4B/5B编码的再调制WDM-PON系统分析与实现

在输入RSOA功率和数据编码方式不同的情况下,为了解决下行信号对上行再调制信号的串扰问题,研究了上行信号的误码率(BER)性能,并采用了下行2.5 Gb/s,上行1.25 Gd/s的非对称数据传输,4B/5B编码的下行信号再调制的波分复用无源光网络(WDM-PON)系统模型。最后通过MATLAB编程实现4B/5B编码,并在Optisystem软件中进行联合仿真。实验结果表明相对于NRZ编码和Manchester编码,4B/5B编码再调制系统可将编码效率提高到80%。

基于过采样CDR的4B/5B编码的设计与实现

为改善IEEE1394b串行总线上传输信息的可靠性,满足设计需求的误码率,其关键在于数字通信系统中串行传输数据编码方式的选择。对此,采用4B/5B编码方式,并给出一种过采样技术的时钟数据恢复的方法对4B/5B进行编译码。首先对过采样技术的时钟数据恢复方法过程进行讨论,指出恢复数据时钟是设计的难点。在此基础上建立总体设计框架,从而提高数据传输效率。通过应用Altera公司CycloneⅢ系列的FPGA芯片,在开发软件QuartusⅡ上实现4B/5B编译码仿真。最后给出仿真波形,验证在过采样技术的时钟数据恢复的方法下的编码方式的可实现性和可靠性。

不同pH的5%葡萄糖注射液与注射用两性霉素B配伍的稳定性研究

目的通过不同pH的5%葡萄糖注射液与注射用两性霉素B配伍,以探讨5%葡萄糖注射液的pH变化对注射用两性霉素B的影响。方法分别用盐酸(HCl)和氢氧化钠(NaOH)调节5%葡萄糖溶液至pH=3.2、3.4、3.6、3.8、4.0、4.2、4.4、4.6、4.8、5.0,并分别与注射用两性霉素B配伍,在避光条件下室温放置0、1、2、3、4、5、6、7 h。以高效液相色谱法测定两性霉素B的含量变化情况,同时考察供试液的pH变化情况;通过加速实验增加输液体系中两性霉素B降解产物量,并最终通过质谱分析来确定其化学结构。结果pH≤3.4的5%葡萄糖注射液与注射用两性霉素B配伍后会产生明显可见的浑浊沉淀;5%葡萄糖注射液pH≤4时,随着放置时间的延长,注射用两性霉素B相对含量下降,降解量可达10%,而降解到的杂质结构为甲氧基取代杂质。结论为了保证注射用两性霉素B的输液安全,在溶媒pH符合要求的前提下,减少输液时间可以有效降低两性霉素B的降解。

氨三乙酸配位辅助原位合成Ni@B-HZSM-5对苯和甲醇烷基化反应的影响

利用氨三乙酸离子(NTA3-)与Ni2+的配位作用在强碱溶液中原位合成了负载B-Ni的HZSM-5分子筛(Ni@B-HZSM-5)。采用X射线衍射(XRD)、扫描电子显微镜(SEM)、透射电子显微镜(TEM)、X射线荧光光谱(XRF)、低温N_(2)吸附-脱附、吡啶红外光谱(Py-IR)、NH3程序升温脱附(NH3-TPD)和H_(2)程序升温还原(H_(2)-TPR)等手段对Ni@B-HZSM-5催化剂进行了表征,采用固定床反应器评价其苯和甲醇烷基化反应性能,并与浸渍法负载的Ni/HZSM-5分子筛催化剂进行了对比。结果表明:原位合成的Ni@B-HZSM-5催化剂中B和Ni分布均匀,具有丰富的弱酸和适宜的加氢能力,甲醇加氢形成甲烷的副反应在一定程度上被抑制;在温度460℃、H_(2)压力0.4 MPa、n(苯)∶n(甲醇)=1.2∶1和质量空速2 h^(-1)条件下,4%Ni@B2-HZSM-5催化苯和甲醇烷基化反应,苯转化率可达46.4%,甲苯和二甲苯总选择性达到95.9%,其中C8芳烃选择性为35.1%,C8芳烃中乙苯摩尔分数为6.1%;并表现出优异的稳定性,比浸渍法Ni/HZSM-5分子筛催化剂性能更佳。

