B和T淋巴细胞弱化因子的研究进展

B和T淋巴细胞弱化因子(BTLA)是新近发现的CD28家族成员,是与细胞毒T淋巴细胞相关抗原-4及程序性死亡分子-1类似的抑制性受体,在抑制淋巴细胞活化及维持免疫耐受等方面具有重要作用,是目前免疫学研究的热点之一。现就BTLA及其配体的结构、功能及其与免疫相关性疾病的关系进行综述。

B和T淋巴细胞弱化因子在感染性疾病中的免疫作用

B和T淋巴细胞弱化因子(B and T lymphocyte attenuator,BTLA)是继程序性死亡因子-1(programmed death-1,PD-1)、细胞毒性T细胞活化抗原4(cytotoxic T lymphocyte Antigen-4,CTLA-4)后发现的第三个属于CD28免疫球蛋白超家族的负性共刺激分子,抑制或下调T细胞的活化和细胞因子的产生。BTLA参与不同感染性疾病的发生和发展。本文根据国内外的研究进展,对BTLA在感染过程中的免疫作用做简要综述。

B、T淋巴细胞衰减因子与系统性红斑狼疮患者疾病活动度及自身抗体的相关性分析

目的分析B、T淋巴细胞衰减因子(BTLA)与系统性红斑狼疮(SLE)患者疾病活动度及自身抗体的相关性。方法纳入2019年5月至2021年5月西安市第五医院收治的90例SLE患者作为研究对象,根据SLE疾病活动度指数(SLEDAI)将其分为低活动度组(56例)和高活动度组(34例),再纳入同期入院体检健康者90例作为对照组。比较三组B、T细胞表面BTLA的表达情况。比较不同自身抗体SLE患者B、T淋巴细胞表面BTLA的表达情况。使用Spearman检验分析SLE患者B、T细胞表面BTLA与疾病活动度、抗核小体抗体(AnuA)、抗双链DNA(anti-dsDNA)抗体的相关性。结果高活动度组的CD19^(+)/BTLA、CD24^(+)/BTLA、CD4^(+)/BTLA、CD8^(+)/BTLA均明显低于低活动度组和对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);低活动度组的CD19^(+)/BTLA、CD24^(+)/BTLA、CD4^(+)/BTLA、CD8^(+)/BTLA均明显低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。90例SLE患者中,AnuA阳性43例,阴性47例,阳性率为47.78%;anti-dsDNA抗体阳性49例,阴性41例,阳性率为54.44%。AnuA、anti-dsDNA抗体阳性SLE患者的CD19^(+)/BTLA、CD24^(+)/BTLA、CD4^(+)/BTLA、CD8^(+)/BTLA均明显低于阴性患者,差异具有统计学意义(P<0.05)。SLE患者CD19^(+)/BTLA、CD24^(+)/BTLA、CD4^(+)/BTLA、CD8^(+)/BTLA与疾病活动度、AnuA、anti-dsDNA抗体均呈负相关(P<0.05)。结论SLE患者B、T细胞表面BTLA表达下调,且与疾病活动度、AnuA、anti-dsDNA抗体呈负相关。

雷公藤内酯醇对T淋巴细胞核因子-κB及其抑制分子的影响

研究雷公藤内酯醇对T淋巴细胞中核因子 κB活力及其抑制分子IκB的影响 ,进一步阐明雷公藤内酯醇免疫抑制作用的分子机制 .利用凝胶移率实验 (EMSA)检测不同浓度的雷公藤内酯醇对于普通培养状态下和同时使用PMA/PHA激活的Jurkat细胞中NF κB活力的影响 ,并以逆转录 半定量PCR方法检测了雷公藤内酯醇处理后两组Jurkat细胞中IκBα 的mRNA水平的改变 .研究发现 :①在普通培养状态的Jurkat细胞核内存在一定活力的NF κB ,使用PMA/PHA处理可使NF κB活力显著升高 ,雷公藤内酯醇可以降低两种培养状况下的Jurkat细胞中NF κB活力 ,并以激活状态下更为显著 ;②雷公藤内酯醇可以上调Jurkat细胞中IκBαmRNA的表达水平 .雷公藤内酯醇上调IκBα 基因转录有可能是其抑制细胞内NF

