乙型肝炎相关性肝癌患者T淋巴细胞、白介素-28B及高尔基体蛋白73的表达及临床意义

目的:分析乙型肝炎相关性肝癌患者T淋巴细胞、白介素-28B (IL-28B)及高尔基体蛋白73 (GP73)的表达及临床意义。方法:选取2018年10月—2021年10月商丘市第一人民医院收治的119例乙型肝炎相关性肝癌患者作为观察组,选取同期体检的112例健康人群作为对照组。比较两组研究对象血清IL-28B、GP73及T淋巴细胞水平,分析IL-28B、GP73、T淋巴细胞与病理特征及预后的关系。结果:观察组血清IL-28B、GP73及CD8^(+)表达水平均高于对照组,CD3^(+)、CD4^(+)及CD4^(+)/CD8^(+)均低于对照组,差异有统计学意义(t=148.380、13.155、9.827、9.939、16.367、11.453,P<0.05)。不同年龄、性别、肿瘤直径的乙型肝炎病毒(HBV)相关性肝癌患者血清中IL-28B、GP73水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。有淋巴结转移、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、低分化、有血管浸润者血清中IL-28B、GP73水平高于无淋巴结转移、TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、中/高分化、无血管浸润者,差异有统计学意义(P<0.05)。HBV相关性肝癌患者血清中CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)在不同年龄、性别、肿瘤直径中比较,差异无统计学意义(P>0.05),CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)水平在不同淋巴结转移情况、TNM分期、分化程度及血管浸润中比较,差异无统计学意义(P>0.05)。死亡者血清GP73、IL-28B水平均高于生存者,CD4^(+)/CD8^(+)指标低于生存者,差异有统计学意义(t=16.629、2.082、9.267,P<0.05)。结论:乙型肝炎相关性肝癌患者血清IL-28B、GP73及CD8^(+)表达水平明显升高,CD3^(+)、CD4^(+)及CD4^(+)/CD8^(+)指标下降,IL-28B、GP73及CD4^(+)/CD8^(+)水平与相关病理特征、预后具有密切的联系。

B、T淋巴细胞弱化因子和T淋巴细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3在肺腺癌中的表达与肿瘤免疫逃逸的临床意义

目的探讨B、T淋巴细胞弱化因子(BTLA)和T淋巴细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3(TIM-3)在肺腺癌中的表达情况,并分析其与肿瘤免疫逃逸的相关性,为今后临床治疗肺腺癌提供新思路。方法回顾性分析2018年1月至2023年12月广西医科大学附属民族医院(广西壮族自治区民族医院)收治的58例肺腺癌患者的临床资料,取术后肿瘤组织样本,将其作为肿瘤组织组;另收集同期58例肺炎患者,取肺炎性组织样本,将其作为肺炎性组织组。比较两组组织中BTLA、TIM-3表达情况;分析BTLA、TIM-3表达与肺腺癌临床病理特征的关系;比较手术前后肺腺癌患者外周血T淋巴细胞亚群水平,并分析BTLA、TIM-3表达与术后T淋巴细胞亚群水平的相关性。结果与肺炎性组织相比,肺腺癌肿瘤组织中BTLA和TIM-3阳性表达率均更高;BTLA阳性表达患者中TNM分期为Ⅱ、Ⅲ期的患者占比均高于BTLA阴性表达患者;TIM-3阳性表达患者中低分化及TNM分期为Ⅱ、Ⅲ期的患者占比均高于TIM-3阴性表达患者;与术前比,术后7d患者外周血CD4^(+)水平、CD4^(+)/CD8^(+)比值均升高,而CD8^(+)水平降低(均P<0.05)。斯皮尔曼相关系数分析结果显示,BTLA和TIM-3阳性表达率均与术后7 d外周血CD3^(+)、CD4^(+)水平呈负相关,而与外周血CD8^(+)水平呈正相关(均P<0.05),BTLA和TIM-3阳性表达率与CD4^(+)/CD8^(+)比值的相关性无统计学意义(均P>0.05)。结论BTLA和TIM-3在肺腺癌中高表达,且BTLA和TIM-3阳性表达率均与术后7 d外周血CD3^(+)、CD4^(+)水平呈负相关,与术后7 d外周血CD8^(+)水平呈正相关,BTLA与TIM-3有望成为监测肺腺癌肿瘤免疫逃逸的临床指标。

