迹(Western blot)和免疫组化检测核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、胱天蛋白酶1(caspase-1)、白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α、核因子(NF)-κB p65蛋白表达情况。结果HE染色结果显示,Sham组小鼠肾组织无明显病变;UUO组肾小管进行性扩张,间质水肿伴有少量的炎性细胞浸润;UUO+MCL组肾脏病变较UUO组明显改善。Masson染色结果显示,与Sham组相比,UUO组胶原容积分数明显增加,而UUO+MCL组胶原容积分数较UUO组明显减少。TUNEL染色结果显示,与Sham组相比,UUO组细胞凋亡率升高,UUO+MCL组较UUO组细胞凋亡率明显下降。Western blot和免疫组化结果显示,与Sham组相比,UUO组肾组织中NLRP3、caspase-1、IL-1β、TNF-α、p-NF-κB p65的表达水平均升高;与UUO组相比,UUO+MCL组上述因子均显著下降。结论UUO小鼠肾组织NLRP3炎症小体及相关炎性因子表达增加,MCL通过抑制NF-κB通路及NLRP3炎症小体的活化,减轻肾小管间质的炎症反应,从而改善肾纤维化。 展开更多
关键词 输尿管梗阻 纤维化 NLR家族 热蛋白结构域包含蛋白3 NF-Κb 含笑内酯
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THERMAL DEMAGNETIZATION AND RANDOMNESS OF DOMAIN NUCLEATION OF SINGLE PHASE Nd_2 Fe_(14) B
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作者 LUO Yang JI Qigen ZHANG Ning SU Xiujin Central Iron and Steel Research Institute,Ministry of Metallurgical Industry,Beijing,ChinaSUN Daliang Shandong University,Jinan,China senior engineer,Department of Precious Alloys,Central Iron and Steel Research Institute,Beijing,China 《Acta Metallurgica Sinica(English Letters)》 SCIE EI CAS CSCD 1989年第7期27-32,共6页
Based on the observation of temperature variation of both domain structure and magnetic con- trast.the thermal demagnetization and randomness of domain nucleation was discussed.
关键词 domain structure Nd_2Fe_(14)b thermal demagnetization domain nucleation
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MAGNETIC DOMAIN STRUCTURE AND RELATED MAGNETIC PROPERTIES OF(NdPr)_(16)Fe_(76)B_8 PERMANENT MAGNET
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作者 WANG Ruikun SUN Lihong +1 位作者 LI Dongpei YING Qiming 《Acta Metallurgica Sinica(English Letters)》 SCIE EI CAS CSCD 1989年第8期127-132,共6页
The magnetic domain structure and related magnetic properties of (NdPr)_(16)Fe_(76)B_8 permanent magnet have been studied by colloid-SEM method.In thermally demagnetized state,the ma- trix grains in the magnet general... The magnetic domain structure and related magnetic properties of (NdPr)_(16)Fe_(76)B_8 permanent magnet have been studied by colloid-SEM method.In thermally demagnetized state,the ma- trix grains