组织T细胞因子4、P糖蛋白和抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤-xl在结直肠癌中的表达及其临床意义

目的探讨组织T细胞因子4（TCF－4）、P糖蛋白（P—gP）和抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤－x1（Bcl—x1）在结直肠癌中的表达及其临床病理特征的关系。方法选取广州医科大学附属广州市第一人民医院2013年1～12月100例手术切除结直肠癌组织及距病灶10em以上的正常组织。应用免疫组化的方法，分别检测TCF－4、P—gP和Bcl—x1蛋白在结直肠癌组织及正常组织的表达，并分析其与临床病理的关系。结果TCF－4、P—gP和Bcl—x1在结直肠癌组织中的阳性表达率分别为85％、67％和84％。明显高于正常黏膜组织（9％、2％、7％），差异有统计学意义（P〈0．05）；结直肠癌组织中TCF-4、P—gP，Bcl-x1三者间表达呈正相关（r=0．301、0．581、0．390，P〈0．01）。结直肠癌组织中TCF－4和Bcl—x1阳性表达与肿瘤组织的分化程度呈正相关（r=0．390，P〈0．01），结直肠癌组织中TCF－4、P—gP，Bcl—x1阳性表达与患者年龄、性别、肿瘤部位、肿瘤大小、组织学类型之间无明显相关（P〉o．05），与浸润深度、淋巴结转移、远处转移、TNM分期有关（P〈0．05）。结论结直肠癌组织中TCF-4、P—gP和Bcl—x1的表达与浸润、转移、TNM分期及复发密切相关，可作为判断结直肠癌患者预后的指标，P—gP和Bcl—xl在结直肠癌中的多药耐药机制可能与Wnt／β-Catenin—TCF信号通路TCF－4有关。

犬急性心肌缺血后左心室功能与抑凋亡蛋白Bcl-xl表达的研究

目的观察犬急性心肌缺血后左心室壁动度、射血功能、细胞凋亡与心肌组织中Bcl—xl表达的变化。方法犬30只随机分为实验组15只及对照组15只，实验组结扎左冠状动脉前降支近端，结扎时间分别为10，30，60min，每一时间点5只，对照组游离左冠状动脉前降支近端，不结扎。心肌组织行三苯四氮唑（TIE）染色，梗死区为黄白色，非梗死区为红色。超声心动图测定左室前壁增厚率及左心室射血分数，原位末端脱氧核苷酸转移酶介导的生物素脱氧尿嘧啶核苷酸缺口末端标记法（TUNEL）检测梗死区心肌组织凋亡细胞数，Western blotting检测梗死区心肌组织Bcl—xl的表达强度变化。结果TIE染色示左室前壁及部分前间隔染色为黄白色，其余区域为红色。实验组冠脉结扎后10rain，左室前壁增厚率降低，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。左心室射血分数未发生明显改变，与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。冠脉结扎后30～60min，前壁增厚率降低与左心室射血分数进一步下降，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。实验组在冠脉结扎后10min，梗死区心肌TUNEL阳性细胞数与对照组比较差异无统计学意义；冠脉结扎后30～60min，梗死区心肌TUNEL阳性细胞数明显增加，与对照组比较差异有显著统计学意义（P〈0．01）。实验组在冠脉结扎后30min，梗死区心肌Bcl—xl表达增高，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。冠脉结扎后60min，梗死区心肌Bcl—xl表达明显增高，与对照组比较差异有显著统计学意义（P〈0．01）。结论急性心肌缺血后，心肌细胞凋亡可能为其早期病理改变，并且与心肌室壁动度与左室收缩功能降低有一定关系，同时抑凋亡基因Bcl—xl表达迅速增加，以对抗促凋亡基因的作用。