新风胶囊对膝骨关节炎患者B、T淋巴细胞衰减因子及氧化应激的影响

目的探讨膝骨关节炎患者(knee osteoarthritis,KOA)B、T淋巴细胞衰减因子(B and T lymphocyte attenuator,BTLA)及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的变化及新风胶囊(XinFeng capsule,XFC)对其影响。方法将60例KOA患者按随机分为2组:30例治疗组,即XFC组(每次3粒,每日3次)和30例对照组,即氨基葡萄糖组(glucosamine,GS组,每次2粒,每日3次);2组治疗均30天为1个疗程,连续1个疗程。流式细胞术检测BTLA表达频率及活化水平,比色法测定血清SOD,采用魏氏法测定血沉(erythrocyte sedimentation rate,ESR),全自动生化分析仪测定hs-C反应蛋白(hypersensitive cross-reacting protein,hs-CRP)。酶联免疫吸附法检测2组血清中白介素(interleukin,IL)-10,IL-1β,丙二醛(methane dicarboxylic aldehyde,MDA)。结果①与NC组比较,KOA患者外周血BTLA在CD3+T细胞(CD3+BTLA+T cell)、CD8+T细胞(CD8+BTLA+T cell),CD4+T细胞上(CD4+BTLA+Tcell)的表达频率明显下降,MAD明显升高。与正常范围比较,60%的KOA患者血清SOD水平降低,且随Lequesne MG的加重及病程的延长而降低,而与年龄、性别无关。②Pearson相关分析结果显示:外周血BTLA表达水平与Lequesne MG呈明显负相关,与RP、RE、BP积分呈正相关;CD3+BTLA+T cell、CD4+BTLA+T cell与IL-1β呈明显负相关,与血清IL-10呈正相关;CD4+BTLA+T cell与血清SOD呈正相关(P<0.05或P<0.01)。③与对照组相比,SF-36总积分、BTLA表达频率、IL-10明显升高,Lequesne MG、症状分级量化评分、IL-1β、MDA明显降低。结论 XFC能提高KOA患者外周血BTLA表达,抑制T细胞活化,降低异常免疫反应和氧化应激损伤,减轻关节疼痛症状,改善患者全身机能,从而提高生活质量水平。

类风湿关节炎患者心肺功能变化及与B、T淋巴细胞衰减因子及氧化应激的相关性分析

目的观察类风湿关节炎患者的心、肺功能变化及其与外周血BTLA和氧化应激指标变化的相关性,探讨心肺功能下降的机制。方法选取RA患者100例并抽取40例健康人作为正常对照。采用肺功能仪检测患者肺功能参数FVC、FEV1、MVV、PEF、MEF25、MEF50、MEF75。采用超声心动图检测2组心功能参数EF%、SV%、FS%、E、A、E/A。流式细胞术检测BTLA表达频率及活化水平,魏氏法测定ESR,全自动生化仪测定hs-CRP。酶联免疫吸附法检测外周血细胞因子(IL-17、TNF-α、IL-4、IL-35)及氧化应激指标(MDA、ROS、SOD、TAOC)。结果 1)与NC组相比,RA患者肺功能参数均有不同程度降低;心功能参数EF、E峰、E/A明显降低,A峰明显升高,SV无明显差异;外周血IL-17、TNF-α和炎性指标ESR、CRP值显著升高,BTLA、IL-4、IL-35值显著降低,ROS、MDA明显升高,SOD、TAOC明显降低。2)相关性分析显示心功能参数与CD24+细胞、CD19+CD24+细胞、TAOC负相关,与BTLA、CD19+Cell、ROS、MDA、SOD呈正相关;肺功能各参数均与ESR、Hs-CRP、DAS28呈负相关,与BTLA、CD19+CD24+、SOD、TAOC、IL-4、IL-35呈正相关,与CD24+BTLA+、ROS、MDA、IL-17、TNF-α呈负相关。结论 RA患者存在心肺功能降低,并与机体BTLA表达减弱、抗氧化能力下降密切相关。