血清SIRT1、Fibulin-5、Bcl-2/Bax与颈动脉粥样硬化斑块破裂所致脑梗死的关系及联合检测价值

目的 探讨血清沉默信息调节蛋白1 (SIRT1)、衰老关键蛋白抗原-5 (Fibulin-5)、B淋巴细胞瘤基因-2(Bcl-2)/B淋巴细胞瘤基因-2相关X蛋白(Bax)与颈动脉粥样硬化(CAS)斑块破裂所致脑梗死(ACI)的关系及联合检测价值。方法 选取新疆维吾尔自治区人民医院2021年1月至2023年2月CAS斑块破裂所致ACI患者98例作为研究组,另选取同期CAS斑块未破裂患者98例作为对照组,比较两组血清SIRT1、Fibulin-5、Bcl-2、Bax水平,分析各血清指标对CAS斑块破裂所致ACI风险的影响及与病情的关系,并评价各血清学指标单独及联合预测CAS斑块破裂所致ACI的价值。结果 研究组血清SIRT1、Bcl-2水平低于对照组,Fibulin-5、Bax水平高于对照组(P<0.05);大面积梗死(MCI)患者血清SIRT1、Bcl-2水平<小面积梗死患者<腔隙性梗死(LI)患者,Fibulin-5、Bax水平>小面积梗死患者> LI患者(P<0.05);重度神经功能缺损患者血清SIRT1、Bcl-2水平<中度神经功能缺损患者<轻度神经功能缺损患者,Fibulin-5、Bax水平>中度神经功能缺损患者>轻度神经功能缺损患者(P<0.05);血清SIRT1、Bcl-2低水平患者CAS斑块破裂所致ACI风险是高水平患者的2.311倍、2.921倍,Fibulin-5、Bax高水平患者CAS斑块破裂所致ACI风险是低水平患者的3.470倍、3.184倍(P<0.05);血清SIRT1、Bcl-2与梗死面积、神经功能缺损程度呈负相关,Fibulin-5、Bax与梗死面积、神经功能缺损程度呈正相关(P<0.05);血清SIRT1、Fibulin-5、Bcl-2、Bax预测CAS斑块破裂所致ACI的AUC分别为0.716 (95%CI:0.648~0.778)、0.796 (95%CI:0.733~0.850)、0.728 (95%CI:0.660~0.789)、0.763 (95%CI:0.698~0.821),联合预测CAS斑块破裂所致ACI的AUC为0.909 (95%CI:0.860~0.945),优于各血清指标单独预测。结论 血清SIRT1、Fibulin-5、Bcl-2/Bax与CAS斑块破裂所致ACI及其病情程度密切相关,联合预测价值可靠,对临床开展防治工作具有指导意义。

B-HZSM-5催化剂上甲醇与丁烯耦合制丙烯的反应和再生性能

为进一步提高HZSM-5分子筛在甲醇与丁烯耦合转化制丙烯反应中的催化性能,采用水热合成法制备含杂原子硼的B-HZSM-5催化剂,考察B-HZSM-5催化剂在甲醇与丁烯耦合转化制丙烯的反应和再生性能,采用XRD(X射线衍射)、SEM(扫描电子显微镜)、N 2等温吸附-脱附、NH 3-TPD(氨-程序升温脱附)和Py-IR(吡啶红外光谱)对新鲜和再生的催化剂进行表征,并采用TG(热重分析)和XPS(X射线光电子能谱)对反应后B-HZSM-5催化剂上的积碳进行表征。结果表明:B-HZSM-5催化剂比HZSM-5具有更高的丙烯收率、更好的稳定性和抗积碳性能。与HZSM-5相比,B-HZSM-5的比表面积和孔体积增加,弱酸和中强酸的酸量增加,强酸量减少,B酸与L酸之比降低。随着再生次数的增加,B-HZSM-5催化剂的比表面积和孔体积降低,酸量和酸强度均降低,催化剂的反应活性下降,而稳定性有所提高。

