B细胞易位基因1在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其对卵巢癌细胞株增殖和凋亡的影响

目的探讨B细胞易位基因1(BTG1)在卵巢上皮性肿瘤中的表达及其对卵巢癌细胞株SKOV3增殖和凋亡的影响。方法采用RT-PCR和组织芯片免疫组化技术检测卵巢上皮性癌组织、卵巢交界性上皮性肿瘤组织、卵巢良性上皮性肿瘤组织和正常卵巢组织中BTG1 mRNA和蛋白的表达。构建Lv-BTG1-EGFP表达载体和psiLv-U6-BTG1 RNA干扰载体,分别转染SKOV3细胞,利用MTT法观察BTG1的表达状态对SKOV3细胞增殖的影响,Hoechst染色法检测BTG1对SKOV3细胞凋亡的影响。结果 BTG1在卵巢上皮性癌组织、卵巢交界性上皮性肿瘤组织、卵巢良性上皮性肿瘤组织和正常卵巢组织中的mRNA和蛋白表达水平呈递增趋势。BTG1的表达状态与卵巢上皮性癌患者的肿瘤临床分期、淋巴结转移等重要的临床病理参数相关。体外实验显示,上调BTG1表达可以抑制SKOV3细胞的增殖,促进其凋亡。结论 BTG1的表达下调可能参与卵巢上皮性肿瘤的发生、发展。

微小RNA-3677靶向调控B细胞易位基因1表达及对肝细胞癌细胞侵袭迁移的影响

目的探讨微小RNA-3677(miR-3677)对B细胞易位基因1(BTG1)的靶向调控作用及肝细胞癌(HCC)细胞HepG2侵袭和迁移的影响。方法采用脂质体Lipofectamine 2000向HepG2细胞转染miR-3677抑制剂(Inhibitor组)和阴性对照序列(NC组)并以未行转染的细胞为对照组,采用实时定量PCR(QPCR)检测miR-3677水平,划痕实验和Transwell实验分别检测划痕宽度和穿膜细胞数目,双荧光素酶报告基因实验验证miR-3677与BTG1的靶向关系,QPCR检测BTG1、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和信号转导和转录激活因子3(STAT3)的mRNA水平,Western blotting检测BTG1、MMP-9、STAT3和磷酸化信号转导和转录激活因子3(p-STAT3)的蛋白水平。结果QPCR结果显示Inhibitor组的miR-3677水平为0.241±0.059,低于对照组的1.012±0.123和NC组的1.147±0.168(P<0.05);Inhibitor组的穿膜细胞数和划痕相对宽度分别为(96.5±9.2)个和(62.15±3.29)%,均优于对照组的(174.5±12.9)个和(37.45±2.16)%及NC组的(181.6±16.4)个和(39.47±2.82)%,差异有统计学意义(P<0.05)。miR-3677模拟物抑制了BTG1野生型3′端非翻译区的荧光素酶活性,而对突变型的无影响。与其余两组相比,Inhibitor组的BTG1表达水平升高,而MMP9和p-STAT3的水平降低(P<0.05)。结论下调miR-3677水平可抑制HCC细胞的迁移侵袭,该miRNA发挥癌基因的作用,可能与通过靶向BTG1以激活JAK/STAT3信号传导有关,为HCC提供一个新的潜在治疗靶点。

B细胞易位基因1在非小细胞肺癌中的表达及与预后的关系

目的:探讨B细胞易位基因1(BTG1)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达情况及与预后的相关性。方法:采用免疫组织化学法检测不同临床病理参数NSCLC病人BTG1蛋白表达水平,绘制生存曲线分析BTG1与病人5年生存率之间的关系。结果:NSCLC组织中BTG1蛋白的阳性表达率为38.4%,BTG1蛋白表达阳性组与阴性组淋巴结转移率、病理分期、组织学分级差异均有统计学意义(P<0.05~P<0.01);BTG1表达阳性组5年生存率高于阴性组(P<0.05);BTG1阳性与阴性病人生存曲线的差异有统计学意义(P<0.05)。结论:检测BTG1的表达情况对判断NSCLC的预后存在一定的参考价值,BTG1阳性病人预后较好。

