癌基因B细胞特异的莫洛尼白血病病毒插入位点1基因和埃兹蛋白在大肠癌组织的表达及意义

目的观察癌基因B细胞特异的莫洛尼白血病病毒插入位点1基因（Bmi-1）和埃兹蛋白（Ezrin）在大肠癌组织中的表达，探讨Bmi-1和Ezrin与大肠癌的相关性。方法采用免疫组织化学法检测75例大肠癌患者手术切除的肿瘤组织和癌旁组织中Bmi-1和Ezrin表达水平。结果Bmi-1在癌旁组织中阳性表达率为22．67％（17／75），在大肠癌组织中阳性表达率为85．33％（64／75），两者差异有统计学意义（P〈0．01），Bmi-1表达水平与大肠癌浸润深度、TNM分期、淋巴结转移有关（P〈0．05）；Ezrin在癌旁组织中阳性表达率为13．33％（10／75），在大肠癌组织中阳性表达率为72．00％（54／75），两者差异有统计学意义（P〈0．01），Ezrin表达水平与大肠癌组织学分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关（P〈0．05）。结论检测Bmi-1和Ezrin有助于评估大肠癌患者的不良预后。

RNA干扰沉默B细胞特异的莫洛尼白血病病毒插入位点1基因对前列腺癌PC-3细胞增殖和凋亡的影响

目的观察RNA干扰沉默B细胞特异性莫洛尼白血病病毒插入位点1（Bmi—1）基因对前列腺癌PC-3细胞增殖和凋亡的影响。方法PC-3细胞随机分为3组，分别转染Bmi-1靶序列干扰RNA（Bmi．1-siRNA）、无义对照siRNA、空白脂质体。48h后收集细胞，逆转录-聚合酶链反应（RT．PCR）、Westernblot检测Bmi-1mRNA和蛋白表达水平。96孔板噻唑蓝（MTT）法检测细胞增殖活力，流式细胞仪检测凋亡率。结果PC．3细胞经Bmi—l—siRNA干扰后Bmi-1mRNA和蛋白质表达水平下调（P〈0．05）。与对照组比较，实验组细胞增殖明显受到抑制（P〈0．05）。实验组细胞凋亡率为（23．77±2．23）％，与空白对照组[（7．05±0．88）％]和阴性对照组[（6．89±I．02）％]比较明显增高（P〈0．05）。结论Bmi．1．siRNA能通过沉默靶基因Bmi—l表达抑制前列腺癌PC-3细胞增殖并促进细胞凋亡。

B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒插入位点1在头颈部鳞状细胞癌中的研究进展

在中国,头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)占全部恶性肿瘤的3%,严重影响患者的生命健康。多数研究显示,B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒插入位点1(BMI1)基因在HNSCC中异常表达,其通过调节肿瘤细胞的干性促进肿瘤的发生发展,是一个具有巨大潜力的新型治疗靶点。本文回顾近年来的相关文献,从BMI1对肿瘤发生、增殖、迁移、免疫调节的作用及其抑制剂的应用进展等方面做一综述,为深入研究其作为治疗HNSCC的潜在靶点提供参考。

B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒整合位点1的生物学功能及肿瘤相关性的研究进展

B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒整合位点1(BMI1)是第一个被发现的多梳基因家族(PcG)成员,BMI1在乳腺癌、结直肠癌和食管鳞状细胞癌等多种人类恶性肿瘤中表达异常升高,参与细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移的调控,与患者的临床特征、化疗耐药性和不良预后密切相关。BMI1基因与干细胞的自我更新和一系列恶性肿瘤的发生、发展及预后密切相关,可能是一个重要的肿瘤治疗靶点,因而日益被重视。本文就BMI1的结构、功能及其在肿瘤细胞中生物学作用的研究进展进行综述。