同源盒基因A10表达下调后抑制胃癌细胞裸鼠皮下成瘤能力及相关机制研究

目的探讨同源盒基因A10(homeobox gene A10,HOXA10)表达水平改变后对胃癌细胞裸鼠皮下成瘤能力的影响及其可能涉及的机制。方法利用生物信息学方法分析The Cancer Genome Atlas website(TCGA)数据库中HOXA10在胃癌中的表达水平,构建HOXA10表达降低稳转胃癌细胞株BGC-823-sh-HOXA10并进行裸鼠皮下成瘤实验,采用western blot检测HOXA10敲减后凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-xL(Bcl-xL)表达水平的改变情况。结果分析TCGA数据库后发现胃癌中HOXA10表达水平升高。HOXA10表达下调后,胃癌细胞株BGC-823裸鼠皮下成瘤能力减弱,凋亡相关蛋白Bcl-xL表达下调。结论 HOXA10在胃癌中表达异常升高,HOXA10表达水平降低后可抑制胃癌细胞BGC-823裸鼠皮下成瘤能力,影响抗凋亡蛋白Bcl-xL表达水平可能是其发挥作用的机制。

腺病毒介导的B细胞淋巴瘤/白血病-xL基因修饰骨髓间充质干细胞对大鼠膝关节软骨缺损的修复作用

目的观察腺病毒介导的B细胞淋巴瘤/白血病-xL(bcl-xL)基因修饰骨髓间充质干细胞(BMSCs)对大鼠膝关节软骨缺损的修复作用。方法构建腺病毒介导的bcl-xL基因过表达载体pAdTrack-bcl-xL,分离大鼠BMSCs并培养扩增,转染pAdTrack-bcl-xL及空白载体,实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测细胞bcl-xL表达水平。将50只SD大鼠随机分成5组(n=10),对照组不做任何处理,模型组、BMSCs治疗、转染空载体的BMSCs治疗组和bcl-xL过表达的BMSCs治疗组均制作膝关节软骨缺损模型并在术后3 d进行相应治疗。治疗后6周和12周后处死各组大鼠,采集膝关节,制作石蜡切片,后分别采用苏木精-伊红(HE)、Masson以及番红素-O法对膝关节软骨组织进行染色观察。结果与空载体组比较,pAdTrack-bcl-xL组BMSCs中bcl-xL基因在mRNA水平上相对表达量显著增加(1.07±0.08比8.15±0.31,t=-52.893,P<0.01),提示成功构建bcl-xL基因稳定过表达的BMSCs。治疗6周后,与模型组比较,BMSCs组及转染空载体的BMSCs治疗组大鼠膝关节有大量软骨形成、软骨细胞排列趋于整齐、软骨细胞数量明显增加;而与空载体的BMSCs治疗组比较,bcl-xL过表达的BMSCs治疗组大鼠膝关节有更多软骨形成、软骨细胞排列更整齐、软骨细胞数量大大增加。与同组6周时比较,各治疗组大鼠12周时的软骨形成更加明显,尤以bcl-xL过表达的BMSCs治疗组最为突出。结论bcl-xL过表达的BMSCs能显著促进大鼠膝关节软骨缺损的修复。

低剂量辐射对人卵巢癌顺铂耐药细胞耐药性的影响

目的探讨低剂量辐射是否可通过Bcl-2相关x(Bax)基因、B细胞淋巴瘤-xL(Bcl-xL)参与逆转人卵巢癌顺铂耐药细胞(SKOV3/DDP)的耐药性,为耐药性卵巢癌的治疗提供新的思路。方法将细胞密度为80%的SKOV3/DDP随机分为对照组、低剂量辐射组及常规剂量辐射组3组,对照组仅摆位(0 Gy),低剂量辐射组每次照射0.5 Gy,共4次,常规剂量辐射组一次性照射2.0 Gy,均照射后12 h进行后续实验。采用细胞增殖及毒性检测试验(CCK-8)检测顺铂对SKOV3/DDP细胞增殖抑制率,计算各组顺铂的IC 50;采用流式细胞术和Annexin V-FITC/PI双染色检测各组SKOV3/DDP细胞凋亡率;采用RT-PCR技术检测各组SKOV3/DDP细胞中Bax、Bcl-xL基因的扩增情况。结果与对照组和常规剂量辐射组相比较,低剂量辐射组顺铂IC 50明显降低(F=16551.931,P<0.05),而细胞凋亡率则显著升高(F=696.081,P<0.05);低剂量辐射组SKOV3/DDP细胞中Bax mRNA相对表达量明显升高(F=11.811,P<0.05);Bcl-xL mRNA相对表达量明显降低(F=54.538,P<0.05)。结论低剂量辐射可以促进SKOV3/DDP细胞凋亡,增加SKOV3/DDP细胞对顺铂的敏感性,此可能与细胞凋亡调控因子Bax、Bcl-xL的参与有关。

