CD20阳性成人急性B淋巴细胞白血病患者临床特点及生存分析

本研究分析成人CD20阳性急性B淋巴细胞白血病(B-lineage acute lymphoblastic leukemia,B-ALL)患者的临床特点和生存情况。回顾性总结分析郑州大学第一附属医院血液科2004年5月至2008年12月收治的119例成人B-ALL患者的临床特点和生存情况。结果表明:119例成人B-ALL中CD20阳性40例(33.61%),CD20阴性者79例(66.39%),CD20阳性组和CD20阴性组男性患者比例分别为72.50%和50.63%(p<0.05),CD20阳性组和CD20阴性组发病时外周血白细胞数分别为(27.35±30.29)×109/L和(50.11±81.72)×109/L(p<0.05)。两组患者在年龄分布、肝脾、淋巴结和中枢神经系统浸润、发病时血红蛋白和血小板水平、髓系抗原表达、Ph染色体、超二倍体和正常核型比例、4周内完全缓解率、诱导死亡率和复发率方面的差异无统计学意义(p>0.05);Kaplan-Meier曲线生存率分析显示,CD20阳性组和CD20阴性组成人B-Lin ALL的中位总体生存(OS)时间分别为11.0个月和12.0个月,3年总生存率分别为28%和20%,两组间差异无统计学意义(p=0.832)。结论:CD20在成人B-ALL中的表达与患者的性别分布、外周血白细胞数相关,与其它临床特点无显著相关性,对患者的预后无显著影响。

B系急性淋巴细胞性白血病患儿外周血中CD4^+、CD8^+、CD19^+细胞的观察

目的 :分析诱导疗程前、疗程中及缓解期三个时期内B系急性淋巴细胞性白血病患儿外周血中CD4+ 、CD8+ 、CD19+ 细胞阳性率的变化情况及比例关系。方法 :应用流式细胞仪 (FCM)分析。结果 :在B系急淋未经治疗的情况下 ,CD19+ 细胞的阳性率显著升高 ,CD4+ 、CD8+ 细胞的阳性率比例显著降低 ,且CD4+ /CD8+ 比例倒置。在诱导疗程后期 ,CD19+ 细胞阳性率下降 ,CD4+ 、CD8+细胞阳性率比例相对升高 ,但CD4+ /CD8+ 比例仍然倒置。在缓解期 ,CD19+ 细胞阳性率下降 ,CD4+ 、CD8+ 细胞阳性率比例升高 ,CD4+ /CD8+ 比例升高至正常水平。结论 :在B系急淋患儿未经治疗时 ,肿瘤负荷较重 ,CD4+ 、CD8+ 细胞DNA增殖受到抑制 ,细胞免疫水平低下。在诱导疗程后期 ,肿瘤负荷下降 ,细胞免疫水平仍然低下。在缓解期 ,细胞免疫水平恢复。

B系急性淋巴细胞白血病中CD20表达及其对预后影响

目的:探讨白细胞分化抗原CD20在B系急性淋巴细胞白血病(B-ALL)中的临床特征与及其对治疗转归影响。方法:回顾性分析2009年7月至2012年7月在我院血液科诊断和治疗的B-ALL患者126例临床特征及治疗转归,比较CD20阳性患者及CD20阴性患者第1疗程诱导治疗完全缓解率、复发率及2年生存率、2年无事件生存率。结果:126例B-ALL患者中CD20阳性患者31例(24.4%),CD20阴性患者95例(75.6%);在性别及年龄分布中,CD20阳性组和CD20阴性组间的差异无统计学意义。CD20阳性与阴性患者经第1疗程诱导治疗后获完全缓解率分别为88.2%(15/17),90.5%(57/63)(P>0.05),复发率分别为53.3%(8/15),38%(19/50);2年总生存率分别为52.1%,92.3%;2年无事件生存率分别为33.7%,70.8%。结论:CD20在B-ALL CD20表达与临床特点方面无明显相关性,但其表达可能提示预后不良。

