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GPⅡb^(R995A)点突变对受体亲合力及PP125^(FAK)磷酸化的影响 被引量:1
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作者 唐雪元 陈方平 +3 位作者 蹇在伏 解勤之 赵谢兰 王光平 《血栓与止血学》 2001年第1期5-8,共4页
目的:为了进一步探讨血小板膜(GPⅡb)胞内段在信号传递中的作用。方法:选择表达GPⅡb^(R995A)Ⅲa的CHO细胞为研究对象,以正常人血小板和表达GPⅡbⅢa的CHO细胞为对照,应用流式细胞术、免疫沉淀、western blot-ting等方法检测PAC-1且结... 目的:为了进一步探讨血小板膜(GPⅡb)胞内段在信号传递中的作用。方法:选择表达GPⅡb^(R995A)Ⅲa的CHO细胞为研究对象,以正常人血小板和表达GPⅡbⅢa的CHO细胞为对照,应用流式细胞术、免疫沉淀、western blot-ting等方法检测PAC-1且结合能力和PP125^(FAK)磷酸化。结果:GPⅡbⅢa CHO细胞几乎不结合PAC-1,而GPⅡb^(R995A)ⅢaCHO细胞结合PAC-1明显增加;GPⅡbⅢa CHO细胞只有在粘附纤维蛋白原后才有FAK磷酸化,GP血b^(R995A)Ⅲa CHO细胞在悬浮时即有微弱的FAK磷酸化。结论:本研究提示GPⅡb^(R995A)点突变能改变受体的低亲合力状态,使受体具有高亲合性;该突变还介导细胞内信号传导,引起非配体结合的FAK磷酸化。 展开更多
关键词 CPbⅢA 胞内段序列 聚焦粘附激酶 磷酸化 血小板
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两亲性卟啉LB膜的Cu^(Ⅱ)离子嵌入作用 被引量:2
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作者 黄涛 王永强 +2 位作者 田永驰 李伯符 梁映秋 《化学世界》 CAS CSCD 1999年第10期520-523,共4页
研究了带一个脂链三个羟基( T H P P1)及三个脂链一个羟基( T H P P3)的两种卟啉的单层膜及 L B膜的 Cu2+ 离子嵌入作用。 Cu2+ 嵌入速率和程度取决于膜中卟啉环的取向、分子排列和聚集态。膜中卟啉环较为平躺... 研究了带一个脂链三个羟基( T H P P1)及三个脂链一个羟基( T H P P3)的两种卟啉的单层膜及 L B膜的 Cu2+ 离子嵌入作用。 Cu2+ 嵌入速率和程度取决于膜中卟啉环的取向、分子排列和聚集态。膜中卟啉环较为平躺、排列较疏松、形成 J聚体的 T H P P1 可快速完全地金属化,而 T H P P3 在膜中形成 B带劈裂聚集体,环较直立,排列紧密有序, Cu2+ 的嵌入缓慢且不完全。 展开更多
关键词 两亲性 铜离子 卟啉 Lb b-带劈裂聚集体 嵌入
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Ca^(2+)对叶绿素a/b钙结合蛋白波谱学特性的影响(Ⅱ) 被引量:3
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作者 文江祁 张立新 +1 位作者 李文瑞 梁厚果 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第5期49-52,共4页
用钙螯合亲和层析分离纯化得到的叶绿素a/b钙结合蛋白,其荧光发射峰在680±1nm,钙结合后导致荧光发射峰强度降低。当再加入EGTA,螯合钙后,其荧光发射峰强度得以部分恢复。该蛋白在结合钙后,其圆二色谱也发生变化... 用钙螯合亲和层析分离纯化得到的叶绿素a/b钙结合蛋白,其荧光发射峰在680±1nm,钙结合后导致荧光发射峰强度降低。当再加入EGTA,螯合钙后,其荧光发射峰强度得以部分恢复。该蛋白在结合钙后,其圆二色谱也发生变化。这些结果表明该蛋白质的构象在结合钙后发生了变化。该蛋白质的荧光激发光谱在440nm和470nm处的激发峰表明此蛋白结合有叶绿素a和叶绿索b。本文对叶绿素a/b钙结合蛋白在光系统Ⅱ中的可能功能进行了讨论。 展开更多
关键词 光系统颗粒 荧光光谱 圆二色谱 吸收光谱 叶绿素a/b钙结合蛋白
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超高效液相色谱-串联质谱法测定禽用饲料中苏丹红、罗丹明B和酸性橙Ⅱ等6种染色剂含量
4
作者 李宏 贺习文 +3 位作者 晁娟娟 李俊 武治勇 杨森 《中国饲料》 北大核心 2024年第3期118-124,共7页