B/T淋巴细胞弱化因子在急性哮喘小鼠模型CD4^+ T淋巴细胞表达的研究

目的研究负向共刺激受体B/T淋巴细胞弱化因子(B and T lymphocyte attenuator,BTLA)在急性哮喘小鼠模型脾脏CD4+T淋巴细胞中的表达特点及地塞米松对BTLA表达的影响。方法 18只BALB/C6小鼠按随机数字表法分为空白对照组、哮喘模型组、地塞米松治疗组。OVA联合AL(OH)3第1和第8天分别致敏和第15～17天激发,建立急性哮喘模型。HE染色观察3组气道炎症浸润情况;Elisa检测血清IL-4和IFN-γ;流式细胞术检测小鼠脾脏CD4+T淋巴细胞BTLA表达变化。结果 HE染色哮喘组肺部小气道和血管周围炎症细胞浸润(EOS)明显,上皮细胞增生;流式细胞仪检测哮喘组脾脏CD4+T淋巴细胞表面BTLA表达较对照组明显增高(P<0.01),BTLA在地塞米松治疗组比哮喘模型组和空白对照组均增高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 BTLA在急性哮喘模型表达上调参与炎症调控;地塞米松能进一步上调BTLA表达,抑制气道炎症。

新风胶囊对膝骨关节炎患者B、T淋巴细胞衰减因子及氧化应激的影响

目的探讨膝骨关节炎患者(knee osteoarthritis,KOA)B、T淋巴细胞衰减因子(B and T lymphocyte attenuator,BTLA)及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的变化及新风胶囊(XinFeng capsule,XFC)对其影响。方法将60例KOA患者按随机分为2组:30例治疗组,即XFC组(每次3粒,每日3次)和30例对照组,即氨基葡萄糖组(glucosamine,GS组,每次2粒,每日3次);2组治疗均30天为1个疗程,连续1个疗程。流式细胞术检测BTLA表达频率及活化水平,比色法测定血清SOD,采用魏氏法测定血沉(erythrocyte sedimentation rate,ESR),全自动生化分析仪测定hs-C反应蛋白(hypersensitive cross-reacting protein,hs-CRP)。酶联免疫吸附法检测2组血清中白介素(interleukin,IL)-10,IL-1β,丙二醛(methane dicarboxylic aldehyde,MDA)。结果①与NC组比较,KOA患者外周血BTLA在CD3+T细胞(CD3+BTLA+T cell)、CD8+T细胞(CD8+BTLA+T cell),CD4+T细胞上(CD4+BTLA+Tcell)的表达频率明显下降,MAD明显升高。与正常范围比较,60%的KOA患者血清SOD水平降低,且随Lequesne MG的加重及病程的延长而降低,而与年龄、性别无关。②Pearson相关分析结果显示:外周血BTLA表达水平与Lequesne MG呈明显负相关,与RP、RE、BP积分呈正相关;CD3+BTLA+T cell、CD4+BTLA+T cell与IL-1β呈明显负相关,与血清IL-10呈正相关;CD4+BTLA+T cell与血清SOD呈正相关(P<0.05或P<0.01)。③与对照组相比,SF-36总积分、BTLA表达频率、IL-10明显升高,Lequesne MG、症状分级量化评分、IL-1β、MDA明显降低。结论 XFC能提高KOA患者外周血BTLA表达,抑制T细胞活化,降低异常免疫反应和氧化应激损伤,减轻关节疼痛症状,改善患者全身机能,从而提高生活质量水平。

