生腺布液汤对干燥综合征NOD小鼠B细胞活化因子及B细胞活化因子受体表达的影响

目的:观察生腺布液汤对干燥综合征(SS)NOD模型小鼠颌下腺及血清中B细胞活化因子(BAFF)及B细胞活化因子受体(BAFFR)的影响,探索生腺布液汤治疗SS的作用机制。方法:将24只8周龄雌性NOD小鼠随机分为模型组、硫酸羟氯喹组及生腺布液汤组,每组8只,另取8只同周龄雌性BALB/c小鼠设为正常对照组。给药组分别予生腺布液汤1.75 g/ml灌胃及硫酸羟氯喹溶液0.0026 g/ml灌胃,模型组及正常组予等量蒸馏水,连续8周。实验期间记录小鼠的一般情况及每日饮水量;HE染色观察各组小鼠颌下腺组织病理变化;免疫组化法检测颌下腺组织BAFF、BAFFR表达;ELISA法检测血清BAFF含量。结果:与模型组相比,生腺布液汤组和硫酸羟氯喹组小鼠饮水量下降(均P<0.05),血清BAFF及颌下腺组织BAFF、BAFFR表达降低(均P<0.05),颌下腺组织中淋巴细胞浸润减少,未见明显浸润灶等组织结构破坏。结论:生腺布液汤能够改善干燥综合征NOD小鼠口干症状,减轻颌下腺淋巴细胞浸润程度,其作用机制可能与降低颌下腺及血清BAFF、BAFFR表达相关。

B细胞活化因子受体在风湿免疫病中的表达

目的检测风湿免疫病患者血清B细胞活化因子受体（BAFF-R）的水平，探讨其在风湿免疫病发病机制中的作用。方法风湿免疫病患者260例，其中干燥综合征73例，类风湿关节炎53例，系统性红斑狼疮36例，未分化结缔组织病36例，强直性脊柱炎19例，同时选取53例健康体检者为对照组。采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测所有受试者血清BAFF—R水平，分析血清BAFF-R水平与免疫指标、炎性指标及自身抗体的相关性。结果患者组血清BAFF-R水平明显高于对照组（P〈0．01）。血清BAFF-R水平与免疫球蛋白IgG呈正相关（r=0．364，P=0．000），与补体C，呈负相关（r=-0．296，P=0．ooo）；与免疫球蛋白tgA、IgM、补体C。、血沉、C反应蛋白、类风湿因子等指标无明显相关性。随着抗核抗体滴度增高，血清BAFF-R水平呈增高趋势。结论风湿免疫病患者的血清BAFF-R水平升高，与免疫球蛋白、补体C，和抗核抗体的表达有相关性。BAFF．R的异常表达可能是风湿免疫病发病的重要环节。