慢性B淋巴细胞白血病CD4^＋CD25^＋highCD127^Low和CD19^＋-CD23^＋的相关性研究

目的通过研究慢性B淋巴细胞白血病（chronic B cell lymphocytic leukemia，B—CLL）CD4^＋CD25^＋highCDl27^Low和CD19^＋CD23^＋的相关性，探讨CD4^＋CD25^＋highCDl27^Low在B—CLL发生发展过程中的作用。方法将20例初次发病的B—CLL患者按临床分期的不同分为O-II期组、III-IV期组，设立正常对照组，应用流式细胞仪检测各组的研究对象外周血中CD4^＋CD25^＋highCDl27^Low、CD19^＋、CD19^＋CD23^＋的表达量，比较各组间的差异。结果B—CLL O-II期组、III-IV期组患者外周血中CD4^＋CD25^＋highCDl27^Low、CD19^＋、CD19^＋CD23^＋的表达量均明显高于正常对照组；B—CLL患者III-IV期组的CD4^＋CD25^＋highCDl27^Low、CDl9^＋、CDl9^＋CD23^＋表达量明显高于O-II期组；CD4^＋CD25^＋highCDl27^Low、CDl9^＋CD23^＋有明显的正相关性。结论B—CLL患者外周血中CD4^＋CD25^＋highCD127^Low的表达量增高，与CD19^＋、CD19^＋CD23^＋的表达量增高明显相关，可能是B—CLL患者CD19^＋CD23^＋克隆性增生原因之一．

脾脏CD4^+T、CD19^+B淋巴细胞凋亡在狼疮性BXSB小鼠发病机制中的意义

目的对♀、♂狼疮性BXSB小鼠外周血T、B淋巴细胞分布及脾脏T、B淋巴细胞凋亡进行比较探讨脾脏CD4+T、CD19+B淋巴细胞凋亡在狼疮性BXSB小鼠发病机制中的意义。方法运用流式细胞术、免疫双荧光染色法检测外周血CD4+T、CD8+T、CD19+B细胞分布及脾脏CD4+T、CD19+B细胞凋亡;直接免疫荧光法观察♀、♂狼疮性BXSB小鼠肾脏免疫组化。结果与♀BXSB小鼠比较,♂BXSB小鼠外周血CD4+T、CD8+T细胞分布明显降低(P<0.01),外周血CD19+B细胞分布及脾脏CD4+T、CD19+B凋亡率明显升高(P<0.01);♂BXSB小鼠绝大多数肾小球毛细血管襻上可见大量IgG呈片状沉积,而♀BXSB小鼠肾脏几乎无IgG沉积。结论♂BXSB小鼠发病较♀BXSB小鼠重,细胞凋亡在BXSB小鼠发病机制中具有重要意义。

成人急性B淋巴细胞白血病CD20表达及临床意义

目的探析CD20表达在成人急性B淋巴细胞白血病中的应用价值。方法选取2013年1月~2018年1月在我院血液科明确诊断和治疗的92例成人急性B淋巴细胞白血病,均接受骨髓细胞形态学、白血病相关免疫表型、细胞遗传学及分子生物学检测,对检测结果进行回顾性分析。结果 CD20阳性组在年龄、性别、初诊白细胞数与CD20阴性组比较,差异无统计学意义(P> 0.05);92例患者中有85例患者完成了诱导治疗,治疗完成率为92.4%;CD20阳性组和CD20阴性组的CRI率比较无显著差异,CD20阳性组的bcrabl融合基因表达阳性率低于CD20阴性组(13.3%vs 25.9%),但两组比较差异无统计学意义(P> 0.05)。CD20阳性组和CD20阴性组5年总体生存率(OS)分别为27.5%和58.3%,CD20阳性组5年总生存率较低,但两组差异无统计学意义。结论 CD20阳性急性B淋巴细胞白血病患者与CD20阴性急性B淋巴细胞白血病患者在临床特征、治疗效果和预后方面比较差异无统计学意义(P> 0.05),CD20尚并不能作为急性淋巴细胞白血病的独立的预后因素。

CD20单克隆抗体rituximab在B淋巴细胞疾病靶向治疗中的应用

CD20是前B淋巴细胞向成熟淋巴细胞分化过程中表达的表面抗原。除了在正常B淋巴细胞分化过程中表达外,CD20也在许多B细胞性恶性肿瘤如淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病、多发性骨髓瘤以及Waldenstrom巨球蛋白血症中表达,为B细胞恶性肿瘤的特异性靶向治疗提供了较为理想的靶点。本文介绍近年来rituximab在B淋巴细胞性疾病中的临床应用概况。

B淋巴细胞CD19和CD20在孤独症谱系障碍诊断中的应用价值

目的探讨B淋巴细胞CD19和CD20在孤独症谱系障碍(又称为自闭症)诊断中的应用价值。方法选取2010年1月至2012年5月中山大学孙逸仙纪念医院儿童神经专科确诊的自闭症患儿35例和幼儿园入学前健康体检儿童35例分别作为自闭症组和对照组,采用流式细胞仪检测分析两组CD19、CD20水平变化,并采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析其对自闭症的诊断价值。结果自闭症组CD19、CD20水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示:CD19最佳临界值为16.55%时,曲线下面积、灵敏度和特异度分别为81.70%、88.90%和74.30%;CD20最佳临界值为14.35%时,曲线下面积、敏感度和特异度分别为68.90%、88.90%和48.60%。结论 B淋巴细胞CD19和CD20可以作为孤独症谱系障碍的辅助诊断指标。

