高效液相色谱法检测粮谷及其制品中六种A,B型单端孢霉烯族真菌毒素

目的 建立粮谷及其制品中六种A,B‘型单端孢霉烯族真菌毒素的高效液相色谱-串联质谱分析方法.方法 样品经乙腈-水溶液(84∶16,V/V)提取,MycoSep(R)226或MycoSep(R)227多功能柱净化,Waters Atlantis dC18 色谱柱分离,串联四极杆质谱多反应离子监测模式检测.结果 6种真菌毒素在各自的线性范围内线性关系良好,相关系数均不低于0.996,定量下限为0.1～20μg/kg,低、中、高3个加标水平下平均回收率为60.1％～123％,相对标准偏差为7.5％～19.8％.结论 该方法具有前处理简单、净化效果好、灵敏度高的优点,适用于复杂基质样品中A,B型单端孢霉烯族真菌毒素残留的确证和定量检测.

粮食与饲料中七种单端孢霉烯族真菌毒素的测定

本文提出了一种同时检测粮食和饲料中七种主要单端孢霉烯族真菌毒素的电子捕获气相色谱分析方法.粮食样品经醋酸乙酯、氯仿、乙醇提取后,减压浓缩.浓缩液用活性炭-中性氧化铝(2:1,W/W)柱净化,84％乙腈水溶液洗脱.洗脱液减压浓缩至于,残渣用N-七氟正丁酰咪唑衍生化.电子捕获气相色谱的分析结果表明,活性炭-中性氧化铝柱能有效地除去粮食中的干扰物,有很好的分离效果.T-2毒素、HT-2毒素、二乙酰藨草镰刀菌烯醇、新茄病镰刀菌烯醇、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、雪腐镰刀菌烯醇、镰刀菌烯酮-X等七种毒素在小麦、大麦、玉米及大米中的回收率在浓度范围为50ng/g—500ng/g的范围内均为80％以上.

饲料中单端孢霉烯族真菌毒素检测方法的探讨

[目的]为饲料中单端孢霉烯族真菌毒素的有效、快速检测提供理论支持。[方法]通过比较单端孢霉烯族毒素的检测方法,探讨了相关问题并预测了饲料中单端孢霉烯族毒素检测方法的发展方向。[结果]使用TLC检测脱氧雪腐镰刀菌烯醇的检测限可达20～300μg/kg。在羟基衍生化后用气相色谱电子俘获法检测A类单端孢霉烯族毒素的检测限为10～50μg/kg,衍生化或荧光酰化后检测B类单端孢霉烯族毒素的检测限可达20～50μg/kg,甚至更低。利用HPLC,以甲醇-水或乙腈-水混合物为流动相检测单端孢霉烯族毒素,其检测限为100～500μg/kg。利用LC-MS/MS检测单端孢霉烯族毒素的检测限可达0.8～10.0 ng/kg。[结论]随着技术的发展,将会有越来越多的优良分析检测方法用于检测饲料中的单端孢霉烯族毒素。

谷物中A类单端孢霉烯族真菌毒素检测方法研究进展

概述谷物中A类单端孢霉烯族真菌毒素的检测方法。描述目前最常见的A类单端孢霉烯族真菌毒素 (HT 2和T 2毒素 )的筛选和定量方法。其中包括各种现行的提取、纯化措施和色谱方法 (HPLC、GC) ,及免疫化学方法 ,特别是酶联免疫吸附测定法 (ELISA)。通过对这些方法的相互比较发现 ,到目前为止 ,可以认为ELISA是一种简单、快速。