外源性硫化氢对去卵巢骨质疏松大鼠骨代谢及护骨素/细胞核因子κB受体活化因子配体表达的影响

目的探讨外源性硫化氢(H2S)对去卵巢骨质疏松(OP)大鼠骨代谢及护骨素(OPG)和细胞核因子κB受体活化因子配体(RANKL)表达的影响。方法将50只健康SD雌性大鼠随机分为对照组、去卵巢OP模型组和外源性H2S供体硫氢化钠(NaHS)(10、50、100μmol/kg)组,每组10只。12周后检测各组大鼠的尿钙和尿脱氧吡啶啉(Dpd)及血清钙、磷、碱性磷酸酶(ALP)和雌二醇(E2)水平,采用双能X线吸收法测量大鼠右侧股骨的骨密度(BMD),采用Western blot检测股骨中OPG和RANKL的表达。结果与对照组比较,去卵巢OP模型组大鼠血清E2[(76.83±8.12)pmol/L比(11.05±1.42)pmol/L,t=5.74,P<0.05]和BMD水平[(0.25±0.03)g/cm2比(0.14±0.01)g/cm2,t=3.85,P<0.05]显著降低,尿钙[(0.85±0.08)mg/L比(1.88±0.21)mg/L,t=4.65,P<0.05]、尿Dpd[(14.67±1.28)nmol/mmol比(22.34±1.75)nmol/mmol,t=3.81,P<0.05]、血清钙[(3.29±0.27)mmol/L比(4.68±0.52)mmol/L,t=3.98,P<0.05]、血清磷[(2.49±0.35)mmol/L比(4.03±0.59)mmol/L,t=4.31,P<0.05]和ALP水平[(78.65±5.23)U/L比(167.35±1.75)U/L,t=4.47,P<0.05]均显著升高;OPG的表达显著降低[(0.68±0.09)比(0.27±0.04),t=3.82,P<0.05],而RANKL的表达显著增加[(0.18±0.02)比(0.66±0.09),t=3.91,P<0.05]。与去卵巢OP模型组比较,NaHS(50、100μmol/kg)组大鼠股骨的BMD显著增加[(0.14±0.01)g/cm2比(0.19±0.02)g/cm2和(0.23±0.03)g/cm2,F=6.42,P<0.05],尿钙[(1.88±0.21)mg/L比(1.39±0.09)mg/L和(0.97±0.09)mg/L,F=4.67,P<0.05]、尿Dpd[(22.34±1.75)nmol/mmol比(18.43±2.04)nmol/mmol和(15.75±1.14)nmol/mmol,F=3.92,P<0.05]、血清钙[(4.68±0.52)mmol/L比(3.98±0.47)mmol/L和(3.56±0.25)mmol/L,F=3.89,P<0.05]、血清磷[(4.03±0.59)mmol/L比(3.11±0.42)mmol/L和(2.68±0.26)mmol/L,F=4.23,P<0.05]和ALP水平[(167.35±1.75)U/L比(115.69±8.72)U/L和(87.61±9.56)U/L,F=4.15,P<0.05]显著降低,OPG的表达显著增加[(0.27±0.04)比(0.48±0.05)和(0.64±0.08),F=4.84,P<0.05],而RANKL的表达显著降低[(0.66±0.09)比(0.37±0.05)和(0.22±0.04),F=5.16,P<0.05]。结论外源性H2S抑制了卵巢切除所引起的OP,其作用机制可能与H2S上调骨组织中OPG的表达而降低RANKL的表达有关。

绝经后骨质疏松患者血清护骨素/细胞核因子κB受体活化因子配基水平与骨硬化蛋白的相关性

目的探讨绝经后骨质疏松患者血清护骨素(OPG)、细胞核因子κB受体活化因子配基(RANKL)及骨硬化蛋白(SOST)水平,评估SOST与OPG/RANKL通路的相关性。方法利用Real-time PCR的方法检测60例绝经后骨质疏松患者(PMOP组)及60例健康受试者(对照组)SOST基因的mRNA水平,ELISA法测定血清OPG、RANKL及SOST水平并做相关性分析。结果 PMOP组SOST基因的mRNA水平较对照组显著升高(P<0.01),患者血清中OPG含量升高,而RANKL水平明显下降。相关性结果显示,SOST与OPG及OPG/RANKL呈正相关(r=0.432、0.413);SOST与RANKL呈负相关(r=-0.370)。结论 PMOP患者血清OPG/RANKL通路的代偿性激活与SOST密切相关。

细胞核因子κB受体活化因子在宫颈鳞癌中的表达及其与临床病理因素和预后的关系

目的:探讨细胞核因子κB受体活化因子(receptor activator of nuclear factor-kappa B,RANK)在宫颈鳞癌中的表达及其与临床病理因素和预后的关系。方法:回顾性分析2012年11月至2015年5月在华中科技大学同济医学院附属协和医院西院妇产科行手术治疗的57例宫颈鳞癌患者,收集其病理及随访资料,采用免疫组织化学法检测宫颈鳞癌及癌旁组织中RANK的表达情况,分析RANK表达与临床病理因素的关系,采用单因素及多因素分析影响宫颈鳞癌患者总生存率及累计复发率的预后因素。结果:肿瘤组织中RANK表达较癌旁组织高(7.263±2.349 vs 5.018±2.303,P<0.001),且RANK高表达与国际妇产科联合会(International Federation of Gynecology and Obstetrics,FIGO)分期(P=0.047)、淋巴结转移(P=0.011)、淋巴脉管浸润(lymph vascular space invasion,LVSI)(P=0.0 0 2)相关;与R N A K低表达组比,R N A K高表达组5年总生存率更低(3 2.1 4%v s 7 9.3 1%,P=0.036),术后5年累计复发率更高(64.29%v s 17.24%,P=0.032);单因素分析示FIG O分期、淋巴结转移及RANK高表达为影响患者总生存率和累计复发率的预后因素(P<0.05)。多因素分析示FIG O分期及R A NK高表达为影响总生存率和累计复发率的预后因素(P<0.05)。结论:R A NK在宫颈鳞癌中高表达,RANK高表达与宫颈癌恶性临床病理因素相关,RANK高表达提示宫颈癌预后不良。