本研究基于超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)结合QuEChERS快速净化方法,旨在建立禽用饲料中苏丹红等6种化工染料的定量分析方法。样品用乙腈提取,C_(18)+PSA净化材料净化,净化液经Hypersil GOLD C_(18)反向色谱柱分离,在电喷雾离子... 本研究基于超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)结合QuEChERS快速净化方法,旨在建立禽用饲料中苏丹红等6种化工染料的定量分析方法。样品用乙腈提取,C_(18)+PSA净化材料净化,净化液经Hypersil GOLD C_(18)反向色谱柱分离,在电喷雾离子源(ESI)正、负离子双扫描模式下多反应监测(MRM),以标准曲线外标法定量。结果表明:6种化合物线性关系良好;相关系数(R^(2))>0.999,4种苏丹红和酸性橙Ⅱ检出限(LOD)为0.5μg/kg,定量限(LOQ)为1.0μg/kg,罗丹明B LOD为0.05μg/kg,LOQ为0.1μg/kg。添加回收率为90%~110%,相对标准偏差<10%。本研究方法具有快速、灵敏等优势,可实现禽用饲料中6种化工染料的准确定量分析,为禽用饲料的质量安全提供技术参考。 展开更多
关键词 禽用饲料 苏丹红 罗丹明b 酸性橙 超高效液相色谱-串联质谱法 QuEChERS
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Uncertainty evaluation of the isotope shift factors for 2s2p^(3,1)P_1~o–2s^2 ~1S_0 transitions in B Ⅱ
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作者 Jianpeng Liu Jiguang Li Hongxin Zou 《Chinese Physics B》 SCIE EI CAS CSCD 2017年第2期147-151,共5页
Accurate isotope shift factors of the 2s2p^(3,1)P_1~o–2s^2 ~1S_0 transitions in B II, obtained with the multi-configuration Dirac–Hartree–Fock and the relativistic configuration interaction methods, are reported.... Accurate isotope shift factors of the 2s2p^(3,1)P_1~o–2s^2 ~1S_0 transitions in B II, obtained with the multi-configuration Dirac–Hartree–Fock and the relativistic configuration interaction methods, are reported. We found a linear correlation relation between the mass shift factors and the energies for the transitions concerned, considering all-order electron correlations. This relation is important for estimating the uncertainty in the calculation of isotope shift factors. These atomic data can be used to extract the nuclear mean-square charge radii of the boron isotopes with halo structures or to resolve the high precise spectroscopy of B II in astronomical observation. 展开更多
关键词 isotope shifts b halo state MCDHF method
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血清PIVKA-Ⅱ、AFP与HBV-DNA联合检测对HBV所致肝癌的诊断及预后预测价值
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作者 万强 赵波 王瑶瑶 《标记免疫分析与临床》 CAS 2024年第4期685-691,共7页
目的探究血清异常凝血酶原Ⅱ(PIVKA-Ⅱ)、甲胎蛋白(AFP)与乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)联合检测对HBV所致肝癌(HCC)的诊断及预后预测价值。方法选取2018年8月至2020年7月在本院接受治疗的98例HCC患者作为研究对象(肝癌组),另取同期95... 目的探究血清异常凝血酶原Ⅱ(PIVKA-Ⅱ)、甲胎蛋白(AFP)与乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)联合检测对HBV所致肝癌(HCC)的诊断及预后预测价值。方法选取2018年8月至2020年7月在本院接受治疗的98例HCC患者作为研究对象(肝癌组),另取同期95例体检健康人群作为健康组,95例肝硬化患者作为肝硬化组,观察3组受试者血清PIVKA-Ⅱ、AFP与HBV-DNA表达水平和一般资料差异。