镰刀菌单端孢霉烯族毒素的生物合成及分子调控研究进展

单端孢霉烯族毒素主要是由镰刀菌属等丝状真菌产生的一类有毒的次级代谢产物,对人类和动物的健康造成威胁。本文对镰刀菌单端孢霉烯族毒素的生物合成基因、生物合成途径及编码酶、分子调控分别进行了阐释,其中生物合成至少涉及到3个基因家族,分别为Tri5基因簇、Tri1～Tri16基因簇和Tri101基因簇,包括编码单端孢霉二烯合酶的Tri5,编码P450单加氧酶的Tri4、Tri11和Tri13,编码转录调控因子的Tri6和Tri10,编码乙酰基转移酶的Tri7、Tri3、Tri16和Tri101,编码酯酶的Tri8,编码羟化酶的Tri1,编码毒素输出泵的Tri12。生物合成起始于反式法尼基焦磷酸环化形成单端孢霉二烯,再经过一系列的加氧、异构化、环化和酯化反应,最终形成不同结构的毒素,毒素形成的差异主要是由代谢途径和基因差异决定的。生物合成除了受TRI6和TRI10特异的转录调控因子调控之外,还受到与外界环境相关的全局性调控因子Pac和VeA的调控。本文旨在为食品、饲料等农产品的毒素防控、毒素脱除提供理论依据。

谷物中重要单端孢霉烯族毒素的检测方法

对谷物样品中常见的单端孢霉烯族真菌毒素物种的最新检测技术研究进展情况进行了详细的综述,包括样品的分离、富集等前处理技术和检测技术.通过对分析方法的比较发现,免疫分析法是一种简单、快速、低成本的单端孢霉烯族真菌毒素筛选方法.另外,液相色谱/三重四极杆串联质谱由于不需要进行衍生化处理,而且具有较低的检测限和较高的灵敏度,已经成为目前分析单端孢霉烯族真菌毒素应用最广泛的方法.该方法通常使用乙腈/水(84∶16,V/V)对样品进行提取,并使用MycoSepTM柱或者Bond Elut Mycotoxin净化柱进行处理,从而获得最佳分析效果.

单端孢霉烯族毒素免疫毒性研究进展

单端孢霉烯族毒素是由镰刀菌属真菌产生的真菌毒素,其导致的主要临床症状表现为呕吐、胃肠炎症和免疫功能降低等。研究表明,单端孢霉烯族毒素具有严重的免疫毒性,T细胞、B细胞和巨噬细胞是其攻击的主要对象[1]。目前,尚未完全了解单端孢霉烯族毒素免疫毒性的机制。此外,单端孢霉烯会引起核糖体应激反应,并激活一系列信号通路,如NF-κB,MAPK和JAK/STAT等。该毒素与核糖体的肽基结合后可以激活MAPK磷酸化,以调节免疫应答和细胞凋亡[2]。A型和B型单端孢霉烯族化合物因其广泛分布及其对人和动物的高毒性,在人和动物健康方面备受关注[3]。单端孢霉烯族化合物在其摄取、结合和整体生物活性(包括毒性)方面有显著不同,这是因为它们有不同的侧基,这些侧基决定着它们的大小、极性和构象。

粮食中真菌毒素及其代谢物的产生和影响

真菌毒素是由丝状真菌产生的次生代谢物,曲霉菌和镰刀菌是在粮食作物中产生真菌毒素的主要植物病原体。我国已被记录的真菌毒素有400多种,其中黄曲霉毒素、单端孢霉烯族毒素和玉米赤霉烯酮是最常见的影响人类和动物健康的真菌毒素。由于真菌毒素对生物的毒性作用以及对国际贸易的重要性,粮食中真菌毒素的检测意义重大。本文综述粮食中的主要真菌毒素及其来源和危害,为粮食安全储存和真菌毒素检验提供参考和理论依据。

小麦中呕吐毒素与玉米赤霉烯酮相关性探讨

呕吐毒素又称脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON),化学名为3a 7a 15-三羟基草镰孢菌-9-烯-8-酮,属单端孢霉烯族化合物。玉米赤霉烯酮(ZEN)又称F-2毒素,化学名为6-(10-羟基-6氧基-1-碳烯基)β-雷琐酸-μ-内酯,是由玉米赤霉菌、禾谷镰刀菌(F.graminearum)、三线镰刀菌(F.tricinctum)及串珠镰刀菌等产生的一类真菌毒素。

