艰难梭菌细胞毒素B功能区的克隆及序列分析

目的克隆艰难梭菌(Clostridium difficile,C.d)细胞毒素B羧基末端功能区(CDB3)基因,并对其进行测序及生物信息学分析。方法利用PCR技术扩增CDB3基因,并将其定向插入pET-22b(+)载体中,以DNA自动分析仪进行序列测定,并以生物信息学软件分析其生物学特性。结果成功克隆了艰难梭菌CDB3基因,经测序表明与GenBank中分布的Clostridium difficile VPI10463的ToxinB3基因序列完全一致。DNAstar软件预测其蛋白质的相对分子量(Mr)约为71.3 kD,并显示出良好的抗原性。结论研究获得了序列正确的CDB3基因,为其重组表达及其相关研究奠定了良好基础。

数控加工B功能和C功能刀具半径补偿方法研究

本文介绍现代数控加工中刀具半径补偿的B功能、C功能刀补方法,以直线与直线转接为例,对两程序段之间过渡中补偿问题做了详细的分析。并根据不同条件对其解决方法作了详尽的归纳总结。

早期序贯治疗联合ASCT对中高危多发性骨髓瘤的临床疗效及对PD-1/PD-L1、T细胞和B细胞功能的影响

目的:分析早期序贯治疗联合自体造血干细胞移植(ASCT)对中高危多发性骨髓瘤的临床疗效及对PD-1/PD-L1、T细胞和B细胞功能的影响。方法:选择2019年1月—2022年5月南阳市中心医院收治的90例中高危多发性骨髓瘤患者作为研究对象,依照随机信封法分为观察组和对照组。对照组患者采用常规化疗方案进行治疗,观察组在对照组的基础上采用早期序贯治疗联合ASCT方案干预和治疗。干预治疗半年后对患者临床疗效进行评估,治疗前及治疗后半年时检测外周血中CD3^(+)T细胞、CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞、PD-1及PD-L1蛋白表达水平,检测受试者血清中T细胞相关细胞因子IFN-γ、TNF-α及B细胞相关抗体IgA、IgM和IgG水平情况。结果:观察组治疗临床疗效显著优于对照组,差异有统计学意义(χ^(2)=13.586,P<0.05);治疗后,两组患者血中CD3^(+)T细胞、CD4^(+)T细胞水平均显著升高,CD8^(+)T细胞水平显著降低,差异有统计学意义(t=7.299、2.521、12.629,P<0.05);治疗后,两组患者血清中PD-1及PD-L1蛋白均显著降低,差异有统计学意义(t=16.315、11.161,P<0.05);治疗后,两组患者血清中IFN-γ、TNF-α蛋白均显著升高,差异有统计学意义(t=30.046、32.084,P<0.05);治疗后,两组患者血清中IgA蛋白显著降低,IgM和IgG蛋白均显著升高,差异有统计学意义(t=47.013、50.959、27.694,P<0.05)。结论:联合早期序贯治疗联合ASCT对中高危多发性骨髓瘤患者干预可有效提高临床疗效,控PD-1及PD-L1水平,改善T细胞和B细胞功能。