拮抗高迁移率族蛋白B1对烫伤小鼠白细胞介素-35表达及T淋巴细胞免疫功能的影响

目的观察特异性拮抗高迁移率族蛋白B1（HMGB1）对烫伤小鼠白细胞介素-35（IL-35）表达及T淋巴细胞免疫功能的影响。方法选择成年雄性BALB／e小鼠30只，按随机数字表法分为正常组、假伤组、烫伤组、Abox干预组，正常组6只，其余各组每组8只。将小鼠背部皮肤置于97℃恒温热水中6s造成约15％体表面积烫伤模型，Abox干预组小鼠烫伤后2h和12h腹腔注射HMGBl特异性拮抗剂Abo×300ug。烫伤后24h处死小鼠，取心、肝、脾、肺等组织，用酶联免疫吸附试验（ELISA）测定各组织中HMGBl和IL-35含量；用实时荧光定量反转录一聚合酶链反应（qRT-PCR）分析IL-35亚基p35和EB病毒诱导基因3（EBB）的mRNA表达水平；由脾脏提取单个核细胞检测HMGBl和IL-35分泌水平，分离脾脏淋巴细胞检测效应T细胞增殖活性及IL-2、γ-干扰素（IFN-γ）、IL-4分泌水平。结果与烫伤组比较，Abox干预后，各器官HMGBl含量和脾脏单个核细胞HMGB1分泌水平显著降低[心脏（mg／g）：65．78±4．42比110．49±11．19，肝脏（mgCg）：50．90±3．72比117．77±8．10，脾脏（mg／g）：83．34±3．90比149．84±11．93，肺脏（mg／g）：125．15±8．75比236．20±17．51，脾脏单个核细胞（ug／L）：34．57±0．69比73．66±19．03]；各器官组织p35和EBl3的mRNA表达[相对定量（RQ）值]及IL-35蛋白水平均有不同程度下降[p35mRNA（r{Q值）：心脏为0．91±0．62比19．74±18．05，肝脏为0．42±0．19比14．85±8．39，脾脏为1．99±1．12比21．94±6．90，肺脏为0．50±0．21比5．15±3．46；EB13mRNA（RQ值）心脏为0．63±0．61比74．25±15．19，肝脏为0．64±0．09比56．59±19．99，脾脏为1．24±0．48比32．72±3．34，肺脏为0．30±0．06比2．41±1．43；IL-35蛋白（ug，g：心脏为142．40±19．95比241．64±12．40，肝脏为272．68±14．90比409．76±21．60。脾脏为66．94±9．60比92．28±8．82，肺脏为235．88±15．65比193．50±27．06；均P〈0．05），脾脏T淋巴细胞增殖活性增强（A值：1．26±0．26比1．03±0．05）及IL-2分泌水平也显著升高（ng／L：153．48±26．64比101．77±34．55），IFN-γ／IL-4比值显著增加（7．44±1．70比0．33±0．07），差异均有统计学意义（均P〈0．01）。结论特异性拮抗HMGB1可显著下调烧伤小鼠重要组织IL-35表达水平，有效促进脾脏T细胞增殖及Th1功能极化，从而有助于改善严重烧伤后免疫抑制状态。

蛋白激酶C对哮喘患者T淋巴细胞核因子-кB活化的调控

为探讨蛋白激酶 C对哮喘患者 T淋巴细胞核因子 - кB(NF- кB)活化的调控作用 ,分别从 16例急性发作期哮喘患者及 16名正常对照者的外周血中分离出 T淋巴细胞并分成 3组培养 ,即空白对照组 ,加入 PKC激动剂 12 -肉豆蔻酰 - 13-乙酸佛波酯 (PMA)的 PMA组 ,同时加入 PMA和 PKC抑制剂 Ro31- 82 2 0的 PMA+Ro31- 82 2 0组。用免疫组织化学染色方法和 Western印迹检测 NF- кB和抑制蛋白 - кB(I- кB)的表达。结果显示 :哮喘 PMA组 NF- кB活化的细胞百分比显著高于空白对照组和正常 PMA组 (P<0 .0 1) ,且 I- кB水平显著低于上述 2组 (P<0 .0 1) ;而哮喘 PMA+Ro31- 82 2 0组 NF- кB活化的细胞百分比显著低于哮喘 PMA组 (P<0 .0 1) ,且 I- кB水平显著高于该组 (P<0 .0 1)。提示哮喘 T淋巴细胞 NF- кB的活化可能受 PKC调控 ,T淋巴细胞 PKC— NF-