A型单端孢霉烯族毒素多克隆抗体及其免疫磁珠制备技术

目的制备用于隐蔽态A型单端孢霉烯族毒素富集净化的免疫磁珠。方法采用A型单端孢霉烯族(简称A型单族)毒素人工抗原3-乙酰-新茄腐镰刀菌烯醇-酸酐-牛血清蛋白(3-Ac-NEOS-HS-BSA)免疫新西兰长耳白兔,分离血清制备A型单族毒素多克隆抗体,测定效价并纯化。然后优化高效价抗体与免疫磁珠的偶联条件并应用。结果免疫5次后的兔血清中A型单族毒素抗体效价最高为1:64 000。抗体和磁珠的最优偶联条件为:24℃、pH 7.4、0.02 mol/L含10%甲醇的PBS缓冲液中旋转捕获24 h。结论 A型单族毒素多克隆抗体及其免疫磁珠的制备为同步富集净化复杂基质中A型单族毒素、提高方法的检测限奠定基础。

真菌毒素引起的氧化应激及其毒理学意义

真菌毒素是一类由真菌产生的次生代谢产物,由于其在自然界污染的普遍性和广泛的毒性作用,被给予了充分关注。从机理上入手来研究真菌毒素毒性作用的起因具有重要意义。真菌毒素根据结构分类可达400种之多,它们的机理也各有不同,但是越来越多的研究表明真菌毒素与氧化应激有重大关联。真菌毒素引起的氧化应激能引起细胞毒性作用,还参与了其他靶点的毒性反应。同时真菌毒素能干扰细胞抗氧化系统的功能,降低细胞对毒素的抵抗能力。本文主要综述了真菌毒素中与氧化应激有密切联系的几种毒素的毒性作用,重点阐述了其与氧化应激之间的关系,以期对真菌毒素的毒性机理有更进一步的认识。

玉米及玉米加工品中的真菌毒素

真菌毒素(Mycotoxin)是由真菌产生的一类次生代谢产物。人畜误食带有毒素的粮食或饲料,就会发生中毒现象或称为真菌中毒症(Mycotoxicoses)。介绍了美国玉米及玉米加工品中常见的黄曲霉毒素(Aflatoxin)和两种镰刀菌毒素(Fusariumtoxins):玉米赤霉烯酮(Zearalenone)及单端孢霉烯族化合物(Trichothecenes)。重点概述了黄曲霉毒素和镰刀菌毒素在玉米原粮及玉米加工品的不同组分中的分布情况;讨论了真菌毒素的检测和化学分析方法。

真菌毒素的危害、限量标准及快速定量检测方法

一种真菌可以产生多种不同的真菌毒素，不同的真菌亦可产生相同的真菌毒素。目前已知能产生真菌毒素的真菌有150余种，产生的真菌毒素约有300种，其中包括黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、玉米赤霉烯酮以及其衍生物类毒素、A型单端孢霉烯族、B型单端孢霉烯族等。一般真菌的生长和繁殖都需要一定的温、湿度条件，最适宜生长温度一般为20～30℃。

脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的毒性及其生物转化研究进展

脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)是世界上分布最广泛的真菌毒素之一,给世界粮食产业造成巨大经济损失,也给人类健康带来重大威胁。该文对DON毒素的基本性质、毒性作用及生物转化研究进展进行全面论述,为DON毒素的防控技术提供参考。

HT-2毒素致DNA损伤的单细胞电泳观察

目的 测定 HT- 2毒素对 Hela细胞 DNA的损伤作用 ,检验单细胞电泳法 (SCGE)在人群试验中的可行性。方法 应用 SCGE和细胞生长抑制实验 (MTT)。结果 HT- 2毒素具有致 DNA损伤的作用 ,并随着毒素剂量的增加 ,DNA损伤程度加重。80 0 ng/ ml的尾长为 (2 8.4± 5 .6 7) μm,16 0 0 ng/ ml时为 (5 5 .8± 10 .47) μm,呈剂量反应关系。结论 HT- 2毒素具有致细胞 DNA损伤的作用。