系统性红斑狼疮患者治疗后外周血单个核淋巴细胞B淋巴细胞活化因子和受体表达变化的研究

目的对比治疗前后系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核淋巴细胞(PBMCs)B淋巴细胞活化因子(BAFF)和B淋巴细胞活化因子受体(BAFF-R) mRNA表达水平的变化。方法收集SLE初发患者14例,所有患者SLEDAI评分均大于10分,分别于治疗前和治疗后12周收集血液标本,应用实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测SLE患者外周血PBMCs BAFF和BAFF-R mRNA表达水平。同时,纳入10例健康者进行对照。结果治疗后14例SLE患者SLEDAI评分均低于10分,病情稳定,SLE患者组治疗前、治疗后12周PBMC BAFF和BAFF-R mRNA表达水平与正常对照组相比明显升高(P<0.05)。患者组治疗后12周与治疗前相比PBMC BAFF和BAFF-R mRNA表达水平显著下降(P<0.05)。结论 SLE患者PBMCs BAFF和BAFF-R mRNA表达水平随病情好转而下降,可以作为疾病活动性指标。

Toll样受体2和4在脂多糖诱导人牙周膜成纤维细胞表达细胞核因子-κB受体活化因子配基中的作用

目的观察在脂多糖(LPS)刺激下,人牙周膜成纤维细胞(HPDLFs)中Toll样受体2(TLR2)和Toll样受体4(TLR4)表达水平的抑制对其表达细胞核因子-κB受体活化因子配基(RANKL)的影响。方法选用100 ng.mL-1、1μg.mL-1、10μg.mL-1大肠杆菌LPS分别刺激HPDLFs,刺激6、12、24、48 h后,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HPDLFs表达RANKL的水平。分别运用不同滴度的anti-TLR2+anti-TLR4、anti-TLR2、anti-TLR4抗体预处理HPDLFs,观察1μg.mL-1LPS刺激下,其RANKL表达水平的变化。结果 LPS刺激HPDLFs 6 h后,即可检测到RANKL的表达,24h达到顶峰,然后逐渐下降;各LPS质量浓度组的规律基本一致。分别用anti-TLR2+anti-TLR4、anti-TLR2、anti-TLR4抗体预处理HPDLFs,在1μg.mL-1LPS刺激下,其产生RANKL的水平明显下降(P<0.05);3组中,RANKL的表达水平有明显差异(P<0.05),其中anti-TLR2+anti-TLR4抗体处理组RANKL表达量最少,anti-TLR4抗体处理组次之,anti-TLR2抗体处理组RANKL的表达量最高。结论 TLR2、TLR4均参与了LPS诱导HPDLFs表达RANKL的过程;与anti-TLR2抗体相比,anti-TLR4抗体能更有效地抑制LPS刺激后HPDLFs表达RANKL的能力。

