一起苦菜罐头引起的B型肉毒梭菌食物中毒

１９９５年１０月２０日晚８时许，呼市水泥厂某一家５人，因食苦菜［１］罐头一瓶发生中毒，报告如下。１临床经过进食苦菜罐头数量较多的女儿，在吃饭中间即感到腹部不适，约４小时后腹痛剧烈，频繁呕吐，次日清晨出现复视、视物模糊、走路不稳、全身无力等症状，２６日...

利用实时荧光定量PCR技术检测毒素基因快速鉴定A/B型肉毒梭菌方法的建立

目的建立针对A/B型肉毒梭菌毒素基因的实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测方法,构建标准曲线,评价该方法的特异性、敏感性及检测下限,以提高肉毒梭菌检测的快速性、准确性。方法根据肉毒梭菌A/B型毒素基因设计特异性引物及探针,优化反应条件,建立real-time PCR反应体系。用25种细菌评价该方法的特异性,使用含有A/B型毒素基因特异性序列的重组质粒标准品构建标准曲线,模拟粪便标本,评价建立方法的灵敏度。结果建立的real-time PCR检测方法特异性好,携带A/B型毒素基因的重组质粒均出现相应特异性扩增曲线,对其他25种细菌进行试验扩增时,均未见出现特异性扩增曲线。根据重组质粒标准品构建的标准曲线可确定其对肉毒梭菌A/B型毒素基因检测灵敏度分别为5. 0 4×1 0 2拷贝/μl和6.91×102拷贝/μl。模拟粪便标本中含有目的基因重组质粒的检测下限为A型1.71×103拷贝/μl,B型2.14×103拷贝/μl。结论本研究设计了适合检测国内肉毒梭菌A/B型的引物和探针,建立real-time PCR快速检测体系,为我国肉毒梭菌A/B型菌株的快速鉴定提供一种新的技术手段。