抗沉默功能蛋白1B在幽门螺杆菌感染的人胃癌细胞中的表达及其对AGS细胞株增殖和转移能力的影响

目的检测组蛋白伴侣抗沉默功能蛋白1B(anti-silencing functional protein 1B,ASF1B)在胃癌组织中的表达情况及其与胃癌患者预后之间的关系,探讨ASF1B对人胃癌细胞株AGS增殖、转移能力的影响以及可能的分子机制,分析ASF1B与幽门螺杆菌感染之间的关系。方法分析癌症基因组图谱数据库中泛瘤种的肿瘤组织和癌旁正常组织中ASF1B的表达情况,并通过实时荧光定量聚合酶链反应(real time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测ASF1B在所收集的59例配对的胃癌组织及癌旁正常组织中的mRNA表达水平。分析Kaplan-Meier plotter数据库中胃癌患者ASF1B的表达水平与其预后之间的关系,后通过免疫组织化学检测胃癌组织芯片中ASF1B的表达水平并分析其与胃癌患者临床预后及临床病理参数之间的关系。通过小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)技术敲低胃癌细胞系AGS中的ASF1B表达,分组为siNC组(阴性对照转染细胞)、siASF1B#1组、siASF1B#2组及siASF1B#3组,后采用CCK-8、平板单克隆实验、Transwell小室迁移实验检测各组细胞的增殖、转移能力。分析基因表达综合数据库的数据集GSE27411中幽门螺杆菌阳性和阴性的胃癌组织中ASF1B的表达水平,并通过RT-qPCR及蛋白质印迹法检测ASF1B在幽门螺杆菌感染前后的胃癌细胞系AGS中的表达水平。结果相关数据库及我们的胃癌队列中的胃癌组织ASF1B的mRNA和蛋白表达水平均高于癌旁正常组织,且胃癌组织中高表达的ASF1B与胃癌患者不良预后相关。此外,与siNC组相比,敲低ASF1B组(siASF1B#1组、siASF1B#2组及siASF1B#3组)的细胞增殖和转移能力均减弱。最后,幽门螺杆菌阳性的胃癌组织及幽门螺杆菌感染后的人胃癌细胞AGS中的ASF1B表达水平均上调。结论ASF1B在幽门螺杆菌感染诱发的胃癌发生发展过程中可能起到重要的促进作用,且高表达的ASF1B与胃癌患者更早发生转移及较差的预后相关,可作为预测胃癌患者复发及预后的分子标志物。此外,敲低ASF1B可显著抑制AGS细胞的增殖和转移能力。

癌组织miR-218联合ASF1B预测前列腺癌根治术后复发的价值

目的探讨癌组织微小RNA-218(miR-218)联合组蛋白伴侣抗沉默功能蛋白1B(ASF1B)预测前列腺癌根治术后患者复发的价值。方法前瞻性选取2021年1月至2023年5月新乡医学院第一附属医院收治的252例前列腺癌患者作为研究对象,所有患者均实施前列腺癌根治术,术后接受为期1年的随访,根据术后1年复发情况分为复发组50例和未复发组202例。比较癌组织、癌旁组织及两组患者癌组织miR-218、ASF1B m RNA表达水平。采用多因素Logistic回归分析癌组织miR-218、ASF1B m RNA对术后复发风险的影响;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析癌组织miR-218、ASF1B m RNA表达水平联合预测术后复发风险的价值。结果癌组织miR-218表达水平为0.47±0.13,明显低于癌旁组织的0.86±0.21,而癌组织ASF1B mRNA表达水平为1.54±0.49,明显高于癌旁组织的1.05±0.18,差异均有统计学意义(P<0.05);复发组患者癌组织的miR-218表达水平为0.25±0.08,明显低于未复发组的0.52±0.17,而ASF1B m RNA表达水平为2.03±0.66,明显高于未复发组的1.42±0.46,差异均有统计学意义(P<0.05);经多因素Logistic回归分析结果显示,校正了术后病理分期、术前PSA、术后切缘阳性后,癌组织miR-218、ASF1B mRNA仍是术后复发的独立相关影响因素(P<0.05);经ROC分析结果显示,癌组织miR-218、ASF1B m RNA及联合检测预测术后复发的ROC曲线下面积(AUC)为0.803、0.824、0.936,联合检测的AUC大于miR-218、ASF1B mRNA,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论癌组织miR-218、ASF1B m RNA表达与前列腺癌根治术后复发风险独立相关,联合检测抑癌因子miR-218和促癌因子ASF1B m RNA能提高对患者术后复发的预测价值,为前列腺癌根治术后分层管理、治疗决策等提供重要的参考依据。

老年女性2型糖尿病病人血清肌酐/胱抑素C比值与胰岛B细胞功能的相关性研究

目的探讨老年女性2型糖尿病病人血清肌酐/胱抑素C比值(Cr/Cys-C)与胰岛B细胞功能的相关性。方法选择年龄≥65岁的老年女性T2DM病人180例,收集临床资料,行75 g口服葡萄糖耐量试验(OGTT),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛素分泌指数(HOMA-β)、葡萄糖处置指数(DI)。根据Cr/Cys-C三分位数将病人分为3组,比较3组间胰岛B细胞功能指标。采用相关分析评估Cr/Cys-C与各胰岛功能指标的相关性。结果Cr/Cys-C第三分位组、第二分位组的InsAUC30、InsAUC120、HOMA-β、DI30均高于第一分位组,BMI、腰围、HbA1c水平均低于第一分位组,差异具有统计学意义(P<0.05)。Cr/Cys-C与空腹血清胰岛素(r=0.187,P=0.005)、InsAUC30(r=0.268,P<0.001)、InsAUC120(r=0.216,P=0.002)、HOMA-β(r=0.279,P<0.001)、DI30(r=0.245,P<0.001)、DI120(r=0.183,P=0.005)均呈正相关。校正了年龄、BMI、病程、HbA1c后,上述相关性仍存在(P<0.05)。结论老年女性T2DM病人血清Cr/Cys-C水平与胰岛B细胞功能之间存在正相关关系。