94例成人急性普通B淋巴细胞白血病CD20表达与预后相关分析

急性淋巴细胞白血病（acutelymphoblasticleukemia，ALL）是淋巴细胞恶性增殖性疾病，起源于单克隆B淋巴细胞或T淋巴细胞的前体细胞，其中急性B淋巴细胞白血病根据细胞表面分化抗原的表达，依次分为早前B型、普通B型、前B型、成熟B细胞型，患者在生物学行为和预后方面有很大的异质性，对治疗反应有很大差别。

替莫唑胺联合大剂量甲氨蝶呤及利妥昔单抗治疗CD20^(+)初发原发中枢神经系统弥漫大B细胞淋巴瘤疗效分析

目的:回顾性分析替莫唑胺联合大剂量甲氨蝶呤及利妥昔单抗治疗CD20^(+)初发原发中枢神经系统弥漫大B细胞淋巴瘤的临床疗效。方法:收集2010年01月至2018年01月治疗的CD20^(+)初发原发中枢神经系统弥漫大B细胞淋巴瘤40例,根据治疗方式分为两组,替莫唑胺组(19例)和非替莫唑胺组(21例),观察两组患者的临床疗效及不良反应。结果:治疗后,替莫唑胺组治疗有效率高于非替莫唑胺组(57.89%vs 33.33%,P<0.05)。替莫唑胺组和非替莫唑胺组患者1年生存率为84.21%和57.14%,2年生存率为63.16%和33.33%,差异有统计学意义(P<0.05),替莫唑胺组生存率高于非替莫唑胺组。两组患者的不良反应程度均较轻,不良反应差异无统计学意义。结论:采用替莫唑胺联合大剂量甲氨蝶呤及利妥昔单抗治疗CD20^(+)初发原发中枢神经系统弥漫大B细胞淋巴瘤的临床疗效较好,不增加不良反应。

SCCLG-ALL-2016方案治疗初诊CD20抗原阳性儿童B-ALL的临床特点及生存分析

目的 探讨华南地区儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)治疗协作组2016治疗方案(SCCLG-ALL-2016)对儿童B细胞起源ALL(B-ALL)中CD20抗原表达与一般临床特点以及预后之间的关系。方法 回顾性分析2016年10月至2023年12月期间在广东医科大学附属医院接受治疗的113例初诊B-ALL患儿的临床特点以及生存情况,分析其基本资料与临床特征、染色体核型、融合基因、临床危险度、骨髓缓解、复发情况及生存曲线。结果 113例初诊B-ALL患儿CD20阳性表达率23.01%;CD20阳性表达与性别、脾脏增大、初诊血小板计数以及融合基因方面存在显著统计学意义(P<0.05)。CD20抗原阳性组与CD20抗原阴性组患儿在初诊年龄、初诊白细胞计数、染色体核型、第15、33天骨髓残留情况以及复发方面的差异均无统计学意义(P>0.05)。生存曲线分析结果显示,CD20抗原阳性组患儿的3年无事件生存(EFS)率为(75.3±10.2)%,CD20抗原阴性组患儿的3年EFS率为(85.2±4.3)%;两组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。CD20抗原阳性组患儿的总生存期(OS)率为(82.8±7.9)%,而CD20抗原阴性组患儿的OS率为(90.4±3.2)%,两组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 在儿童B-ALL中,CD20抗原的表达与性别、脾脏情况、初诊血小板计数以及融合基因表达相关,但与其他一般临床特点和预后无关,CD20抗原不是B-ALL患儿预后的影响因素,脾脏是否增大、初诊白细胞计数、危险度及融合基因是影响B-ALL患儿预后的独立因素。

急性脑梗死患者外周血B淋巴细胞CD19、CD20表达的临床研究

目的:了解急性脑梗死患者B淋巴细胞CD19和CD20的变化及临床意义。方法:采用流式细胞术,用单克隆抗体定量测定30例急性脑梗死患者和30例健康同龄人外周血淋巴细胞中CD19、CD20的阳性表达率,进行成组设计病例对照研究。结果:急性脑梗死组血CD19和CD20在淋巴细胞中的阳性表达率均明显高于对照组(P<0.001)。结论:急性脑梗死患者B淋巴细胞CD19、CD20的表达上调,可能参与急性脑梗死后的炎症和免疫反应。