AlkB同源蛋白5去除前mRNA加工因子6的mRNA甲基化修饰调控肝细胞癌的细胞增殖

目的探讨AlkB同源蛋白5(AlkBhomolog5,ALKBH5)在肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)的细胞增殖中的作用。方法通过癌症基因组图谱数据库分析ALKBH5和前mRNA加工因子6(pre-mRNA processing factor 6,PRPF6)在HCC组织中的表达水平。采用实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测ALKBH5和PRPF6在HCC细胞系(Huh7和Hep3B)中的mRNA和蛋白表达水平。荧光原位杂交确定ALKBH5和PRPF6在HCC细胞系(Huh7和Hep3B)中的亚细胞定位。在免疫沉淀复合物中检测PRPF6的N6-甲基腺苷甲基化水平。通过过表达和敲低基因表达的方法,将Huh7细胞和Hep3B细胞分别进行转染,分组为sh-NC组(阴性对照转染细胞)、sh-ALKBH5实验组(ALKBH5干扰序列转染细胞)、sh-ALKBH5+ex-PRPF6实验组(ALKBH5干扰序列转染+PRPF6 pcDNA 3.1过表达质粒转染细胞),并采用CCK-8和染色增殖试验检测各组细胞的增殖情况。裸鼠异种移植瘤实验验证ALKBH5和PRPF6在体内的生物学功能。蛋白质印迹法检测各组细胞中AKT/mTOR通路相关蛋白的表达水平。结果HCC细胞中ALKBH5的表达上调,可以去除PRPF6的甲基化修饰。体外和体内实验结果显示,ALKBH5可通过调节PRPF6的表达参与HCC细胞的恶性增殖。此外,敲低ALKBH5会抑制丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(serine-threonine kinase,AKT)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)的磷酸化,而PRPF6的过表达则有助于AKT和mTOR的磷酸化。结论ALKBH5能促进HCC细胞的增殖,相关机制是通过ALKBH5/PRPF6/AKT/mTOR轴实现的。

Fe/HZSM-5催化剂类芬顿体系去除罗丹明B

本文以HZSM-5为载体、Fe(NO_(3))_(3)·9H_(2)O为铁源,采用过量浸渍法制备了不同负载量的Fe/HZSM-5催化剂,并将其与H_(2)O_(3)组成类芬顿体系用于降解罗丹明B。对所制备的材料进行了XRD、FT-IR、N_(2)吸附-脱附、NH,-TPD等表征分析。结果表明:Fe以Fe_(2)O_(3)的形式存在于HZSM-5中,负载铁后对HZSM-5的结构未产生明显的影响,但使其酸量略有降低。以5%-Fe/HZSM-5为催化剂的类芬顿体系处理50mL浓度为10mg·L^(-1)的罗丹明B溶液,在反应温度55℃、过氧化氢用量0.12mL、催化剂投加量0.03g的条件下,在较宽的pH范围(1~5)反应30min后,罗丹明B去除率均可达93%以上。

6-巯基-5-三唑并[4,3-b]-s-四嗪(MTT)的密度泛函理论研究

采用密度泛函理论(Density functional theory,DFT),在B3LYP/6-31g(d)(C,H,N,S),Ag原子采用LanL2d赝势基组水平上对甲醛(HCHO)与4-氨基-5肼基-3-巯基-1,2,4-三唑(4-amino-5-hydrazino-3-mercapto-1,2,4-triazole,AHMT)衍生化反应生的成产物6-巯基-5-三唑并[4,3-b]-s-四嗪(6-mercapto-5-triazolo[4,3-b]-s-tetrazine,MTT)及其银配合物进行结构优化,优化结果表明MTT的结构是一个近平面结构.通过对频率计算,获得MTT分子及其银配合物的拉曼光谱,对400-1800 cm^(-1)波段内的拉曼光谱特征峰进行了指认.同时讨论了MTT分子的表面静电势,分析可能发生化学反应的位点.并采用含时密度泛函理论(Time Dependent density functional theory,TDDFT)对MTT分子与Ag3配合物的激发态进行了计算分析,并使用电荷转移光谱对Ag配合物与MTT之间电荷转移关系进行了研究.该研究对MTT分子的光谱测定和电子性质提供了理论基础.