姜黄素介导MAPK信号通路对非小细胞肺癌细胞Bcl-2、Bcl-xl及Bax蛋白表达的影响

目的 研究姜黄素介导丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路对非小细胞肺癌细胞Bcl-2、Bcl-xl及Bax蛋白表达的影响。方法 对非小细胞肺癌A549细胞实施体外培养、分组,并用10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L姜黄素处理24 h后,借助显微镜对A549细胞形态结构进行观察;通过MTT法、流式细胞仪对A549细胞增殖抑制率、凋亡率进行测定,经免疫细胞化学法测定MAPK的阳性表达,免疫印迹法测定Bcl-2、Bcl-xl、Bax蛋白表达。结果 姜黄素组的非小细胞肺癌A549细胞增殖抑制率高于对照组(P <0.05);姜黄素组的非小细胞肺癌A549细胞凋亡率高于对照组(P <0.05);姜黄素组的非小细胞肺癌A549细胞内MAPK阳性表达率低于对照组(P <0.05)。姜黄素组A549细胞内Bcl-2、Bcl-xl蛋白浓度低于对照组,Bax蛋白浓度高于对照组(P <0.05)。结论 姜黄素能介导MAPK信号通路,通过下调Bcl-2、Bcl-xl,上调Bax蛋白表达,抑制非小细胞肺癌细胞增殖,促进癌细胞凋亡。

丫蕊花甾体皂苷YB16对人前列腺癌细胞PC-3增殖与凋亡的影响

目的:探讨丫蕊花甾体皂苷YB16对人前列腺癌细胞PC-3增殖与凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法:体外培养PC-3细胞,给予不同浓度的YB16(0.125~16μmol·L-1),以噻唑蓝(MTT)比色法检测YB16对PC-3的细胞毒性,倒置相差显微镜观察细胞形态变化,吖啶橙(AO)染色、流式细胞术检测YB16对PC-3的凋亡影响,逆转录-聚合酶链式反应(RTPCR)检测YB16对PC-3细胞B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),B细胞淋巴瘤-xl(Bcl-xl),Bcl-2相关X蛋白(Bax),半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)mRNA的表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Bcl-2,Bcl-xl,Bax,激活型Caspase-3(cleaved-Caspase-3)蛋白表达,并对结果进行分析。结果:YB16能显著抑制PC-3细胞的生长,具有剂量依赖性(P<0.05);YB16能促进细胞的凋亡,相差显微镜,AO染色法观察可见细胞具凋亡特征性改变;YB16能下调Bcl-2,Bcl-xl,上调Bax,Caspase-3 mRNA和蛋白的表达(P<0.05)。结论:YB16能抑制PC-3细胞增殖,促进PC-3发生凋亡,其机制可能与促进Caspase-3表达有关,具有良好的抗肿瘤作用。

