Caspase-9和CMYC在弥漫性大B细胞淋巴瘤中的表达及与患者病理特征和预后的关系

目的探讨半胱氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)和细胞性骨髓细胞瘤病病毒癌基因(CMYC)在弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)组织中的表达及其与患者病理特征和预后的关系。方法选取2017年2月至2020年2月周口市中心医院收治的60例DLBCL患者纳入研究,比较DLBCL肿瘤组织及病灶旁正常组织的Caspase-9、CMYC表达水平,分析Caspase-9、CMYC表达与临床病理特征的关系,比较预后良好和预后不良患者的临床病理特征、Caspase-9、CMYC表达水平,采用二元Logistic回归分析DLBCL患者预后不良的影响因素。结果DLBCL患者肿瘤组织中Caspase-9阳性率为43.33%,明显低于正常组织的80.56%,CMYC阳性率为36.67%,明显高于正常组织的13.88%,差异均有统计学意义(P<0.05);Ann Arbor分期Ⅰ~Ⅱ期、国际预后指数(IPI)评分0~2分患者DLBCL肿瘤组织Caspase-9阳性率明显高于Ⅲ~Ⅳ期和3~4分患者,CMYC阳性率低于Ⅲ~Ⅳ期、3~4分患者,差异均有统计学意义(P<0.05);预后不良患者Ann Arbor分期中Ⅲ~Ⅳ期占比、IPI评分中3~4分占比、CMYC阳性表达占比分别为73.08%、65.38%、69.23%,均高于预后良好组的35.29%、32.35%、11.76%,Caspase-9阳性表达占比为23.08%,低于预后良好组的58.82%,差异均有统计学意义(P<0.05);Ann Arbor分期、IPI评分、Caspase-9、CMYC均为影响DLBCL患者预后不良的独立影响因素(P<0.05),其中Ann Arbor分期Ⅲ~Ⅳ期预后不良风险是Ⅰ~Ⅱ期的9.008倍;IPI评分3~4分预后不良风险是0~2分的10.298倍;Caspase-9表达阳性预后不良风险是阴性的0.622倍;CMYC表达阳性预后不良风险是阴性的19.922倍。结论Caspase-9、CMYC异常表达参与DLBCL的进展,与肿瘤恶性程度有关,且Caspase-9、CMYC异常表达是DLBCL预后不良的独立影响因素,对DLBCL预后具有一定的预测价值,可作为预测DLBCL患者预后的参考指标。

长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18通过微RNA-497-5p/细胞周期蛋白E1轴调节弥漫性大B细胞淋巴瘤的增殖、凋亡和侵袭

目的 探讨长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18(lncRNA HCG18)调控微RNA-497-5p(miR-497-5p)/细胞周期蛋白E1(CCNE1)轴对弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白质印迹法分别检测2018年5月至2021年5月收集的恩施土家族苗族自治州中心医院DLBCL病人淋巴组织、良性淋巴结增生病人的淋巴组织、人正常B细胞永生化细胞HMy2.CIR、DLBCL细胞系SU-DHL-1、OCI-LY8、U2932中HCG18、miR-497-5p表达及CCNE1蛋白表达,将OCI-LY8细胞分为Ct组(正常培养的OCI-LY8细胞)、pcDNA组(细胞转染过表达物阴性对照)、pcDNA-HCG18组(细胞转染HCG18过表达物)、si-NC组(细胞转染小干扰RNA阴性对照)、si-HCG18组(细胞转染HCG18小干扰RNA)、si-HCG18+inhibitorNC组(细胞转染HCG18小干扰RNA和抑制物阴性对照)、si-HCG18+miR-497-5p inhibitor组(细胞转染HCG18小干扰RNA和miR-497-5p抑制物),CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell检测细胞侵袭,蛋白质印迹法检测CCNE1、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达,双萤光素酶验证HCG18与miR-497-5p、miR-497-5p与CCNE1的关系。结果 在DLBCL淋巴组织和细胞中,HCG18、CCNE1蛋白高表达,miR-497-5p低表达,且在OCI-LY8细胞中HCG18、CCNE1蛋白表达上调最高,miR-497-5p表达下调最多(P<0.05),因此,以OCI-LY8细胞进行后续研究,与si-NC组比较,si-HCG18组HCG18(0.26±0.03比1.01±0.01)、CCNE1蛋白(0.45±0.03比1.44±0.19)表达降低,miR-497-5p(1.95±0.14比1.03±0.02)表达升高(P<0.05),与pcDNA组比较,pcDNA-HCG18组HCG18(1.96±0.23比1.02±0.01)、CCNE1蛋白(2.33±0.21比1.42±0.18)表达升高,miR-497-5p(0.28±0.02比1.02±0.02)表达降低(P<0.05),与siHCG18组、si-HCG18+inhibitor NC组比较,miR-497-5p表达降低(1.21±0.09比1.95±0.14、1.94±0.13),CCNE1蛋白(0.87±0.08比0.45±0.03、0.44±0.04)表达上调(P<0.05),沉默HCG18可抑制OCI-LY8细胞增殖、侵袭行为及PCNA、MMP-9蛋白表达,诱导细胞凋亡及Bax蛋白表达,而上调HCG18则呈相反趋势,下调miR-497-5p逆转了沉默HCG18对OCI-LY8细胞增殖、侵袭、凋亡的影响,HCG18靶向调控miR-497-5p/CCNE1。结论 沉默HCG18可能通过调控miR-497-5p/CCNE1抑制OCI-LY8细胞增殖、侵袭,诱导细胞凋亡。