B细胞易位基因1在BGC823胃癌细胞株中的表达及其对细胞周期、凋亡及迁移的影响

目的检测B细胞易位基因(B-cell translocation gene 1,BTG1)在BGC823胃癌细胞中的过表达对其周期、凋亡及迁移的影响。方法采用脂质体法将pc DNA3.1-BTG1重组质粒转染细胞,经过筛选得到稳定表达细胞株后,分为含BTG1质粒组、空载体组和空白对照组,采用Western-blot检测BTG1蛋白在BGC823细胞株中的表达,采用流式细胞术及划痕实验观察BTG1对BGC823细胞周期、凋亡及迁移的影响。结果与空载体组、空白对照组相比,BTG1组蛋白表达增高(P<0.05);流式细胞术显示,BTG1组G2/M期细胞数明显高于其他组(21.38%、18.47%vs 8.57%、8.74%,P<0.05),同时早期凋亡和总凋亡率显著增高(3.41%、3.05%vs 1.32%、0.87%和6.12%、8.30%vs 3.17%、2.34%,P<0.05)。结论 BTG1高表达,诱导G2/M阻滞,抑制细胞增殖,提高凋亡率。

急性髓细胞白血病模型小鼠B细胞易位基因1和Ikaros家族锌指转录因子1表达水平及相关性分析

目的:探讨急性髓细胞白血病(AML)模型小鼠B细胞易位基因1(BTG1)和Ikaros家族锌指转录因子1(IKZF1)表达水平,并进行相关性分析。方法:36只小鼠随机等分为模型A组、模型B组和对照组。模型A组和模型B组分别经尾静脉注射HL60细胞1×10^(7)/只、5×10^(6)/只,对照组注射等量0.9%氯化钠溶液。采用Western blot检测骨髓组织BTG1和IKZF1蛋白相对表达水平,并与体重、红细胞、血小板及白细胞CD33阳性率进行相关性分析。结果:模型A组和模型B组小鼠在接种第7、14、28天的体重、血小板低于对照组,红细胞高于对照组(均P<0.05),但模型A组与模型B组上述指标比较无统计学差异(均P>0.05)。模型A组和模型B组接种第28天白细胞CD33阳性率高于对照组,BTG1和IKZF1蛋白相对表达水平低于对照组(均P<0.05),但模型A组与模型B组上述指标比较无统计学差异(均P>0.05)。Pearson相关性分析显示,AML小鼠BTG1、IKZF1蛋白相对表达水平与白血病CD33阳性率、体重、红细胞、血小板均存在相关性(均P<0.05)。结论:BTG1、IKZF1蛋白在AML模型小鼠呈高表达,且表达水平与小鼠体重、外周血及肿瘤浸润程度存在相关性。

BTG1在非小细胞肺癌中的表达及其对肺癌细胞增殖、凋亡和侵袭转移的作用

目的探讨B细胞易位基因1(BTG1)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其对NSCLC细胞生物学行为的影响。方法采用免疫组织化学染色和Western blotting分别检测82例NSCLC及38例癌旁正常组织中BTG1蛋白的表达。采用慢病毒转染建立BTG1过表达的NSCLC H1299细胞株。采用实时荧光定量PCR和Western blotting检测BTG1转染后H1299细胞株中BTG1表达含量的变化。采用MTT法、流式细胞术及Transwell法检测BTG1过表达对NSCLC细胞增殖、凋亡及侵袭转移的影响。结果 BTG1蛋白在NSCLC及癌旁正常组织中的阳性表达率分别为37.8%(31/82)、84.2%(32/38),差异有统计学意义(P<0.05)。NSCLC组织中BTG1蛋白的相对表达量为0.331±0.035,明显低于癌旁正常组织的0.673±0.072,差异有统计学意义(P<0.05)。NSCLC组织中BTG1的表达与淋巴结转移、临床分期和组织学分级有关(P<0.05)。BTG1过表达的NSCLC细胞增殖能力明显减弱、细胞凋亡增加及侵袭转移能力降低,且Bcl-2、MMP-9表达量明显下调。结论 NSCLC组织中BTG1蛋白的表达明显降低;BTG1可能通过调控Bcl-2及MMP-9蛋白的表达影响NSCLC细胞的增殖、凋亡与转移。