红托竹荪多糖诱导肿瘤细胞凋亡的作用初探

探讨红托竹荪多糖对小鼠腹水瘤S180细胞凋亡的作用。分别使用不同浓度的红托竹荪多糖处理S180细胞24h,Western blot法检测Bcl-xl、Bax、caspase-9和Caspase-3等蛋白表达,使用流式细胞仪检测细胞凋亡。Western blot法检测结果显示Bcl-xl表达量随竹荪多糖剂量增加而降低,Bax表达量则相反,每组Bax/Bcl-xl的比值增加,Caspase-9、Caspase-3表达量增加;流式细胞仪检测结果显示:0、25、50和100mg/L组细胞凋亡率分别为5.12%±0.11%、9.61%±0.61%、16.39%±0.19%和17.05%±0.13%,与对照组相比细胞凋亡率增高,差异具有统计学意义(P<0.05),推断红托竹荪多糖具有诱导S180细胞凋亡的功能。

胰岛素样生长因子结合蛋白-3通过细胞外信号调节激酶1/2信号通路调控多胶母细胞瘤增殖的机制

目的探讨胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)在胞内高表达及胞外刺激促进胶质母细胞瘤U87MG增殖的机制。方法培养胶质母细胞瘤U87MG细胞株,构建的pCMV/IGFBP-3质粒转染U87MG细胞,分为未处理组(Control)、转染pcDNA3.1(+)、空载体组(NC1)、转染pCMV-Myc空载体组(NC2)、转染pCMV-IGFBP-3组(Ⅰ)、转染pcDNA3.1(+)/ pCMV-Myc组(NC1+NC2),采用实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)、Western blot检测IGFBP-3、细胞外信号调节激酶(ERK)1/2、B细胞淋巴瘤/白血病-XL(bcl-XL)的表达;采用噻唑蓝(MTT)比色法分析IGFBP-3细胞因子对U87MG细胞的增殖作用,U87MG细胞经IGFBP-3于0、5、10、30 min时间段刺激后,提取的各时间段细胞总蛋白,定量后进行蛋白印迹分析,观察ERK1/2、bcl-XL蛋白的表达及ERK1/2磷酸化的变化。结果Real-time PCR显示ERK1、ERK2、bcl-XL的mRNA相对表达量为(1.32±0.45)、(1.19±0.14)、(2.83±0.56),ERK1的mRNA表达有升高趋势(P<0.01),ERK2的mRNA表达无明显变化(P>0.05),bcl-XL的mRNA明显升高(P<0.01);Western blot发现ERK1/2的灰度值(178.86±4.89,188.19±5.07)蛋白表达量无变化,但其磷酸化水平明显增强,bcl-XL的灰度值(151.85±5.71,214.37±4.71)蛋白表达量明显升高。MTT比色法检测结果表明IGFBP-3浓度的增加,细胞株呈明显增殖效应,其中500 ng/ml的IGFBP-3细胞因子刺激作用较大(P<0.01);刺激U87MG细胞株培养,蛋白印迹实验显示0、5、10、30 min、1、2 h时间段表达量,ERK1/2为163.18±4.45、159.36±5.67、161.27±3.23、172.41±4.01、177.41±2.42、169.11±1.45没有变化;pERK1/2(27.51±2.34、52.25±3.56、51.75±3.67、57.55±5.01、66.75±3.67、47.49±2.76)随时间延长而逐渐增加,2 h后出现减弱;bcl-XL(18.77±2.78、46.14±3.29、52.43±3.62、82.87±2.71、60.02±0.18、56.94±2.16)随时间延长而先增加后降低,在1 h出现下降。结论IGFBP-3胞内高表达和从胞外刺激U87MG细胞后均能增加ERK1/2下游调控基因bcl-XL的表达,进一步促进胶质母细胞瘤瘤细胞的增殖。