Ywhab通过靶向Hsp90aa1抑制小鼠B细胞淋巴瘤38B9细胞生长

目的:研究Ywhab在小鼠B细胞淋巴瘤发生发展中的作用,并探讨其可能的分子机制。方法:使用生物信息学分析Ywhab与弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的相关性。在小鼠B细胞淋巴瘤38B9细胞中感染逆转录病毒构建Ywhab基因过表达细胞系,并采用RT-qPCR和Western blot验证Ywhab的mRNA及蛋白(14-3-3β)水平;通过细胞计数法、CCK-8法和小鼠皮下成瘤实验检测Ywhab过表达对38B9细胞在体内外生长的影响;RT-qPCR和Western blot检测细胞凋亡相关蛋白的表达;应用蛋白质免疫共沉淀联合蛋白质谱(CoIP-MS)筛选与14-3-3β特异性结合的蛋白并采用Western blot及分子对接分析进行验证。结果:Ywhab基因在DLBCL中低表达,其低表达预示DLBCL患者的临床预后较差。与正常小鼠骨髓B细胞相比,Ywhab在38B9细胞中低表达。Ywhab过表达能在体内外诱导38B9细胞凋亡,促进凋亡蛋白Puma、Noxa和Bax的mRNA及蛋白表达,抑制抗凋亡蛋白Bcl2的mRNA及蛋白表达(P<0.05)。14-3-3β蛋白能特异性结合Hsp90aa1蛋白并抑制其表达,从而促进38B9细胞凋亡。结论:Ywhab能够显著诱导小鼠B细胞淋巴瘤38B9细胞凋亡,其机制可能是通过靶向抑制Hsp90aa1蛋白表达来实现的。

舌鳞状细胞癌组织中COX-2、VEGF、MMP-9和Bcl-2表达水平及临床意义

目的观察舌鳞状细胞癌患者癌组织中环氧化酶-2(COX-2)、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的表达水平,并探讨其临床意义。方法选取2014年2月—2016年2月手术切除的40例舌鳞状细胞癌标本作为观察组,另选取同期40例正常舌黏膜组织标本作为对照组。检测2组COX-2、VEGF、MMP-9和Bcl-2表达水平,分析其与舌鳞状细胞癌临床病理参数的关系以及4种蛋白表达的相关性。结果观察组COX-2、VEGF、MMP-9和Bcl-2蛋白阳性表达率高于对照组(P<0.01)。COX-2在有淋巴结转移组织中的阳性表达率高于无淋巴结转移组织(P<0.05);VEGF、MMP-9与Bcl-2在有淋巴结转移与临床分期Ⅲ+Ⅳ期组织中的阳性表达率高于无淋巴结转移与临床分期Ⅰ+Ⅱ期的组织(P<0.05)。COX-2、VEGF、MMP-9、Bcl-2表达水平均呈正相关(P<0.05,P<0.01)。结论 COX-2、VEGF、MMP-9和Bcl-2蛋白参与舌鳞状细胞癌的生长、转移与侵袭,且四者间可能存在相互协同的作用。

Caspase-9、Bcl-2和Bax在基底细胞样乳腺癌组织中的表达及意义

目的探讨半胱天冬氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)、B淋巴细胞瘤/白血病-2(Bcl-2)基因、Bcl-2同源拮抗蛋白/致死蛋白(Bax)基因在基底细胞样乳腺癌(BLBC)发生、发展中的作用。方法采用免疫组化法检测43例BLBC标本(BLBC组)、57例非BLBC乳腺癌标本(非BLBC组)及60例正常乳腺组织标本(正常组)Caspase-9、Bcl-2及Bax蛋白的表达水平,分析三者表达的相关性及其与BLBC临床病理特征的关系。结果 BLBC组、非BLBC组Bcl-2表达率均明显高于正常组,Caspase-9和Bax表达率均低于正常组,P均<0.05;Caspase-9、Bcl-2及Bax表达与BLBC淋巴结转移及临床分期相关,与年龄、肿瘤大小无关,Caspase-9与Bax表达呈正相关(r=0.572,P<0.05),Caspase-9与Bcl-2、Bax与Bcl-2表达均呈负相关(r=-0.381,r=-0.408,P<0.05)。结论 Caspase-9与Bax在BLBC组织中均呈低表达,Bcl-2呈高表达;三者在BLBC的发生、发展中共同发挥作用。