根据肝癌组3年内预后情况将患者分为生存组(57例)和死亡组(41例)。比较肝癌组一般资料和血清PIVKA-Ⅱ、AFP与HBV-DNA水平关系;多因素Logistic和COX回归分析分别分析影响受试者患肝癌和患者预后不良的影响因素;四格表法计算血清PIVKA-Ⅱ、AFP与HBV-DNA水平对HCC的预测价值;ROC曲线分析评估血清PIVKA-Ⅱ、AFP与HBV-DNA水平对HCC患者预后的预测价值。结果肝癌组患者血清PIVKA-Ⅱ、AFP与HBV-DNA水平显著高于健康组和肝硬化组(P<0.05);HCC发病与血清PIVKA-Ⅱ、AFP与HBV-DNA水平有关,且是危险因素(P<0.05)。HCC患者预后不良与血清PIVKA-Ⅱ、AFP与HBV-DNA水平以及肿瘤数量有关(P<0.05),且是危险因素。血清PIVKA-Ⅱ、AFP与HBV-DNA水平以及3项联合诊断HCC发病的准确度分别为77.43%、72.57%、77.43%和84.72%。血清PIVKA-Ⅱ、AFP与HBV-DNA水平以及3项联合诊断HCC预后不良的AUC分别为0.823、0.841、0.824和0.958,3项联合诊断效能优于单一诊断(P<0.05)。结论血清PIVKA-Ⅱ、AFP与HBV-DNA水平在HCC患者和预后不良患者中呈高表达,且3项联合可有效预测HCC发病和HCC患者预后情况。 展开更多
关键词 肝癌 异常凝血酶原 甲胎蛋白 乙肝病毒脱氧核糖核酸 诊断 预后
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知母中知母皂苷BⅡ的TLC鉴别及HPLC法含量测定 被引量:14
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作者 于健东 马玲云 +3 位作者 马双成 赵阳 张洁 马百平 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期1436-1437,共2页
目的:建立知母药材中知母皂苷BⅡ的 TLC 鉴别及 HPLC 含量测定方法。方法:TLC 法,展开剂:氯仿-甲醇-水(65:35:10)10℃以下放置的下层溶液为展开剂,显色剂:10%硫酸乙醇溶液,105℃加热至斑点显色清晰。HPLC 法,色谱柱:HiQ-sil C_(18)(5μm... 目的:建立知母药材中知母皂苷BⅡ的 TLC 鉴别及 HPLC 含量测定方法。方法:TLC 法,展开剂:氯仿-甲醇-水(65:35:10)10℃以下放置的下层溶液为展开剂,显色剂:10%硫酸乙醇溶液,105℃加热至斑点显色清晰。HPLC 法,色谱柱:HiQ-sil C_(18)(5μm,4.6mm×250mm),流动相:甲醇-水(53:47),流速:0.8 mL·min^(-1),检测:蒸发光散射检测器(ELSD),漂移管温度:100℃,气体流速:2.6L·min^(-1)。结果:3批药材中知母皂苷 BⅡ成分的 TLC 分离效果均较好,HPLC 法测得知母皂苷 BⅡ的平均回收率为97.7%,RSD 为1.8%。结论:该方法准确可靠,可用于知母药材质量控制。 展开更多
关键词 知母 知母皂苷b TLC HPLC 含量测定
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知母皂苷BⅡ对Aβ_(25-35)诱导的原代大鼠神经细胞损伤的保护作用 被引量:20
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作者 邓云 马百平 +3 位作者 从玉文 沈玉先 张晶晶 沈玉君 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期244-247,共4页
目的研究甾体皂苷类化合物知母皂苷BⅡ对Aβ25-35诱导的原代大鼠神经细胞损伤的保护作用。方法体外培养原代大鼠神经细胞,采用MTT(四甲基偶氮唑盐)法检测细胞增殖活性;采用分光光度法测定细胞培养液中LDH(乳酸脱氢酶)漏出率、SOD(超氧... 目的研究甾体皂苷类化合物知母皂苷BⅡ对Aβ25-35诱导的原代大鼠神经细胞损伤的保护作用。方法体外培养原代大鼠神经细胞,采用MTT(四甲基偶氮唑盐)法检测细胞增殖活性;采用分光光度法测定细胞培养液中LDH(乳酸脱氢酶)漏出率、SOD(超氧化物歧化酶)活力、MDA(丙二醛)含量以及AChE(乙酰胆碱酯酶)活力。结果知母皂苷BⅡ10-4、10-5mol.L-1能明显增强Aβ25-35(20μmol.L-1)诱导的神经细胞增殖活性,降低LDH漏出率,并能明显提高其SOD活力、降低MDA含量,同时对AChE活力具有一定的降低作用。结论知母皂苷BⅡ能明显改善Aβ25-35诱导的原代大鼠神经细胞损伤,可能与其提高模型细胞的抗氧化能力,改善胆碱能系统相关。 展开更多
关键词 知母皂苷b AΒ25-35 原代大鼠神经细胞
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HPLC同时测定冠心丹参胶囊中丹参素、原儿茶醛、丹酚酸B和丹参酮ⅡA的含量 被引量:22