糖皮质激素对类风湿关节炎患者血清中B、T淋巴细胞弱化因子表达的影响

目的探讨B、T淋巴细胞弱化因子(BTLA)在类风湿关节炎患者血清中的水平及其在发病机制中的作用和糖皮质激素对其表达的调节。方法酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测患者血清中BTLA的水平。采用免疫印迹法检测抗核抗体(ANA)谱,ELISA法检测抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体,免疫比浊法检测类风湿因子(RF)。结果对照组治疗有效例数为9例,无效为11例;观察组有效例数为15例,无效为12例。观察组临床治疗总有效率(75%)明显高于对照组(53%),差异有统计学意义(P<0.05)。对照组治疗前血清中BTLA为(89±13)μg/L,治疗后为稍微升高,为(110±11)μg/L,差异有统计学意义(P<0.05);而观察组治疗前血清中BTLA为(78±11)μg/L,治疗后为(140±13)μg/L,明显升高。结论 BTLA在类风湿关节炎患者的血清中水平降低,糖皮质激素可上调其表达,BTLA的升高影响类风湿关节炎病情的转归,可作为治疗的新靶点。

类风湿关节炎患者心肺功能变化及与B、T淋巴细胞衰减因子及氧化应激的相关性分析

目的观察类风湿关节炎患者的心、肺功能变化及其与外周血BTLA和氧化应激指标变化的相关性,探讨心肺功能下降的机制。方法选取RA患者100例并抽取40例健康人作为正常对照。采用肺功能仪检测患者肺功能参数FVC、FEV1、MVV、PEF、MEF25、MEF50、MEF75。采用超声心动图检测2组心功能参数EF%、SV%、FS%、E、A、E/A。流式细胞术检测BTLA表达频率及活化水平,魏氏法测定ESR,全自动生化仪测定hs-CRP。酶联免疫吸附法检测外周血细胞因子(IL-17、TNF-α、IL-4、IL-35)及氧化应激指标(MDA、ROS、SOD、TAOC)。结果 1)与NC组相比,RA患者肺功能参数均有不同程度降低;心功能参数EF、E峰、E/A明显降低,A峰明显升高,SV无明显差异;外周血IL-17、TNF-α和炎性指标ESR、CRP值显著升高,BTLA、IL-4、IL-35值显著降低,ROS、MDA明显升高,SOD、TAOC明显降低。2)相关性分析显示心功能参数与CD24+细胞、CD19+CD24+细胞、TAOC负相关,与BTLA、CD19+Cell、ROS、MDA、SOD呈正相关;肺功能各参数均与ESR、Hs-CRP、DAS28呈负相关,与BTLA、CD19+CD24+、SOD、TAOC、IL-4、IL-35呈正相关,与CD24+BTLA+、ROS、MDA、IL-17、TNF-α呈负相关。结论 RA患者存在心肺功能降低,并与机体BTLA表达减弱、抗氧化能力下降密切相关。

蛋白激酶C对哮喘患者T淋巴细胞核因子-кB活化的调控

为探讨蛋白激酶 C对哮喘患者 T淋巴细胞核因子 - кB(NF- кB)活化的调控作用 ,分别从 16例急性发作期哮喘患者及 16名正常对照者的外周血中分离出 T淋巴细胞并分成 3组培养 ,即空白对照组 ,加入 PKC激动剂 12 -肉豆蔻酰 - 13-乙酸佛波酯 (PMA)的 PMA组 ,同时加入 PMA和 PKC抑制剂 Ro31- 82 2 0的 PMA+Ro31- 82 2 0组。用免疫组织化学染色方法和 Western印迹检测 NF- кB和抑制蛋白 - кB(I- кB)的表达。结果显示 :哮喘 PMA组 NF- кB活化的细胞百分比显著高于空白对照组和正常 PMA组 (P<0 .0 1) ,且 I- кB水平显著低于上述 2组 (P<0 .0 1) ;而哮喘 PMA+Ro31- 82 2 0组 NF- кB活化的细胞百分比显著低于哮喘 PMA组 (P<0 .0 1) ,且 I- кB水平显著高于该组 (P<0 .0 1)。提示哮喘 T淋巴细胞 NF- кB的活化可能受 PKC调控 ,T淋巴细胞 PKC— NF-