MMP-9和NF-κB在视网膜母细胞瘤中的表达

目的:研究基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)和核转录因子-κB(nuclear factor of κB,NF-κB)在视网膜母细胞瘤(Retinoblastoma,RB)中的表达及与RB分化程度和视神经浸润的关系,探讨它们在RB浸润、转移过程中的作用。方法:应用MMP-9和NF-κB单克隆抗体,采用免疫组织化学方法,对47例RB患者石蜡包埋标本进行MMP-9和NF-κB表达的测定,数据进行统计学分析。结果:(1)47例RB中MMP-9阳性表达率为46.8%,与RB的分化程度(P<0.05)及有无视神经浸润(P<0.05)相关。(2)NF-κB在RB组织中阳性表达率为63.8%,与RB的分化程度相关(P<0.05),与有无视神经浸润无相关性(P>0.05)。(3)RB中NF-κB的表达与MMP-9的表达有相关性(P<0.05)。结论:RB组织中MMP-9高表达。NF-κB在RB中被激活。RB中NF-κB表达与MMP-9表达相关,NF-κB激活后可能通过上调MMP-9的表达促进RB的浸润、转移。二者表达的检测可以作为反映RB浸润、转移潜能的生物学指标,有助于筛选转移高危病例。

血清Bcl-2、IGF-1、CA19-9水平联合检测对食管癌的诊断价值

目的:分析血清B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、糖类抗原19-9(CA19-9)水平联合检测对食管癌的诊断价值。方法:回顾性分析2020年1月至2023年8月该院收治的126例疑似食管癌患者的临床资料。所有患者均接受血清学检测和内镜下病理活检,比较良恶性患者及不同病理特征食管癌患者的血清Bcl-2、IGF-1、CA19-9水平。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清Bcl-2、IGF-1、CA19-9水平单项及联合检测对食管癌的诊断价值。结果:126例疑似食管癌患者中,病理学检出恶性肿瘤(食管癌)70例,其中鳞癌54例,腺癌16例;良性病变56例,其中不典型增生37例,平滑肌瘤19例。恶性患者血清Bcl-2、IGF-1、CA19-9水平均高于良性患者,高分期、低分化、有淋巴结转移的食管癌患者血清Bcl-2、IGF-1、CA19-9水平高于低分期、中高分化、无淋巴结转移的患者,差异均有统计学意义(P<0.05);ROC曲线分析结果显示,血清Bcl-2、IGF-1、CA19-9水平单项及联合检测诊断食管癌的曲线下面积分别为0.802、0.836、0.767、0.918,联合检测的诊断价值高于单一指标检测。结论:血清Bcl-2、IGF-1、CA19-9水平联合检测诊断食管癌的价值高于单一指标检测。

湿润烧伤膏对糖尿病足创面组织中MMP-2、MMP-9、Bcl-2、Bax水平的影响

目的探讨湿润烧伤膏(MEBO)对糖尿病足创面组织中基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)水平的影响。方法选取2020年5月至2022年5月郑州大学附属郑州中心医院收治的55例糖尿病足患者作为研究对象,按照不同治疗方法将其分为MEBO组(35例)和VSD组(20例),MEBO组患者局部创面采用MEBO治疗,VSD组患者局部创面采用负压封闭引流(VSD)治疗,对比观察两组患者创面面积,创面组织中MMP-2、MMP-9、Bcl-2、Bax水平及临床疗效。结果治疗第7、21天,MEBO组患者创面面积均明显小于VSD组(t=2.719、5.268,P=0.009、P<0.001),创面组织中MMP-2、MMP-9、Bax水平均明显低于VSD组(MMP-2:t=2.138、2.202,P=0.037、0.032;MMP-9:t=2.129、2.476,P=0.038、0.017;Bax:t=3.623、3.038,P=0.001、0.004),Bcl-2水平均明显高于VSD组(t=2.040、3.054,P=0.046、0.004);治疗21 d后,MEBO组患者中显效23例、有效10例、无效2例,明显优于VSD组患者的显效8例、有效7例、无效5例(Z=-2.126,P=0.033)。结论MEBO可通过降低糖尿病足创面组织中MMP-2、MMP-9、Bax水平以及提高Bcl-2水平促进创面愈合。