T-2毒素研究进展

T-2毒素是单端孢霉烯族毒素之一,也是毒性最强的真菌毒素,可由多种真菌产生,在自然界中广泛存在,严重危害人畜健康。T-2毒素由Bamburg于1968年首次分离提纯并确认了化学结构。

小麦不完善粒种类与呕吐毒素值相关性探讨

呕吐毒素(DON),属B型单端孢霉烯族化合物,主要由禾谷镰刀菌、尖孢镰刀菌、串珠镰刀菌和雪腐镰刀菌产生,是广泛分布于自然界,对人类和动物健康有极大危害的一种真菌毒素。对人和动物的免疫功能、繁殖功能产生明显的影响[1]。DON毒素通过被污染的小麦、大麦、玉米等原料进入食品和饲料中,家禽食用污染的饲料后,使DON毒素少量进入牛奶、肉和蛋中从而间接影响人类健康。

浅谈饲料中DON毒素的危害

随着食物安全日益受到人们的重视，对谷物制品及饲料中的真菌毒素含量要求越来越严格，毒素的含量严格控制在限量之内已成当务之急。脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON），是由禾谷镰刀菌及其他一些真菌产生的单端孢霉烯族毒素中的一种。DON的污染非常普遍，尽管其毒素不强，但严重危害人畜的安全，越来越引起人们的注意。

高效液相色谱-紫外法同时检测小麦中DON、15ACDON和3ACDON

建立了测定小麦中B型单端孢酶烯族毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)、3-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇(3-acetyldeoxynivalenol,3-ACDON)和15-乙酰脱氧雪腐镰刀菌烯醇(15-acetyldeoxynivalenol,15-ACDON)的高效液相色谱-紫外(HPLC-UV)检测方法。用水提取小麦样品,提取液经无水乙醇等体积沉淀,再结合OasisHLB固相萃取小柱可取得较好的净化效果。采用乙腈-0.005%磷酸水溶液二元梯度洗脱程序在高效液相色谱-紫外检测器上完成DON、15ACDON和3ACDON的定性定量分析。结果表明,在0.5～15.0mgL-1线性范围内,DON、15ACDON和3ACDON的平均加标回收率分别为89.8%、93.4%和92.9%,相对标准偏差分别为2.2%、2.0%和2.5%(n=3);检测限分别为12.2、10.5和16.7μgkg-1。该方法准确、重现性好,样品净化方法使杂峰干扰少,大幅减少有机溶剂的使用,成本低,适用于小麦中B型单端孢酶烯族毒素的大批量检测。

真菌次级代谢的新时代

真菌作为世界上仅次于昆虫的第二大生物类群与人类有着长久而密切的关系,特别是在化学水平。人们意识到真菌是有害和有益化合物的重要来源起因于两个事件:一是20世纪60年代黄曲霉毒素导致的火鸡中毒事件,二是被称为第二次世界大战神奇药物的青霉素作为第一种广谱抗生素被发现(Nesbittetal.1962;Quinn2013)。这些生物活性分子叫做次级代谢产物,又叫做天然产物。在天然产物学科100多年的研究史中,大量的有益和有害的天然产物被发现,例如:临床上广泛使用的洛伐他汀、棘白霉素和紫衫醇等药物,真菌大环内酯类抗线虫thermolide类化合物,具有除草活性的aspterric acid,伏马毒素、赭曲霉素A和单端孢霉烯族毒素等真菌毒素(Hoffmeister&Keller 2008;Chen et al. 2013;Yan et al. 2018;Gil-Serna et al. 2020;Zhang et al. 2020)。