CD20和CD19双靶点CAR-T细胞对B淋巴细胞瘤的杀伤作用

目的:设计同时靶向B淋巴细胞表面CD20和CD19两个抗原蛋白的双特异嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)并制备BiCAR-T细胞,检测其对B淋巴细胞瘤细胞的杀伤作用以及对免疫缺陷B-NSG小鼠白血病模型的治疗效果。方法:构建基于鼠源CD19和人源化CD20 scFv的双靶点CAR分子,将CAR基因装载于慢病毒载体中,在293T细胞中包装慢病毒,感染健康人T细胞制备BiCAR-T细胞。构建表达CD19和CD20的K562-CD19-GFP、K562-CD20-GFP以及表达Luciferase的Nalm6-Luc-GFP细胞作为靶细胞,将BiCAR-T细胞与靶细胞共同孵育,检测其对靶细胞杀伤能力及释放IFN-γ水平。使用Nalm6-Luc-GFP细胞构建白血病小鼠模型,尾静脉注射BiCAR-T细胞,通过小动物成像方法观察BiCAR-T细胞对荷瘤小鼠的治疗作用。结果:健康人来源的BiCAR-T细胞经7 d培养后扩增良好,扩增倍数为20~50倍,阳性率为10%~92%,显示成功制备BiCAR-T细胞。在效靶比为10∶1时,BiCAR-T细胞对Nalm-6、K562-CD19-GFP和K562-CD20-GFP的杀伤率显著高于对照组细胞[(76.7±7.4)%vs(8.7±2.4)%、(93.3±5.2)%vs(46.7±6.2)、(51.0±0.8)vs(30.7±0.5)%,均P<0.01];与对照组相比,与Nalm-6细胞共孵育后BiCAR-T细胞分泌IFN-γ量显著增加[(872.7±7.7)vs(101.0±5.3)pg/ml,P<0.01]。动物实验表明,BiCAR-T细胞对B-NSG小鼠白血病模型治疗效果明显,注射BiCAR-T细胞后白血病细胞逐渐减少,第50天时基本消失,小鼠全部存活至第70天被安乐死;PBS和对照T细胞组小鼠分别在(19±3)和(20±1)d全部死亡。结论:成功设计了表达CD19和CD20的双靶点CAR分子后成功制备了BiCAR-T细胞,该细胞能够有效杀伤表达CD19和/或CD20的B淋巴细胞瘤细胞,与靶细胞共同孵育后能够分泌大量IFN-γ,对B-NSG免疫缺陷小鼠白血病模型具有明显的治疗效果。

CD20阳性B细胞NHL^(131)I-美罗华放射免疫治疗剂量个体化的临床初步研究

本研究旨在观察不同个体间131I-美罗华全身清除速率的差异,并拟定131I-美罗华放射免疫治疗个体化治疗剂量。选取CD20阳性B细胞NHL患者13例,于不同时相行全身平面显像,监测131I-美罗华的全身分布和清除情况,绘制时间-放射性曲线得到全身清除速率常数(λ),计算全身有效半清除时间Teff,采用医用内照射吸收剂量(Medical Internal Radiation Dosimetry,MIRD)法求得示踪剂量水平的全身辐射吸收剂量,并参照体重为70 kg的标准人体模型131I-美罗华全身最大耐受剂量为75 cGy,求得个体化的最大允许注射活度。结果显示:13例患者Teff为58.73~177.69 h(96.87±30.58 h),似呈正态分布;最大允许注射活度为1.14~2.95 GBq,其分布无明显规律。根据求得的最大允许注射活度试行治疗其中1例病人,其病情获得了部分缓解。

嵌合抗CD_(20) Fab′对B淋巴瘤细胞Raji细胞生长的影响

目的：研究嵌合抗CD_(20)基因工程抗体Fab′的抗肿瘤活性。方法：利用MTT法以及3H掺入法测定嵌合抗CD_(20) Fab′对Raji细胞生长的影响。结果：MTT法测定结果显示嵌合抗CD_(20) Fab′对Raji细胞的生长具有抑制作用，抑制作用成剂量依赖性，其IC50为24μg／ml；嵌合抗CD_(20) Fab′对3H－TdR掺入Raji细胞无抑制作用，表明抗CD_(20) Fab′不影响Raji细胞DNA的合成；但嵌合抗CD_(20) Fab′抑制3H－UdR掺入Raji细胞，表明嵌合抗CD_(20) Fab′对Raji细胞RNA合成具有抑制作用，其抑制作用成剂量相关性。结论：嵌合抗CD_(20) Fab′抑制Raji细胞生长，嵌合抗CD_(20) Fab′具有较好的抗肿瘤活性。

