HPLC-DAD法测定降脂合剂中5-羟甲基糠醛、苍术素、丹酚酸B的含量

目的：建立降脂合剂中5-羟甲基糠醛（5-HMF）、苍术素（atractydin）、丹酚酸B（salvianolic acid B）的高效液相含量测定方法。方法：采用Hibar ODS柱（4．6mm×250mm，5μm），以乙腈-0．1％甲酸溶液为流动相梯度洗脱，流速为1．0mL·min^-1，检测波长为300nm，柱温为35℃，进样量10μL。结果：5-羟基甲基糠醛在7．812～250．0μg·mL^-1范围内线性关系良好（R。=0．9993），回收率为100．03％（RSD=1．76％，n=5），苍术素在7．812—250．0μg·mL^-1范围内线性关系良好（R2=0．9998），回收率为100．41％（RSD=1．42％，n=5），丹酚酸B在7．812—250．0μg·mL^-1范围内线性关系良好（R2=0．9992），回收率为100．77％（RSD=2．15％，n=5），其精密度、稳定性和平均加样回收率均符合含量测定要求。结论：本法简单易行，结果准确可靠，可有效地用于降脂合剂的质量控制。

HPLC法测定乳制品中的结合型羟甲基糠醛

5-羟甲基糠醛来源于食品的热处理加工过程,分游离型和结合型两种。通过对Amadori产物水解和还原糖异构化可获得该化合物,它可作为一种评估食品中蛋白质发生质量损伤程度的有效标志物。采用三氯乙酸沉淀法对婴幼儿配方食品进行蛋白质沉淀,通过对获得的Amadori产物酸水解,最终测定发生于美拉德反应过程中的羟甲基糠醛含量。结果表明:Amadori产物水解的最优条件为:草酸浓度1.07 mol/L;22.22 mL草酸/g蛋白质;水解240 min。该方法的检出限为0.045μg/mL,变异系数为7.9%,回收率为92.2%。通过对市售样品分析发现,蛋白质质量热损伤程度不同的乳制品中B-HMF差别较显著。

丹参酒炙过程中炮制时间、颜色与化学成分含量的相关性

目的:评价丹参酒炙过程中炮制时间、颜色与化学成分含量的相关性。方法:用黄酒制备不同炮制时间(7~15 min)的丹参酒炙品,采用高效液相色谱法测定丹参及其酒炙品中丹酚酸B、丹参酮ⅡA和5-羟甲基糠醛(5-HMF)的含量;采用色差仪测定两者的色度值[红绿色轴分量(a*)、黄蓝色轴分量(b*)、明度(L*)]并计算总色差值(ΔE);采用Spearman’s rho、Kendall’s Tau-b检验考察炮制时间、色度值与化学成分含量的相关性。结果:丹参饮片中丹酚酸B、丹参酮ⅡA、5-HMF的含量分别为17.9~70.6、2.3~3.1、0 mg/g;丹参酒灸品中丹酚酸B、丹参酮ⅡA、5-HMF的含量分别为14.8~68.4、1.1~3.9、0.7~34.4 mg/g。丹酚酸B含量先降低再增加,约在9、11 min达到高峰后逐渐降低;丹参酮ⅡA含量先增加,约在7 min达到高峰后逐渐降低;5-HMF在炒制13 min后含量急剧增加。以丹参为标样的丹参酒炙品的ΔL*为-5.369~2.553、Δa*为-1.098~0.321、Δb*为-1.471~2.355,ΔE为0.217~5.397。Spearman’s rho、Kendall’s Tau-b检验的结果均显示,ΔE与丹参炮制时间(相关系数分别为0.517、0.389)、5-HMF含量(相关系数分别为0.549、0.405)均呈正相关(P均小于0.01);丹参酮ⅡA含量与Δb*(相关系数分别为-0.509、-0.391)、炮制时间(相关系数分别为-0.556、-0.420)、5-HMF含量(相关系数分别为-0.545、-0.392)均呈负相关(P均小于0.01);5-HMF含量与炮制时间(相关系数分别为0.957、0.870)呈正相关(P均小于0.01)。结论:丹参酒炙过程中丹参酮ⅡA、5-HMF的含量与炮制时间及颜色显著相关,即随着炮制时间增加和温度升高,其颜色由红黄色向黄绿色变化,在黑白程度上偏黑色;丹参酮ⅡA含量降低,5-HMF含量升高。