BTG1在肾透明细胞癌组织中的表达及对786-O细胞株增殖和凋亡的影响

目的:探讨B细胞易位基因1(BTG1)在肾透明细胞癌组织中的表达及对肾透明细胞癌细胞株786-O增殖和凋亡的影响。方法:采用免疫组化法检测20例肾透明细胞癌及其癌旁组织中BTG1蛋白的表达。构建BTG1表达质粒及合成BTG1的干扰RNA分别转染786-O细胞,通过MTT法实验观察BTG1对786-O细胞体外增殖的影响,Hoechst染色观察BTG1对786-O细胞凋亡的影响。结果:20例肾透明细胞癌组织中,BTG1蛋白阳性表达5例,阳性率25%;对应的癌旁组织中,BTG1蛋白阳性表达17例,阳性率85%。MTT和Hoechst染色实验分别提示在786-O细胞中高表达BTG1能够抑制其增殖、促进凋亡,在786-O细胞中低表达BTG1能够促进其增殖、抑制凋亡(P<0.05)。结论:在肾透明细胞癌中,BTG1行使抑癌基因的功能,与肾透明细胞癌的发生、发展有关。

绵羊BTG1基因的半定量RT-PCR及生物信息学分析

B细胞易位基因1(BTG1基因)是BTG/TOB基因家族的成员之一,在动物细胞的增殖和分化中起重要的作用.利用牛BTG1基因的mRNA序列与绵羊的EST数据库进行Blast检索,并通过序列拼接和逆转录RT-PCR方法首次获得绵羊BTG1基因的部分cDNA序列(GenBank登录号FJ444829),其片段长度为1 358 bp,包括完整的开放阅读框516 bp,编码171个氨基酸.半定量PCR研究结果表明:BTG1基因在小尾寒羊和陶赛特羊的10种组织中均表达,并具有一致的表达趋势.同源分析结果表明,绵羊BTG1蛋白的氨基酸序列中存在BTG/TOB的保守结构域,并且该蛋白在不同物种间具有很高的保守性.通过生物信息学预测BTG1蛋白功能,发现绵羊BTG1蛋白存在1个跨膜结构域、8个磷酸化位点和1个特异性蛋白激酶磷酸化位点.蛋白质结构同源建模分析表明,绵羊BTG1蛋白具有BTG/TOB蛋白家族的典型空间结构.

下调miR-372靶向调控BTG1表达对胶质瘤细胞分泌免疫抑制因子的影响

目的研究miR-372靶向调控B细胞易位基因(BTG)1的表达对胶质瘤细胞分泌免疫抑制因子的影响。方法Realtime PCR方法测定胶质瘤细胞和正常星形胶质细胞中miR-372表达变化。在胶质瘤细胞中转染miR-372抑制剂(inhibitor),Realtime PCR方法检测下调效果,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定细胞培养液上清中转化生长因子(TGF)-β1、血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素(IL)-8含量。利用生物信息学软件预测miR-372的靶基因可能为BTG1,荧光素酶报告系统鉴定靶向关系。Western印迹检测miR-372 inhibitor对胶质瘤细胞中BTG1蛋白表达影响。在胶质瘤细胞中共转染BTG1 siRNA和miR-372 inhibitor,检测细胞培养液上清中TGF-β1、VEGF、IL-8含量和细胞中BTG1蛋白水平。结果胶质瘤细胞中miR-372表达水平高于正常星形胶质细胞。转染miR-372 inhibitor后的胶质瘤细胞分泌的TGF-β1、VEGF、IL-8含量显著减少。miR-372靶向调控BTG1。转染miR-372 inhibitor后的胶质瘤细胞中BTG1蛋白水平显著升高。BTG1 siRNA可以逆转miR-372 inhibitor对胶质瘤细胞分泌TGF-β1、VEGF、IL-8的抑制作用和BTG1蛋白表达的促进作用。结论下调miR-372靶向调控BTG1的表达抑制胶质瘤细胞分泌免疫抑制因子TGF-β1、VEGF、IL-8。