急性髓系白血病患者细胞淋巴瘤滤过性病毒插入位点1的表达水平与凋亡的关系

目的 分析急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者外周血B细胞淋巴瘤滤过性病毒插入位点1(B cellspecific moloney leukemia virus insert site-1,BMI-1)的表达水平及其与血清B细胞淋巴瘤基因-2家族(B-cell lymphoma 2,Bcl-2)、原癌基因(proto-oncogene,c-myc)的关系。方法 选取2016年2月至2021年2月于安徽医科大学第一附属医院东区就诊的80例AML患者作为观察组,选取同期80例健康体检的志愿者作为对照组。定量反转录PCR检测受试者外周血BMI-1 mRNA表达水平。酶联免疫吸附试验检测两组血清Bcl-2、c-Myc、白细胞介素6、白细胞介素10、转化生长因子-β水平。入组后记录两组受试者白细胞计数、红细胞计数、血小板计数及血红蛋白水平。Pearson分析外周血BMI与血清Bcl、c-Myc水平相关性。结果 观察组患者白细胞计数、红细胞计数、血小板计数和血红蛋白水平明显低于对照组(P<0.05)。观察组患者白细胞介素6、白细胞介素10水平高于对照组,转化生长因子-β水平低于对照组(P<0.05)。观察组患者外周血BMI mRNA表达水平、血清Bcl、c-myc明显高于对照组(P<0.05)。外周血BMI mRNA水平与血清Bcl-2与、c-Myc之间均呈正相关(r=0.624,P=0.023;r=0.454,P=0.035)。结论 BMI mRNA、Bcl、c-myc在AML中表达较高,参与AML的发生发展过程,可为临床诊断和治疗AML提供一定的理论依据。

B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒插入位点1促进炎症微环境中人结直肠癌细胞HT-29细胞上皮-间质转化及侵袭

目的 探讨原癌基因B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒插入位点1(Bmi-1)对炎症微环境中人结直肠癌细胞HT-29细胞肿瘤迁移及上皮-间充质转化(EMT)的作用及机制。方法 实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)及Western blot法,检测Bmi-1、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的基因水平及Bmi-1蛋白水平,酶联免疫吸附剂测定法检测上清TNF-α和IL-6水平。噻唑蓝比色法和Transwell侵袭试验分别检测细胞增殖和侵袭能力,Western blot法检测EMT相关标记及核因子-κB (NF-κB)通路关键蛋白。结果 HT-29细胞经人急性单核细胞白血病细胞条件培养基(THP-1-CM)刺激后,Bmi-1、TNF-α和IL-6的基因表达均增高(1.86±0.08比1.00±0.05,2.38±0.13比1.00±0.14,3.00±0.15比1.00±0.05,P<0.01),Bmi-1蛋白含量增高(1.68±0.08比1.00±0.05,P<0.01),上清TNF-α和IL-6水平也有不同程度增加[(73±4) pg/ml比(32±4) pg/ml、(140±9) pg/ml比(42±9) pg/ml,P<0.01]。沉默Bmi-1基因后,HT-29细胞分泌TNF-α和IL-6的水平下降[(31±3)、(56±8) pg/ml]。THP-1-CM刺激后,细胞侵袭性增加,但对细胞增殖无影响。进一步检测发现,EMT相关标记E-钙黏素表达下调,波形蛋白和N-钙黏附素水平及NF-κB通路关键蛋白NF-κB p65的磷酸化上调。沉默Bmi-1基因后,减弱细胞侵袭,上皮细胞-间充质转化受抑制,NF-κB通路活化受抑制。结论 Bmi-1可能参与调控THP-1-CM诱导的HT-29细胞炎性因子的产生,并通过上皮细胞-间充质转化影响侵袭,与NF-κB通路活性有关。