左归丸对去势骨质疏松大鼠钙磷代谢和细胞核因子κB受体活化因子配体/骨保护素的影响

目的探讨左归丸对卵巢摘除大鼠钙磷代谢和细胞核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factorκB ligand,RANKL)/骨保护素(osteoprotegerin,OPG)的影响。方法 SD雌性大鼠60只,采用去卵巢法制备骨质疏松症大鼠模型,将大鼠分为假手术组,切除卵巢组,左归丸低、中、高剂量组,西药对照组(戊酸雌二醇片),每组10只。造模成功12周后给予药物干预,西药对照组给予戊酸雌二醇片0.09 mg/kg灌胃治疗,左归丸低、中、高剂量组按4.75、9.5、19 g/kg灌胃治疗,假手术组和切除卵巢组大鼠给予等体积蒸馏水灌胃,干预4周后股动脉采血处死大鼠。比色分析法检测血清钙(calcium,Ca)、磷(phosphorus,P)含量;ELISA法检测骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、细胞核因子κB受体活化因子(receptor activator of nuclear factorκB,RANK)和RANKL含量;双能X骨密度仪分析测定大鼠股骨的骨密度(bone mineral density,BMD);AG-IX生物力学万能实验机检测最大载荷和弹性模量,比较各组间差异。结果假手术组,切除卵巢组,西药对照组,左归丸高、中、低剂量组的BMD分别为(0.145±0.004)、(0.116±0.007)、(0.146±0.006)、(0.142±0.004)、(0.134±0.002)、(0.129±0.001)g/cm2;这6组的体质量分别为(173.20±13.92)、(264.10±28.61)、(249.44±26.64)、(243.00±10.25)、(253.45±18.19)、(268.50±22.39)g;这6组的子宫指数分别为(1.62±0.34)、(0.45±0.09)、(0.89±0.22)、(1.03±0.23)、(0.91±0.13)、(0.46±0.07)mg/g;这6组Ca、P含量分别为(2.07±0.07/0.30±0.02)、(0.92±0.08/0.10±0.03)、(1.89±0.11/0.22±0.03)、(1.95±0.13/0.27±0.02)、(1.67±0.10/0.19±0.06)、(1.59±0.15/0.12±0.02)mmol/L;这6组OPG、RANKL和RANK含量分别为(755.00±58.05/5.73±0.27/10.68±0.69)、(493.67±36.77/10.24±0.33/18.62±0.74)、(653.00±56.93/7.37±0.19/12.23±0.76)、(731.00±38.49/6.77±0.65/11.52±0.39)、(704.33±62.92/7.97±0.41/14.69±0.86)、(555.00±97.09/9.31±0.75/15.04±0.52)pg/m L;这6组的最大载荷分别为(142.16±0.10)、(86.26±0.13)、(126.43±0.31)、(119.77±0.74)、(111.96±1.57)、(98.92±1.44)N;这6组弹性模量分别为(19.48±0.24)、(13.10±0.43)、(16.70±0.37)、(16.17±0.15)、(15.99±0.22)、(14.98±0.15)MPa。与假手术组比较,切除卵巢组大鼠的BMD、Ca、P、OPG、最大载荷和弹性模量水平均显著降低,而RANK和RANKL含量均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与切除卵巢组相比,左归丸各剂量干预组和西药对照组大鼠BMD和弹性模量均显著升高,RANK和RANKL含量明显降低,左归丸中、高剂量组和切除卵巢+西药对照组Ca、P、OPG含量和最大载荷显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论左归丸能升高去卵巢大鼠的骨密度,提高骨强度,并改善其力学性能,其机制可能与调节RANKL/OPG水平和Ca、P代谢有关。

破骨细胞核因子κB受体活化因子配体和骨保护素在根尖周囊肿和肉芽肿中的表达及意义

目的检测破骨细胞核因子κB受体活化因子配体(RANKL)和骨保护素(OPG)在根尖周囊肿及根尖周肉芽肿中的表达水平,探讨RANKL和OPG在不同根尖周疾病周围骨质破坏机制中的作用。方法收集根尖周囊肿组织20例为囊肿组,根尖周肉芽肿组织20例为肉芽肿组,正常牙的牙周膜组织20例为对照组。采用免疫组织化学法检测RANKL和OPG在根尖周囊肿、根尖周肉芽肿和正常牙周膜组织中的阳性表达。结果在囊肿组、肉芽肿组、对照组中,RANKL的表达分别为75.00±7.54、68.40±6.74和29.40±2.46,OPG的表达分别为38.10±7.09、47.65±13.85和58.60±5.88,3组间的差异均有统计学意义(P<0.01)。相关性分析表明,囊肿组中RANKL与OPG呈负相关关系(r=-0.56,P=0.01),肉芽肿组和对照组中RANKL和OPG无相关关系(P>0.05)。结论 RANKL与OPG参与了根尖周病变引起的骨吸收过程。在根尖周病变中,RANKL和OPG的表达失调,RANKL增加而OPG减少,骨吸收活跃,导致溶骨性病变。根尖周囊肿的骨吸收活动较根尖周肉芽肿更活跃。