老年2型糖尿病病人估计肾小球滤过率与胰岛素抵抗及胰岛B细胞功能的相关性研究

目的探讨老年T2DM病人估计肾小球滤过率(eGFR)与胰岛素抵抗及胰岛B细胞功能的相关性。方法将944例老年T2DM病人按eGFR水平分为eGFR正常组315例[eGFR≥90 mL/(min·1.73 m^(2))]、eGFR轻度下降组357例[eGFR为60~<90 mL/(min·1.73 m^(2))]及eGFR中重度下降组272例[eGFR<60 mL/(min·1.73 m^(2))]。所有病人均行口服葡萄糖耐量试验(OGTT)及胰岛素释放试验,根据服糖后0、30、60、120 min葡萄糖及胰岛素水平,计算胰岛素抵抗指标[胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、GluAUC30×InsAUC30]、胰岛分泌功能指标[胰岛B细胞功能指数(HOMA-β)、ΔI30/ΔG30、InsAUC30、IG30、InsAUC120、IG120]。分析eGFR与胰岛素抵抗和胰岛分泌功能指标的相关性。结果随着eGFR水平逐渐降低,HOMA-IR、GluAUC30×InsAUC30、HOMA-β、ΔI30/ΔG30、InsAUC30、IG30、InsAUC120和IG120的水平逐渐升高(均P<0.05)。校正混杂因素后,线性回归分析显示,eGFR与HOMA-IR、GluAUC30×InsAUC30、HOMA-β、ΔI30/ΔG30、InsAUC30、IG30、InsAUC120及IG120仍均呈负相关(均P<0.01)。结论老年T2DM病人胰岛素抵抗及胰岛细胞代偿性分泌对eGFR水平有显著影响。

瑞格列奈在胰岛B细胞功能检测中的应用价值

目的 探讨瑞格列奈在胰岛 B细胞功能检测中的应用价值。 方法 对 31例 2型糖尿病患者先行常规口服葡萄糖耐量 -胰岛素释放试验 (OG- IRT,常规法 ) ,次日或第 3日在做 OG- IRT前加服 2 m g瑞格列奈片改良法。测定血清胰岛素并计算曲线下面积。 结果 瑞格列奈试验血清胰岛素水平及曲线下面积为 92 .2 1± 70 .6 9mu/ (h· L ) ,显著高于常规法 3.77± 34.91mu/ (h· L ) ,(P<0 .0 0 1) ;改良法胰岛素曲线下面积最少净增 2 9.6 3% ,最大增加 45 3.6 6 % ,中位数为 95 .2 4%。胰岛素曲线下面积增加值与 BMI呈正相关 ,与空腹血糖呈负相关。 结论 瑞格列奈试验比常规 OG- IRT能更好地反映胰岛 B细胞的储备功能。

二甲双胍格列吡嗪复方制剂对2型糖尿病患者B细胞功能的影响

目的二甲双胍、格列吡嗪是2种作用机制不同的降糖药。通过临床观察评价二甲双胍格列吡嗪复方制剂治疗2型糖尿病的有效性和安全性,探讨二甲双胍格列吡嗪复方制剂与单药相比,其降糖、改善胰岛B细胞功能、减轻胰岛素抵抗作用。方法为多中心、随机、双盲、三模拟、阳性药平行对照临床试验,试验组(A组)21例,服用二甲双胍格列吡嗪复方制剂、格列吡嗪模拟片和二甲双胍模拟片;对照1组(B组)22例,服用二甲双胍片、格列吡嗪模拟片和二甲双胍格列吡嗪模拟片;对照2组(C组)22例,服用格列吡嗪片、二甲双胍模拟片和二甲双胍格列吡嗪模拟片,上述药物均为口服,1片/次,3次/d,疗程为12周。结果治疗后,A、C组空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、餐后2 h血糖(2 hourspostprandial bolld glucose,PBG2h)及3组糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin Alc,HbA1c)均较治疗前有明显下降(P<0.05);A、C组餐后2 h胰岛素(2 hours postprandial insulin level,PINS2 h)明显增加(P<0.05);与B组、C组相比,A组B细胞功能指数(homeostasis model assessment for beta cell function,Homa-B)明显增加(P<0.01);FBG、PBG2h、HbA1c、空腹胰岛素(fasting insulin,FINS)、PINS2h、胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment index of insulin resistance,Homa-IR)无明显变化(P>0.05)。安全性观察指标未见异常。结论二甲双胍格列吡嗪复方制剂与对照组相比,有效性和安全性相似;且与单药具有相似的降糖作用时,可明显改善胰岛B细胞功能。