5-磷酸吡哆醛缩合罗丹明B席夫碱合成及对Cu^(2+)的识别研究

合成了吡哆醛-5-磷酸罗丹明B席夫碱.通过紫外-可见光光谱法研究了该化合物对Cu^(2+)的识别能力:在丙酮-水(体积比1∶1)混合体系中,加入Cu^(2+)后,在526 nm处出现了一个新的吸收峰,并且随着Cu^(2+)的加入,吸收强度逐渐增强.在(0.25~10)×10^(-6) mol/L的浓度范围内,检测结果呈现出良好的线性关系(R^(2)=0.9993),检测限为2.30×10^(-7) mol/L.

非金属B掺杂g-C3N5催化剂的制备及对亚甲基蓝的降解

通过高温溶剂热解的方法制备B/g-C3N4催化剂,并采用X射线衍射(XRD)、扫描电子显微镜(SEM)、红外光谱(FT-IR)、紫外-可见漫反射光谱(UV-Vis DRS)、瞬态荧光光谱(PL)等对B/g-C_(3)N_(5)催化剂的晶型、官能团等进行表征。以亚甲基蓝(MB)染料溶液为模拟污染物,研究了可见光照射下不同质量比掺杂对B/g-C_(3)N_(5)光催化活性的影响。结果表明:非金属B掺杂实现了g-C_(3)N_(5)的e^(-)-h^(+)的高效分离,提高了可见光的吸收性能,光谱范围发生明显红移。当非金属B掺杂量为3%时,B/g-C3N5催化剂活性最佳,其对MB的光催化降解率达到95%,B/g-C3N5催化剂循环使用5次后其对MB的光催化降解率仍达到90%。活性自由基·O_(2)^(-)和h^(+)可将MB高效降解为CO_(2)和H_(2)O等无机小分子。

组织DDX5、PBX3的表达对前列腺癌术后复发的预测价值

目的探讨与分析组织死亡盒蛋白5(Dead-boxpolypeptide5,DDX5)、前B细胞白血病同源盒基因3(pre-B-cell leukemia homeobox 3,PBX3)的表达对前列腺癌术后复发的预测价值。方法采用回顾性方法,2018年8月到2022年5月选择在南阳市第一人民医院诊治的前列腺癌患者90例作为研究对象,采用免疫组化法检测癌组织DDX5、PBX3表达水平。随访患者的术后复发情况并进行预测价值分析。结果90例患者随访到2022年8月,平均随访时间为16.20±2.22个月,复发10例(复发组),占比11.1%,其中吻合口复发2例,淋巴结复发9例。复发组的DDX5、PBX3表达阳性率为80.0%、90.0%,显著高于非复发组的26.3%、21.3%(P<0.05)。Spearsman分析显示DDX5、PBX3表达阳性率与术后复发存在相关性(P<0.05);COX回归分析显示DDX5、PBX3表达阳性率为影响术后复发的重要因素(P<0.05);ROC曲线显示DDX5、PBX3表达阳性率预测术后复发的曲线下面积分别为0.806、0.857。结论前列腺癌术后复发比较常见,多伴随有DDX5、PBX3的高表达,组织DDX5、PBX3的表达对前列腺癌术后复发的预测具有重要价值。