丹参素对牙槽骨成骨细胞细胞核因子-κB受体活化因子配体/骨保护素表达的影响研究

目的:探讨丹参素对大鼠牙槽骨成骨细胞的细胞核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)和骨保护素(osteoprotegerin,OPG)表达的影响。方法:采用体外牙槽骨成骨细胞培养,用含不同浓度(0.10、0.50、1.00、5.00 mg/L)的丹参素血清分别作用于第4代牙槽骨成骨细胞,培养1、3和5 d后,分别通过噻唑蓝(methyl thiazol tetrazolium,MTT)、逆转录-聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)和Western blot法检测成骨细胞增殖率、OGP和RANKL mRNA及蛋白表达水平。结果:丹参素对牙槽骨成骨细胞增殖的影响随药物浓度和时间变化而改变,其中含5.00 mg/L丹参素的血清作用3 d后牙槽骨成骨细胞增殖率最高,OGP mRNA和蛋白表达增加( P <0.05)。结论:丹参素能通过增加OGP mRNA和蛋白表达进而促进牙槽骨成骨细胞增殖。

磁共振成像联合血清细胞核因子κB受体活化因子配体护骨素水平对类风湿关节炎诊断和治疗的有效性分析

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是以周围关节骨质损害为特征的全身性自身免疫疾病,其临床特征表现为对称性累及多个周围关节疼痛、肿胀和功能低下,其主要病理特征为慢性的关节滑膜炎症浸润软骨和骨组织,导致骨关节破坏[1]。调查发现,全球RA发病率约0.5%~1.2%,我国RA发病率约0.28%,致残率高达30%~50%,是导致人类劳动能力丧失和残疾的主要疾病[2,3]。

核因子κB受体活化因子配体、护骨素在不同年龄男性下颌骨的表达

目的:观察核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、护骨素(OPG)在不同年龄男性下颌骨的表达。探讨RANKL、OPG与男性牙槽骨骨质疏松的关系。方法:选取湘雅医院2008年5月—2009年7月口腔门诊拔牙去骨及病房正颌外科手术男性患者46例。排除牙周病、影响骨代谢的全身系统性疾病及药物服用史,无抽烟、酗酒等不良生活习惯。分为3组,其中青少年组10～29岁,17例,中年组30～59岁,15例,老年组60～89岁,14例。采用RT-PCR方法,观察下颌骨RANKL、OPG的表达。采用SPSS16.0软件包对数据进行总体方差分析和组间比较。结果:①与青少年组相比,中年组和老年组RANKL mRNA分别升高2.1倍和5.3倍,OPG mRNA分别升高3.3倍和4.8倍,差异具有显著性(P<0.05)。RANKL和OPG值与年龄呈正相关。②中年组RANKL/OPG比值低于青少年组和老年组,差异无显著性(P>0.05)。结论:①男性下颌骨RANKL mRNA和OPG mRNA水平随年龄增长而升高,RANKL和OPG值与年龄呈正相关。②中年组颌骨改建活跃,与青少年组相比,骨形成大于骨吸收;③老年组颌骨吸收与骨形成均处于低水平,骨吸收大于骨形成。