in the magnet generally exhibit multidomain structure,i.e.,180° plate-like indi- vidual domain and a few spike-like or maze-like domains.The average width of the domain measured was 1.5μm.Grain size of single-domain was observed to be generally about 1μm and only a few up to 3μm.The results calculated are:the domain wall energy γ=36 MJ/m^2,the exchange constant A=4.5×10^(-11)J/m,the domain wall width δ=15.7nm, and the critical grain diameter of single-domain D_c=0.5μm.The dependence of high magnet- ic field gradient at grain boundaries in different magnetization directions in the adjacent mag- netic domains located on both sides of grain boundaries and the effect of microstructure on the values of K,A and δ were discussed. 展开更多
关键词 Nd-Fe-b permanent magnet domain structure magnetic properties
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Isolation and Characterization of Recombinant Variable Domain of Heavy Chain Anti-idiotypic Antibodies Specific to Aflatoxin B_1 被引量:2
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作者 WANG Dan XU Yang +5 位作者 TU Zhui FU Jin Heng XIONG Yong Hua FENG Fan TAO Yong LEI Da 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 2014年第2期118-121,共4页
Some unique subclasses of Camelidae antibodies are devoid of the light chain, and the antigen binding site is comprised exclusively of the variable domain of the heavy chain (VHH). The recombinant VHHs have a high p... Some unique subclasses of Camelidae antibodies are devoid of the light chain, and the antigen binding site is comprised exclusively of the variable domain of the heavy chain (VHH). The recombinant VHHs have a high potential as alternative reagents for the next generation of immunoassay. In particular, they might be very useful for molecular mimicry. The present study demonstrated an alpaca immunized with the F(ab')z fragment of anti-aflatoxin B1 mAb and developed an important anti-idiotypic (anti-ld) responses. Antigen-specific elution method was used for panning private anti-ld VHHs from the constructed alpaca VHH library. The selected VHHs were expressed, renatured, purified, and then identified by a competitive enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Our findings indicated that the VHH would be an alternative tool for haptens mimicry studies. 展开更多