晚期结直肠癌西妥昔单抗治疗前后循环肿瘤DNA、循环B细胞特异性莫洛尼白血病病毒插入位点1 mRNA和微小RNA-21水平变化

目的探讨晚期结直肠癌表皮生长因子受体(EGFR)单克隆抗体治疗前后循环肿瘤DNA(ctDNA)、循环B细胞特异性莫洛尼白血病病毒插入位点1 mRNA(Bmi-1mRNA)、微小RNA-21(miR-21)变化及与治疗反应性的关联性。方法回顾性分析2019年3月至2021年3月烟台毓璜顶医院98例晚期结直肠癌患者的临床资料。西妥昔单抗治疗后完全缓解4例,部分缓解26例,疾病稳定39例,疾病进展29例。将完全缓解和部分缓解作为缓解组(30例),疾病稳定和疾病进展作为未缓解组(68例)。治疗前和治疗2个周期后采用高通量测序方法检测血浆ctDNA水平,采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测Bmi-1mRNA和miR-21水平。采用Spearman相关性分析治疗2个周期后ctDNA、Bmi-1mRNA和miR-21与治疗反应性的关系;采用多因素Logistic回归分析影响治疗反应性的独立危险因素;绘制受试者工作特征(ROC)曲线,评估治疗2个周期后ctDNA、Bmi-1mRNA和miR-21预测缓解的价值。结果两组治疗前ctDNA、Bmi-1mRNA和miR-21比较差异无统计学意义(P>0.05);缓解组治疗2个周期后ctDNA、Bmi-1mRNA和miR-21明显低于未缓解组[(10.03±3.32)μg/L比(15.33±5.14)μg/L、0.13±0.04比0.19±0.05和0.81±0.26比1.08±0.24],差异有统计学意义(P<0.01)。Spearman相关性分析结果显示,ctDNA、Bmi-1mRNA和miR-21与治疗反应性呈负相关(r=-0.500、-0.506和-0.531,P<0.01)。多因素Logistic回归分析结果显示,控制远处转移器官数量和临床分期后,ctDNA、Bmi-1mRNA和miR-21仍是影响晚期结直肠癌患者治疗反应性的独立危险因素(OR=3.342、2.725和1.838,95%CI 3.116~3.584、2.647~2.805和1.768~1.911,P<0.01)。ROC曲线分析结果显示,治疗2个周期后ctDNA、Bmi-1mRNA联合miR-21预测治疗反应性的曲线下面积最大为0.922。结论晚期结直肠癌患者EGFR单克隆抗体治疗前后ctDNA、Bmi-1mRNA和miR-21变化与治疗反应性有关,联合检测有利于筛查EGFR靶向治疗的敏感患者,并能为寻找晚期结直肠癌分子干预新靶点提供参考。

siRNA沉默Bmi-1基因表达对宫颈癌细胞增殖的影响

目的探讨siRNA沉默B细胞特异的莫洛尼白血病病毒插入位点1基因(Bmi-1)表达对宫颈癌细胞增殖的影响研究。方法通过脂质体转染siRNA Bmi-1及阴性对照(control)到人宫颈癌Hela细胞,采用Realtime PCR及western blot法检测细胞中Bmi-1的表达。MTT法检测细胞活力,Annexin V-PI流式双染及Hoechst染色检测细胞凋亡情况,流式细胞术检测细胞周期,western blot法检测细胞中p16,p53,Cyclin D1及Rb的表达。结果与Control组比较,siRNA Bmi-1组细胞中Bmi-1蛋白及mRNA表达量皆显著降低(P<0.01),同时细胞活力下降,细胞凋亡率提高(P<0.01),细胞周期阻滞在G1期(P<0.01),细胞中p16表达量上调(P<0.01),p53及Cyclin D1表达量下调(P<0.01),Rb磷酸化水平降低(P<0.01)。结论 Bmi-1具有抑制宫颈癌Hela细胞增殖的作用,可能与调控细胞周期相关蛋白表达有关。