阿斯匹林诱导神经母细胞瘤细胞凋亡的研究

目的 探讨阿斯匹林诱导神经母细胞瘤细胞凋亡的作用及其机制.方法 体外培养SH-SY5Y和CHLA-119神经母细胞瘤细胞株细胞,不同浓度的阿斯匹林（0 ～ 10 mmol/L）处理细胞,噻唑蓝（MTT）检测细胞增殖抑制作用,锥虫蓝拒染法检测细胞的死亡率,流式细胞学检测细胞凋亡率,蛋白印记检测阿斯匹林诱导半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（Caspase）-9/-3活化,聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP）裂解,以及对B细胞淋巴瘤/白血病-2（bcl-2）、bcl-xL、髓细胞白血病基因-1（Mcl-1）表达的影响.结果 不同浓度的阿斯匹林处理神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y和CHLA-119细胞72 h,50％增殖抑制率（IC50）分别为4.8mmol/L和4.6mmol/L.阿斯匹林（5mmol/L）处理SH-SYSY和CHLA-119细胞48 h,在两株细胞中可分别诱导45％和46％的髓细胞白血病基因-1（Mcl-1）细胞死亡.流式细胞仪检测结果显示,阿斯匹林（5 mmol/L）处理SH-SY5Y和CHLA-119细胞24 h,细胞的凋亡率分别为46％和42％.Western blot检测结果显示,阿斯匹林（5 mmol/L）处理SH-SYSY和CHLA-119细胞24 h,可诱导Caspase-9、-3活化,PARP裂解,以及诱导bcl-2抗凋亡家族蛋白Mcl-1、bcl-xL表达的下调.结论 阿斯匹林能够诱导神经母细胞瘤细胞Mcl-1和bcl-xL表达下调,疏通凋亡信号传导,到达强效的凋亡诱导作用.

乐胃饮加味方对胃癌前病变中NF-κB和STAT3共调控因子表达的影响

目的:研究乐胃饮加味方对胃癌前病变中NF-κB和STAT3共调控因子Bcl-x L、c-Myc、IL-6的影响。方法:将NF-κB(Rel A/p65)-PECFP和STAT3-PEYFP载体转染到SGC-7901人胃癌细胞内,给予LPS刺激,经乐胃饮加味方治疗后采用实时荧光定量PCR检测Bcl-x L、c-Myc、IL-6 m RNA表达,Western Blot检测Bcl-x L、c-Myc蛋白的表达。结果:LPS刺激后,Bcl-x L、c-Myc、IL-6 m RNA表达上调,Bcl-x L、c-Myc蛋白的表达亦上调,经乐胃饮加味方治疗后,Bcl-x L、c-Myc、IL-6 m RNA表达均明显下调,Bcl-x L、c-Myc蛋白的表达亦下降。结论:乐胃饮加味方能阻断炎性反应与恶性肿瘤正反馈回路中的相关因子,达到防治胃癌的作用。

白藜芦醇对胃癌细胞MKN-45凋亡的影响及机制

目的 以P53/人B细胞淋巴瘤-xL(Bcl-xL)信号通路为基础,探讨白藜芦醇对人胃癌MKN-45细胞凋亡的影响。方法 体外培养胃癌MKN-45细胞,以不同浓度的白藜芦醇(5、10、20、40、80μg·mL^(-1))分别干预细胞24、48、72 h,采用细胞增殖实验检测细胞增殖情况。设空白组和白藜芦醇高、中、低剂量组(30、20、10μg·mL^(-1)),干预MKN-45细胞48 h, DAPI染色观察细胞核的形态;采用流式细胞仪检测细胞的凋亡情况;蛋白免疫印迹法检测细胞中P53、Bcl-xL蛋白的表达;实时荧光定量聚合酶链式反应检测细胞中P53、Bcl-xL mRNA的表达。结果 随着白藜芦醇浓度的增加,能明显抑制胃癌MKN-45细胞增殖;与空白组比较,白藜芦醇中、高剂量组细胞的细胞核逐渐皱缩,甚至破裂;两组细胞的凋亡率明显增加,P53的表达均增加,Bcl-xL的表达均降低。结论 白藜芦醇可激活MKN-45细胞中P53/Bcl-xL信号通路,增加P53的表达,降低Bcl-xL的表达,从而诱导MKN-45细胞凋亡。