2型糖尿病患者体表指标与代谢综合征及胰岛B细胞功能的关系

目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者体表指标(AI)与代谢综合征(MS)的相关指标及胰岛B细胞功能的相互关系。方法 450名2型糖尿病住院患者,测量各项体表指标和代谢综合征相关指标,计算出胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),分析T2DM患者体表指标与MS的各项指标以及胰岛B细胞功能的关系。结果 1)2型糖尿病患者随着MS危险因素的增多,体表指标均显著升高。2)2型糖尿病伴MS者与不伴MS者相比,体表指标明显升高。3)偏相关分析显示,2型糖尿病患者的体表指标与HOMA-IR显著相关,与空腹胰岛素(FIns)、C肽(CPT)均无明显相关。结论 1)2型糖尿病患者中肥胖仍是MS发生、发展的关键因素。2)2型糖尿病人群的AI与胰岛素抵抗密切相关。

西格列汀改善2型糖尿病患者胰岛B细胞功能的Meta分析

目的:系统评价西格列汀改善2型糖尿病患者胰岛B细胞功能的效果,为临床提供循证参考。方法:计算机检索Pub Med、Cochrane图书馆、EMBase、中国期刊全文数据库、万方数据库、中文科技期刊数据库和中国生物医学文献数据库,收集西格列汀单药或联合常规方案(试验组)对比安慰剂单用或联合常规方案(对照组)治疗2型糖尿病的随机对照试验(RCT),由两位研究者根据纳入与排除标准独立筛选文献、提取资料,按照Cochrane系统评价员手册5.1.0评价纳入研究的方法学质量后,采用Rev Man 5.3统计软件进行Meta分析。结果:纳入了5项RCT,合计1 253例患者。Meta分析结果显示,试验组患者胰岛B细胞功能指数(Homa-B)变化值[西格列汀单药治疗组:MD=9.21,95%CI(4.16,14.25),P<0.001;联合用药组:MD=7.24,95%CI(0.80,13.68),P=0.03]和胰岛素抵抗指数(Homa-IR)变化值[西格列汀单药治疗组:MD=-0.40,95%CI(-0.44,-0.36),P<0.001;联合用药组:MD=-0.35,95%CI(-0.63,-0.07),P=0.02]均显著优于对照组,差异均有统计学意义。结论:西格列汀在改善胰岛B细胞功能及胰岛素抵抗方面有一定效果。

短期胰岛素强化治疗对初诊2型糖尿病患者的胰岛B细胞功能及胰岛素抵抗的影响

目的:探讨短期胰岛素强化治疗对初诊2型糖尿病(T2DM)患者的胰岛B细胞功能及胰岛素抵抗的影响。方法:采用自身前后对照,对58例初诊T2DM患者接受4周的胰岛素强化治疗,观察治疗前后空腹血糖(FPG)及餐后2h血糖(2hPG)、胰岛素分泌指数(Homa-B)、胰岛素敏感指数(ISI)、胰岛素抵抗指数(Homa-IR)、标准馒头餐试验中30及120min内C肽曲线下面积(AUCcp30、AUCcp120)。结果:治疗4周后,FPG、2hPG明显下降,ISI及Homa-B明显上升,Homa-IR明显下降(P<0.05)。反映葡萄糖刺激的胰岛素分泌第一时相变化及总量的AUCcp30、AUCcp120均明显升高(P<0.05)。结论:短期胰岛素强化治疗有快速稳定血糖和显著改善胰岛B细胞分泌功能的作用,同时对胰岛素抵抗也有一定的改善。

丹蛭降糖胶囊对2型糖尿病患者B细胞功能的影响

目的:观察纯中药制剂丹蛭降糖胶囊对2型糖尿病患者B细胞功能的影响,探讨中医药在治疗2型糖尿病及延缓其进程中的作用。方法:62例2型糖尿病患者随机分成两组,治疗组32例服用丹蛭降糖胶囊,对照组30例服用马来酸罗格列酮,疗程为2个月,以胰岛素敏感指数及Ho-ma模型公式评估各组B细胞功能。结果:两组中医证候积分及B细胞功能均有改善,且治疗组明显优于对照组(P<0.05,P<0.01)。结论:丹蛭降糖胶囊具有降低血糖,改善高胰岛素血症,提高2型糖尿病患者胰岛素敏感性,改善胰岛素抵抗的作用。