B细胞特异性莫洛氏鼠白血病病毒插入位点-1、原癌基因和肝癌缺失基因-1在宫颈癌中的表达及其临床意义

目的研究B细胞特异性莫洛氏鼠白血病病毒插入位点-1(BMI-1)、原癌基因(C-myc)和肝癌缺失基因-1(DLC-1)在宫颈癌中的表达及其意义。方法收集43例宫颈癌组织为A组,21例宫颈上皮内瘤变组织为B组,以及20例良性病变宫颈组织为C组。用免疫组化PV-9000二步法检测BMI-1、Cmyc和DLC-1蛋白的表达,用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测BMI-1、C-myc和DLC-1 mRNA的表达,并分析其与宫颈癌临床病理因素的关系和三者表达的相关性。结果 A组、B组和C组BMI-1 mRNA的表达量分别为0. 93±0. 09,0. 29±0. 06和0. 17±0. 03,C-myc mRNA的表达量分别为0. 96±0. 08,0. 29±0. 04和0. 16±0. 03,DLC-1 mRNA的表达量分别为0. 11±0. 01,0. 83±0. 11和0. 95±0. 16,两两比较,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。宫颈癌组织中BMI-1、C-myc和DLC-1的表达与患者的年龄、临床病理类型均无明显的相关性(均P> 0. 05),与患者的FIGO临床分期、淋巴结是否转移和分化程度均有明显的相关性(均P <0. 05)。DLC-1的蛋白表达水平与BMI-1、C-myc的蛋白表达水平均呈负相关(均P <0. 01)。结论在宫颈癌中,BMI-1和C-myc呈高表达,DLC-1呈低表达,其均与宫颈癌患者的FIGO分期、分化程度和淋巴结转移密切相关,联合检测BMI-1、C-myc和DLC-1可作为评价宫颈癌生物学行为和判断预后的参考指标。

B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒插入位点-1在胃癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒插入位点-1(B-cell-specific Moloney murine leukemia virus integration site-1,Bmi-1)蛋白在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组织化学法检测正常胃黏膜、慢性非萎缩性胃炎、慢性萎缩性胃炎、异型增生及胃癌组织中Bmi-1、c-myc和Zeste基因增强子同源物2(enhancer of Zeste homolog 2,EZH2)蛋白的表达。结果:Bmi-1蛋白在正常胃黏膜、慢性非萎缩性胃炎、慢性萎缩性胃炎、异型增生和胃癌组织中的阳性表达率分别为5.0%、16.7%、30.7%、58.1%和78.0%,各组间差异有统计学意义(P<0.05)。胃癌组织中Bmi-1高表达率为45.0%,其表达水平与肿瘤大小、分化程度、浸润深度、淋巴结转移和TNM分期有关(P<0.05)。胃癌组织中Bmi-1的表达与c-myc、EZH2表达之间呈正相关(rs=0.567,P<0.001;rs=0.582,P<0.001)。结论:Bmi-1在胃癌组织中表达上调,其高表达与胃癌的分化程度、浸润深度和淋巴结转移有关。

siRNA干扰BMI-1基因对膀胱癌EJ细胞增殖的调控作用及其机制

目的:对比观察膀胱癌EJ细胞及人膀胱移行上皮细胞中BMI-1基因及下游p16INK4a、p14ARF基因的mRNA及蛋白表达水平,探讨siRNA干扰BMI-1基因后对EJ细胞增殖的影响及其调控机制。方法:细胞免疫荧光观察BMI-1、p16INK4a和p14ARF蛋白在EJ细胞中表达情况及定位。Real-time RT-PCR检测EJ细胞及膀胱正常移行上皮细胞中3种基因的表达水平,Western blotting检测蛋白水平。构建干扰BMI-1基因siRNA,通过脂质体转染导入EJ细胞中,设立空白对照和阴性干扰对照组,检测BMI-1及下游p16、p14基因表达水平及蛋白表达水平的变化;以CCK-8检测细胞生长观察siRNA干扰BMI-1表达对EJ细胞增殖的抑制作用;用流式细胞术分析细胞凋亡的改变。结果:BMI-1mRNA及蛋白水平在EJ细胞表达高于膀胱移行上皮细胞,而p16INK4a和p14ARFmRNA及蛋白在EJ细胞表达水平稍低于膀胱移行上皮细胞。siRNA干扰BMI-1后可以上调EJ细胞中其下游p16和p14 mRNA及蛋白水平,使EJ细胞增殖能力下降,细胞凋亡增多。结论:siRNA干扰BMI-1基因表达对EJ细胞的体外生长具有明显的抑制作用,其作用机制与上调其下游p16INK4a、p14ARF基因的表达有关。