GPRC5A调控的ABCB1表达对肺腺癌增殖的影响

目的ATP结合盒B亚家族成员1(ATP binding cassette subfamily B member 1,ABCB1)的异常表达在多种癌症的发生发展中发挥关键作用。然而,G蛋白偶联受体C家族5组A型(G protein coupled receptor family C group5 type A,GPRC5A)调控的ABCB1表达对肺腺癌增殖的影响仍不清楚。本研究探讨了GPRC5A调控的ABCB1表达对肺腺癌增殖的影响。方法我们采用RT-PCR、Western-blot或免疫组化实验,分析ABCB1在肺腺癌细胞系、人肺腺癌组织以及GPRC5A基因敲除小鼠和野生型小鼠的气管上皮细胞和肺组织中的表达。采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)分析GPRC5A基因敲除小鼠气管上皮细胞对化疗药物的敏感性。采用皮下肿瘤形成实验探讨下调ABCB1表达是否可抑制体内肺腺癌增殖。采用免疫荧光和免疫沉淀实验研究GPRC5A和ABCB1之间潜在的调控关系。结果ABCB1在肺腺癌细胞系和人类肺腺癌组织中表达上调。GPRC5A基因敲除小鼠的气管上皮细胞及肺组织的ABCB1表达高于野生型小鼠。与GPRC5A野生型小鼠的气管上皮细胞相比,GPRC5A基因敲除小鼠的气管上皮细胞对塔立奇达和多柔比星更敏感。注射移植细胞28天后,接受ABCB1基因敲除细胞移植的GPRC5A-/-C57BL/6小鼠的肺肿瘤的体积和重量均明显低于野生型细胞移植小鼠(P=0.0043,P=0.0060)。此外,免疫荧光和免疫沉淀实验表明,GPRC5A通过直接结合方式调控ABCB1的表达。结论GPRC5A通过抑制ABCB1表达降低肺腺癌增殖。GPRC5A调节ABCB1表达的途径有待研究。

姐妹染色体过早分离基因5黏附相关因子B(PDS5B)下调Wnt5a表达抑制A549人肺癌细胞增殖

目的探讨姐妹染色体过早分离基因5黏附相关因子B(PDS5B)对A549肺癌细胞株生物学功能的影响及可能的分子机制。方法沉默或过表达A549人肺癌细胞的PDS5B后,噻唑蓝(MTT)法及集落形成实验检测肺癌细胞的增殖情况;划痕实验及TranswellTM检测细胞迁移的情况;Western blot法检测A549细胞PDS5B及无翅基因5a(Wnt5a)的蛋白表达;共同转染PDS5B小干涉RNA(siRNA)及Wnt5a siRNA,TranswellTM检测细胞迁移的情况。结果与转染阴性对照组相比,转染PDS5B siRNA后,PDS5B蛋白表达明显下降且A549细胞增殖能力、细胞集落形成率、迁移能力均明显提高,Wnt5a的表达升高;过表达PDS5B后,则结果相反;共转实验显示Wnt5a可以抵抗PDS5B对A549细胞的抑制作用。结论PDS5B通过下调Wnt5a表达抑制肺癌细胞增殖。

基于ALKBH5调控GSK3β/mTOR通路抑制过度自噬探讨速效救心丸减轻心肌细胞缺氧/复氧损伤的作用机制

目的:基于HL-1细胞自噬水平及相关通路关键蛋白表达探讨速效救心丸经Alk B同源蛋白5(ALKBH5)信号转导调控糖原合成酶激酶3β(GSK3β)/雷帕霉素靶蛋白(m TOR)通路抑制过度自噬而发挥对心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤保护作用的机制。方法:构建慢病毒干扰载体,筛选最佳干扰慢病毒。将HL-1细胞随机分为3组,并进行空白转染、ALKBH5转染、GSK3转染,各组再随机分为4组分别进行缺氧/复氧(模型组)、缺氧/复氧+速效(速效组)、缺氧/复氧+川芎嗪(川芎嗪组)、缺氧/复氧+冰片(冰片组)处理。通过自噬双标腺病毒(m RFP-e GFP-LC3)双荧光染色检测自噬流,细胞计数法(CCK8)检测细胞增殖,双染色双变量流式细胞分析法(Annexin V/PI)检测细胞凋亡,透射电镜观察自噬小体的数量和形态,蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测GSK3β、m TOR含量及自噬相关基因(Atg)5、苄氯素1(Beclin1)、自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链3Ⅱ/Ⅰ(LC3Ⅱ/Ⅰ)、自噬标志物p62蛋白表达。结果:ALKBH5过表达可抑制GSK3β表达,增强m TOR表达(P<0.05)。CCK8法检测m RFP-e GFP-LC3的双荧光染色检测自噬流结果显示,与空白转染比较,ALKBH5转染可促进自噬,GSK3β转染可抑制自噬(P<0.05)。CCK8法检测细胞增殖结果显示,与模型组比较,速效组、川芎嗪组、冰片组均可促进细胞增殖;与空白转染比较,ALKBH5组可抑制细胞增殖,GSK3β可促进细胞增殖(P<0.05)。Annexin V/PI双染色法检测心肌细胞凋亡显示,与模型组比较,速效组、川芎嗪组、冰片组均可抑制细胞凋亡;与空白组比较,ALKBH5转染及GSK3β转染均可增加细胞凋亡(P<0.05)。Western Blot检测LC3Ⅱ/Ⅰ比值、Atg5、Atg7、p62表达显示,与模型组比较,速效组、川芎嗪组、冰片组可抑制LC3Ⅱ/Ⅰ比值、Atg5、Atg7、p62表达,增强m TOR表达(P<0.05)。与空白转染比较,ALKBH5转染可增强LC3Ⅱ/Ⅰ比值、Atg5、Atg7、p62表达,抑制m TOR表达;GSK3β转染可抑制LC3Ⅱ/Ⅰ比值、Atg5、Atg7、p62表达,增强m TOR表达(P<0.05)。结论:速效救心丸及其有效成分冰片、川芎嗪经ALKBH5/GSK3β/m TOR信号通路抑制过度自噬,减轻心肌细胞缺氧/复氧损伤。