抗CD20单克隆抗体诱导B淋巴瘤细胞株凋亡的实验研究

本研究探讨抗CD20单克隆抗体体外诱导B淋巴细胞株凋亡情况及其可能的作用机制。体外培养Daudi、Ramos、Namalwa和Raji细胞,采用XTT法测定细胞增殖抑制率;用流式细胞术测定细胞凋亡;Western blot测定Daudi、Ramos、Raji和Namalwa细胞经Rituximab20μg/ml作用24小时后Bcl-2的表达情况。结果表明:抗CD20单克隆抗体对Daudi、Raji和Namalwa淋巴瘤细胞有轻度的抗增殖作用,对Ramos细胞无抗增殖作用,抗增殖作用与单克隆抗体作用浓度无关。抗CD20单克隆抗体对4株细胞无明显诱导凋亡作用,抑制率在3%-10%之间波动。Na-malwa和Raji细胞株经抗CD20单克隆抗体作用24小时后,Bcl-2蛋白表达下调。结论:单药抗CD20单克隆抗体对Daudi、Namalwa和Raji细胞株有轻度抗细胞增殖作用,但与作用浓度和作用时间无明显相关。单药抗CD20单克隆抗体对Daudi、Namalwa、Raji和Ramos细胞株有微弱的诱导凋亡作用。Namalwa和Raji细胞株经抗CD20单克隆抗体作用24小时后Bcl-2表达下调,这可能是抗CD20单克隆抗体增敏细胞毒药物作用的机制之一。

抗CD20单链抗体-CD8-TCRζ融合基因转染的T细胞治疗人B细胞淋巴瘤的实验研究

目的:观察抗CD20单链抗体(single chain variable fragment,scFv)-CD8-TCRζ融合基因转染的T淋巴细胞在体内外的抗人B细胞淋巴瘤作用,探讨利用CD20介导自体T淋巴细胞杀伤人B细胞淋巴瘤的可行性。方法:构建包含抗CD20scFv、CD8分子和CD3信号转导链ζ的融合基因,将其克隆入载体pcDNA3中,酶切鉴定正确后电转染入人外周血T淋巴细胞,诱导其表达抗CD20 scFv-CD8-TCRζ融合蛋白。流式细胞仪检测基因修饰后人T淋巴细胞结合CD20蛋白的功能;细胞杀伤试剂盒检测基因修饰后T淋巴细胞体外杀伤人B细胞淋巴瘤Raji细胞的能力;并在BALB/c裸鼠体内观察其对人B细胞淋巴瘤移植瘤的抑制效应。结果:成功构建、转染了抗CD20 scFv-CD8-TCRζ融合基因,并在人T淋巴细胞表面成功表达;流式细胞仪和细胞杀伤试剂盒检测结果表明经基因修饰后的人T淋巴细胞能特异性结合CD20抗原,并能特异性地杀伤人B细胞淋巴瘤Raji细胞,在裸鼠体内显著地抑制人B细胞淋巴瘤移植瘤的生长。结论:抗CD20 scFv-CD8-TCRζ融合基因转染的T淋巴细胞在体内外均能杀伤人B细胞淋巴瘤细胞,为进一步应用人T淋巴细胞杀伤作用治疗人B细胞淋巴瘤奠定了基础。

10例利妥昔单抗治疗后CD20转阴的B细胞性非霍奇金淋巴瘤随访资料(英)

最近，有研究显示B细胞性非霍奇金淋巴瘤（B—NHL）在利妥昔单抗治疗后CD20转阴。该作者报道了10例B—NHL在利妥昔单抗治疗后的随访资料，这些患者（4例男性，6例女性；中位年龄57岁）起初为CD20阳性，但在利妥昔单抗治疗后却转变为阴性。作者对这组B—NHL的临床病理特征（包括临床过程、CD20表达和组织病理学特点）进行了分析，用免疫组化和／或流式细胞术评估淋巴瘤中CD20表达。最初的组织病理学诊断为滤泡性淋巴瘤（FL）7例、弥漫性B细胞性淋巴瘤1例和慢性淋巴细胞白血病2例。其中6例（3例FL、1例弥漫性大B细胞性淋巴瘤和2例慢性淋巴细胞白血病）在表型改变后持续24个月CD20阴性；3例FL在表型改变1～7个月后恢复原来表型；2例FL（包括1例重新获得CD20阳性）表现为异质性CD20阳性，即低级别肿瘤成分CD20阴性，而大细胞成分CD20阳性。