Bmi-1基因的过表达对人结肠癌细胞株SW480/CD133^+细胞增殖的影响

目的探讨Bmi-1基因过表达对人结肠癌细胞株SW480/CD133^+细胞增殖的影响。方法用携带Bmi-1基因的质粒(pMSCV-Bmi-1)感染人结肠癌SW480/CD133^+细胞,作为观察组(pMSCV-Bmi-1/CD133^+组);以空质粒(pMSCV)感染SW480/CD133+细胞,作为空质粒对照组(pMSCV/CD133^+组);空白对照组不作任何处理,常规培养。用实时荧光PCR和免疫印迹法分别检测细胞中Bmi-1 mRNA水平和蛋白表达的水平;平板克隆实验检测细胞增殖能力的变化。结果观察组Bmi-1 mRNA和蛋白表达的水平均较空质粒对照组和空白对照组显著增高(均P<0.01)。观察组、空质粒对照组和空白对照组的细胞克隆形成率分别为(88.45±5.79)%,(52.33±3.62)%和(54.66±4.03)%,观察组分别高于空质粒对照组和空白对照组(均P<0.01)。结论成功地将Bmi-1基因导入SW480/CD133^+细胞,并能使其在mRNA水平和蛋白水平稳定、持续地表达。Bmi-1过表达可以显著增强人结直肠癌SW480/CD133^+细胞的克隆形成能力,促进SW480/CD133^+细胞增殖。

B淋巴细胞特异单克隆鼠白血病病毒整合位点基因-1及辅助性T淋巴细胞相关细胞因子在儿童免疫性血小板减少症中的变化

目的通过检测新诊断免疫性血小板减少症（ITP）患儿B淋巴细胞特异单克隆鼠白血病病毒整合位点基因-1（Bmi-1）及辅助性T淋巴细胞相关因子1干扰素（IFN-γ）、白细胞介素4（IL-4）mRNA的表达变化，分析探讨Bmi-1及Th1／Th2细胞比例在新诊断ITP患儿中的变化及意义。方法试验组36例ITP患儿均来源于新乡医学院第一附属医院儿科2013年4至12月住院和门诊患儿，同期小儿外科择期手术患儿26例作为对照组，采用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测外周血淋巴细胞中Bmi-1、TFN-γ、IL-4mRNA的表达；并采用t检验和直线相关分析进行分析比较。结果1．试验组外周血淋巴细胞中Bmi-1 mRNA为2．63±0．54，对照组Bmi-1 mRNA为3．91±0．92，试验组明显低于对照组（P〈0．001）；试验组IFN-γmRNA为3．84±0．43，对照组IFN-γmRNA为2．88±0．57，试验组明显高于对照组（P〈0．001）；试验组IL-4mRNA为1．444-0．39，对照组IL4mRNA为1．874-0．34，试验组明显低于对照组（P〈0．001）。2．试验组外周血淋巴细胞中IFN-γmRNA表达与IL-4mRNA表达呈负相关（r=一0．667，P〈0．001），IL-4mRNA表达与Bmi-1mRNA表达呈正相关（r=0．776，P〈0．001），IFN-γmRNA表达与Bmi-1mRNA表达无相关性（r=一0．206，P〉0．05）。结论Bmi-1可能通过调节Th细胞参与ITP发病；ITP患儿存在Th细胞功能紊乱、Th1／Th2比例失调，可能是Th1优势。

BMI-1基因和蛋白在子宫颈癌中的表达和临床意义

目的探讨B细胞特异的莫洛尼白血病毒插入位点1(BMI-1)基因在子宫颈癌组织中的表达及其与临床病理参数的关系,初步评价BMI-1基因在子宫颈癌发生、发展中的作用及其意义。方法收集30例子宫颈癌患者的癌组织及10例子宫肌瘤患者的子宫颈组织,采用实时定量PCR方法检测患者子宫颈组织的BMI-1 mRNA的表达情况;采用SP免疫组织化学法对以上40例手术标本石蜡切片进行染色,检测BMI-1蛋白的表达。结果子宫颈癌组织中BMI-1 mRNA及蛋白的表达高于正常子宫颈组织,差异具有统计学意义(P<0.05);中低分化子宫颈癌组织中BMI-1蛋白的表达高于高分化子宫颈癌组织中的表达,差异具有统计学意义(P<0.05);伴有淋巴结转移的子宫颈癌组织中BMI-1蛋白的表达高于无淋巴结转移的子宫颈癌组织,差异具有统计学意义(P<0.05);BMI-1蛋白在子宫颈鳞癌与腺癌的相对表达量差异无统计学意义(P>0.05)。结论 BMI-1基因的过表达在子宫颈癌的发生发展中有重要意义,与子宫颈癌组织的分化程度、淋巴结转移密切相关。