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作者 魏惠珍 王跃生 +4 位作者 吴有根 饶毅 金浩鑫 方海红 张洁 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期64-68,共5页
目的:建立同时测定冠心丹参胶囊(丹参,三七,降香)中丹参素、原儿茶醛、丹酚酸B和丹参酮ⅡA含量的HPLC方法。方法:采用HPLC法,色谱柱:VP—ODS(4.6mm×250mm,5μm);流动相:0.03mol/L醋酸铵溶液(甲酸调pH2.4)(A)... 目的:建立同时测定冠心丹参胶囊(丹参,三七,降香)中丹参素、原儿茶醛、丹酚酸B和丹参酮ⅡA含量的HPLC方法。方法:采用HPLC法,色谱柱:VP—ODS(4.6mm×250mm,5μm);流动相:0.03mol/L醋酸铵溶液(甲酸调pH2.4)(A)-乙腈(B),梯度洗脱;流速:1.0mL/min;检测波长:280nm。结果:丹参素钠、原儿茶醛、丹酚酸B和丹参酮ⅡA分别在3.310—18.66μg(r=0.9999)、0.03950—0.2370μ(r=0.9996)、0.7500~4.500μg(r=0.9995)和0.05920~0.3550μg(r=0.9999)范围内呈良好线性关系;平均回收率分别为99.73%(RSD=1.05%)、100.20%(RSD=1.25%)、99.97%(RSD=1.12%)、99.89%(RSD:1.34%)。结论:本方法简便,结果准确,可用于冠心丹参胶囊的质量控制和治疗药物监测。 展开更多
关键词 HPLC 冠心丹参胶囊 丹参素 原儿茶醛 丹酚酸b 丹参酮A
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知母皂苷B-Ⅱ抑制人胃癌细胞增殖和迁移的作用机制 被引量:5
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作者 庞涛 陆文铨 +1 位作者 陈小玲 陈万生 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期380-387,共8页
目的研究知母皂苷B-Ⅱ抑制人胃癌细胞株BGC-823和MGC-803增殖及迁移的作用机制。方法使用终浓度为50 ng/m L的知母皂苷B-Ⅱ处理BGC-823和MGC-803细胞48 h,用q PCR和蛋白质印迹实验分别检测细胞内清道夫受体A5(SCARA5)的mRNA含量及蛋白表... 目的研究知母皂苷B-Ⅱ抑制人胃癌细胞株BGC-823和MGC-803增殖及迁移的作用机制。方法使用终浓度为50 ng/m L的知母皂苷B-Ⅱ处理BGC-823和MGC-803细胞48 h,用q PCR和蛋白质印迹实验分别检测细胞内清道夫受体A5(SCARA5)的mRNA含量及蛋白表达;采用生物信息学方法预测hsa-miRNA-766-3p与SCARA5 3′UTR区的结合位点,并通过荧光素酶报告基因实验进行验证;转染hsa-miRNA-766-3p mimic或siRNA-SCARA5至BGC-823、MGC-803细胞,24 h后使用50 ng/m L知母皂苷B-Ⅱ处理细胞48 h,用q PCR和蛋白质印迹实验检测细胞内hsamiRNA-766-3p相对含量和SCARA5蛋白表达,MTT法检测细胞的增殖活性及迁移能力。结果 50 ng/m L知母皂苷B-Ⅱ处理BGC-823、MGC-803细胞48 h能增强肿瘤细胞中SCARA5蛋白表达(P<0.01),而SCARA5 mRNA相对含量变化差异无统计学意义(P>0.05)。与报告基因表达载体单独转染比较,hsa-miRNA-766-3p mimic和hsamiRNA-766-3p inhibitor与野生型荧光素酶报告基因共转染可分别抑制和增强细胞内荧光素酶活性(P<0.05,P<0.01);hsa-miRNA-766-3p mimic和hsa-miRNA-766-3p inhibitor转染对突变型荧光素酶报告基因载体荧光素酶活性无明显影响(P>0.05)。50 ng/m L知母皂苷B-Ⅱ处理BGC-823、MGC-803细胞48 h,细胞内hsa-miRNA-766-3p含量均降低,SCARA5蛋白表达则升高(P<0.01);hsa-miRNA-766-3p mimic转染+皂苷处理与单纯皂苷处理比较,细胞内hsa-miRNA-766-3p含量上升(P<0.01)、SCARA5蛋白表达降低(P<0.01);siRNA-SCARA5转染+皂苷处理与单纯皂苷处理比较,细胞内hsa-miRNA-766-3p含量无明显变化(P>0.05),但SCARA5蛋白表达降低(P<0.01)。细胞增殖及迁移实验检测结果表明,与细胞对照或溶媒对照比较,经知母皂苷B-Ⅱ处理的胃癌细胞BGC-823和MGC-803增殖活性及迁移能力均降低(P<0.01),siRNA-SCARA5转染+皂苷处理的细胞增殖活性和迁移能力与单纯皂苷处理的细胞相比增强(P<0.01)。结论知母皂苷B-Ⅱ能够抑制hsa-miRNA-766-3p的表达,进而上调其靶基因SCARA5的表达,最终抑制胃癌细胞BGC-823和MGC-803的增殖和迁移。 展开更多