肿瘤抑制因子BTG1和IKZF1在小鼠白血病发生过程中相互作用研究

目的探讨肿瘤抑制因子B细胞易位基因1(BTG1)与编码转录因子蛋白的基因1(KZF1)在小鼠白血病发生过程中的相互作用。方法将24只SPF级BALB/c裸鼠分为对照组和模型组,每组12只。模型组采用尾静脉注射白血病细胞系K562建立白血病模型,对照组注射等剂量生理盐水。试验后1周、3周与6周采用MTT法检测细胞生存率,酶联免疫法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)与白细胞介素6(IL-6)含量;试验后6周流式细胞仪法检测细胞凋亡,Western blot法检测BTG1、IKZF1蛋白表达水平;定量分析小鼠肝和肺中白细胞浸入情况。结果试验后1周、3周与6周,模型组的造血细胞生存率、血清TNF-α与IL-6含量显著高于对照组(P<0.05),模型组在组内对比差异也有统计学意义(P<0.05)。试验后6周,模型组的骨髓细胞凋亡指数显著高于对照组(P<0.05),骨髓BTG1、IKZF1蛋白相对表达水平显著低于对照组(P<0.05)。与对照组相比,模型组渗入小鼠肝和肺的白细胞百分比显著上升(P<0.05)。结论小鼠白血病发生过程伴随有BTG1和IKZF1的低表达,可促进炎症因子的释放,导致造血细胞增殖旺盛与骨髓细胞凋亡并使得小鼠肝和肺组织的白细胞百分比上升。

BTG1在78例口腔鳞癌中的表达及临床意义

目的:探讨B细胞易位基因1(BTG1)在口腔鳞状细胞癌中的表达及临床意义。方法:采用免疫组织化学染色检测78例口腔鳞癌组织、78例癌旁组织、20例正常口腔黏膜组织及80例颈淋巴结中BTG1蛋白的表达水平;使用蛋白免疫印迹及实时荧光定量PCR分别检测78例口腔鳞癌组织及癌旁组织中BTG1蛋白及mRNA的表达水平。采用SPSS 21.0软件包对数据进行统计学分析,包括Kaplan-Meier生存分析、Log rank检验及Cox回归分析。结果:口腔鳞癌组织及颈部阳性淋巴结中BTG1的表达水平显著低于癌旁正常组织及阴性淋巴结,低分化口腔鳞癌中BTG1的表达水平显著低于高分化鳞癌(P<0.05)。生存分析显示,BTG1低表达组无进展生存期(PFS)、总体生存时间(OS)显著低于高表达组(P<0.05)。Cox回归分析显示,肿瘤分化程度、颈淋巴结转移情况及BTG1表达均是影响口腔鳞癌预后的危险因素。结论:BTG1在口腔鳞癌中低表达,其表达与口腔鳞癌的TNM分期、分化程度有关。

BTG1在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨B细胞易位基因1(BTG1)在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其与喉鳞状细胞癌临床病理特征及生物学行为的关系。方法:采用免疫组织化学和Western blot检测70例喉鳞状细胞癌组织和35例癌旁组织中BTG1蛋白的表达水平。结果:BTG1蛋白在喉癌组织中的阳性表达率为31.43%,明显低于癌旁组织(91.43%,P<0.05)。Western blot示喉癌和癌旁组织BTG1相对表达量分别为0.217±0.032和0.918±0.081(P<0.05)。BTG1在喉鳞状细胞癌组织中蛋白的表达与患者性别、年龄、肿瘤所在部位无关,与肿瘤局部浸润深度、区域淋巴结转移、临床分期、组织学分级呈负相关(P<0.05或P<0.01)。结论:在喉鳞状细胞癌组织中,BTG1蛋白的表达水平明显降低,检测BTG1的表达对喉癌的临床治疗和预后判断有一定的参考价值。