B和T淋巴细胞衰减因子激活在休克／脓毒症诱导的急性肺损伤中的作用

目的探讨B和T淋巴细胞衰减因子（BandTlymphocyteattenuator，BTLA）激活在休克／脓毒症诱导的急性肺损伤（ALI）中的作用。方法24只雄性C57BL／6小鼠随机平均分为三组：对照组、Au模型组和6A6（BTLA激动性抗体）干预组。采用Westernblot观察对照组和AU模型组肺组织BTLA蛋白的表达变化，并测定和比较三组小鼠支气管肺泡灌洗液蛋白浓度，ELISA方法测定肺组织促炎症细胞因子、趋化因子水平及肺组织髓过氧化物酶活性，TUNEL染色评估肺组织细胞凋亡情况；肺组织切片HE染色了解肺组织病理学改变。另外45只小鼠随机平均分为如上三组观察10d生存率。结果BTLA在Au模型组肺组织中表达较对照组明显升高。与Au模型组比较，6A6干预组小鼠支气管肺泡灌洗液蛋白浓度升高，肺部TNF—α和MIP-2、MCP-1水平升高，肺组织MPO活性增加（P均〈0．05）。TUNEL染色显示，6A6干预组小鼠肺细胞凋亡较Au模型组增加。HE染色显示，6A6干预组较Au模型组小鼠肺组织病理学形态损伤加重。6A6干预组较Au模型组小鼠死亡率显著升高。结论BTLA在休克／脓毒症诱导的ALI肺组织中表达升高。BTLA激活使脓毒症诱导的Au小鼠肺通透性增高，肺部炎症因子和趋化因子水平升高，肺部中性粒细胞募集增加，肺细胞凋亡增加，肺组织病理学形态损伤加重，导致ALI小鼠死亡率增加。

可溶性B、T淋巴细胞衰减因子及其配体在单纯疱疹性角膜基质炎小鼠体内的异常表达

目的研究B、T淋巴细胞衰减因子(B and T lymphocyte attenuator,BTLA)及其配体疱疹病毒侵入介体(herpes virus entry mediator,HVEM)在单纯疱疹性角膜基质炎(herpetic stromal keratitis,HSK)小鼠角膜组织中及外周血CD4+T细胞上的表达水平,探讨共抑制信号BTLA-HVEM是否参与了CD4+T细胞介导的HSK免疫病理反应。方法将106PFU的单纯疱疹病毒I型(herpes simplex virus type 1,HSV-1)KOS毒株接种于BALB/c鼠的角膜上建立HSK动物模型,分别于角膜接种病毒前(0d),接种病毒后的第3、7、10、14、21天,用毛细管取小鼠的左眼眼眶静脉窦血1mL,分离淋巴细胞,行荧光抗体染色,用流式细胞仪检测CD3+CD4+BTLA+T细胞和CD3+CD4+HVEM+T细胞阳性率;在裂隙灯显微镜下观察小鼠角膜变化;免疫组织化学方法检测BTLA蛋白及HVEM蛋白在角膜组织中的表达。结果 BALB/c鼠的角膜接种HSV-1后的1～5d,角膜擦拭液中均检测出HSV-1复制,表明小鼠感染了单纯疱疹病毒。裂隙灯显微镜观察显示:角膜接种HSV-1后第3天,所有小鼠均患了急性上皮性角膜炎,并于感染后1周内痊愈,自病毒接种后第8天起,小鼠出现角膜基质炎的改变,表现为角膜基质呈灰白色混浊,角膜基质混浊于病毒接种后的第10天达到高峰,持续至第14天后逐渐减轻。流式细胞仪检测显示,小鼠外周血淋巴细胞中CD3+CD4+BTLA+T细胞和CD3+CD4+HVEM+T细胞的阳性率,在角膜接种病毒前(0d)分别为(3.15±0.60)%和(9.84±1.06)%,在角膜接种病毒后第10天(HSK疾病程度最严重时)分别增加到(20.47±3.15)%和(45.18±3.90)%(与0d相比差异均有显著统计学意义,均为P<0.01)。免疫组织化学方法检查HSK小鼠角膜组织中BTLA和HVEM的蛋白表达结果一致:HSK临床表现最严重时,即病毒接种后第10天时,BTLA蛋白和HVEM蛋白在角膜组织中表达最强,主要表达于角膜基质层内浸润的炎性细胞上,角膜上皮层和内皮层也有表达。结论在HSK小鼠模型中,BTLA及其配体HVEM蛋白在角膜组织中及外周血CD4+T细胞上表达明显增强,共抑制信号BTLA-HVEM参与了CD4+T细胞介导的HSK的免疫病理过程。