B/T淋巴细胞弱化因子在免疫调控和免疫相关疾病中的作用

B/T淋巴细胞弱化因子(B and T lymphocyte attenuator,BTLA)是免疫调控中重要的检查点分子之一。BTLA属于CD28超家族,其蛋白质结构类似于程序性细胞死亡受体-1(programmed cell death-1,PD-1)和细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(cytotoxic T lymphocyte associated antigen-4,CTLA-4)。BTLA主要在B细胞和T细胞中表达,也被发现存在于其它一些先天免疫细胞,例如树突状细胞和单核细胞中。到目前为止,疱疹病毒入侵介质(herpesvirus entry mediator,HVEM)是在人类细胞中发现的BTLA的唯一配体。HVEM属于肿瘤坏死因子受体(tumor necrosis factor receptor,TNFR)超家族,其与BTLA的相互作用直接连接了CD28和TNFR两大家族。BTLA与HVEM的结合通常介导免疫抑制效应,并在维持免疫耐受方面发挥重要作用。然而近年来研究发现,BTLA/HVEM通路除了提供负调控信号以外,还能促进T细胞的存活,这种双重信号系统的存在使得BTLA介导的免疫调控更加精细和复杂。越来越多的研究表明,BTLA参与并影响了T细胞、B细胞及树突状细胞等介导的免疫调控,并因此在多种免疫相关疾病,例如炎症、肿瘤、感染性疾病及自身免疫性疾病中发挥重要作用。本文以国内外最新研究进展为基础,就BTLA在免疫调控及免疫相关疾病中的作用进行综述。

小儿病毒性肺炎应用不同剂量干扰素α-2b雾化吸入治疗后对患儿血浆细胞因子及T淋巴细胞亚群的影响

目的探讨不同剂量干扰素α-2b雾化吸入对病毒性肺炎患儿血浆细胞因子及T淋巴细胞亚群的影响。方法选择2017年8月—2019年8月于我院就诊的病毒性肺炎患儿150例,随机分为干扰素α2b高剂量组、低剂量组、对照组,高剂量组给予干扰素α2b每次20万U/kg雾化吸入,低剂量组给予每次10万U/kg雾化吸入,对照组给予0.9%生理盐水2 mL雾化吸入。对比治疗前后肺功能、白细胞、血清淀粉样蛋白A(SAA)和生长停滞特异性基因产物6(GAS6)水平、T淋巴细胞亚群变化和不良反应。结果高剂量组(82.00%)和低剂量组(74.00%)总有效率高于对照组(54.00%)(P<0.05),高、低剂量组总有效率无差异(P>0.05)。治疗后3组VPTEF/VE、VT/kg、WBC、CD_(3)^(+)、CD_(4)^(+)、CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)较治疗前升高(P<0.01),呼吸频率、AA、GAS6、CD_(8)^(+)降低(P<0.01),两两比较有显著差异(P<0.05)。三组不良反应发生率无差异(P>0.05)。结论雾化吸入干扰素α-2b能有效改善病毒性肺炎患儿SAA和GAS6水平,缓解炎症损伤,恢复气道功能,增强免疫功能,改善预后,与10万U/kg剂量相比,每次20万U/kg雾化吸入的效果更佳。