关键词 ab VHH Isolation and Characterization of Recombinant Variable domain of Heavy Chain Anti-idiotypic Antibodies Specific to Aflatoxin b1
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氟西汀调节TLR4/NF-κB/NLRP3炎症体信号通路改善CUMS大鼠抑郁样行为 被引量:6
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作者 吕霞 黄丽 +3 位作者 张美琳 樊珺婷 马泽微 刘欢 《天津医药》 CAS 北大核心 2023年第2期160-165,共6页
目的基于Toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症体信号通路探究氟西汀对慢性不可预知性轻度应激(CUMS)模型大鼠抑郁样行为的作用。方法18只SD大鼠随机分为对照组、模型组和氟西汀组。模型组... 目的基于Toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症体信号通路探究氟西汀对慢性不可预知性轻度应激(CUMS)模型大鼠抑郁样行为的作用。方法18只SD大鼠随机分为对照组、模型组和氟西汀组。模型组和氟西汀组大鼠随机给予不可预知性轻度刺激11周,制备抑郁症模型。氟西汀组于第7~11周灌胃氟西汀(10 mg·kg^(-1)·d^(-1)),其余组大鼠灌胃1 mL生理盐水。干预结束后进行行为学检测,酶联免疫吸附试验检测脑组织中白细胞介素(IL)-1β和IL-18的含量,免疫荧光染色观察海马CA3区和皮质区中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)和胱天蛋白酶1(Caspase-1)的表达情况。Western blot测定脑组织TLR4、NF-κB、NLRP3、Caspase-1和活化的Caspase-1(cleaved Caspase-1)蛋白的表达水平。结果与模型组比较,氟西汀组大鼠在旷场的运动距离及站立次数显著增多,在高架十字迷宫的运动距离增加,且在闭臂的停留时间减少,大鼠脑组织中IL-1β和IL-18含量显著降低,TLR4、NF-κB、NLRP3、ASC、Caspase-1和cleaved Caspase-1蛋白的表达降低(P<0.05)。结论氟西汀可能通过抑制TLR4/NF-κB/NLRP3炎症体信号通路,降低脑组织中炎性因子IL-1β和IL-18的水平,从而改善CUMS大鼠的抑郁样行为。 展开更多
关键词 抑郁症 氟西汀 Toll样受体4 NF-Κb NLR家族 热蛋白结构域包含蛋白3 白细胞介素1β 白细胞介素18 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1 ASC
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抑制EB病毒阳性弥漫性大B细胞淋巴瘤增殖的抗TMD5单克隆抗体的筛选和效果评价
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作者 涂小云 熊玉红 +3 位作者 邓爱花 孙春枝 刘阳 陈宇 《广西医科大学学报》 CAS 2023年第9期1480-1486,共7页
目的:筛选抗爱泼斯坦—巴尔病毒(EBV)潜伏期膜蛋白-1中跨膜结构域5(TMD5)单克隆抗体并评价其抑制EB病毒阳性弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的效果。方法:人工合成TMD5肽段,用此TMD5肽段免疫BALB/c小鼠;PEG法制备杂交瘤;ELISA法筛选阳性杂... 目的:筛选抗爱泼斯坦—巴尔病毒(EBV)潜伏期膜蛋白-1中跨膜结构域5(TMD5)单克隆抗体并评价其抑制EB病毒阳性弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的效果。方法:人工合成TMD5肽段,用此TMD5肽段免疫BALB/c小鼠;PEG法制备杂交瘤;ELISA法筛选阳性杂交瘤细胞;有限稀释法制备单克隆;使用阳性孔单克隆细胞免疫小鼠制备腹水;western blotting法和ELISA法分别对腹水中的单克隆抗体进行鉴定和效价测定;体外CCK-8法测定腹水对Sp2/0细胞存活能力的影响;Annexin VFITC/PI双标记流式细胞术测定腹水对Sp2/0细胞凋亡率的影响;在体内裸鼠荷瘤实验测定腹水对裸鼠荷瘤生长的影响。结果:成功备制13个杂交瘤,其中3个为阳性杂交瘤,分别为2B11、5D07和6F04,阳性率为23%。以5D07孔单克隆细胞制备的腹水以1∶105稀释后,阳性/阴性腹水单克隆抗体抗TMD5效价比为6.763,阳性/Sp2/0的效价比为5.952,效价最高。与PBS组相比,2B11组和5D07组DB细胞48 h和72 h增殖能力降低,凋亡率升高,裸鼠荷瘤较小(P<0.05),6F04组上述测定指标无明显差异(P>0.05)。与2B11组相比,5D07组DB细胞48 h和72 h增殖能力降低,凋亡率升高,裸鼠荷瘤较小(P<0.05)。结论:通过杂交瘤法筛选出的5D07单克隆抗体抗TMD5效价高,在体外和在体裸鼠荷瘤实验抗EBV+DLBCL淋巴瘤活性良好。 展开更多