构筑钌基纳米催化剂用于5-羟甲基糠醛加氢制2,5-二羟甲基四氢呋喃

合理使用生物质,对解决环境污染和资源短缺问题大有裨益.5-羟甲基糠醛(5-HMF)可以由生物质衍生的糖类脱水获得,进一步完全氢化可以转化为具有高附加值的2,5-二羟甲基四氢呋喃(DHMTHF).以表面胺基功能化介孔二氧化硅小球(SiO2-NH2)为载体,采用等体积浸渍法制备了高分散钌(Ru)基(Ru-B)纳米催化剂(Ru-B/SiO2-NH2).以2-丁醇为溶剂,将制得的Ru-B/SiO2-NH2用于5-HMF加氢制DHMTHF.在160℃,2.76 MPa,800 r·min^-1的条件下,5-HMF转化率为100%,DHMTHF的产率为87%.与目前报道的催化剂相比,该催化体系可以在更为温和的条件下获得较好的效果.构效关系研究表明:载体表面胺基功能化可以起到锚定和高度分散Ru-B非晶态合金纳米粒子的作用.

基于中药炮制“醋制入肝”理论醋五味子对急性肝损伤作用谱效关系研究

目的以“醋制入肝”中药炮制理论为基础,采用HPLC法分析不同醋制时间五味子成分变化,探讨成分变化与抗肝损伤作用关联,明确醋五味子保肝活性物质基础。方法应用HPLC法建立10批生五味子及醋制1、2、3、4、5、6 h五味子指纹图谱,检测五味子醇甲、五味子乙素、五味子甲素、丙烯酰胺、5-羟甲基糠醛(5-HMF)、五味子酯甲水平。以CCl4诱导小鼠急性肝损伤为动物模型,结合血清生化指标天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的变化,运用灰色关联度法联合偏最小二乘法分析其保肝作用成分与药效之间的关联性。结果10批五味子指纹图谱中,以五味子醇甲色谱峰为参比峰,标定出共有峰23个,其中特征峰6个;对10批生五味子及不同醋制时间下五味子指纹图谱与对照指纹图谱相似度组内对比发现,相似度均在0.913~0.999;随着蒸制时间的延长,五味子中5-HMF整体呈上升趋势;醋制3 h时五味子酯甲较生五味子质量分数略有增加,而后随着时间延长逐渐减小;醋制1~6 h内五味子醇甲、五味子甲素和五味子乙素质量分数较生五味子变化不大。与模型组比较,醋制2、3、6 h组AST、ALT、TNF-α、MDA水平显著降低,SOD水平显著升高(P<0.01);醋制1 h组AST、MDA水平显著降低,SOD水平显著升高(P<0.01);醋制4 h组AST、ALT水平显著降低,SOD水平显著升高(P<0.01);醋制5 h组AST、ALT、TNF-α水平显著降低,SOD水平显著升高(P<0.01)。组间对比发现,醋制3 h组药效学指标明显较好,随着炮制时间延长,与醋制3 h组比较,醋制4、5、6 h组血清中AST、ALT、TNF-α、MDA水平有不同程度升高,SOD含量下降。故以醋制3 h五味子指纹图谱与药效学之间关联性建立谱-效关系研究,经灰色关联度法联合偏最小二乘法分析,5-HMF、五味子乙素、五味子醇甲为改善小鼠肝损伤的主要贡献成分。结论醋制3 h五味子对CCl4诱导急性肝损伤小鼠的作用效果最佳,其中五味子乙素、5-HMF及五味子醇甲对小鼠生化指标影响较显著。

