复方守宫散联合唑来膦酸通过B淋巴细胞诱导成熟蛋白-1/B细胞淋巴瘤因子6通路对肺癌骨转移的研究

目的探讨复方守宫散联合唑来膦酸对肺癌骨转移的治疗作用,及对B淋巴细胞诱导成熟蛋白(B lymphocyte induced maturation protein,Blimp)1/B细胞淋巴瘤因子(B-cell lymphoma factor,Bcl)-6通路的影响。方法建立肺癌骨转移小鼠模型,分为骨转移组、中药低剂量(40 mg/kg复方守宫散)组、中药高剂量(120 mg/kg复方守宫散)组、西药(50μg/kg唑来膦酸)组以及联合用药(120 mg/kg复方守宫散+50μg/kg唑来膦酸)组,另设假手术组,每组10只。21 d后,观察胫骨损伤、病理形态、统计破骨细胞数目、骨转移细胞活体成像系统荧光信号以及胫骨组织中Blimp1、Bcl-6表达水平。结果与假手术组相比,骨转移组破骨细胞数目、肿瘤细胞荧光信号以及Blimp1表达增加,Bcl-6表达降低(P<0.01);与骨转移组相比,中药低、高剂量组以及西药组的破骨细胞数目、肿瘤细胞荧光信号以及Blimp1表达降低,Bcl-6表达增加(P<0.01);联合用药增强肺癌骨转移的治疗作用(P<0.01)。结论复方守宫散联合唑来膦酸治疗肺癌骨转移具有协同作用,其机制可能与抑制Blimp1/Bcl-6通路有关。

基于Blimp1/Bcl6通路探讨骨痛灵联合唑来膦酸治疗肺癌骨转移的实验研究

目的观察骨痛灵方对肺癌骨转移疼痛模型小鼠Blimp1/Bcl6通路的影响。方法 85只C57 BL/6小鼠随机选取17只小鼠,注射PBS溶液作为假手术组;其余68只小鼠左后肢胫骨骨髓腔内注射Lewis肺癌细胞建立骨转移疼痛模型,随机分为模型组、中药组、西药组、中西药组,每组17只。中药组小鼠以骨痛灵方煎剂灌胃,西药组予以唑来膦酸腹腔注射,中西药组则两药联合运用,治疗3周。采用TRAP特殊染色法检测小鼠胫骨的破骨细胞,以RT-PCR和Western blot法检测B细胞诱导成熟蛋白1(Blimp1)、B细胞淋巴瘤蛋白6(Bcl6)和组织蛋白酶K(Ctsk) mRNA和蛋白的表达。结果与模型组比较,中药组、西药组和中西药组TRAP阳性细胞数量均明显减少,Blimp1、Ctsk mRNA和蛋白表达均降低,Bcl6 mRNA和蛋白表达均升高,且差异均有统计学意义(P<0.05);在3个治疗组中,中西药组阳性细胞数量最少,Blimp1、Ctsk mRNA和蛋白表达最低,Bcl6 mRNA和蛋白表达最高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论骨痛灵方通过抑制Blimp1/Bcl6通路,抑制破骨细胞的活化,从而缓解肺癌骨转移疼痛。

乳腺癌中BCL-6、ZEB2、PTEN与VEGF-D的表达及其意义

目的探讨B细胞淋巴瘤蛋白-6(BCL-6)、E盒结合锌指蛋白2(ZEB2)、蛋白酪氨酸磷酸酶基因(PTEN)以及血管内皮生长因子-D(VEGF-D)在乳腺癌组织中的表达情况及其临床意义。方法 95例术前未做化疗的乳腺癌患者(Ⅰ期18例,Ⅱ期34例,Ⅲ期29例,Ⅳ期14例)作为乳腺癌组,60例乳腺良性增生病变患者作为良性病变组。比较两组患者免疫组化检测其BCL-6、ZEB2、PTEN与VEGF-D表达情况。结果乳腺癌组患者BCL-6、ZEB2与VEGF-D表达阳性率分别为56.84%、50.53%、62.11%,高于良性病变组的18.33%、21.67%、15.00%;PTEN表达阳性率为12.63%,低于良性病变组的76.67%,差异均具有统计学意义(P<0.05)。BCL-6、ZEB2与VEGF-D表达阳性率与乳腺癌组病理分期呈正相关(r=0.572、0.431、0.794,P<0.05),PTEN表达阳性率与乳腺癌组病理分期呈负相关(r=-0.353,P<0.05)。结论乳腺癌患者BCL-6、ZEB2与VEGF-D表达升高,PTEN表达降低,对其进行监测,能为其诊断及病情评估提供参考。

萸连丸对溃疡性结肠炎小鼠脾脏CD4^(+)T细胞BCL-6/Blimp-1,PD-1/PD-L1表达的调节作用

目的:探讨萸连丸对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的溃疡性结肠炎(Ulcerative colitis,UC)小鼠脾脏CD4^(+)T细胞转录因子B细胞淋巴瘤因子6/B细胞诱导成熟蛋白1(BCL-6/Blimp-1),程序性死亡受体-1/程序性死亡受体配体-1(PD-1/PD-L1)表达的调节作用。方法:将40只BALB/c雄性小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、萸连丸500 mg/kg组以及美沙拉嗪300 mg/kg组。除正常对照组小鼠外,其余小鼠采用DSS复制慢性溃疡性结肠炎模型,造模成功后,各组灌胃给予药物或生理盐水,观察小鼠体质量、结肠长度、结肠质量、肠质量指数、结肠黏膜病理形态及病理组织学损伤评分;ELISA法检测结肠组织中白细胞介素-7(IL-7)、IL-9、IL-23含量;流式细胞术检测小鼠脾脏中CD4^(+)BCL-6^(+)、CD4^(+)Blimp-1^(+)、CD4^(+)PD-1^(+)及CD4^(+)PD-L1^(+)细胞水平;Western blot法检测结肠组织中BCL-6、Blimp-1蛋白表达。结果:与正常对照组相比,模型对照组结肠组织中IL-7、IL-9、IL-23含量明显升高(P<0.05),小鼠脾脏中CD4^(+)BCL-6^(+)、CD4^(+)PD-1^(+)、CD4^(+)PD-L1^(+)细胞水平显著升高(P<0.01),CD4^(+)Blimp-1^(+)细胞水平显著降低(P<0.01),BCL-6蛋白表达明显上调(P<0.05),Blimp-1蛋白表达显著下调(P<0.01);与模型对照组相比,萸连丸500 mg/kg组小鼠体质量和结肠长度明显增加、肠质量指数明显降低(P<0.05),结肠组织中IL-7、IL-9、IL-23含量显著降低(P<0.01),小鼠脾脏中CD4^(+)BCL-6^(+)、CD4^(+)PD-1^(+)、CD4^(+)PD-L1^(+)细胞水平明显降低(P<0.05),CD4^(+)Blimp-1^(+)细胞水平明显升高(P<0.05),BCL-6蛋白表达明显下调(P<0.05),Blimp-1蛋白表达明显上调(P<0.05)。结论:萸连丸可能通过调节小鼠CD4^(+)T细胞表面BCL-6/Blimp-1,PD-1/PD-L1表达水平改善溃疡性结肠炎。