关键词 弥漫性大b细胞淋巴瘤 Eb病毒 跨膜结构域5 杂交瘤 单克隆抗体
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miRNA-181a、胱天蛋白酶富集域家族成员11、核因子κB在弥漫大B细胞淋巴瘤患者中的表达及临床意义
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作者 陈青 郭广秀 王建 《癌症进展》 2023年第16期1780-1785,共6页
目的探讨微小RNA-181a(miRNA-181a)、胱天蛋白酶富集域家族成员11(CARD11)、核因子κB(NF-κB)在弥漫大B细胞淋巴瘤患者中的表达及临床意义。方法选取85例弥漫大B细胞淋巴瘤患者和60例增生性淋巴结炎患者,分别作为观察组和对照组,采用... 目的探讨微小RNA-181a(miRNA-181a)、胱天蛋白酶富集域家族成员11(CARD11)、核因子κB(NF-κB)在弥漫大B细胞淋巴瘤患者中的表达及临床意义。方法选取85例弥漫大B细胞淋巴瘤患者和60例增生性淋巴结炎患者,分别作为观察组和对照组,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测miRNA-181a、CARD11 mRNA、NF-κB mRNA相对表达量。比较不同临床特征弥漫大B细胞淋巴瘤患者miRNA-181a、CARD11 m RNA、NF-κB mRNA相对表达量,比较Ⅰ~Ⅱ期、Ⅲ~Ⅳ期观察组和对照组患者miRNA-181a、CARD11 mRNA、NF-κB mRNA相对表达量,比较不同疗效弥漫大B细胞淋巴瘤患者miRNA-181a、CARD11mRNA、NF-κB mRNA相对表达量。采用受试者工作特征(ROC)曲线及曲线下面积(AUC)分析miRNA-181a、CARD11、NF-κB单独及联合检测对弥漫大B细胞淋巴瘤患者临床分期的诊断价值及对疗效的预测价值。结果Ann Arbor分期为Ⅲ~Ⅳ期、国际预后指数(IPI)评分为3~5分弥漫大B细胞淋巴瘤患者miRNA-181a相对表达量分别明显高于Ann Arbor分期为Ⅰ~Ⅱ期、IPI评分为0~2分的患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。结外累及数目﹥1个、Ann Arbor分期为Ⅲ~Ⅳ期、IPI评分为3~5分弥漫大B细胞淋巴瘤患者CARD11 mRNA、NF-κB mRNA相对表达量均明显高于结外累及数目≤1个、Ann Arbor分期为Ⅰ~Ⅱ期、IPI评分为0~2分的患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。Ⅰ~Ⅱ期、Ⅲ~Ⅳ期弥漫大B细胞淋巴瘤患者miRNA-181a、CARD11 mRNA、NF-κB mRNA相对表达量均高于对照组,Ⅲ~Ⅳ期弥漫大B细胞淋巴瘤患者miRNA-181a、CARD11 mRNA、NF-κB mRNA相对表达量均高于Ⅰ~Ⅱ期患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。疗效为完全缓解(CR)/部分缓解(PR)/疾病稳定(SD)弥漫大B细胞淋巴瘤患者miRNA-181a、CARD11 mRNA、NF-κB mRNA相对表达量均低于疗效为疾病进展(PD)的患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。ROC曲线显示,miRNA-181a、CARD11、NF-κB联合检测诊断弥漫大B细胞淋巴瘤患者临床分期的AUC为0.968,高于三者单独检测的0.852、0.841、0.830;miRNA-181a、CARD11、NF-κB联合检测预测弥漫大B细胞淋巴瘤患者疗效的AUC为0.953,高于三者单独检测的0.847、0.684、0.816。结论miRNA-181a、CARD11、NF-κB可作为弥漫大B细胞淋巴瘤患者病情监测和预后预测指标,其表达水平升高提示患者病情可能加重,三者联合检测对弥漫大B细胞淋巴瘤的诊断价值较高,且对预后的预测价值较高。 展开更多
关键词 微小RNA-181a 胱天蛋白酶富集域家族成员11 核因子Κb 弥漫大b细胞淋巴瘤 临床分期 疗效 诊断价值