补肺养阴方联合利奈唑胺对复治肺结核患者呼吸功能、炎性因子及B、T淋巴细胞衰减子的影响

目的分析利奈唑胺联合补肺养阴汤用于治疗复治肺结核对改善患者呼吸功能、血清炎性因子和肺组织中B、T淋巴细胞衰减子表达的作用。方法选择进行肺结核再次治疗的86例患者,采取随机数字排列表法将86例患者分成常规组及观察组,每组43例,常规组予以利奈唑胺治疗,观察组予以利奈唑胺联合补肺养阴汤治疗。比较治疗前后两组氧分压、二氧化碳分压、第1秒用力呼气量(FEV1)、用力肺活量(FVC)以及FEV1/FVC水平;白细胞介素(IL)-6、IL-8以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;CD4^+、CD8^+水平以及CD4^+/CD8+比值。对比每组治疗效果以及不良反应发生情况。结果常规组与观察组治疗前氧分压、二氧化碳分压、FEV1、FVC以及FEV1/FVC指标方面比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后观察组氧分压指标高于常规组;二氧化碳分压指标低于常规组;FEV1、FVC以及FEV1/FVC指标均高于常规组,差异有统计学意义(P<0.05)。常规组与观察组治疗前在IL-6、IL-8以及TNF-α方面水平比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后观察组在IL-6、IL-8以及TNF-α方面水平均低于常规组,差异有统计学意义(P<0.05)。常规组与观察组治疗前在CD4^+、CD8^+水平以及CD4^+/CD8^+比值方面比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后观察组在CD4^+以及CD4^+/CD8^+比值方面均高于常规组,CD8^+水平低于常规组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组与常规组总有效率分别是97.67%、81.40%,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组与常规组不良反应总出现率分别是9.30%、11.63%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论复治肺结核病患采用利奈唑胺以及补肺养阴方治疗可有效提升患者呼吸功能,改善机体炎症水平,提升机体免疫功能,促进患者生活质量提高。

高迁移率族蛋白B1对人外周血T淋巴细胞增殖反应的影响

目的：观察高迁移率族蛋白B1（HMGB1）对健康人外周血T淋巴细胞增殖反应的影响,并对其机制进行初步探讨。方法：分离8例健康人外周血单个核细胞后接种于96孔培养板（2×10~6/ml）,以植物血凝素诱导细胞体外增殖后,采用不同剂量（0、1、10、100、1000 ng/ml）重组人HMGB1（rhHMGB1）刺激12～48 h。用噻唑蓝（MTT法检测T淋巴细胞增殖,观察HMGB1对T淋巴细胞增殖反应的影响。结果：12、24 h不同rhHMGB1剂量组间淋巴细胞增殖反应无明显差异;rhHMGB1刺激48h后不同剂量对淋巴细胞增殖影响差异有显著性（P =0.0453）,500、1000 ng/ml rhHMGB1组淋巴细胞增殖能力显著低于1、10 ng/ml组和对照组（P〈0.05～0.01）。结论：较高浓度HMGB1长时间刺激后体外T细胞增殖活力明显下降,HMGB1可能是诱导T细胞功能亚群从促炎免疫应答优势向抗炎优势转化的重要因素之一。