多发性骨髓瘤患者骨髓中BAFF的含量及B细胞表面BAFF受体表达的研究

本研究旨在分析多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓中B细胞活化因子(BAFF)、增殖诱导配体(APRIL)的含量,B细胞、初始B细胞和记忆B细胞表面BAFF受体的表达,以探讨MM骨髓中B细胞的特点。采用流式细胞术检测19例初治MM(初治组)、17例平台期MM(平台期组)、10例对照组骨髓中B细胞(CD19+)、初始B细胞(CD19+IgD+)、记忆B细胞(CD19+CD27+)的表面BAFF受体(BAFF-R、TACI)的表达,ELISA法测定各组骨髓上清中BAFF、APRIL的含量。分析各组结果数据的差异及它们之间的相互关系。结果表明,初治组患者CD19+细胞表面BAFF-R受体表达明显高于平台期组和对照组;初治组患者CD19+IgD+细胞表面BAFF-R受体表达与平台期组无差别,但明显高于对照组;初治组患者CD19+CD27+细胞表面BAFF-R受体表达明显高于平台期组和对照组;各种B细胞表面BAFF-R受体表达在平台期组与对照组之间无差别;TACI受体表达总体水平低,初治组患者与平台期组、对照组比较,CD19+细胞、CD19+IgD+细胞、CD19+CD27+细胞表面TACI受体表达均无明显差异;初治组骨髓上清中BAFF含量明显高于平台期组和对照组,但平台期组与对照组间无明显差异;各组骨髓中APRIL的含量均无明显差异。结论:MM患者骨髓中BAFF含量增高,CD19+细胞、CD19+IgD+细胞和CD19+CD27+细胞表面BAFF受体的表达均增加,这可能有助于促进B细胞的增殖,因而可能与MM发病机制有关。

BAFF及其特异性受体BAFF—R对多发性骨髓瘤细胞增殖及凋亡的影响研究

目的探讨B淋巴细胞刺激因子（BAFF）及其特异性受体BAFF—R对多发性骨髓瘤（MM）细胞增殖及凋亡的影响。方法采用流式细胞术（FCM）、RT—PCR、WesternBlot、荧光免疫细胞化学技术检测BAFF及其受体BAFF—R的表达与定位；wsT细胞增殖实验及TUNEL法检测BAFF及其受体BAFF—R对MM肿瘤细胞生长、存活与凋亡的影响。结果①MM细胞能够表达BAFF及其特异性受体BAFF—R；②BAFF及其受体BAFF—R定位表达于KM3细胞的浆膜上；③BAFF及其受体BAFF—R促进MM细胞的增殖、存活，抗细胞凋亡。结论BAFF及其受体BAFF—R对于骨髓瘤发生、发展可能起着重要的作用。

BAFF受体在人B淋巴瘤细胞中的作用研究

目的测定B细胞活化因子(BAFF)受体在人B淋巴瘤细胞中的表达水平,探讨B细胞活化因子受体(BAFF-R)信号转导在人淋巴瘤细胞中的作用。方法选取3种人B淋巴瘤细胞系Raji、Daudi、BALL-1,通过流式细胞术、实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)及Western blot检测BAFF的表达。结果流式细胞术结果显示,在3种人B淋巴瘤细胞系中均检出BAFF-R阳性表达,q RT-PCR和Western blot检测显示,在3种人B淋巴瘤细胞系中,BAFF-R基因与蛋白表达水平上调。结论人B淋巴瘤细胞系Raji、Daudi、BALL-1呈阳性表达,BAFF-R与B淋巴瘤细胞的生长、增殖关系密切。

脉冲电磁场对卵巢切除大鼠骨组织活化T细胞核因子2和空泡型V-ATP酶mRNA表达的影响

目的:探讨脉冲电磁场(pulsed electromagnetic fileds,PEMF)对卵巢切除(ovariectomized,OVX)大鼠骨组织细胞核因子κB受体活化因子(receptor activator of NF-κB,RANK),活化T细胞核因子2(nuclear factor of activated T2,NFAT2)和空泡型V-ATP酶(vavcuolar H+-ATPase,V-ATP)表达的影响。方法:将48只SD大鼠随机分为假手术组(SHAM),卵巢切除组(OVX),卵巢切除+脉冲电磁场治疗组(OVX+PEMF)。OVX+PEMF组大鼠在频率8Hz,磁场强度3.8m T的PEMF下每天干预40min,干预8周和16周后检测大鼠骨密度和骨组织RANK,NFAT2和V-ATP的mRNA表达水平。结果:OVX组BMD在第8周(P<0.05)和第16周(P<0.001)均低于SHAM组。SHAM组与OVX组比较,8周时RANK表达P>0.05,而SHAM组NFAT2与V-ATP表达均低于OVX组(P<0.05,P<0.01);16周时RANK、NFAT2、VATP在OVX组表达升高(均P<0.01)。SHAM组与OVX+PEMF组比较,8周时两组RANK、NFAT2、V-ATP表达P>0.05;16周时OVX+PEMF组RANK和NFAT2表达均高于SHAM组(均P<0.01),而两组V-ATP表达P>0.05。OVX组与OVX+PEMF组相比,8周时两组RANK和V-ATP表达均P>0.05,OVX+PEMF组NFAT2表达低于OVX组(P<0.05);第16周时两组RANK表达P>0.05,NFAT2和V-ATP在OVX+PEMF组的表达均下降(P<0.01,P<0.05)。结论:PEMF可通过下调OVX大鼠骨组织中NFAT2和V-ATPmRNA的表达从而抑制破骨细胞的骨吸收,进而延缓OVX大鼠的骨丢失。