MMP-9及HIF-1α在鼻NK/T细胞淋巴瘤表达中的作用研究

目的：研究鼻NK/T细胞淋巴瘤组织中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、缺氧诱导因子-1ɑ（HIF-1ɑ）的表达情况及其与患者临床病理特征的关系。方法：选取右江民族医学院附属医院经病理检查确诊为鼻NK/T细胞淋巴瘤患者,收集病理组织蜡块标本46例（病例组）、同期内镜检查取鼻甲黏膜组织经病理学证实为黏膜慢性炎症标本20例（对照组）,分别采用HE染色法和免疫组织化学法处理两组标本,观察两组标本的病理形态、MMP-9及HIF-1ɑ的表达差异,并分析其与患者临床病理特征的关系。结果：病例组的HIF-1α表达阳性率67.39%（31/46）、对照组表达阳性率为6.52%（3/20）,病例组的HIF-1ɑ表达显著的高于对照组（P〈0.05）。病例组的MMP-9表达阳性率71.74%（33/46）、对照组表达阳性率为6.52%（3/20）,病例组的MMP-9表达显著的高于对照组（P〈0.05）。HIF-1ɑ、MMP-9在阳性表达在Ann Arbor分期（Ⅲ～Ⅳ期）、发生淋巴结转移、血管浸润鼻NK/T细胞淋巴瘤患者的患者组织中出现高表达（P〈0.05）。结论：鼻NK/T细胞淋巴瘤患者组织中HIF-1α、MMP-9呈现高表达,并且与患者发生Ann Arbor分期（Ⅲ～Ⅳ期）、发生淋巴结转移、血管浸润具有一定的关系。

生长抑素对急性胰腺炎患者外周血单核细胞CARD9、BCL-10水平的影响

目的分析生长抑素对急性胰腺炎患者外周血单核细胞胱天蛋白酶募集域蛋白9(CARD9)、B细胞淋巴瘤因子-10(BCL-10)水平的影响。方法124例急性胰腺炎患者依据随机数字表法分为2组,对照组(n=62)行常规治疗方案,研究组(n=62)在常规治疗的基础上使用生长抑素。比较2组外周血单核细胞CARD9、BCL-10水平、炎性因子、胰腺体部血流指标、血清胰腺消化酶水平。结果2组治疗后外周血单核细胞CARD9、BCL-10水平均明显低于治疗前(P<0.05),且研究组外周血单核细胞CARD9、BCL-10水平低于对照组(P<0.05);2组治疗后血肿瘤坏死因子、白介素-6、血白细胞水平均明显低于治疗前(P<0.05),且研究组血肿瘤坏死因子、白细胞介素-6、血白细胞水平低于对照组(P<0.05);2组治疗后血流量、血容量水平均明显高于治疗前(P<0.05),毛细血管表面通透性明显低于治疗前(P<0.05),且研究组血流量、血容量水平高于对照组(P<0.05),毛细血管表面通透性水平低于对照组(P<0.05);2组治疗后胰蛋白酶原2、胰淀粉酶、胰脂肪酶水平均明显低于治疗前(P<0.05),且研究组胰蛋白酶原2、胰淀粉酶、胰脂肪酶水平低于对照组(P<0.05)。结论急性胰腺炎患者在接受常规治疗基础上应用生长抑素,对外周血单核细胞CARD9、BCL-10水平的调节作用较为明显,可有效减轻炎症,改善胰腺血流、消化功能。

淋巴瘤细胞AXIN、β-catenin、MMP7和MMP9 mRNA、蛋白表达水平及相互关系探讨

目的:探讨淋巴瘤细胞轴抑制因子(AXIN)、β-链蛋白(β-catenin)、基质金属蛋白酶-7(MMP-7)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA及其蛋白表达水平和相互关系。方法:应用Western blot及RT-PCR法测定多株淋巴瘤细胞中MMP-7、MMP-9、β-catenin和AXIN的表达。对AXIN相对低表达的淋巴瘤细胞进行分组,然后用pcDNA5-His-β-catenin及pCMV5-HA-AXIN进行瞬时转染,用Western blot及RT-PCR法测定淋巴瘤细胞中MMP-7、MMP-9、β-catenin蛋白及其mRNA表达。通过Transwell浸润实验分析AXIN稳定高表达组、干扰AXIN稳定高表达组、空白对照组细胞浸润和迁移能力。结果:多株淋巴瘤细胞株AXIN与MMP-7、MMP-9和β-catenin表达存在负相关关系。人恶性B淋巴瘤细胞株Raji在AXIN表达上调后,MMP-7、MMP-9和β-catenin mRNA表达均无明显改变,而MMP-7、MMP-9和β-catenin蛋白表达均明显下调(P<0.05)。在β-catenin表达上调后,MMP-7、MMP-9蛋白及其mRNA均明显上调(P<0.05)。干扰AXIN稳定高表达组细胞的AXIN后,MMP-7、MMP-9和β-catenin mRNA表达均无明显改变,而MMP-7、MMP-9和β-catenin蛋白表达均明显上调(P<0.05)。干扰AXIN稳定高表达组细胞的β-catenin后,MMP-7和MMP-9蛋白及其mRNA表达均明显下调(P<0.05)。结论:淋巴瘤细胞AXIN表达上调可导致β-catenin表达降低,进而MMP-7和MMP-9表达明显降低,从而起到阻滞淋巴瘤细胞浸润及迁移的作用。