关键词 胃癌 知母皂苷b- 清道夫受体A5 hsa-miRNA-766-3p 增殖 迁移
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知母皂甙B-Ⅱ可减少氧-糖剥夺脊髓前角运动神经元瘤细胞的程序性坏死 被引量:4
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作者 高俊彦 曹燕飞 +4 位作者 张芸 刘学敏 侯燕红 李建斌 武志兵 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第25期4062-4067,共6页
背景:研究发现知母皂甙B-Ⅱ具有神经保护作用,可减少细胞的程序性坏死,但其作用机制尚不明了,有待深入研究。目的:分析知母皂甙B-Ⅱ干预可减少氧-糖剥夺脊髓前角运动神经元瘤细胞VSC4.1程序性坏死的机制。方法:①取生长状态良好的VSC4.... 背景:研究发现知母皂甙B-Ⅱ具有神经保护作用,可减少细胞的程序性坏死,但其作用机制尚不明了,有待深入研究。目的:分析知母皂甙B-Ⅱ干预可减少氧-糖剥夺脊髓前角运动神经元瘤细胞VSC4.1程序性坏死的机制。方法:①取生长状态良好的VSC4.1细胞,分6组培养:A组为正常对照;B组加入过氧化氢溶液干预24 h;C-F组分别加入1,10,100,1 000μmol/L的知母皂甙B-Ⅱ溶液干预24 h,之后各组均加入过氧化氢溶液干预24 h;MTT法检测细胞存活率,选择细胞存活率最高组的药物浓度进行以下实验;②将VSC4.1细胞分3组培养:正常对照组常规培养;模型组厌氧低糖培养8h后复氧高糖培养6或12h;抑制剂组加入程序性坏死抑制剂Necrostatin-1干预24 h,厌氧低糖培养8 h后复氧高糖培养6或12 h。流式细胞仪检测复氧6 h后的坏死细胞数量;Western-blot检测复氧高糖培养6或12 h的受体相互作用蛋白3表达;③将VSC4.1细胞分3组培养:正常对照组常规培养;模型组厌氧低糖培养8 h后复氧高糖培养6 h;药物组加入100μmol/L的知母皂甙B-Ⅱ溶液干预24 h,厌氧低糖培养8 h后复氧高糖培养6 h。流式细胞仪检测复氧6 h后的坏死细胞数量;Western-blot检测复氧6 h的受体相互作用蛋白3表达。结果与结论:①MTT检测显示与B组比较,E组细胞存活率最高,所以后续实验选择100μmol/L的知母皂甙B-Ⅱ;②模型组坏死细胞数多于正常对照组(P <0.05),抑制剂组坏死细胞数少于模型组(P <0.05);抑制剂组复氧高糖培养6,12 h的受体相互作用蛋白3表达高于正常对照组(P <0.05),且复氧6 h的该蛋白表达最高;③模型组坏死细胞数与受体相互作用蛋白3表达均高于正常对照组(P <0.05),药物组坏死细胞数与受体相互作用蛋白3表达均低于模型组(P <0.05);④结果表明,知母皂甙B-Ⅱ可有效减少氧-糖剥夺脊髓前角运动神经元瘤细胞的程序性坏死,可能与降低受体相互作用蛋白3有关系。 展开更多
关键词 VSC4.1细胞 Necrostatin-1 程序性坏死 氧-糖剥夺 细胞损伤 受体相互作用蛋白3 坏死体 知母皂甙b-
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鸡MHC B-LBⅡ新等位基因检测及多态性研究 被引量:8
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作者 徐日福 李奎 +5 位作者 陈国宏 强巴央宗 莫德林 李长春 樊斌 刘榜 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期1247-1255,共9页
在鸡的基因组中扩增了MHC B-LBⅡ基因第2外显子长度为374bp的片段,通过克隆、测序,发现了20个B-LBⅡ新等位基因.对第2外显子6个限制性酶切位点(AluⅠ、CaiⅠ、CfrⅠ、Hinl Ⅰ、HinfⅠ和RsaⅠ)的PCR-RFLP多态性进行分析,并运用在这6个位... 在鸡的基因组中扩增了MHC B-LBⅡ基因第2外显子长度为374bp的片段,通过克隆、测序,发现了20个B-LBⅡ新等位基因.对第2外显子6个限制性酶切位点(AluⅠ、CaiⅠ、CfrⅠ、Hinl Ⅰ、HinfⅠ和RsaⅠ)的PCR-RFLP多态性进行分析,并运用在这6个位点所观测的纯合基因型组合对B-LBⅡ等位基因进行初步检测,结果显示,该方法的等位基因检出率可达65%,等位基因主型检出率为68.75%.对B-LBⅡ基因7个单倍型和20个等位基因第2外显子多态性分析表明,核苷酸的多态变异位点为63个,其中简约性信息位点48个,单变异位点15个;仅在中国地方鸡种所检测到的简约性信息位点13个,单变异位点11个.序列同源性达90.6%~99.5%;核苷酸异义替换率为14.64%±2.67%,高于同义替换率2.92%±0.94%.为鸡B-LBⅡ基因多态性进化机制研究提供了参考资料. 展开更多
关键词 等位基因 中国地方鸡种b-Lb基因 多态性