基于多元统计分析和网络药理学的五味子醋制前后质量标志物预测分析

目的 基于多元统计分析和网络药理学分析预测五味子醋制前后潜在的质量标志物。方法 采用UPLC-Q/TOF-MS解析生、醋五味子饮片中主要的木脂素类成分,并运用多元统计方法筛选出炮制前后潜在的差异化学成分,即化学标记物。进一步通过网络药理学以及生物信息学分析显著差异成分相关的主要作用靶点和通路,构建“成分-靶点-通路”网络关系,预测生、醋五味子潜在的质量标志物。结果 筛选了五味子醋制前后差异性成分40个,其中8个为生、醋五味子之间显著性差异成分(即化学标记物)。鉴定并确认了其中的5个化学成分,分别是5-羟甲基糠醛、五味子甲素及其同分异构体、五味子乙素和五味子酯丁。而其余3个化学标记物通过解析一级、二级质谱信息,推测它们很可能也属于木脂素类成分。网络药理学分析结果表明,鉴定并确认的5个潜在质量标志物与五味子的主要药理作用密切相关。最终五味子乙素和5-羟甲基糠醛被确定为最具代表性的潜在质量标志物。结论 五味子醋制前后其化学成分发生了一系列复杂的变化,经研究分析确定五味子乙素和5-羟甲基糠醛可作为五味子醋制前后代表性的潜在质量标志物,并推测木脂素类成分可能为五味子醋制保肝的重要效应物质基础。

熟地黄泽泻郁金合煎液中2种成分煎出量的变化

目的研究熟地黄、泽泻、郁金合煎液中5-羟甲基糠醛、23-乙酰泽泻醇B煎出量的变化,为探讨三药合煎液的药效物质奠定基础。方法药材分为单煎-1(熟地黄)、单煎-2(泽泻)、单煎-3(郁金)、合煎-1(熟地黄/泽泻)、合煎-2(熟地黄/郁金)、合煎-3(泽泻/郁金)、合煎-4(熟地黄/泽泻/郁金)等7组,分别制备水煎液干浸膏,超声法提取,高效液相色谱法(HPLC)检测并计算煎出量(以药材计)。结果 5-羟甲基糠醛煎出量由高至低依次为单煎-1、合煎-1、合煎-4、合煎-2;23-乙酰泽泻醇B煎出量由高至低依次为合煎-3、合煎-1、合煎-4、单煎-2。结论与熟地黄、泽泻单煎液比较,合煎液中5-羟甲基糠醛煎出量降低,23-乙酰泽泻醇B煎出量增加,且差异均具有显著性(P<0.01),推测三药合煎液发挥药效作用可能与23-乙酰泽泻醇B有关,一定程度上为阐明三药合煎液的药效物质提供了科学依据。

HPLC-CAD同时测定骨疏康胶囊中6种成分的含量

目的：建立HPLC-CAD同时测定骨疏康胶囊中柚皮苷,朝藿定B,朝藿定C,淫羊藿苷,5-羟甲基糠醛（5-HMF）及丹参酮ⅡA的含量,为骨疏康胶囊的质量控制提供参考。方法：采用高效液相色谱法联合电雾式检测器法（HPLC-CAD）,Agilent ZORBAX Eclipse XDB C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,乙腈（A）-0.05%甲酸水（B）为流动相,梯度洗脱（010 min,10%A;10～25 min,10%～25%A;25～30 min,25%～30%A;30～45 min,30%～60%A;45～50 min,60%～75%A）,流速0.8 m L·min-1,雾化器温度为35℃,柱温35℃,进样量10μL,测定骨疏康胶囊中6种成分的含量。结果：柚皮苷,朝藿定B,朝藿定C,淫羊藿苷,5-羟甲基糠醛及丹参酮ⅡA的质量浓度分别在0.0060.120μg（r=0.999 7）,0.0410.820μg（r=0.999 9）,0.0110.220μg（r=0.999 6）,0.0220.440μg（r=0.999 8）,0.0120.240μg（r=0.999 8）,0.0050.100μg（r=0.999 8）与峰面积呈良好的线性关系。柚皮苷,朝藿定B,朝藿定C,淫羊藿苷,5-羟甲基糠醛及丹参酮ⅡA的平均加样回收率分别为99.26%,97.99%,98.17%,99.34%,98.26%及99.25%,RSD（n=6）分别为1.7%,1.0%,1.6%,1.4%,1.9%和1.3%。结论：该方法准确、简便、重复性好、灵敏度高,可用于骨疏康胶囊中多成分的质量控制研究。