弥漫性大B细胞淋巴瘤患者组织中CXCL9、CXCR3表达与临床病理特征及预后的关系

目的探究弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者组织中趋化因子9(CXCL9)及其受体CXCR3的表达水平与临床病理特征及预后的关系。方法收集2015年1月~2016年1月在我院采用R-CHOP化疗方案治疗的92例DLBCL患者,均通过淋巴结活检获取DLBCL肿瘤组织标本,及50例病灶旁正常淋巴组织标本。利用癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析CXCL9、CXCR3基因在DLBCL肿瘤组织和正常淋巴组织中的表达情况,并利用免疫组化分析CXCL9、CXCR3蛋白在DLBCL肿瘤组织和正常淋巴组织中的阳性表达情况;分析CXCL9、CXCR3蛋白表达水平与临床病理特征及预后的关系。采用Kaplan-Meier法分析CXCL9、CXCR3蛋白表达水平与DLBCL复发的关系,采用COX回归分析影响DLBCL患者复发的危险因素。结果TCGA数据库中CXCL9、CXCR3基因在DLBCL肿瘤组织中表达水平与正常淋巴组织比较差异有统计学意义(P<0.05)。CXCL9、CXCR3蛋白在DLBCL肿瘤组织中的阳性表达率明显高于正常组织(P<0.05)。DLBCL肿瘤组织中CXCL9与CXCR3蛋白表达呈正相关(χ^(2)=15.836,P<0.001);CXCL9、CXCR3蛋白表达水平与DLBCL患者年龄、性别、原发部位、乳酸脱氢酶水平、国际预后指数(IPI)评分无关(P>0.05),与Ann Arbor分期、组织学分型、Ki67阳性率有关(P<0.05)。DLBCL患者肿瘤组织CXCL9高表达组5年累积复发率高于低表达组,差异有统计学意义(χ^(2)=9.788,P<0.001);CXCR3高表达组5年累积复发率高于低表达组,差异有统计学意义(χ^(2)=17.610,P<0.001)。多因素COX分析结果显示,CXCL9高表达、CXCR3高表达、Ann Arbor分期Ⅲ~Ⅳ期、非生发中心型是影响DLBCL患者复发的独立危险因素(均P<0.05)。结论DLBCL患者肿瘤组织中CXCL9、CXCR3表达上调,其表达水平与患者Ann Arbor分期、组织学分型有关,可能是DLBCL患者预后的潜在靶标。

BCL9与肿瘤及肿瘤靶点治疗研究

Wnt信号传导通路与肿瘤的关系是近年来肿瘤研究的热点,该通路包含许多信号成员,其中BCL9是近年来该通路上发现的新的癌基因,其在多种Wnt信号通路失调肿瘤中的异常表达表明其与肿瘤的发生、发展有密切关系.而针对Wnt信号通路不同基因靶点的高特异性基因药物开发以及肿瘤的分子诊断也相继出现,尤其是针对BCL9与β-catenin作用界面的小分子抑制剂基因药物的开发更是引起广泛的注意.现就BCL9及其与肿瘤的关系和BCL9基因为靶点的肿瘤基因治疗等三方面做一综述.

MMP-9、Bcl-2基因多态性与青海汉族乳腺癌易感性

目的研究青海地区汉族人群乳腺癌易感性与基质金属蛋白酶-9基因(MMP-9)启动子区-1562C/T多态性和B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)-938C>A多态性的关系。方法应用聚合酶链反应-限制性片段多态性(PCR-RFLPs)法检测青海地区30例汉族乳腺癌患者(乳腺癌组)及30例汉族乳腺良性病变患者(对照组)MMP-9-1562C/T和Bcl-2-938C>A多态性的分布情况。同时运用统计学方法对MMP-9基因1562C/T SNP、Bcl-2基因C(-938)A SNP的基因频率进行相关分析。结果 MMP-9基因型CC、CT和TT在对照组中分别是43.3%、36.7%、20.0%,而在乳腺癌组中分别是50.0%、33.3%、16.7%。TT基因型在对照组及乳腺癌组中,相对于CC和CT基因组表达较低,但是对照组和乳腺癌组间并没有明显差异(P>0.05)。C和T基因频率在对照组中是0.529和0.471,而在乳腺癌组中是0.667和0.333,两组之间经过比较,C和T基因频率也无明显差异(P>0.05)。Bcl-2基因型CC、CA、AA在对照组中分别是13.3%、50.0%、36.7%,而在乳腺癌组中分别是20.0%、46.7%、33.3%。CC基因型在对照组及乳腺癌组中,相对于CA和AA基因组表达较低,但对照组和乳腺癌组间差异无显著性(P>0.05)。C、A基因频率在对照组中是0.383、0.617,而在乳腺癌组中是0.433、0.567,两组之间经过比较,C和A基因频率也无明显差异(P>0.05)。结论 MMP-9-1562C/T和Bcl-2-938C>A基因多态性可能与青海地区汉族人群乳腺癌易感性无关。