高迁移率族蛋白B1对人T淋巴细胞功能性极化的调节作用

目的观察高迁移率族蛋白B1（HMGB1）对人外周血T淋巴细胞功能性极化的影响，并对其作用机制进行初步探讨。方法分离健康人外周血单个核细胞后接种于24孔培养板（2×10^6／ml），以植物血凝素激活T淋巴细胞体外增殖后，给予不同剂量重组人HMGB1（0、1、10、100和1000ng／m1）进行刺激12、24或48h。采用四色流式细胞术分析CD3^＋淋巴细胞CD4表达和胞内细胞因子干扰素（IFN）-γ、白细胞介素4-（IL-4）阳性（Th1、Th2）的比例。结果不同HMGB1刺激时间和作用剂量对CD4^＋T淋巴细胞和Th1亚群比例未造成明显改变，但1000ng／ml HMGB1刺激48h后CD4^＋／CD3^＋比值显著低于刺激12h组（P〈0．05）。较大剂量HMGB1（100、1000ng／m1）能显著增加Th2亚群比例（P〈0．05或P〈0．01），并因此降低Th1／Th2比值，出现Th1优势向Th2优势偏移。结论HMGB1剂量蓄积和持续刺激可诱导T细胞功能亚群从促炎反应向抗炎优势转化。HMGB1的这一免疫调控效应可能是机体免疫应答陷人抑制状态，并最终出现免疫麻痹的重要原因之一。

贲门腺癌组织中RKIP表达变化及其与血清NF-κB p65蛋白、T淋巴细胞亚群的关系

目的观察Raf激酶抑制蛋白(RKIP)在贲门腺癌组织中的表达变化,进一步探讨贲门腺癌的发生、发展机制。方法收集160例贲门腺癌患者(腺癌组)的腺癌组织及其癌旁组织,应用免疫组织化学SP法检测RKIP表达;采用ELISA法和流术细胞术分别检测腺癌组和50例查体健康者(对照组)的血清NF-κB p65蛋白、T淋巴细胞亚群水平。采用Spearman秩和相关分析法分析指标间的关系。结果贲门腺癌及癌旁组织中RKIP表达阳性率分别为38.7%、52.5%(P<0.05),在有、无淋巴结转移者中的表达阳性率分别为24.4%、53.1%(P<0.05,t=4.34);腺癌组血清总NF-κB p65蛋白水平高于对照组(P<0.05),但RKIP表达阳性与阴性者水平无显著差异(P>0.05),有淋巴结转移者高于无淋巴结转移者(P<0.05);腺癌组细胞免疫功能低于对照组,尤以RKIP表达阴性者为著(P<0.05)。结论 RKIP在贲门腺癌组织中表达降低并与肿瘤发生、发展、浸润转移有关,可能机制为抑制NF-κB活性及细胞免疫功能,使肿瘤细胞逃避机体的免疫监视。

小鼠B、T淋巴细胞衰减因子真核表达载体的构建及在HEK293细胞中的表达

目的构建小鼠B、T淋巴细胞衰减因子(BTLA)的真核表达载体,并分析其在人胚肾HEK293细胞中的表达,为单纯疱疹性角膜基质炎的免疫治疗奠定基础。方法应用PCR法获得小鼠BTLA胞外功能区的cDNA片段,将其插入真核表达载体pcDNA3.1中,获得重组表达质粒pBTLA,经酶切鉴定和测序正确后转染HEK293细胞,并利用间接免疫荧光法、实时定量PCR(real-time PCR)、Western blot技术检测BTLA在细胞中的表达。结果重组质粒pBTLA经酶切鉴定和测序,确认插入序列正确,与基因文库中提供的基因序列同源性达98%～100%。Real-time PCR检测可见转染了重组质粒pBTLA的HEK293细胞内BTLA mRNA表达增强(P=0.00),3个组间HEK293细胞内BTLA mRNA表达差异有统计学意义(F=167.83,P=0.00);Western blot结果显示,转染重组质粒pBTLA的HEK293细胞内BTLA蛋白表达明显增强,转染后24～48 h表达最强。间接免疫荧光结果显示BTLA蛋白主要表达在HEK293细胞的细胞膜和细胞质中。结论成功构建了BTLA的真核表达载体,该重组质粒在HEK293细胞中能够表达BTLA,为后续研究BTLA在抗病毒免疫中的作用奠定基础。