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PI3K/Akt信号通路通过上调HKDC1促进人肝癌HepG2细胞糖酵解、增殖及迁移
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作者 刘峰 邓萍 +1 位作者 闫光志 金刚 《中国实验诊断学》 2024年第9期1079-1086,共8页
目的探讨磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通过调节含己糖激酶结构域的蛋白1(HKDC1)对人肝癌HepG2细胞糖酵解、增殖和迁移的影响及机制。方法将体外培养的对数期人肝癌HepG2细胞,分为对照组、LY294002组和MK-2206组,RT-qPCR法检... 目的探讨磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通过调节含己糖激酶结构域的蛋白1(HKDC1)对人肝癌HepG2细胞糖酵解、增殖和迁移的影响及机制。方法将体外培养的对数期人肝癌HepG2细胞,分为对照组、LY294002组和MK-2206组,RT-qPCR法检测各组细胞HKDC1 mRNA的表达水平,western blotting法分析各组细胞HKDC1蛋白的表达水平。将细胞分为si-NC组(转染si-NC)、si-HKDC1组(转染si-HKDC1),western blotting法分析各组细胞HKDC1蛋白的表达水平,CCK-8、5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)实验检测各组细胞增殖活力和划痕,Transwell实验检测各组细胞迁移率,细胞外酸化率(ECAR)实验检测分析各组细胞的糖酵解和糖酵解能力,葡萄糖及乳酸含量测定实验检测各组细胞内葡萄糖及乳酸含量。将细胞分为对照组、LY294002组、过表达HKDC1+LY294002组、MK-2206组、过表达HKDC1+MK-2206组,葡萄糖及乳酸含量测定实验检测各组细胞内葡萄糖及乳酸含量。结果与对照组比较,LY294002组细胞HKDC1 mRNA表达明显降低(P<0.001),HKDC1蛋白表达降低(P<0.01);MK-2206组细胞HKDC1 mRNA表达降低(P<0.01),HKDC1蛋白表达明显降低(P<0.001)。与si-NC组相比,si-HKDC1组细胞HKDC1蛋白表达降低(P<0.001);与si-NC组相比,si-HKDC1组细胞增殖活力降低(P<0.05),EdU阳性细胞数明显减少(P<0.01);与si-NC组相比,si-HKDC1组细胞划痕愈合率明显降低(P<0.001),迁移细胞数明显减少(P<0.001);与si-NC组相比,si-HKDC1组细胞糖酵解和糖酵解能力明显减弱(P<0.01);与si-NC组相比,si-HKDC1组细胞内葡萄糖和乳酸含量明显降低(P<0.05)。与LY294002组相比,过表达HKDC1+LY294002组细胞内葡萄糖和乳酸含量明显升高(P<0.01);与MK-2206组相比,过表达HKDC1+MK-2206组细胞内葡萄糖和乳酸含量明显升高(P<0.001,P<0.01)。结论PI3K/Akt信号通路通过HKDC1促进人肝癌HepG2细胞糖酵解、增殖和迁移。 展开更多
关键词 磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶b 含己糖激酶结构域的蛋白1 有氧糖酵解 增殖 迁移
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FHL2和PBX3在卵巢癌组织中表达与临床病理特征的相关性研究
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作者 黄小杏 梁秀冰 +4 位作者 莫劲思 黄世勇 郝丽莉 李江 曾庆苏 《空军军医大学学报》 CAS 2023年第5期453-457,共5页
目的探讨四个半LIM结构域蛋白2(FHL2)与前B细胞白血病同源盒基因3(PBX3)在卵巢癌(OC)组织中的表达与临床病理特征及预后的相关性。方法选取广东省阳江市人民医院2017年6月至2019年6月收治的63例OC患者作为研究对象,收集患者的OC组织和... 目的探讨四个半LIM结构域蛋白2(FHL2)与前B细胞白血病同源盒基因3(PBX3)在卵巢癌(OC)组织中的表达与临床病理特征及预后的相关性。方法选取广东省阳江市人民医院2017年6月至2019年6月收治的63例OC患者作为研究对象,收集患者的OC组织和癌旁正常组织(距肿瘤边缘4 cm处)进行研究,采用免疫组化法检测组织中的FHL2与PBX3蛋白的表达水平,并分析其与OC患者临床病理特征的关系,采用Cox回归模型分析影响OC患者预后的相关因素。