B和T淋巴细胞衰减因子激活在休克／脓毒症诱导的急性肺损伤中的作用

目的探讨B和T淋巴细胞衰减因子（BandTlymphocyteattenuator，BTLA）激活在休克／脓毒症诱导的急性肺损伤（ALI）中的作用。方法24只雄性C57BL／6小鼠随机平均分为三组：对照组、Au模型组和6A6（BTLA激动性抗体）干预组。采用Westernblot观察对照组和AU模型组肺组织BTLA蛋白的表达变化，并测定和比较三组小鼠支气管肺泡灌洗液蛋白浓度，ELISA方法测定肺组织促炎症细胞因子、趋化因子水平及肺组织髓过氧化物酶活性，TUNEL染色评估肺组织细胞凋亡情况；肺组织切片HE染色了解肺组织病理学改变。另外45只小鼠随机平均分为如上三组观察10d生存率。结果BTLA在Au模型组肺组织中表达较对照组明显升高。与Au模型组比较，6A6干预组小鼠支气管肺泡灌洗液蛋白浓度升高，肺部TNF—α和MIP-2、MCP-1水平升高，肺组织MPO活性增加（P均〈0．05）。TUNEL染色显示，6A6干预组小鼠肺细胞凋亡较Au模型组增加。HE染色显示，6A6干预组较Au模型组小鼠肺组织病理学形态损伤加重。6A6干预组较Au模型组小鼠死亡率显著升高。结论BTLA在休克／脓毒症诱导的ALI肺组织中表达升高。BTLA激活使脓毒症诱导的Au小鼠肺通透性增高，肺部炎症因子和趋化因子水平升高，肺部中性粒细胞募集增加，肺细胞凋亡增加，肺组织病理学形态损伤加重，导致ALI小鼠死亡率增加。

可溶性B、T淋巴细胞衰减因子及其配体在单纯疱疹性角膜基质炎小鼠体内的异常表达

目的研究B、T淋巴细胞衰减因子(B and T lymphocyte attenuator,BTLA)及其配体疱疹病毒侵入介体(herpes virus entry mediator,HVEM)在单纯疱疹性角膜基质炎(herpetic stromal keratitis,HSK)小鼠角膜组织中及外周血CD4+T细胞上的表达水平,探讨共抑制信号BTLA-HVEM是否参与了CD4+T细胞介导的HSK免疫病理反应。方法将106PFU的单纯疱疹病毒I型(herpes simplex virus type 1,HSV-1)KOS毒株接种于BALB/c鼠的角膜上建立HSK动物模型,分别于角膜接种病毒前(0d),接种病毒后的第3、7、10、14、21天,用毛细管取小鼠的左眼眼眶静脉窦血1mL,分离淋巴细胞,行荧光抗体染色,用流式细胞仪检测CD3+CD4+BTLA+T细胞和CD3+CD4+HVEM+T细胞阳性率;在裂隙灯显微镜下观察小鼠角膜变化;免疫组织化学方法检测BTLA蛋白及HVEM蛋白在角膜组织中的表达。结果 BALB/c鼠的角膜接种HSV-1后的1～5d,角膜擦拭液中均检测出HSV-1复制,表明小鼠感染了单纯疱疹病毒。裂隙灯显微镜观察显示:角膜接种HSV-1后第3天,所有小鼠均患了急性上皮性角膜炎,并于感染后1周内痊愈,自病毒接种后第8天起,小鼠出现角膜基质炎的改变,表现为角膜基质呈灰白色混浊,角膜基质混浊于病毒接种后的第10天达到高峰,持续至第14天后逐渐减轻。流式细胞仪检测显示,小鼠外周血淋巴细胞中CD3+CD4+BTLA+T细胞和CD3+CD4+HVEM+T细胞的阳性率,在角膜接种病毒前(0d)分别为(3.15±0.60)%和(9.84±1.06)%,在角膜接种病毒后第10天(HSK疾病程度最严重时)分别增加到(20.47±3.15)%和(45.18±3.90)%(与0d相比差异均有显著统计学意义,均为P<0.01)。免疫组织化学方法检查HSK小鼠角膜组织中BTLA和HVEM的蛋白表达结果一致:HSK临床表现最严重时,即病毒接种后第10天时,BTLA蛋白和HVEM蛋白在角膜组织中表达最强,主要表达于角膜基质层内浸润的炎性细胞上,角膜上皮层和内皮层也有表达。结论在HSK小鼠模型中,BTLA及其配体HVEM蛋白在角膜组织中及外周血CD4+T细胞上表达明显增强,共抑制信号BTLA-HVEM参与了CD4+T细胞介导的HSK的免疫病理过程。