HIV-1B亚型Nef core蛋白特异性T淋巴细胞免疫应答研究

研究表明,Nef蛋白通过激活CD4＋T淋巴细胞,提高病毒颗粒的感染性,增加CD4分子和主要组织相容性复合体（MHC）分子的内吞,以及防止受感染细胞凋亡等途径,对HIV复制起到极其重要的促进作用[1]。因此机体对Nef蛋白的免疫反应及其在控制病毒方面的作用成为人们所关注的问题。

难治性肺炎支原体肺炎患儿T淋巴细胞亚群和高迁移率族蛋白B1的表达水平及临床意义

目的:探讨难治性肺炎支原体肺炎(RMPP)患儿T淋巴细胞亚群及高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的表达情况,为临床早期诊断RMPP提供参考。方法:选择2016-2018年在我院儿科接受治疗的肺炎支原体肺炎(MPP)患儿430例,其中RMPP患儿106例(RMPP组),非RMPP患儿324例(NRMPP组);另选同期体检健康儿童106例(NC组)作为对照组。分析三组儿童的临床资料及T淋巴细胞亚群、淋巴细胞绝对计数、HMGB1、C反应蛋白(CRP)及降钙素原(PCT)等生化指标的差异性;利用ROC评估RMPP的预测指标。结果:与NRMPP组和NC组相比,RMPP组患儿的CD3^+、CD3^+CD4^+、CD4^+/CD8^+、CD3-CD19^+、CD19^+CD23^+、CD3^-CD(16^+56^+)绝对值均下降,外周血淋巴细胞绝对计数、HMGB1、CRP及PCT水平均升高(P均<0.05)。ROC分析显示,CD3^+CD4^+、CD19^+CD23^+、HMGB1、CRP及PCT水平可预测RMPP,其AUC(95%CI)分别为0.887(0.857,0.917)、0.827(0.788,0.865)、0.907(0.863,0.951)、0.844(0.789,0.898)、0.788(0.727,0.849),敏感性分别为87%、82%、89%、85%、79%,特异性分别为78%、74%、81%、76%、72%。结论:RMPP患儿T淋巴细胞亚群及血清HMGB1水平升高,提示免疫系统紊乱参与了RMPP的发病过程,故T淋巴细胞亚群及血清HMGB1水平可作为RMPP的预测指标。

原发性肝癌患者外周血淋巴细胞及其亚群B、T淋巴细胞衰减子表达的研究

目的探讨原发性肝癌患者外周血淋巴细胞及其亚群B、T淋巴细胞衰减子（BTLA）的表达情况。方法应用流式细胞术（FCM）检测原发性肝癌组（45例）及健康体检对照组（28例）及乙肝后肝硬化组（20例）外周血CD4^＋、CD8^＋及CD19^＋淋巴细胞BTLA的表达，比较其差异。结果3组对象CD19^＋细胞BTLA均呈高表达；肝癌组患者外周血中CD8^＋,CD4^＋细胞BTLA的表达均明显高于对照组（均P〈0.05），肝硬化组患者外周血中CD4^＋细胞BTLA的表达明显高于对照组（P〈0．05）。结论BTLA这一负性共信号分子的异常表达可能在肿瘤逃逸免疫应答中起一定的调节作用。