助孕宁Ⅰ号方对复发性自然流产孕鼠滋养及蜕膜细胞凋亡的影响

目的探讨助孕宁Ⅰ号方防治复发性自然流产(RSA)的可能作用机制。方法建立DBA/2×CBA/J RSA小鼠模型,以不同浓度助孕宁Ⅰ号方对实验组模型小鼠进行灌胃,留取药物干预后的滋养细胞及蜕膜组织,并设空白组(空白滋养细胞及蜕膜组织)、模型组(模型滋养细胞及蜕膜组织)及西药组(地屈孕酮含药滋养细胞及蜕膜组织),每组15只。分别采用免疫组化法及PCR法检测各组不同浓度药物干预后的滋养细胞及蜕膜中PI3K/AKT信号传导通路上人第10号染色体缺失的磷酸酶(PTEN)和B细胞淋巴瘤/白血病-XL(Bcl-XL)细胞凋亡相关因子表达水平。结果 (1)与空白组比较,模型组死胎率增加(P<0.05);与模型组比较,西药组及助孕宁Ⅰ号各剂量组死胎率降低(P<0.05)。(2)模型组滋养细胞中可见细胞碎裂溶解或凋亡趋势;空白组滋养细胞结构清晰,胞质染色均匀,血管丰富,助孕宁Ⅰ号(低、中、高)及西药组及次之。(3)与模型组比较,滋养细胞助孕宁Ⅰ号高、低剂量组中PTEN mRNA和蛋白含量减少,助孕宁Ⅰ号高、中、低剂量组和西药组中Bcl-XL mRNA和蛋白含量增多,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,蜕膜助孕宁Ⅰ号高、低剂量组和西药组中PTEN mRNA和蛋白含量增多,蜕膜助孕宁Ⅰ号高、中剂量组和西药组中Bcl-XL mRNA和蛋白含量增多,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论 PTEN及Bcl-XL与RSA有关,助孕宁Ⅰ号方能够促进RSA小鼠滋养细胞及蜕膜中Bcl-XL表达;分别下调和促进RSA小鼠滋养细胞及蜕膜中PTEN表达,平衡母胎界面的细胞异常凋亡,从而达到保胎作用。

清热活血解毒复方(QHJD)对TNF-α诱导的HaCat细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究中药清热活血解毒复方(QHJD)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的人永生化角质形成细胞株(Ha Cat)增殖和凋亡的影响,为治疗银屑病的可能作用机制提供依据。方法:体外培养Ha Cat细胞,将高、中、低(30,25,20 g·L^(-1))质量浓度的QHJD水提物分别作用于TNF-α诱导的Ha Cat细胞24 h,采用倒置显微镜观察QHJD水提物处理后的Ha Cat细胞形态学改变;采用CCK-8技术检测QHJD对TNF-α诱导的Ha Cat细胞增殖的影响;采用流式细胞术检测QHJD对TNF-α诱导的Ha Cat细胞凋亡的影响;采用Western blot技术检测QHJD对TNF-α诱导的Ha Cat细胞B细胞淋巴瘤/白血病-xl(Bclxl),Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达的影响;采用Real-Time PCR技术检测清热活血解毒复方对TNF-α诱导的Ha Cat细胞Bcl-xl,Bax mRNA表达的影响。结果:与空白组比较,QHJD各组细胞镜下单位面积的细胞均呈现数量减少,细胞体积缩小,细胞间连接变少或是消失,细胞间隙变大;QHJD各组均可抑制Ha Cat细胞的增殖,差异有统计学意义(P<0.05),其中QHJD中、高剂量组极显著(P<0.01);QHJD中、高剂量组可以促进Ha Cat细胞的凋亡,差异有统计学意义(P<0.05),其中高剂量组促进Ha Cat细胞凋亡更明显(P<0.01);QHJD各组Bax蛋白表达均有上升,差异有统计学意义(P<0.05);QHJD各组Bax mRNA表达均有上升,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:QHJD可能通过上调Bax蛋白和mRNA的表达,来诱导角质形成细胞的凋亡,进而抑制TNF-α诱导的Ha Cat细胞的增殖,以发挥治疗银屑病的作用。