食管鳞癌组织中B、T淋巴细胞弱化因子的表达及临床意义

目的检测食管鳞癌组织中B、T淋巴细胞弱化因子(B and T lymphocyte attenuators,BTLA)的mRNA表达水平,研究食管鳞癌中BTLA的表达水平与患者临床病理的关系。方法利用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction, RT-PCR)方法,分别检测食管鳞癌和对照组织中BTLA mRNA的表达量。结果食管鳞癌标本中BTLA mRNA的表达高于对照组[(8.8±2.6)×10~4(拷贝/μg RNA)vs.(9.2±3.4)×10~3(拷贝/μg RNA)],差异有统计学意义(P<0.01)。BTLA mRNA在食管鳞癌中的表达与肿瘤TNM分期和淋巴结转移明显相关,差异有统计学意义(P<0.01),与患者的性别、年龄、肿瘤大小和肿瘤分化程度无关,差异无统计学意义(P>0.05)。结论本研究发现BTLA在食管鳞癌组织中表达增高,且与患者的TNM分期和淋巴结转移明显相关,BTLA在食管癌发展过程中可能具有重要意义。

核因子-κB对哮喘患者T淋巴细胞血红素氧合酶1表达的调控

探讨核因子κB(NF κB)对哮喘患者T淋巴细胞HO 1表达的转录调节机制。分离 18例急性发作期哮喘患者外周血T淋巴细胞 ,并分成 3组培养 :对照组、加入NF κB激动剂肿瘤坏死因子 α(TNF α)组、同时加入TNF α和NF κB抑制剂二硫代氨基甲醇吡咯烷 (PDTC)组。培养 6h后留取细胞 ,用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测血红素氧合酶 1(HO 1)的mRNA。培养 2 4h后留取细胞用Western印迹法检测HO 1的表达。发现TNF α组T淋巴细胞HO 1蛋白和mRNA表达水平显著高于对照组 (q =4 4 4 8、2 9 94 ,P均 <0 0 1) ,而同时加入TNF α和PDTC培养组T淋巴细胞HO 1蛋白和mRNA表达水平显著低于TNF α组 (q =4 3 2 3、2 7 99,P均 <0 0 1)。可见哮喘患者T淋巴细胞HO 1基因转录可能是通过激活NF κB进行调控。T淋巴细胞NF κB

补肺养阴方联合利奈唑胺对复治肺结核患者呼吸功能、炎性因子及B、T淋巴细胞衰减子的影响

目的分析利奈唑胺联合补肺养阴汤用于治疗复治肺结核对改善患者呼吸功能、血清炎性因子和肺组织中B、T淋巴细胞衰减子表达的作用。方法选择进行肺结核再次治疗的86例患者,采取随机数字排列表法将86例患者分成常规组及观察组,每组43例,常规组予以利奈唑胺治疗,观察组予以利奈唑胺联合补肺养阴汤治疗。比较治疗前后两组氧分压、二氧化碳分压、第1秒用力呼气量(FEV1)、用力肺活量(FVC)以及FEV1/FVC水平;白细胞介素(IL)-6、IL-8以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;CD4^+、CD8^+水平以及CD4^+/CD8+比值。对比每组治疗效果以及不良反应发生情况。结果常规组与观察组治疗前氧分压、二氧化碳分压、FEV1、FVC以及FEV1/FVC指标方面比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后观察组氧分压指标高于常规组;二氧化碳分压指标低于常规组;FEV1、FVC以及FEV1/FVC指标均高于常规组,差异有统计学意义(P<0.05)。常规组与观察组治疗前在IL-6、IL-8以及TNF-α方面水平比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后观察组在IL-6、IL-8以及TNF-α方面水平均低于常规组,差异有统计学意义(P<0.05)。常规组与观察组治疗前在CD4^+、CD8^+水平以及CD4^+/CD8^+比值方面比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后观察组在CD4^+以及CD4^+/CD8^+比值方面均高于常规组,CD8^+水平低于常规组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组与常规组总有效率分别是97.67%、81.40%,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组与常规组不良反应总出现率分别是9.30%、11.63%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论复治肺结核病患采用利奈唑胺以及补肺养阴方治疗可有效提升患者呼吸功能,改善机体炎症水平,提升机体免疫功能,促进患者生活质量提高。