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转人类胰岛素样生长因子-Ⅰ基因成肌细胞对骨骼肌急性钝挫伤后Ⅱb型肌球蛋白重链及波形蛋白mRNA表达的影响 被引量:6
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作者 卫宏图 陈世益 +3 位作者 李云霞 陈疾忤 张鹏 李宏云 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期268-272,共5页
目的:观察转人类胰岛素样生长因子-Ⅰ(HumanInsulin -likeGrowthFactor-Ⅰ,hIGF -Ⅰ)基因成肌细胞回输小鼠骨骼肌钝挫伤局部后,对小鼠骨骼肌愈合过程中Ⅱb型肌球蛋白重链(MyosinHeavyChain -Ⅱb ,MHC -Ⅱb)及波形蛋白(Vimentin)mRNA表... 目的:观察转人类胰岛素样生长因子-Ⅰ(HumanInsulin -likeGrowthFactor-Ⅰ,hIGF -Ⅰ)基因成肌细胞回输小鼠骨骼肌钝挫伤局部后,对小鼠骨骼肌愈合过程中Ⅱb型肌球蛋白重链(MyosinHeavyChain -Ⅱb ,MHC -Ⅱb)及波形蛋白(Vimentin)mRNA表达的影响。方法:将90只7~12周雄性C3H小鼠右下肢腓肠肌中段内侧实施急性钝挫伤后,随机分为自然愈合组、单纯成肌细胞注射组和转基因成肌细胞注射组。挫伤后第3天,对单纯成肌细胞注射组、转基因成肌细胞注射组损伤局部分别注射等量单纯成肌细胞和转基因成肌细胞,并于损伤后第1、5、10、2 0、30天取材。检测不同时间点MHC -Ⅱb和VimentinmRNA表达水平,观察比较各组骨骼肌修复情况。结果:(1)在急性骨骼肌钝挫伤修复期,3组小鼠骨骼肌MHC -ⅡbmRNA均明显升高,第2 0天达到峰值。转基因成肌细胞注射组MHC -ⅡbmRNA表达水平最高,其次为单纯成肌细胞注射组。(2 )急性骨骼肌钝挫伤修复过程中,转基因成肌细胞注射组VimentinmRNA的表达水平始终在3组中表达最低。结论:急性骨骼肌钝挫伤修复过程中,注射转基因成肌细胞能提高损伤后MHC -IIbmR NA表达水平,促进肌纤维的增生,加速骨骼肌愈合进程。同时,损伤局部注射转hIGF -Ⅰ基因的成肌细胞后,使得损伤局部VimentinmRNA表达低于另两组。 展开更多
关键词 转人类胰岛素样生长因子-1 b型肌球蛋白重链 波形蛋白 成肌细胞 修复 胰岛素样生长因子-Ⅰ 转基因成肌细胞 骨骼肌钝挫伤 肌球蛋白重链 MRNA表达
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知母甾体总皂苷中知母皂苷BⅡ的鉴别及含量测定 被引量:3
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作者 陈行愉 韩丽萍 梁均乐 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期401-402,共2页
目的建立知母甾体总皂苷提取物中知母皂苷BⅡ的TLC鉴别及HPLC含量测定的方法。方法 TLC法:展开剂:正丁醇-冰醋酸-水(4∶1∶5)的上层溶液,显色剂:香草醛硫酸试液,105℃加热至斑点清晰。HPLC-ELSD法:采用Agilent HC-C18(5μm,4.6 mm×... 目的建立知母甾体总皂苷提取物中知母皂苷BⅡ的TLC鉴别及HPLC含量测定的方法。方法 TLC法:展开剂:正丁醇-冰醋酸-水(4∶1∶5)的上层溶液,显色剂:香草醛硫酸试液,105℃加热至斑点清晰。HPLC-ELSD法:采用Agilent HC-C18(5μm,4.6 mm×250 mm),流动相:甲醇-水梯度洗脱,流速:1 ml.min-1,漂移管温度40℃,载气压力3.5 bar。结果知母皂苷BII成分的TLC分离效果较好;HPLC法测得知母皂苷BII进样量在0.506~10.12μg范围内呈良好的线性关系;平均回收率(n=6)为97.44%,RSD为1.67%。结论该方法简便准确,可用于知母甾体总皂苷提取物的质量控制。 展开更多
关键词 知母甾体总皂苷 知母皂苷b 高效液相色谱-蒸发光散射检测 薄层色谱
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NIRS与HPLC结合快速测定知母中知母皂苷BⅡ的含量 被引量:3
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作者 谢惠英 时博 +3 位作者 王丰青 雷敬卫 谢彩侠 王丽娜 《世界科学技术-中医药现代化》 2015年第11期2306-2311,共6页