miR-499-5p上调对动脉粥样硬化大鼠心肌细胞凋亡的影响及作用机制

目的研究微小核糖核酸(micoroRNA,miR)-499-5p上调对动脉粥样硬化大鼠心肌细胞凋亡影响及作用机制。方法选取30只健康Wistar大鼠,经腹腔注射维生素D3和高脂饲料喂养方法建立动脉粥样硬化模型,分为模型组、竞争性短核糖核苷酸阴性对照序列(scramble-NC)组和miR-499-5p上调组各10只,另选10只健康Wistar大鼠为正常组。构建miR-499-5p表达载体,检测血清氧化应激指标[丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、肌酸激酶(CK)、髓过氧化物酶(MPO)]、炎症因子[白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-10]水平。HE染色观察心肌细胞凋亡,Western blot法检测心肌细胞凋亡相关蛋白[B细胞淋巴瘤/白血病-xl(Bcl-xl)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)]的表达。结果模型组、scramble-NC组、miR-499-5p上调组较正常组血清CK、MDA、MPO、IL-1β、TNF-α水平和心肌细胞凋亡率、Bax蛋白表达升高,SOD、IL-10水平和Bcl-xl蛋白表达降低(P均<0.05);miR-499-5p上调组较模型组及scramble-NC组血清CK、MDA、MPO、IL-1β、TNF-α水平和心肌细胞凋亡率、Bax蛋白表达降低,SOD、IL-10水平和Bcl-xl蛋白表达升高(P均<0.05)。结论miR-499-5p上调可逆转动脉粥样硬化所致氧化应激、血管炎症反应,抑制大鼠动脉粥样硬化发展,可能通过调控Bax、Bcl-xl蛋白表达,抑制心肌细胞凋亡。

香砂六君子汤对慢性萎缩性胃炎大鼠的作用研究

目的研究香砂六君子汤对慢性萎缩性胃炎(CAG)大鼠胃组织Bcl-2相关凋亡促进因子(BAD)、B淋巴细胞瘤-XL(Bcl-XL)、Bcl-2相关X蛋白(BAX)基因及其蛋白表达水平的影响。方法用综合法复制CAG动物模型。按随机数字表法将造模成功Wistar大鼠随机分为5组:模型组、对照组和高、中、低3个剂量实验组;另取正常大鼠作为正常组,每组均20只。正常组和模型组大鼠给予馏水灌胃,高、中、低3个剂量实验组分别给予香砂六君子汤24,12,6g·kg^-1·d^-1灌胃,对照组给予维酶素0.30 g·kg^-1·d^-1灌胃,持续给药120 d。用免疫印迹法检测BAD、Bcl-XL和BAX蛋白表达水平(灰度值),用实时荧光定量聚合酶链反应法检测BAD、Bcl-XL和BAX基因表达水平(荧光值)。结果正常组、模型组、对照组和高、中、低3个剂量实验组的BAD蛋白表达量分别为0.24±0.06,1.23±0.28,0.58±0.07,0.41±0.13,0.80±0.10和1.07±0.20;这6组的Bcl-XL蛋白表达量分别为0.42±0.02,2.52±0.29,0.84±0.09,0.47±0.02,0.85±0.16和2.01±0.26;这6组的BAX蛋白表达量分别为1.17±0.37,0.36±0.05,0.51±0.07,1.07±0.21,0.59±0.09和0.44±0.05。上述指标:模型组与正常组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01);高剂量实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01)。基因表达结果与蛋白表达的趋势一致。结论香砂六君子汤通过上调胃组织BAX基因及其蛋白表达,下调BAD、Bcl-XL基因及其蛋白表达,达到影响CAG的作用。