不同释放方式对全氟己酮抑制B类火焰的影响研究

全氟己酮作为一种高效环保的灭火剂,需要依托良好的释放方式才能有效发挥其灭火性能。为了检验不同释放方式下全氟己酮的灭火效能,使用20 mL正庚烷油盘火作为火焰模型,分别利用1.2 MPa的氮气和2 g富氮产气物质来推动全氟己酮释放。讨论和比较了全氟己酮在两种释放方式下,对B类火焰的灭火效果、降温能力和作用机理。研究结果表明:施放的压力对全氟己酮灭火效果影响显著。相比于充装氮气的驱动方式,全氟己酮在富氮产气物质产生的高压气流作用下,能充分释放并及时扑灭火灾,在灭火时间、降温效果、火焰抑制上均有优异的表现。机理分析表明,在1.2 MPa的氮气充装驱动下,大部分的全氟己酮在释放过程中尚未与火焰接触便发生了挥发。而全氟己酮在仅2 g富氮产气物质产生的高压气流作用下,能够与火焰燃烧面充分接触,吸热分解并发挥化学抑制作用,快速阻断燃烧反应。

复发性流产患者胎盘绒毛中FTO mRNA和ALKBH5 mRNA水平表达及临床价值研究

目的 探讨胎盘绒毛组织中肥胖相关蛋白(fat mass and obesity associated protein,FTO)mRNA和AlkB同源蛋白5(Alk B homologous 5,ALKBH5)mRNA水平与复发性流产的相关性。方法 选取2019年12月~2021年1月深圳市中西医结合医院产科接收的98例复发性流产患者为复发性流产组,同期选取正常早孕人工流产者96例作为对照组。比较两组一般资料;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测两组受试者胎盘绒毛组织FTO mRNA和ALKBH5mRNA水平;采用Pearson法分析复发性流产患者胎盘绒毛组织FTO mRNA与ALKBH5 mRNA水平相关性;采用单因素及多因素Logistic回归分析影响复发性流产的因素。结果 复发性流产组胎盘绒毛组织FTO mRNA(0.72±0.16),ALKBH5 mRNA(0.64±0.18)水平低于对照组(1.02±0.24,1.01±0.21),差异均有统计学意义(t=10.263,13.185,均P <0.05)。复发性流产患者胎盘绒毛组织FTO mRNA与ALKBH5 mRNA水平呈正相关(r=0.537,P <0.05)。流产次数> 3次的复发性流产患者胎盘绒毛组织FTO mRNA(0.40±0.12),ALKBH5 mRNA(0.47±0.11)水平低于流产次数3次患者(0.86±0.18,0.72±0.14),差异具有统计学意义(t=12.615,8.561,均P <0.05)。单因素Logistic回归分析结果显示,孕囊大小为复发性流产发生的危险因素[OR(95%CI):2.025(1.468~2.794),P <0.05],FTO mRNA,ALKBH5 mRNA为复发性流产发生的保护因素[OR(95%CI):0.730(0.548~0.972);0.655(0.492~0.873),均P <0.05]。多因素Logistic回归分析结果显示,FTO mRNA和ALKBH5 mRNA为复发性流产发生的独立保护因素[OR(95%CI):0.674(0.519~0.874),0.541(0.392~0.747),均P <0.05]。结论 复发性流产患者胎盘绒毛组织FTO mRNA和ALKBH5 mRNA低表达,二者为复发性流产发生的独立保护因素。