基于T淋巴细胞PPAR-γ-核因子-κB通路探讨平喘固本膏对支气管哮喘缓解期患者的作用机制

目的:基于T淋巴细胞PPAR-γ-核因子-κB通路探讨平喘固本膏对支气管哮喘缓解期患者的作用机制。方法:将100例支气管哮喘缓解期患者按随机数字表法分为对照组[沙美特罗替卡松粉吸入剂(舒利迭)]和治疗组[沙美特罗替卡松粉吸入剂(舒利迭)+平喘固本膏]各50例。观察两组临床疗效,对比治疗前后两组患者中医证候积分、高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein B1,HMGB1)、环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)、白三烯D4(leukotriene D4,LTD4)、免疫功能、白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)及T淋巴细胞NF-κB活化率。结果:治疗后两组患者中医证候积分、HMGB1、cAMP、LTD4、免疫功能、IL-10及T淋巴细胞NF-κB活化率均较治疗前改善,治疗组改善更明显(P<0.05)。结论:在沙美特罗替卡松粉吸入剂的基础上口服平喘固本膏可通过升高支气管哮喘患者T淋巴细胞源性IL-10水平从而抑制支气管哮喘患者T淋巴细胞NF-κB的活性及PPAR-γ-NF-κB通路。

T淋巴细胞中核转录因子κB在膀胱肿瘤细胞抑制T淋巴细胞功能中的作用

目的 :了解T淋巴细胞中核转录因子κB在膀胱肿瘤细胞抑制T淋巴细胞功能中的作用。方法 :1 采用免疫组化法检测与膀胱肿瘤细胞EJ、T2 4、正常移行上皮细胞共培养时T淋巴细胞NF κB。 2 用NF κB激动剂、抑制剂调节T淋巴细胞NF κB活性 ,应用免疫组化法、MTT法 ,了解膀胱肿瘤细胞EJ、T2 4作用下NF κB活性与T淋巴细胞功能的相关性。结果 :1 EJ+T淋巴细胞组、T2 4 +T淋巴细胞组 ,T淋巴细胞胞核染色阳性细胞的百分比与人正常膀胱移行上皮细胞组、空白对照组相比显著降低 (P <0 0 1) ;2 膀胱肿瘤细胞EJ、T2 4作用下T淋巴细胞NF κB胞核染色阳性细胞的百分比与增殖反应 (A值 )呈显著正相关 (Pearson相关系数 =0 74 4 ,P <0 0 0 1,n =6 0 )。结论 :膀胱肿瘤细胞EJ、T2 4可能通过下调NF

小鼠B、T淋巴细胞衰减因子真核表达载体的构建及在HEK293细胞中的表达

目的构建小鼠B、T淋巴细胞衰减因子(BTLA)的真核表达载体,并分析其在人胚肾HEK293细胞中的表达,为单纯疱疹性角膜基质炎的免疫治疗奠定基础。方法应用PCR法获得小鼠BTLA胞外功能区的cDNA片段,将其插入真核表达载体pcDNA3.1中,获得重组表达质粒pBTLA,经酶切鉴定和测序正确后转染HEK293细胞,并利用间接免疫荧光法、实时定量PCR(real-time PCR)、Western blot技术检测BTLA在细胞中的表达。结果重组质粒pBTLA经酶切鉴定和测序,确认插入序列正确,与基因文库中提供的基因序列同源性达98%～100%。Real-time PCR检测可见转染了重组质粒pBTLA的HEK293细胞内BTLA mRNA表达增强(P=0.00),3个组间HEK293细胞内BTLA mRNA表达差异有统计学意义(F=167.83,P=0.00);Western blot结果显示,转染重组质粒pBTLA的HEK293细胞内BTLA蛋白表达明显增强,转染后24～48 h表达最强。间接免疫荧光结果显示BTLA蛋白主要表达在HEK293细胞的细胞膜和细胞质中。结论成功构建了BTLA的真核表达载体,该重组质粒在HEK293细胞中能够表达BTLA,为后续研究BTLA在抗病毒免疫中的作用奠定基础。