目的:建立知母中知母皂苷BⅡ含量的快速检测方法,实现知母皂苷BⅡ含量的快速、简便、高效测定。方法:采用中国药典中高效液相色谱法测得知母皂苷BⅡ的含量作为实测值,并采集知母样品的近红外光谱图,运用TQ Analyst 8.0数据分析软件中的... 目的:建立知母中知母皂苷BⅡ含量的快速检测方法,实现知母皂苷BⅡ含量的快速、简便、高效测定。方法:采用中国药典中高效液相色谱法测得知母皂苷BⅡ的含量作为实测值,并采集知母样品的近红外光谱图,运用TQ Analyst 8.0数据分析软件中的偏最小二乘法(PLS),通过预处理、波段范围及主成分数的选择,将实测值与近红外光谱信息进行关联,建立知母皂苷BⅡ的最佳定量分析模型。结果:所建立的模型内部交叉验证决定系数(R^2)、校正均方差(RMSEC)、验证均方差(RMSEP)、交叉验证均方差(RMSECV)以及性能指数(PI)分别为0.975 15、0.094 2、0.080 0、0.369 20、91.0。结论:运用近红外光谱法结合HPLC建立的定量分析模型能够实现知母中知母皂苷BⅡ含量的快速准确测定。 展开更多
关键词 NIRS 高效液相色谱法 含量测定 知母 知母皂苷b
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扬子鳄MHCⅡ类B基因第二外元的克隆及序列分析 被引量:7
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作者 史燕 吴孝兵 +1 位作者 晏鹏 陈壁辉 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期415-421,共7页
3头扬子鳄血样取自宣城安徽省扬子鳄繁殖研究中心。利用一对简并引物对MHCⅡ类B基因第二外元的部分片段进行扩增 ;通过克隆、单链构象多态性分析、测序 ,并将测得序列与下载的 8个物种MHC序列比对 ,确定序列差异和变异位点 ;利用MEGA软... 3头扬子鳄血样取自宣城安徽省扬子鳄繁殖研究中心。利用一对简并引物对MHCⅡ类B基因第二外元的部分片段进行扩增 ;通过克隆、单链构象多态性分析、测序 ,并将测得序列与下载的 8个物种MHC序列比对 ,确定序列差异和变异位点 ;利用MEGA软件构建NJ树 ,PAUP4 0构建MP树。结果得到 10种不同的序列 ,片段长 16 6bp。核苷酸序列中有 38个变异位点 ,氨基酸序列中有 2 3个变异位点 ;推定的抗原结合位点非同义替换 (dN)明显高于同义替换 (dS)。 10种序列的NJ树和MP树极为相似 ,均为A、B两个分支 ,两个分支明显的特异性位点核苷酸序列中有 9个 ,氨基酸序列中有 7个。表明扬子鳄MHCⅡ类B基因第二外元有较高的多态性 ,有利于扬子鳄饲养种群的遗传保护。 展开更多
关键词 MHC 异位 b基因 MP 克隆 单链构象多态性分析 抗原 扬子鳄 氨基酸序列 简并引物
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Fenton体系中罗丹明B的化学发光和微量铁(Ⅱ)的测定 被引量:2
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作者 池泉 覃艳蕾 +3 位作者 杨桢 雷剑英 池继涛 黄涛 《中南民族大学学报(自然科学版)》 CAS 2013年第3期13-17,共5页
通过在pH 3.0的高氯酸溶液中Fenton体系直接氧化罗丹明B产生化学发光,探讨了影响化学发光反应的因素,建立了微量Fe(Ⅱ)离子的化学发光分析方法.结果表明:该法测定Fe(Ⅱ)离子的浓度线性范围为3.0×10-7~1.2×10-3mol·L-1,... 通过在pH 3.0的高氯酸溶液中Fenton体系直接氧化罗丹明B产生化学发光,探讨了影响化学发光反应的因素,建立了微量Fe(Ⅱ)离子的化学发光分析方法.结果表明:该法测定Fe(Ⅱ)离子的浓度线性范围为3.0×10-7~1.2×10-3mol·L-1,检出限为1.7×10-7mol·L-1.9次平行测定含Fe(Ⅱ)离子0.35μg·mL-1的标准溶液的相对标准偏差为4.7%.根据其化学发光光谱、紫外-可见吸收光谱和荧光光谱,推测其发光机理为Fenton体系中产生的羟自由基进攻罗丹明B的1位C原子形成的活性中间体退激发光. 展开更多
关键词 化学发光 FENTON体系 罗丹明b Fe(
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培哚普利和卡维地洛对自发性高血压大鼠Ang Ⅱ和B型利钠肽的影响 被引量:17
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作者 吴小盈 宋建平 +1 位作者 李红霞 蒋文平 《高血压杂志》 CSCD 2004年第1期80-82,共3页