结果患者癌组织中FHL2和PBX3蛋白表达阳性率显著高于癌旁组织(P<0.05);FHL2与PBX3蛋白表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移、腹水和病理分期具有显著相关性(P<0.05);所有OC患者中位生存期为30.75(24.82,36.70)个月,其中FHL2阳性和阴性表达OC患者的中位生存期分别为17.67(6.33,29.01)和35.36(32.30,38.41)个月,PBX3阳性和阴性表达OC患者的中位生存期分别为17.01(14.11,19.91)和33.75(31.45,36.05)个月,差异具有统计学意义(Log rank P<0.05)。经单因素分析,肿瘤低分化、淋巴结转移、病理分期Ⅲ+Ⅳ期、FHL2及PBX3阳性表达患者的生存时间均显著缩短,差异具有统计学意义(P<0.05);Cox回归模型分析表明,淋巴转移情况(HR=0.17,95%CI:0.05~0.53)、腹水(HR=0.02,95%CI:0.00~0.17)、病理分期(HR=11.45,95%CI:2.95~44.49)、FHL2(HR=0.19,95%CI:0.05~0.71)及PBX3表达水平(HR=0.22,95%CI:0.08~0.57)均为OC患者不良预后的独立危险因素(P<0.05)。结论FHL2与PBX3蛋白在OC组织中的表达水平显著高于癌旁正常组织,且表达水平与OC患者的临床特征显著相关。该研究对于OC的发生、发展及预后均有着重要的临床意义。 展开更多
关键词 四个半LIM结构域蛋白2 b细胞白血病同源盒基因3 卵巢癌
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CLEC12B在肺腺癌中的表达及其与预后和免疫浸润的关系
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作者 孙玲玲 汪巧 李光耀 《临床与病理杂志》 CAS 2023年第12期2071-2079,共9页
目的:C型凝集素受体(C-type lectin receptors,CLRs)家族参与发育、炎症调节、肿瘤、心血管疾病等许多病理和生理过程。C型凝集素结构域家族成员12B(C-type lectin domain family 12 member B,CLEC12B)能够抑制黑色素瘤增殖,但其与肺腺... 目的:C型凝集素受体(C-type lectin receptors,CLRs)家族参与发育、炎症调节、肿瘤、心血管疾病等许多病理和生理过程。C型凝集素结构域家族成员12B(C-type lectin domain family 12 member B,CLEC12B)能够抑制黑色素瘤增殖,但其与肺腺癌的关系尚不清楚。因此,本研究利用生物信息学方法探讨CLEC12B在肺腺癌中的表达水平及其与肿瘤分期、预后、免疫浸润的关系。方法:使用基因型-组织表达(genotype-tissue expression,GTEx)、癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库及免疫组织化学法探讨CLEC12B在肺腺癌中的表达及其与不同肿瘤分期的相关性,使用Kaplan-Meier Plotter在线分析网站、仙桃学术网页工具探讨CLEC12B与肺腺癌预后的相关性,并使用肿瘤免疫估算工具(tumor immune estimation resourse,TIMER)探究CLEC12B与免疫细胞浸润之间的相关性,再用基因表达谱互动分析(Gene Expression Profiling Interactive Analysis,GEPIA)数据库获取肺腺癌中表达相关的前100个与CLEC12B共表达的基因,进行基因本体(Gene Ontology,GO)和京都基因和基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析。结果:与正常组织相比,肺腺癌CLEC12B mRNA和蛋白表达水平下调。CLEC12B高表达与较早的肿瘤分期和较好的预后相关,并且B细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、中性粒细胞等细胞浸润及免疫检查点基因的表达在CLEC12B高、低表达之间差异均有统计学意义(均P<0.05)。富集分析显示CLEC12B表达与中性粒细胞介导免疫、中性粒细胞脱颗粒等过程密切相关。结论:CLEC12B在肺腺癌中呈低表达,与中性粒细胞浸润、免疫检查点基因表达及中性粒细胞介导免疫、中性粒细胞脱颗粒等过程呈正相关,且CLEC12B低表达与较差的肺腺癌预后相关。 展开更多
关键词 肺腺癌 预后标志物 免疫浸润 C型凝集素结构域家族成员12b
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整合多数据库分析PM20D1基因与弥漫大B细胞淋巴瘤缺氧相关性及预后的关系
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作者 张园园 潘静 +2 位作者 李光明 焦霞霞 赵文理 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期401-411,共11页