选择性MAO-B抑制剂TM-5对胶质瘤U87细胞自噬和凋亡的影响

目的探讨选择性单胺氧化酶B(MAO-B)抑制剂TM-5对胶质瘤U87细胞体外自噬及凋亡的影响。方法正常培养胶质瘤细胞株U87,随机分为6组:对照组不做处理,5、10、25、50、100μmoL/L TM-5组分别予以5、10、25、50、100μmoL/L TM-5处理细胞,每组设3个复孔。采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测促凋亡蛋白Bcl-2相关蛋白X(Bax)、抑凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的基因表达;蛋白质免疫印迹(WB)检测细胞凋亡相关蛋白Bax和切割后半胱氨酸蛋白酶3(cleaved caspase-3)以及自噬相关标志蛋白Beclin-1、自噬相关蛋白1轻链-Ⅱ(LC3-Ⅱ)和P62表达。结果与对照组比较,10、25、50、100μmoL/L TM-5组U87细胞存活率降低(P<0.05),选取5、10、25μmoL/L TM-5组(细胞存活率>50%)进行后续实验。与对照组比较,10、25μmoL/L TM-5组相对细胞凋亡率、细胞中LC3-Ⅱ和Bax蛋白相对表达量升高,差异有统计学意义(P<0.05);5、10、25μmoL/L TM-5组U87细胞中促凋亡基因Bax mRNA相对表达水平、Beclin-1和cleaved caspase-3蛋白相对表达量升高,抑凋亡基因Bcl-2 mRNA、P62蛋白相对表达量降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论TM-5可抑制胶质瘤U87细胞存活,可上调Beclin-1、LC3-Ⅱ、Bax和cleaved caspase-3,下调Bcl-2和P62表达,诱导细胞自噬和凋亡。

SETD5介导AKT1磷酸化调控结肠癌细胞的迁移和5-FU敏感性

目的:探讨含SET结构域蛋白5(SETD5)对结肠癌细胞增殖、迁移和对5-氟尿嘧啶(5-FU)药物敏感性的影响及机制。方法:常规培养结肠癌细胞,用Lipofectamine 2000将siSETD5-NC、si-SETD5-1~3质粒转染至HT-29细胞中,将其分为对照组(未处理)、si-SETD5-NC组、si-SETD5组和si-SETD5+SC79组,si-SETD5+SC79组HT-29细胞转染质粒的同时用10µmol/L SC79处理。qPCR法检测NCM460、HT-29和LoVo细胞中SETD5 mRNA表达,流式细胞术、细胞划痕法、WB法和CCK-8法分别检测各组HT-29细胞的凋亡情况、迁移能力、相关蛋白的表达,以及对5-FU的敏感性。结果:SETD5 mRNA在HT-29、LoVo细胞中均呈高表达(均P<0.01)。在HT-29细胞中成功地敲减了SETD5 mRNA(P<0.01)。敲减SETD5 mRNA可明显抑制HT-29细胞的增殖活性(P<0.01)、迁移能力(P<0.01)、相关蛋白(SETD5、p-PI3K、p-AKT1、p-mTOR蛋白)的表达(均P<0.01)、促进细胞凋亡(P<0.01),且提高其对5-FU的敏感性(P<0.01),这些作用均可被AKT激活剂SC79部分阻挡(P<0.05或P<0.01)。结论:SETD5在HT-29、LoVo细胞中高表达,SETD5通过PI3K/AKT1通路促进结肠癌HT-29细胞的增殖、迁移,且降低其对5-FU的敏感性,SETD5是结肠癌临床诊断、治疗的潜在靶点。