B型呼吸道合胞病毒荧光定量RT-PCR检测

目的建立B型人呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)的快速荧光定量RT-PCR检测方法,用于B型RSV实验室早期诊断与病毒核酸的定量分析。方法利用B型RSV N基因保守区设计引物和TaqMan-MGB(minor groove binder,DNA小沟结合物)探针,优化反应体系和反应条件;并对方法进行特异性、灵敏度和重复性评价;同时以10倍梯度稀释的质粒为标准品建立荧光定量RT-PCR的标准曲线,构建定量分析模型。并用该方法对100份临床呼吸道样本进行检测。结果该方法与其他呼吸道病毒均无交叉反应,检测灵敏度达1TCID50/ml50%组织培养物感染剂量病毒滴度,临床样本中B型RSV的检测阳性率达18%。结论B型RSV荧光定量RT-PCR检测方法快速、敏感、特异,适用于B型RSV的早期诊断和核酸定量分析。

一起由B型呼吸道合胞病毒引起学校内急性呼吸道感染暴发的调查

2012年9月22日江西省某学校报告数十例发热、呼吸道症状病例,且前期检测9份鼻咽拭子流感病毒和肠道病毒均为阴性,病因不明,为此本研究对疫情开展了调查,结果报告如下. 1.对象与方法： （1）病例定义：①疑似病例：2012年9月1-24日该学校学生、教职员工及其周边居民出现发热症状者（体温≥37.5℃）;②确诊病例：疑似病例＋鼻咽拭子呼吸道合胞病毒核酸阳性者.