克拉维酸钾配伍阿莫西林治疗对老年肺结核外周血自然杀伤细胞表面受体及肺组织中B、T淋巴细胞衰减子表达的影响

目的探究克拉维酸钾联合阿莫西林治疗老年肺结核患者外周血自然杀伤细胞(NK)细胞表面受体和肺组织中B、T淋巴细胞衰减子(BTLA)表达的影响。方法选取老年肺结核患者120例,随机分成研究组和对照组,各60例,对照组采用左氧氟沙星治疗,研究组采用克拉维酸钾配伍阿莫西林并结合左氧氟沙星进行治疗,比较治疗前与治疗后3个月、6个月两组痰菌阴转率、肺部病灶吸收、空洞闭合率情况;并对两组治疗前与治疗后3个月、6个月NK细胞表面受体表达率、肺组织中BTLA表达情况及不良反应发生率进行比较。结果治疗前,两组各指标比较无统计学差异(P>0.05);治疗后3个月,研究组痰菌阴转率、肺部病灶吸收有效率显著高于对照组(P<0.05),治疗后6个月两组痰菌阴转率、肺部病灶吸收有效率比较差异无统计学意义(P>0.05);两组治疗后3个月和6个月空洞闭合率、NK细胞表面受体表达率、肺组织中BTLA表达情况均较治疗前显著降低(P<0.05),且研究组相比于对照组更低(P<0.05);治疗期间两组不良反应发生情况比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论应用克拉维酸钾配伍阿莫西林治疗对老年肺结核疗效确切,不良反应发生较少,对于老年肺结核外周血NK细胞表面受体及肺组织中BTLA表达有显著调节作用。

干扰素α2b给药途径对小儿病毒性肺炎疗效、T淋巴细胞亚群与血清KL-6、ICAM-1、TNF-α的影响

目的探讨干扰素α2b给药途径治疗小儿病毒性肺炎的疗效及其对T淋巴细胞亚群与血清KL-6、ICAM-1、TNF-α的影响。方法选取我院2017年3月至2019年3月收治的92例病毒性肺炎患儿,随机分为雾化组与肌注组,每组46例。比较两组治疗1周后的总有效率,记录两组治疗前及治疗1 d、2 d、3 d、4 d、5 d、6 d、7 d后的临床症状总评分,比较两组治疗前与治疗7 d后的血清CD^+_3、CD^+_4、CD^+_8、CD^+_4/CD^+_8、KL-6、ICAM-1、TNF-α水平与不良反应。结果两组的整体疗效与总有效率比较差异无统计学意义(P>0.05)。两组治疗后的临床症状总评分均呈下降趋势,组内前后差异有统计学意义(P<0.05)。雾化组治疗4 d、5 d、6 d、7 d的临床症状总评分低于肌注组(P<0.05)。治疗7 d后,两组CD^+_3、CD^+_4和CD^+_4/CD^+_8升高,CD^+_8降低(P<0.05);雾化组治疗7 d后CD^+_3、CD^+_4和CD^+_4/CD^+_8高于肌注组,CD^+_8低于肌注组(P<0.05)。治疗7 d后,两组各项血清学指标均明显降低(P<0.05),雾化组治疗后的血清ICAM-1、TNF-α低于肌注组(P<0.05),两组KL-6比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论干扰素α2b雾化吸入给药可取得与肌注给药相当的疗效,同时可加速患儿症状缓解,调节免疫,血清ICAM-1、TNF-α下降幅度大,安全性良好。

HMGB1对淋巴细胞增殖、凋亡及Th1/Th2、Tc1/Tc2漂移的影响

目的：探索HMGB1是否参与淋巴细胞免疫功能的调节。方法：系列浓度HMGB1单独或与ConA联合刺激培养小鼠脾淋巴细胞。MTT法检测细胞增殖,流式细胞术（FCM）检测细胞凋亡、细胞表面CD3、CD8及细胞内IL-4、IFN-γ表达。结果：（1）HMGB1时间-剂量依赖性调节淋巴细胞增殖,而不影响其凋亡。（2）不同HMGB1浓度和刺激时间不影响淋巴细胞Th1、Th2及Th1/Th2变化,但10μg/L和100μg/L HMGB1刺激12-24h,Th1亚群占优势;培养12-24h,淋巴细胞Tc1亚群明显减少,Tc2无变化。Tc1/Tc2变化显示,1μg/L和10μg/L HMGB1刺激,Tc1亚群占优势。（3）培养12-24h,上清中IL-2增加,sIL-2R减少,IL-2/sIL-2R比例升高20-50倍,尤以10μg/L HMGB1刺激明显。结论：低剂量HMGB1可增强淋巴细胞免疫功能。