Bmi-1基因与大肠癌术后相关性研究进展

大肠癌是临床常见的恶性肿瘤，包括盲肠、结肠和直肠的癌症。近年来在世界范围内大肠癌的发病率呈上升趋势，其中在西欧、北美等经济发达国家和地区，其发病率处于全部恶性肿瘤第2位；大肠癌在我国发病率处于全部恶性肿瘤第3位，

BMI-1和MMP-3基因多态性与汉族群体乳腺癌易感性的关联分析

目的研究B细胞特异性白血病病毒插入位点-1(BMi-1)和基质金属蛋白酶-3(MMP-3)基因的3个单核苷酸多态性与汉族乳腺癌易感性的关联。方法基于病例-对照组研究方法,选取2014年1月至2018年7月齐齐哈尔医学院第二、三附属医院、齐齐哈尔建华医院和大庆油田总医院的524例汉族女性乳腺癌患者作为病例组,同期进行健康体检的518例健康体检者作为对照组,应用PCR-LDR技术对BMI-1基因rs1042059、rs201024480位点以及MMP-3基因rs3025058位点的基因多态性进行检测分型,用风险值(OR)和95%置信区间(CI)表示患病风险。结果病例组与对照组相比,MMP-3基因rs3025058位点等位基因频率和基因型分布在两组间有显著性差异(P=0.008);BMI-1基因rs201024480、rs1042059位点基因多态性在两组间比较,差异无统计学意义(P>0.05);校正混杂因素后,携带等位基因5A和基因型5A5A的群体乳腺癌发病风险分别提高1.51和1.48倍(OR=1.51,95%CI:1.17-1.94;P=0.001和OR=1.48,95%CI:1.16-1.91;P=0.001)。结论MMP-3基因rs3025058的多态性与乳腺癌发病风险存在关联,可作为乳腺癌易感基因的候选位点。

BMI-1基因在妇科肿瘤中的研究进展

B细胞特异的莫洛尼白血病毒插入位点1基因(B-cell specific moloneymurine leukemiavirus insertion site 1,BMI-1)是多疏基因(polycomb group gene)家族重要的调节基因,被认为是癌基因。BMI-1在调节干细胞自我更新、细胞增殖和衰老中发挥重要作用。近年研究发现,BMI-1在多种肿瘤中表达异常,如乳腺癌、肝癌和鼻咽癌等,其不仅与肿瘤的发生、发展密切相关,而且在肿瘤的诊断、病情评估和预后等方面发挥着重要作用。目前,关于BMI-1在妇科肿瘤中的研究尚少,但现有研究证实其与妇科肿瘤的发生发展显著相关。随着对该基因深入研究,其在妇科肿瘤的诊断、治疗、预后等方面将发挥重要的作用。