靶向SOX9调控弥漫性大B细胞淋巴瘤代谢重编程的研究

目的·探索弥漫性大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lymphoma,DLBCL)中差异表达的性别决定区Y框转录因子9(SRY-box transcription factor 9,SOX9)基因所起到的作用,尤其是在生发中心B细胞(germinal center B-cell,GCB)来源亚型中对代谢重编程的调控作用。方法·选取NCICCR-DLBCL数据库中的481例DLBCL患者的临床信息和基因表达谱数据,使用R语言4.1.3版本进行数据分析与可视化,并基于RNA-seq测序表达量的细胞组织来源亚型(cell of origin subtype,COO)分类算法进行分类;使用ABC/GCB特征注释基因集,通过基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)对分类进行验证。以SOX9的表达量高低将ABC和GCB亚组分别二分类。使用DEseq2包进行差异分析。使用KEGG(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes)与Hallmark注释集分析SOX9与DLBCL的代谢的关系。采用KaplanMeier方法绘制生存曲线。采用GEPIA2进行泛癌分析。采用ESTIMATE包进行微环境评分分析。结果·481例DLBCL患者样本中,481例均有RNA-seq的表达量数据,421例有临床分期,335例有国际预后指数(international prognostic index,IPI)评分,234例有生存数据。分类得出ABC亚型232例(48.2%)、GCB亚型173例(36.0%)、未分类76例(15.8%),与数据库声明的比例相符,经富集分析验证符合ABC/GCB表达谱特征。SOX9低表达量组与SOX9高表达量组相比,总生存期更短,预后分数更差。泛癌分析示该现象亦可见于其他类型肿瘤。差异分析显示,在GCB亚型中,与SOX9高表达量组相比,SOX9低表达量组中有上调基因156个、下调基因1826个。对于细胞代谢水平的变化,下调基因富集于糖酵解。结论·在ABC-DLBCL中,SOX9基因通过调控代谢重编程影响ABC-DLBCL的生物学特征。低表达SOX9的DLBCL,预示着肿瘤中糖酵解减少;其肿瘤基质细胞浸润程度更低,并且有着更差的预后。

一氧化碳中毒后迟发性脑病患者血清Bcl-2、Caspase-3、Caspase-9水平与病情、预后的关系

目的 探讨急性一氧化碳中毒后迟发性脑病(DEACMP)患者血清B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)水平与病情、预后的关系。方法 选取2019年1月—2022年9月收治的DEACMP 92例作为DEACMP组,急性一氧化碳中毒(ACMP)后未发生DEACMP 50例作为ACMP组,健康体检者50例作为健康体检组。比较DEACMP组、ACMP组和健康体检组3组,DEACMP患者急性期和恢复期,以及预后不良和预后良好DEACMP患者血清Bcl-2和Caspase-3、Caspase-9水平,采用Pearson相关性分析探讨DEACMP患者血清Bcl-2和Caspase-3、Caspase-9与长谷川痴呆量表(HDS)、格拉斯哥预后量表(GOS)的相关性,绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估血清Bcl-2、Caspase-3、Caspase-9单独及联合检测对DEACMP患者预后预测价值。结果 DEACMP组、ACMP组和健康体检组血清Bcl-2和Caspase-3、Caspase-9依次降低(P<0.05)。DEACMP患者血清Bcl-2和Caspase-3、Caspase-9急性期均高于恢复期,预后不良均高于预后良好(P<0.01)。Pearson相关性分析显示,DEACMP患者血清Bcl-2、Caspase-3、Caspase-9与HDS、GOS均呈负相关(P<0.01)。ROC曲线分析结果显示,血清Bcl-2、Caspase-3、Caspase-9单独及联合检测对DEACMP患者预后不良预测的曲线下面积分别为0.859、0.780、0.798和0.921。结论 DEACMP患者血清Bcl-2、Caspase-3、Caspase-9水平与病情和预后相关,三者联合检测对DEACMP患者预后预测价值较高。