目的 转换酶抑制剂 (ACEI)培哚普利和β -阻滞剂 (BB)卡维地洛逆转左室肥大 (LVH) ,本文旨在探讨药物干预下自发性高血压大鼠 (SHR)血管紧张素 (AngⅡ )和B型利钠肽 (BNP)水平改变的意义。 方法  15周龄雄性SHR尾动脉测压 ,随机分三... 目的 转换酶抑制剂 (ACEI)培哚普利和β -阻滞剂 (BB)卡维地洛逆转左室肥大 (LVH) ,本文旨在探讨药物干预下自发性高血压大鼠 (SHR)血管紧张素 (AngⅡ )和B型利钠肽 (BNP)水平改变的意义。 方法  15周龄雄性SHR尾动脉测压 ,随机分三组 :未治疗组 (n =7)、培哚普利组 (n =6 )、卡维地洛组 (n =7)。药物溶于蒸馏水以灌胃法给予 ,培哚普利 8mg/kg·-1、卡维地洛 4mg/kg·-1,疗程 6周 ,未治疗组以等量蒸馏水灌胃。 15周龄雄性WKY大鼠为正常血压对照组 (n =8)。实验结束断头处死 ,取血、分离左心室。采用高效液相色谱 -放射免疫 (HPLC RIA)分析技术和RIA法测定各组大鼠血浆和心肌组织AngⅡ和BNP(B型利钠肽 )浓度。 结果  (1)经 6周治疗后SHR血压和左心室/体重比值较未治疗组有显著下降 (P <0 0 5 ) ;(2 )培哚普利能显著降低心肌组织AngⅡ水平 (P <0 0 5 ) ,但能明显升高血浆AngⅡ水平 (P <0 0 5 ) ;(3)卡维地洛显著降低血浆和心肌组织AngⅡ水平 (P <0 0 5 ) ;(4)无论培哚普利、卡维地洛都能使血浆和心肌组织的BNP水平降低 (P <0 0 5 )。结论 培哚普利、卡维地洛逆转LVH与其降低心肌组织AngⅡ相一致 ,BNP可看作是AngⅡ的天然拮抗物 ,随LVH逆转而下降 ,BNP下降反映治疗有效。 展开更多
关键词 左心室肥厚 血管紧张素 b型利钠肽 培哚普利 卡维地洛 自发性高血压
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中药复方多糖对不同MHC B-Lβ Ⅱ基因型鸡淋巴细胞中NF-κB、TNF-α、IL-6 mRNA表达的影响 被引量:4
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作者 马昭 朱晓庆 +4 位作者 杨莉 刘晓婷 张保军 谷新利 商云霞 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第12期3446-3452,共7页
为探讨中药复方多糖(compound Chinese herbal medicine polysaccharides,cCHMPS)对不同MHC B-LβⅡ基因型鸡免疫调节作用的影响,采用PCR-SSCP方法将200羽白羽肉鸡按不同MHC B-LβⅡ基因型分组,采集不同MHC B-LβⅡ基因型鸡的外周血淋... 为探讨中药复方多糖(compound Chinese herbal medicine polysaccharides,cCHMPS)对不同MHC B-LβⅡ基因型鸡免疫调节作用的影响,采用PCR-SSCP方法将200羽白羽肉鸡按不同MHC B-LβⅡ基因型分组,采集不同MHC B-LβⅡ基因型鸡的外周血淋巴细胞,分别加入终剂量为100、75、50、0μg/mL的cCHMPS,共培养24h,采用实时荧光定量PCR方法检测cCHMPS对鸡淋巴细胞NF-κB、TNF-α、IL-6mRNA表达量的影响。结果显示:与对照组相比,cCHMPS能显著增强不同MHC B-LβⅡ基因型鸡淋巴细胞NF-κB、TNF-α、IL-6mRNA的表达量(P<0.05)。并且同一基因型鸡中,当cCHMPS剂量为50μg/mL时,AB、AA基因型鸡淋巴细胞NF-κB、TNF-α、IL-6mRNA表达量显著高于其他剂量组(P<0.05);AC基因型鸡淋巴细胞NF-κB、IL-6mRNA的表达量显著高于其他剂量组(P<0.05);AC基因型鸡淋巴细胞TNF-αmRNA的表达量在cCHMPS为100μg/mL时显著高于其他剂量组(P<0.05)。综上所述,cCHMPS能不同程度的促进各MHC B-LβⅡ基因型鸡NF-κB、TNF-α、IL-6mRNA的表达,且不同MHC B-LβⅡ基因型鸡淋巴细胞最适中药复方多糖免疫调节剂量不同。 展开更多
关键词 中药复方多糖 MHCb基因型 鸡淋巴细胞 细胞因子
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丹酚酸B、丹参酮ⅡA对动脉粥样硬化家兔血清一氧化氮及甘油三酯的影响 被引量:41
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作者 吕炳强 范英昌 孙连胜 《天津中医学院学报》 2006年第1期32-34,共3页
[目的]观察丹参水溶性成分丹酚酸B和脂溶性成分丹参酮ⅡA对家兔动脉粥样硬化模型血清一氧化氮(NO)及甘油三酯(TG)浓度的影响,以寻找其作用耙点。[方法]复制家兔动脉粥样硬化模型,分别用放射性免疫方法和比色法检测血清NO和TG浓度,观察... [目的]观察丹参水溶性成分丹酚酸B和脂溶性成分丹参酮ⅡA对家兔动脉粥样硬化模型血清一氧化氮(NO)及甘油三酯(TG)浓度的影响,以寻找其作用耙点。[方法]复制家兔动脉粥样硬化模型,分别用放射性免疫方法和比色法检测血清NO和TG浓度,观察丹酚酸B和丹参酮ⅡA抗动脉粥样硬化的作用异同。[结果]丹酚酸B和丹参酮ⅡA都能增加动脉粥样硬化家兔血清NO浓度,降低血清TG浓度。但升高NO的作用丹参酮ⅡA优于丹酚酸B;降低TG作用丹酚酸B优于丹参酮ⅡA。[结论]丹参水溶性成分与脂溶性成分都能调节血清NO及TG浓度而达到抗动脉粥样硬化的作用,但具体作用机制有所不同。 展开更多
关键词 丹参 丹酚酸b 丹参酮A 动脉粥样硬化 一氧化氮 甘油三酯
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