Cdc7Mcm2在弥漫大B细胞淋巴瘤的表达与预后的相关性研究

目的:探讨弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者中Cdc7、Mcm2的表达及与预后的关系。方法:收集2008年1月至2010年1月收治的60例DLBCL初治患者的性别、年龄、ECOG评分、Ann Arbor分期、IPI评分、骨髓累及、B症状有无、结外受累数目、血乳酸脱氢酶(LDH)数值、治疗模式、组织细胞来源等临床资料,应用免疫组化法测定组织蜡块中Cdc7、Mcm2蛋白的表达,分析其与预后的关系。结果:经单因素分析,Cdc7阳性和阴性表达者2年生存率分别为41%、73%(P<0.05);Mcm2阳性和阴性表达者分别为25%、75%(P<0.05);临床资料:ECOG评分(0～1分vs 2分)(76.7%vs 233%);Ann Arbor分期(Ⅰ～Ⅱ期vsⅢ～Ⅳ期)(65.0%vs 35.0%);IPI(0～1分vs≥2分)(78.3%vs 21.7%);LDH(正常vs高于正常)(70.0%vs 30.0%);单纯化疗vs化疗+放疗(41.7%vs 583%);GCB vs ABC来源(53.3%vs 46.7%)其2年生存率差异具有统计学意义(P<0.05)。Cdc7和Mcm2的表达与DLBCL的临床分期和IPI评分具有相关性(P<0.05),Ⅲ/Ⅳ期DLBCL患者Cdc7和Mcm2的表达高于Ⅰ/Ⅱ期患者,IPI评分越高,Cdc7和Mcm2的表达也越强。结论:除IPI评分、治疗模式、组织细胞来源是DLBCL的预后因素外,Cdc7和Mcm2高表达是影响DLBCL患者预后的不良因素。

结肠腺癌细胞微小RNA-21-5p和B细胞慢性淋巴细胞白血病/淋巴瘤7表达的关系及其临床意义

目的探讨微小RNA(miR)-21-5p/B细胞慢性淋巴细胞白血病/淋巴瘤7(BCL7A)轴在对结肠腺癌细胞系体外增殖和迁移的作用。方法通过生物信息学公共数据库GEPIA2和Starbase 2.0官网分析miR-21-5p和BCL7A在结肠腺癌中的表达特点,以及两者的相互关系。并开展体外细胞学研究,采用48孔板体外培养结肠腺癌细胞系Caco-2细胞,设立miR-21-5p模拟物组(miR-21-5p mimics)、mimics阴性对照组(mimics NC)、miR-21-5p抑制剂组(miR-21-5p inhibitor)、inhibitor阴性对照组(inhibitor NC)、miR-21-5p inhibitor+sh-BCL7A组,每组3个样本,均采用慢病毒转染实验过表达或敲减相应基因。基因干扰成功后,采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)用于检测Caco-2细胞的BCL7A表达水平,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活力,划痕实验实验来评估细胞迁移率。结果生物信息学分析结果显示,结肠腺癌组织miR-21-5p表达水平为17.6±3.8,高于癌旁样本(11.5±2.6,t=7.587,P<0.05)。体外细胞学研究结果显示,miR-21-5p mimics组BCL7A表达水平为(98.5±10.5)%,高于mimics NC组[(44.5±5.2)%,t=7.982,P<0.05];miR-21-5p inhibitor组的细胞增殖活力(55.3±6.5)%,低于inhibitor NC组[(99.6±15.5)%,t=4.565,P<0.05];迁移率为(38.5±5.2)%,低于inhibitor NC组(75.6±12.0,t=4.913,P<0.05);miR-21-5p inhibitor+sh-BCL7A组的细胞增殖活力为(75.2±9.3)%,高于miR-21-5p inhibitor组[(55.3±6.5)%,t=3.038,P<0.05];迁移率为(55.3±8.2)%,高于miR-21-5p inhibitor组[(38.5±5.2)%,t=2.997,P<0.05]。结论miR-21-5p在结肠腺癌细胞增殖和迁移上具有重要作用。

BCL7A在肝细胞癌中的表达及对患者预后、肝癌细胞侵袭、迁移的影响

目的:分析B细胞淋巴瘤7A(BCL7A)在肝细胞癌中的表达以及与预后的关系,以及BCL7A表达对肝癌细胞侵袭、迁移的影响和机制。方法:前瞻性收集2017年11月至2018年3月于南通大学附属医院肝胆外科行根治性肝切除术的40例肝细胞癌患者的癌组织及癌旁组织用于提取蛋白质,其中男性29例,女性11例,年龄(58.5±10.4)岁。从癌症基因组图谱(TCGA)数据库中下载374例肝细胞癌和50例癌旁组织样本信息,肝癌细胞系Hep3B、SMMC-7721分别转染过表达BCL7A质粒及空载体质粒(阴性对照)。Western印迹和免疫组化检测BCL7A表达,Western印迹检测上皮间质转化相关蛋白表达(神经钙黏素、上皮钙黏素、锌指转录因子)。Transwell以及细胞划痕实验检测细胞侵袭迁移能力。结果:TCGA中50例肝细胞癌患者(癌组织与癌旁组织匹配),与癌旁组织相比,癌组织中BCL7A的mRNA相对表达显著升高,差异具有统计学意义( t=13.38, P<0.001)。依据BCL7A mRNA表达水平的中位数将374例患者分为BCL7A高表达组( n=187)和低表达组( n=187),BCL7A高表达患者术后累积生存率低于低表达组,差异有统计学意义( χ^(2)=6.95, P=0.009)。Western印迹检测肝胆外科切除的手术标本,癌组织中BCL7A蛋白相对表达也高于癌旁组织。显微镜下(×20),与对照组比较,肝癌细胞Hep3B和SMMC-7721的BCL7A过表达组侵袭的细胞数更多(153.7±1.3)个比(63.7±4.7)个、(307.7±25.1)个比(72.3±12.5)个,差异均具有统计学意义( t=7.97、8.38,均 P=0.001)。细胞划痕实验结果与Transwell侵袭检测结果一致。肝癌细胞BCL7A过表达组神经钙黏素、锌指转录因子表达高于对照组,上皮钙黏素低于对照组,差异均有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:肝细胞癌患者癌组织中BCL7A表达升高,并且与不良预后相关。BCL7A可能通过促进上皮间质转化促进肝癌细胞转移和侵袭能力。