爱康方含药大鼠血清对人肺腺癌A549细胞内Bad、Caspase-9蛋白及mRNA的作用

目的 探讨爱康方含药血清对人肺腺癌A549细胞内B淋巴细胞瘤-2基因相关启动子(Bad)、Caspase-9蛋白(Caspase-9蛋白)及mRNA的表达作用。方法 40只大鼠,采用随机分组法分为空白对照组(NS)、环磷酰胺组(CTX)、爱康方组(AKF)和爱康方联合环磷酰胺组(AC),每组10只。以人肺腺癌A549细胞为研究对象,依据前期研究结果选定20%的含药血清为最佳干预浓度,用各组含药血清分别干预细胞48、72 h后收集细胞用于检测。通过蛋白质印迹法(Western blot)测定干预后目的细胞中Bad、Caspase-9蛋白表达,实时荧光定量PCR技术(RT-qPCR)法测定Bad、Caspase-9 mRNA的表达。比较各组不同方法检测的Bad mRNA、Caspase-9 mRNA表达水平及Bad、Caspase-9蛋白表达水平。结果 48、72 h时,环磷酰胺组、爱康方组和爱康方联合环磷酰胺组Bad mRNA表达水平高于空白对照组,爱康方联合环磷酰胺组Bad mRNA表达水平高于环磷酰胺组和爱康方组,差异具有统计学意义(P<0.05);48 h时,环磷酰胺组Bad mRNA表达水平高于爱康方组,差异具有统计学意义(P<0.05)。72 h时,爱康方组和爱康方联合环磷酰胺组Bad mRNA表达水平高于本组48 h,差异具有统计学意义(P<0.05)。48、72 h时,环磷酰胺组、爱康方组和爱康方联合环磷酰胺组Caspase-9 mRNA表达水平高于空白对照组,爱康方联合环磷酰胺组Caspase-9 mRNA表达水平高于环磷酰胺组和爱康方组,差异具有统计学意义(P<0.05);48 h时,环磷酰胺组Caspase-9 mRNA表达水平高于爱康方组,差异具有统计学意义(P<0.05)。72 h时,爱康方组和爱康方联合环磷酰胺组Caspase-9 mRNA表达水平高于本组48 h,差异具有统计学意义(P<0.05)。48、72 h时,环磷酰胺组、爱康方组和爱康方联合环磷酰胺组Bad蛋白表达水平明显高于空白对照组,环磷酰胺组、爱康方联合环磷酰胺组高于爱康方组,爱康方联合环磷酰胺组高于环磷酰胺组,差异具有统计学意义(P<0.05)。72 h时,爱康方组和爱康方联合环磷酰胺组Bad蛋白表达水平高于本组48 h,差异有统计学意义(P<0.05)。48、72 h时,环磷酰胺组、爱康方组和爱康方联合环磷酰胺组Caspase-9蛋白表达水平明显高于空白对照组,环磷酰胺组、爱康方联合环磷酰胺组高于爱康方组,爱康方联合环磷酰胺组高于环磷酰胺组,差异具有统计学意义(P<0.05)。72 h时,爱康方组和爱康方联合环磷酰胺组Caspase-9蛋白表达水平高于本组48 h,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 爱康方能抑制肺癌肿瘤生长,与环磷酰胺合用抑癌效果更佳,可能是通过上调A549细胞中促凋亡蛋白Bad、Caspase-9,诱导肿瘤细胞凋亡而实现的。

Bcl-xL蛋白、LDH、IPF、MMP-9在食管癌术后胸腔感染中的表达及预测脓毒症的效能

背景食管癌患者术后易胸腔感染,但缺乏早期预测机制,基于基质金属蛋白酶-9、未成熟血小板比率、大分子B淋巴细胞瘤、乳酸脱氢酶水平变化均与感染有关,推测可为临床完善相关机制提供参考.目的探讨大分子B淋巴细胞瘤(B-cell lymphoma-extra large,Bcl-xL)蛋白、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、未成熟血小板比率(immature platelet fraction,IPF)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)在食管癌(esophageal cancer,EC)术后胸腔感染中的表达及预测脓毒症的效能.方法将2016-02/2020-10期间187例EC术后胸腔感染患者作为观察组,并根据是否发生脓毒症分为脓毒症(16例)、非脓毒症(171例)患者,并选取同期临床资料相匹配的187例EC术后未感染患者作为对照组,比较两组及脓毒症、非脓毒症患者Bcl-xL蛋白、LDH、IPF、MMP-9水平,采用Pearson分析Bcl-xL蛋白、LDH、IPF、MMP-9与脓毒症病情程度的关系,Logistic回归方程分析脓毒症的相关影响因素,受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic,ROC)分析Bcl-xL蛋白、LDH、IPF、MMP-9预测脓毒症的效能.结果观察组Bcl-xL蛋白、LDH、IPF、MMP-9较对照组显著升高(P<0.05);脓毒症手术时间长于非脓毒症,Bcl-xL蛋白、LDH、IPF、MMP-9水平高于非脓毒症(P<0.05);Bcl-xL蛋白、LDH、IPF、MMP-9水平与APACHEⅡ评分呈正相关(P<0.05);Logistic回归方程分析,结果显示,Bcl-xL蛋白、LDH、IPF、MMP-9高于均值者发生脓毒症的风险分别是低于均值者的1.174、2.883、2.562、1.948倍(P<0.05);经ROC分析Bcl-xL蛋白、LDH、IPF、MMP-9联合预测脓毒症的AUC为0.964,大于任一指标单独预测(P<0.05).结论EC术后胸腔感染患者Bcl-xL蛋白、LDH、IPF、MMP-9水平升高,且与病情进展关系密切,其预测EC术后胸腔感染继发脓毒症具有良好预测效能,便于指导临床完善防治方案.