B细胞活化因子及其特异性受体BAFF-R在B细胞性非霍奇金淋巴瘤中的表达及其意义

目的探讨B细胞活化因子（BAFF）及其特异性受体BAFF-R在B细胞性非霍奇金淋巴瘤（B-NHL）中的表达及其意义。方法ELISA及荧光定量-聚合酶链反应（RTQ-PCR）测定临床标本BAFF及其特异性受体BAFF-R蛋白与mRNA的表达水平；RT—PCR、Western blot、荧光免疫细胞化学法和激光共聚焦技术鉴定人Burkitt’s 淋巴瘤细胞Raji中BAFF及BAFF-R的表达与定位；运用免疫组化的方法分析B—NHL患者肿瘤组织中BAFF的表达；WST细胞增殖试验及TUNEL法检测BAFF及其受体BAFF-R对B—NHLRaji细胞生长、存活与凋亡的影响。直线相关分析LDH浓度与BAFF蛋白及mRNA表达水平的关系。结果（1）B-NHL患者BAFF蛋白或mRNA表达水平显著高于正常对照组（P〈0．01）；（2）Raji细胞表达BAFF及其受体BAFF-R，并定位表达于Raji细胞的质膜上；（3）BAFF在B—NHL患者的表达量与B—NHL组织亚型有关，BAFF在小B细胞恶性淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、黏膜相关淋巴瘤和滤泡性淋巴瘤中表达量较高，而在套细胞淋巴瘤中表达量较低。（4）BAFF促进Raji细胞的生长与存活；（5）直线相关分析显示乳酸脱氢酶（LDH）与BAFF蛋白及mRNA表达水平呈显著相关性。结论BAFF及其特异性受体BAFF-R对于B—NHL的发生、发展起着重要的作用。

免疫性血小板减少症患者中B细胞活化因子及其受体与白细胞介素-21变化及相关性分析

目的:检测免疫性血小板减少症(ITP)患者中B细胞活化因子(BAFF)、BAFF受体(BAFF-R)及白细胞介素-21(IL-21)的表达,并进行相关性分析,进一步探讨其临床意义。方法:应用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测18例ITP患者和15例对照者血浆BAFF和IL-21的表达;应用流式细胞术检测CD19+细胞上BAFF-R的表达及CD3+CD8-IL-21+和CD3+CD8+IL-21+细胞的比例。结果:活动性ITP患者血浆BAFF和IL-21水平均明显高于对照者[(589.9±201.9)pg/ml∶(424.5±164.2)pg/ml,(156.8±112.0)pg/ml∶(82.0±27.0)pg/ml,均P<0.05]。CD19+细胞均表达BAFF-R,且ITP患者中BAFF-R表达明显低于对照者[(45.1±10.4)∶(71.2±18.8),P<0.01]。发现IL-21表达于CD3+CD8-细胞和CD3+CD8+细胞上,ITP患者中CD3+CD8-IL-21+细胞亚群比例、CD3+CD8+IL-21+细胞亚群比例均显著高于对照者[(4.3±1.0)%∶(2.9±1.4)%,(1.0±0.6)%∶(0.6±0.3)%,均P<0.05]。血浆BAFF与IL-21存在正相关(P<0.01),BAFF-R与IL-21存在负相关(P<0.05)。结论:ITP患者中BAFF、IL-21表达均升高,且两者血浆水平之间存在正相关,BAFF-R与IL-21存在负相关,提示BAFF/BAFF-R信号通路与IL-21在ITP的发病中发挥重要作用。