目的:探讨肽酶M20结构域1(peptidase M20 domain containing 1,PM20D1)在人弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphomas,DLBCL)细胞中的表达及其与缺氧相关性和预后的关系。方法:通过GDC、TCGA、GTEx公共数据库分析PM20D1表达对D... 目的:探讨肽酶M20结构域1(peptidase M20 domain containing 1,PM20D1)在人弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphomas,DLBCL)细胞中的表达及其与缺氧相关性和预后的关系。方法:通过GDC、TCGA、GTEx公共数据库分析PM20D1表达对DLBCL细胞增殖、迁移和凋亡的影响及其与患者预后的关系。通过对不同分组患者的富集分析及PM20D1与CD274相关性分析验证PM20D1是否为DLBCL的缺氧相关基因;采用ChEA、ENCODE和hTFtarget数据库分析上游调控PM20D1表达的转录因子(TF)和miRNA,以及差异表达PM20D1与化疗药物敏感性的关系。采用WB法检测PM20D1在正常淋巴细胞和DLBCL细胞中的表达水平,通过设计PM20D1的siRNA序列敲减目的基因,并采用qPCR和WB法检测验证SUDHL2和SUDHL10细胞中PM20D1的敲减效率,采用CCK-8法和Transwell实验分别检测敲减PM20D1对细胞增殖和迁移能力的影响,流式细胞术检测细胞凋亡水平。结果:PM20D1在DLBCL组织中高表达且患者预后差(P<0.05或P<0.01);富集分析显示,PM20D1高表达组与ssGSEA高分组主要涉及细胞电耦合通讯、甘油三酯代谢过程调节和细胞质翻译起始复合物过程,且PM20D1表达与免疫检查点CD274表达呈正相关(P<0.01,r=0.757)。在SUDHL2和SUDHL10细胞中敲减PM20D1后,细胞的增殖和迁移均显著降低(均P<0.05),细胞凋亡明显增加(P<0.05)。结论:PM20D1基因在DLBCL组织和细胞中高表达且与患者预后密切相关;PM20D1可能通过促进DLBCL细胞的增殖、迁移并抑制凋亡,从而促进DLBCL的发生发展。 展开更多
关键词 肽酶M20结构域1(PM20D1) 弥漫大b细胞淋巴瘤(DLbCL) 肿瘤缺氧 增殖 迁移 凋亡
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vWF-△Pro改善基于蛋白质剪接的双载体BDD-FⅧ基因转移 被引量:6
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作者 朱甫祥 杨树德 +2 位作者 刘泽隆 屈慧鸽 迟晓艳 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期720-726,共7页
多聚体von Willebrand因子(vWF)的功能之一是保护凝血Ⅷ因子(FⅧ)免受蛋白水解引起的快速清除.前肽缺失突变体vWF(vWF-ΔPro)不能形成多聚体,但可以结合FⅧ蛋白.为探讨vWF-ΔPro对基于蛋白质反式剪接作用介导的双载体转FⅧ基因后连接的... 多聚体von Willebrand因子(vWF)的功能之一是保护凝血Ⅷ因子(FⅧ)免受蛋白水解引起的快速清除.前肽缺失突变体vWF(vWF-ΔPro)不能形成多聚体,但可以结合FⅧ蛋白.为探讨vWF-ΔPro对基于蛋白质反式剪接作用介导的双载体转FⅧ基因后连接的FⅧ蛋白的分泌和活性的影响,将vWF-ΔPro基因和融合SspDnaB内含肽的B结构域缺失型FⅧ(BDD-FⅧ)断裂基因共转染293细胞进行转基因的瞬时表达,用Western印迹检测了单独转染vWF-ΔPro基因细胞的vWF-ΔPro表达量和蛋白形式,并检测了其对FⅧ的结合力;用ELISA法观察分泌至培养上清中的剪接的BDD-FⅧ,并用Coatest法检测由其产生的生物活性.结果显示,vWF-ΔPro转基因细胞呈现二聚体蛋白表达形式,其结合FⅧ的能力与转野生型vWF基因细胞相近;vWF-ΔPro共转染细胞上清中剪接BDD-FⅧ蛋白浓度为198±21ng/mL,活性为1.78±0.18IU/mL,明显高于未转染vWF-ΔPro基因的细胞对照(91±12ng/mL和1.05±0.13IU/mL),与共转染野生型vWF基因细胞对照相近(221±19ng/mL和1.95±0.22IU/mL),表明vWF-ΔPro可显著改善内含肽剪接的BDD-FⅧ蛋白的分泌和生物活性.为vWF-ΔPro转基因的基于蛋白质剪接技术双AAV载体转BDD-FⅧ基因动物体内实验提供了依据. 展开更多
关键词 von WILLEbRAND因子 bDD-FⅧ 转基因 内含肽 蛋白质反式剪接
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