类转录激活因子效应物核酸酶介导的E-cad和Bmi-1基因联合干预鼻咽癌的体外研究

目的:检测类转录激活因子效应物核酸酶(transcription activator-like effector nuclease,TALEN)介导的E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)、B细胞特异性莫洛尼氏白血病毒插入位点1(B-lymphoma Moloney murine leukemia virus insertion region-1,Bmi-1)基因联合干预对鼻咽癌细胞生物学行为的影响。方法:构建多位点基因打靶载体p UC-DS1-E-cad-2ANeo-DS2(以下简称E-cad打靶载体)和p UC-DS1-Bmi-1 sh RNA-Zeo-DS2(以下简称Bmi-1打靶载体),将E-cad打靶载体、Bmi-1打靶载体及佛山科学技术学院分子医学研究院前期构建的TALEN载体以不同组合转染鼻咽癌CNE-2细胞。采用PCR检测靶基因的整合,Western印迹检测靶基因蛋白表达水平变化,细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测细胞增殖能力变化,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡变化,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力变化。结果:靶基因E-cad和Bmi-1 sh RNA表达元件成功整合到鼻咽癌CNE-2细胞的基因组中;转染后鼻咽癌CNE-2细胞中E-cad的蛋白表达水平明显上升,Bmi-1的蛋白表达水平明显下降;干预E-cad及Bmi-1不影响细胞的增殖、周期和凋亡,但显著抑制细胞的迁移和侵袭能力,且E-cad和Bmi-1联合干预比单独干预更能显著抑制鼻咽癌CNE-2细胞体外迁移能力(均P<0.01)。结论:TALEN介导的E-cad和Bmi-1联合干预能有效抑制鼻咽癌CNE-2细胞的体外迁移和侵袭,可为人类癌症的基因治疗建立前期的实验基础。

宫颈上皮内瘤变及宫颈癌组织中DLC-1、BMI-1、C-myc、FHIT的表达及意义

目的检测宫颈上皮内瘤变(CIN)及宫颈癌组织中肝癌缺失基因1(DLC-1)、B细胞特异性莫洛尼白血病毒插入位点1(BMI-1)、原癌基因C-myc、氨酸三联体基因(FHIT)的表达,探讨其在宫颈癌发生发展中的作用。方法选取宫颈CIN组织32例、宫颈癌组织47例、正常宫颈组织20例。采用免疫组化法检测各宫颈组织中DLC-1、BMI-1、C-myc、FHIT蛋白的表达情况。分析DLC-1、BMI-1、C-myc、FHIT蛋白表达与CIN及宫颈癌组织病理特点的关系。结果宫颈癌组织及CIN组织中DLC-1、FHIT阳性表达率均低于正常宫颈组织,BMI-1、C-myc阳性表达率均高于正常宫颈组织(P均<0.05)。宫颈癌组织中DLC-1、FHIT阳性表达率均低于CIN组织,BMI-1、C-myc阳性表达率均高于CIN组织(P均<0.05)。CINⅠ级组织BMI-1、C-myc阳性表达率均高于CINⅡ、Ⅲ级(P均<0.05)。宫颈癌组织中,DLC-1表达与FIGO分期、病理分级、淋巴结转移相关,BMI-1表达与FIGO分期、淋巴结转移相关,C-myc表达与FIGO分期、病理分级相关,FHIT表达与FIGO分期相关(P均<0.05)。结论与宫颈CIN组织相比,宫颈癌组织中DLC-1、FHIT表达较低,BMI-1、C-myc表达率较高;DLC-1、BMI-1、C-myc、FHIT与宫颈癌的发生发展密切相关。

microRNA-218在肝细胞癌中的表达及功能研究

目的探讨microRNA-218在肝细胞癌(HCC)中的表达水平及功能。方法选取该院肝胆外科收治的46例HCC手术患者,并将其分为转染组和未转染组,比较两组HepG2细胞的microRNA-218表达、增殖、凋亡情况,以及B细胞特异性莫洛尼白血病病毒插入位点1(Bmi-1)和周期蛋白依赖性激酶6(CDK6)的表达水平。结果肝癌组织中microRNA-218表达水平明显低于癌旁组织(P<0.05);microRNA218的表达水平与HCC的肿瘤大小、肿瘤TNM分期等临床病理特征密切相关(P<0.05);转染组HepG2细胞增殖率在转染后24、48、72h均明显低于未转染组(P<0.05);转染组HepG2细胞凋亡率明显高于未转染组(P<0.05);HepG2细胞转染后的Bim-1、CDK6表达水平均明显低于未转染组(P<0.05)。结论 microRNA-218可通过下调潜在靶点的Bim-1、CDK6表达水平来抑制肝癌细胞增殖并促进其凋亡。