BAFF及受体BAFF-R在Ⅰ型自身免疫性肝炎中的表达及其临床意义

目的:探讨外周血B淋巴细胞活化因子(BAFF)和B淋巴细胞活化因子受体(BAFF-R)之间的相关性以及两者与I型自身免疫性肝炎(AIH-I)患者临床特征的关系.方法:检测30例AIH-I患者治疗前后外周血BAFF(酶联免疫吸附法)及BAFF-R(流式细胞仪)的表达水平和30名健康志愿者外周血中二者的表达水平,同时收集实验对象相应的IgG、ALT、AST、GLO、CRP检查结果,通过SPSS统计软件进行分析.结果:AIH-I患者外周血BAFF及BAFF-R水平较正常对照组有统计学差异(747.83ngL±66.96ngLvs203.50ngL±43.99ngL;18.78%±5.08%vs1.98%±0.89%,均P<0.05);AIH-I患者外周血BAFF与BAFF-R水平呈正相关(P<0.05);AIH-I患者外周血BAFF及BAFF-R水平在治疗前后有统计学差异(747.83ngL±66.96ngLvs582.83ngL±51.89ngL;18.78%±5.08%vs9.93%±3.53%,均P<0.05);AIH-I患者外周血BAFF及BAFF-R水平与疾病活动指标(IgG、ALT、AST、GLO、CRP)水平无明显相关(均P>0.05).结论:AIH-I患者外周血BAFF与BAFF-R水平明显升高,激素治疗前后差异显著,二者与疾病的发展过程相关,对评价疾病的治疗具有一定的指导意义.

类风湿关节炎患者B细胞亚群分析及表没食子儿茶素没食子酸酯对B细胞亚群的影响

目的·探讨类风湿关节炎(rhumatoid arthritis,RA)患者B细胞亚群特点及表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechingallate,EGCG)对RA患者B细胞亚群的调节作用。方法·纳入年龄、性别匹配的RA患者和健康对照各29例,运用配对t检验分析2组外周血中B细胞亚群的差异;根据28关节疾病活动评分(disease activity score in 28 joints,DAS28)的值将RA患者分为活动组(2.6≤DAS28<5.1)和高度活动组(DAS28≥5.1),运用t检验分析2组外周血中B细胞亚群的差异。在0、10、100μmol/L EGCG和2.5μg/L葡萄球菌A蛋白共刺激条件下,体外培养RA患者外周血单个核细胞,24 h后应用实时聚合酶链反应检测B细胞活化因子受体(B-cell-activating factor receptor,BAFF-R)的表达水平,48 h后用流式细胞术检测B细胞亚群。结果·RA患者的总B细胞、未分化B细胞、记忆B细胞和浆母细胞占淋巴细胞比例和数量均高于健康对照(P<0.05),而CD19^+IL-10^+调节性B细胞(regulatory B cell,Breg)占淋巴细胞比例和数量与健康对照相比差异无统计学意义(P>0.05)。10例活动组与19例高度活动组RA患者的总B细胞及各B细胞亚群(除CD19^+IL-10^+Breg外)占淋巴细胞比例和数量的差异无统计学意义(P>0.05),6例活动组与12例高度活动组RA患者CD19^+IL-10^+Breg占淋巴细胞比例和数量的差异也无统计学意义(P>0.05)。RA患者外周血总B细胞所占比例与IgG型类风湿因子呈弱正相关(r=0.308)。EGCG能显著提高CD19^+IL-10^+Breg占淋巴细胞比例(P<0.05),且100μmol/L EGCG能显著降低总B细胞中BAFF-R mRNA的表达水平(P=0.000);但其对未分化B细胞、记忆B细胞和浆母细胞占淋巴细胞比例无显著影响(P>0.05)。结论·B细胞可能在RA发病中发挥辅助作用,RA患者CD19+IL-10+Breg数量反馈性增加,EGCG可促进Breg增殖,降低BAFF-R mRNA表达水平。