miRNA-9过表达对Aβ损伤的PC12细胞的保护作用

目的:探讨micro RNA-9(mi R-9)过表达对β-淀粉样蛋白(Aβ)损伤的PC12细胞及B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关x蛋白(Bax)表达的影响。方法:PC12细胞分为mi R-9过表达组(E组)、空转染对照组(NC组)、不转染的损伤细胞模型组(NT组),采用CCK-8法检测细胞增殖;采用Annexin-V-PE检测细胞凋亡;采用RT-q PCR检测Bcl-2、Bax m RNA的表达,Western-Blot检测Bcl-2、Bax蛋白表达。结果:与NC组及NT组比较,E组的PC12细胞转染48 h后增殖增加,凋亡率降低,Bcl-2表达增加,Bax表达下降(P<0.05)。结论:mi R-9过表达可保护Aβ损伤的PC12细胞。

姜黄素通过β-连环蛋白/B细胞淋巴瘤/白血病-9通路调控胃癌细胞自噬的研究

目的:探讨姜黄素通过β-连环蛋白(β-catenin)/B细胞淋巴瘤/白血病-9(bcl-9)通路调控胃癌细胞自噬的机制。方法:动物水平上,利用小鼠胃癌细胞(MFC)接种于裸鼠右侧腋下成瘤,建立胃癌造模,分为模型组、低姜黄素组、中姜黄素组、高姜黄素组,每组6只。计算各组小鼠抑瘤率,采用苏木精-伊红(HE)染色法观察瘤体病理组织形态学,采用蛋白质免疫印迹法检测各组肿瘤组织自噬标志蛋白及β-catenin/bcl-9信号通路相关蛋白的表达水平。细胞水平上,利用氯化锂(LiCl)激活β-catenin/bcl-9信号通路,用0、10、20、40μmol/L姜黄素处理BGC-823细胞48 h,通过噻唑蓝(MTT)法、流式细胞术、吖啶橙染色及蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞活力、凋亡、自噬水平及相关蛋白的表达。结果:动物水平,低姜黄素组、中姜黄素组、高姜黄素组抑瘤率高于模型组[(17.54±3.88)%、(26.87±5.12)%、(37.98±7.09)%比(0.00±0.00)%,F=162.010,P<0.01];低姜黄素组、中姜黄素组、高姜黄素组LC-Ⅱ表达高于模型组(1.54±0.09、1.89±0.12、2.75±0.28比1.00±0.04,F=5.983,P<0.05),p62表达低于模型组[(0.62±0.05、0.47±0.05、0.39±0.04比1.00±0.07,F=6.774,P<0.05),β-catenin表达低于模型组[(0.52±0.08、0.48±0.06、0.35±0.04比0.99±0.12,F=7.092,P<0.01),BCL9表达低于模型组[(0.54±0.06、0.46±0.05、0.31±0.02比0.99±0.10,F=7.365,P<0.01)。细胞水平,10、20、40μmol/L姜黄素BGC-823细胞活自噬水平高于对照组[(8.97±0.16)%,(17.68±0.55)%,(34.45±1.32)%比(5.65±0.12)%,F=52.932,P<0.05],LC-Ⅱ水平高于对照组[(0.23±0.00、0.32±0.00、0.95±0.01比0.18±0.00,F=83.028,P<0.05)、p62水平高于对照组(0.24±0.00、0.38±0.02、0.90±0.02比0.19±0.00,F=74.355,P<0.05),β-catenin水平高于对照组[(0.23±0.01、0.19±0.00、0.11±0.00比0.05±0.00,F=98.623,P<0.05)、BCL9水平高于对照组[(0.37±0.00、0.30±0.01、0.21±0.01比0.09±0.00,F=129.746,P<0.05)水平。β-catenin/BCL9信号通路激活剂LiCl预先处理细胞后,姜黄素诱导的BGC-823细胞自噬水平低于空白对照组[(1.47±0.22)%比(5.64±0.13)%,F=8.669,P<0.05]。结论:姜黄素能够通过下调β-catenin/bcl-9通路的表达,进而促进胃癌细胞自噬的发生。