不同治疗方式对初诊2型糖尿病血糖及B细胞功能的影响

目的:探讨不同治疗方式对初诊2型糖尿病血糖控制情况及对胰岛素B细胞功能的影响。方法:在饮食控制、运动的基础上随机分组,分为胰岛素治疗组、口服降糖药组及胰岛素对照组。其中,胰岛素治疗组随机又分为胰岛素强化治疗组及预混胰岛素二次治疗组,治疗前后查OGTT、内生胰岛功能及HbA1c,各组患者血糖控制达标(FBG≤6.0mmol/L,PBG≤6.0mmol/L)后巩固治疗2周,然后停药;停药后第7天复诊,若FBG≥7.0mmol/L,PBG≥10.0mmol/L为治疗继发性失效,未失效的按方案1￣3个月复查1次,随诊1年。结果:强化治疗组与预混胰岛素二次治疗组血糖分别于治疗后(5.9±1.3)、(9.6±2.1)d达到良好控制,达标所需时间均显著低于对照组(21.6±7.9)d(P<0.05),其中强化组治疗3个月后复查HbA1c降低程度显著优于口服降糖药组及对照组(P<0.05),而胰岛素治疗组及口服降糖药组内生胰岛测定由治疗前的(37.3±27.8)、(38.2±28.2)U/ml,分别提高到(54.4±31.6)、(40.1±28.3)U/ml。结论:初诊2型糖尿病患者短期应用胰岛素或口服药治疗,强化血糖控制均可改变胰岛B细胞功能,并可诱导部分患者长达一年的血糖控制,胰岛素治疗在降低血糖幅度方面明显优于其他治疗方式,故可考虑根据患者具体情况采用多种强化治疗方式。

血清瘦素水平与胰岛B细胞功能 胰岛素抵抗的关系──附114例检测分析

目的:探讨外周血瘦素(leptin)水平与胰岛B细胞功能、胰岛素抵抗性(insulinresistance,IR)的关系。方法:检测45名正常糖耐量者、33例糖耐量减低者及36例新诊断的2型糖尿病患者的空腹血清瘦素水平,用30分钟特异胰岛素增值与血糖增值的比值(△SI30/△G30)评估胰岛B细胞初期时相胰岛素分泌功能,并应用稳态模型评估法(homeostasismodelassessment,HOMA)评估胰岛B细胞功能(HOMA-B)和胰岛素抵抗性(HOMA-IR),分析不同糖耐量者瘦素水平与胰岛B细胞功能、胰岛素抵抗性的关系。结果:不同糖耐量者的瘦素水平比较无统计学差异;瘦素与性别和体重指数在3组中均呈正相关(r=0.348～0.661,均为P<0.01);瘦素与△SI30/△G30、HOMA-B和HOMA-IR只在2型糖尿病组呈正相关(r=0.321～0.348,均为P<0.05)。结论:不同糖耐量者的血瘦素水平比较无统计学差异;不同糖耐量者的血瘦素水平均与性别和体重指数呈正相关;仅2型糖尿病患者的血瘦素水平与胰岛B细胞功能和胰岛素抵抗性呈正相关。

高压静电场对雏鸡血液和免疫器官T、B细胞功能的影响

应用细胞培养技术和MTT测定法,对高压静电场照射1日龄雏鸡的外周血液和免疫器官T细胞和B细胞增殖功能的动态变化进行研究。结果发现,高压正静电场对雏鸡血液和免疫器官T细胞、B细胞功能有促进作用,而高压负静电场照射雏鸡的血液和免疫器官T、B细胞功能较相应未照射的对照雏鸡明显减弱。

胰岛B细胞功能的评价方法——内分泌代谢疾病(11)

1 引言 胰岛B细胞功能的狭义定义是指B细胞在葡萄糖刺激下分泌胰岛素以维持血糖水平稳定的功能.广义定义则是指B细胞在葡萄糖及葡萄糖以外的因素,如:在精氨酸、胰高血糖素、化学药物等刺激下分泌胰岛素来维持血糖水平稳定的能力.