B细胞转位基因3在乳腺癌组织的表达及其对乳腺癌细胞增殖和侵袭的影响

目的观察B细胞转位基因3(BTG3)在乳腺癌组织中的表达及其对乳腺癌细胞增殖和侵袭的影响.方法选择80例乳腺癌患者的乳腺癌组织和癌旁组织,采用蛋白质印迹法(Western blot)和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定乳腺癌组织和癌旁组织中BTG3蛋白和mRNA水平.将MCF-7细胞分为Blank组(不转染)、NC组(转染空载体)和Ex-BTG3组(转染过表达BTG3载体).噻唑蓝(MTT)法测定细胞增殖能力,Transwell小室测定细胞侵袭能力,划痕实验测定细胞迁移能力,Western blot和RT-PCR测定细胞BTG3、转化生长因子-β1(TGF-β1)、人信号转导分子7(Smad7)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)蛋白和mRNA水平.采用t检验和方差分析.结果乳腺癌细胞MCF-7中BTG3蛋白(0.18±0.06)和mRNA水平(0.56±0.07)均低于正常乳腺上皮细胞HBL-100 (0.44 ±0.09、1.00 ±0.04)(t=5.375、12.203,P<0.05).与Blank组和NC组比较,Ex-BTG3组MCF-7细胞吸光度(A)值降低(t=4.214、4.185、3.941、3.952,P<0.05),侵袭细胞数降低(t=5.624、5.315,P<O.05),划痕面积升高(t=7.426、7.437,P<0.05),TGF-β1、Vimentin蛋白水平降低(t=3.012、3.024、3.105、3.108,P<0.05),BTG3、Smad7、E-cadherin蛋白水平升高(t=4.516、4.518、3.231、3.118、3.402、3.411,P<0.05).结论乳腺癌组织中BTG3水平下降,过表达BTG3可通过抑制TGF-β1/Smad信号通路抑制乳腺癌细胞增殖和侵袭能力.

BTg-3对肝癌细胞增殖、侵袭、迁移及Akt/GSK3β/β-catenin信号通路的影响

目的探讨B细胞转位基因3(B cell translocation gene 3,BTg-3)对肝癌细胞增殖、侵袭、迁移及蛋白激酶B/糖原合成酶激酶3β/β连环蛋白(Akt/GSK3β/β-catenin)信号通路的影响。方法Western blot测定肝癌细胞BEL-7402、SMMC-7721和HepG2以及正常肝细胞LO2细胞中BTg-3蛋白表达水平。将HepG2细胞分为空白对照组(N组)、空载体组(V组)、BTg-3过表达组(BTg-3组)和BTg-3过表达+LICL组(BTg-3+LICL组),N组HepG2细胞不转染,V组HepG2细胞转染空载体pcDNA3.1,BTg-3组HepG2细胞转染过表达BTg-3载体pcDNA3.1-BTg-3,BTg-3过表达+LICL组转染过表达BTg-3载体pcDNA3.1-BTg-3同时给予10nmol/LGSK-3β抑制剂氯化锂(LICL)处理。MTT法测定各组细胞增殖能力,细胞克隆形成实验测定各组细胞存活能力,Transwell小室实验测定各组细胞侵袭和迁移能力,Western blot测定各组细胞Akt、磷酸化Akt(p-Akt)、p-GSK3β、β-catenin、细胞周期素D1(Cyclin D1)、神经型钙粘蛋白(N-cadherin)和上皮型钙粘蛋白(E-cadherin)蛋白表达水平。结果人肝癌细胞BEL-7402、SMMC-7721、HepG2中BTg-3蛋白表达水平均低于正常肝细胞LO2(P<0.001)。与N组和V组比较,BTg-3组和BTg-3+LICL组HepG2细胞增殖能力和克隆形成率降低(P<0.05),侵袭细胞数、迁移细胞数降低(P<0.05),p-Akt、p-GSK3β、β-catenin、Cyclin D1、N-cadherin蛋白表达水平降低(P<0.05),BTg-3、E-cadherin蛋白表达水平升高(P<0.05);与BTg-3组比较,BTg-3+LICL组HepG2细胞增殖能力和克隆形成率升高(P<0.05),侵袭细胞数、迁移细胞数升高(P<0.05),p-Akt、p-GSK3β、β-catenin、Cyclin D1、N-cadherin蛋白表达水平升高(P<0.05),BTg-3、E-cadherin蛋白表达水平降低(P<0.05);N组和V组HepG2细胞各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论BTg-3在肝癌细胞中低表达,过表达BTg-3可能通过Akt/GSK3β/β-catenin信号通路抑制肝癌细胞增殖、侵袭和迁移。

喉鳞状细胞癌组织中USP18、BTG3表达变化及与预后的相关性

目的 观察喉鳞状细胞癌组织中泛素特异性蛋白酶18(USP18)和B细胞转位基因3(BTG3)的表达变化,并探讨其与预后的关系。方法 应用免疫组化法检测82例喉鳞状细胞癌组织和50例癌旁正常喉黏膜组织中的USP18、BTG3表达水平,分析二者表达与患者临床病理参数及预后的关系。结果 喉鳞状细胞癌组织中USP18高表达率为37.80%,高于癌旁正常组织的12.00%;BTG3高表达率为45.12%,低于癌旁正常组织的82.00%。肿瘤直径≥3cm、临床分期Ⅰ~Ⅱ期、中低分化、合并淋巴结转移患者USP18高表达率低于肿瘤直径<3cm、临床分期Ⅲ~Ⅳ期、高分化、无淋巴结转移患者(P均<0.05);肿瘤高分化、临床分期Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移患者BTG3高表达率高于肿瘤中低分化、临床分期Ⅲ~Ⅳ期、合并淋巴结转移患者(P均<0.05)。USP18低表达患者的3年总生存率、3年无进展生存率均高于USP18高表达患者,BTG3高表达患者的3年总生存率、3年无进展生存率均高于BTG3低表达患者(P均<0.05)。单因素和多因素回归分析显示,USP18高表达、BTG3低表达是影响喉鳞状细胞癌患者生存时间的危险因素(OR=0.241,95%CI为0.092~0.661,P=0.007;OR=0.336,95%CI为0.182~0.935,P<0.001)。结论 喉鳞状细胞癌组织中USP18表达升高,BTG3表达降低;USP18、BTG3表达状态与临床病理特征具有明显相关性,USP18高表达和BTG3低表达是影响喉鳞状细胞癌患者预后的危险因素。

BTG3在甲状腺乳头状癌组织中的表达及其对细胞增殖、侵袭、迁移的影响

目的:探讨B细胞转位基因3(BTG3)在甲状腺乳头状癌组织中的表达及其对甲状腺乳头状癌TPC-1细胞增殖、侵袭、迁移的影响。方法:选择60例甲状腺乳头状癌患者的新鲜肿瘤标本及其对应的癌旁组织,采用免疫组化法测定组织中BTG3蛋白表达水平。将甲状腺乳头状癌TPC-1细胞分为BTG3过表达组、阴性对照组和空白对照组,分别于0、24、72 h加入10μl CCK-8试剂孵育2 h,测定TPC-1细胞增殖能力(OD值),采用微孔滤膜实验测定TPC-1细胞侵袭和迁移能力,采用蛋白质印迹法测定各组TPC-1细胞的波形蛋白、N-钙粘蛋白和E-钙粘蛋白水平。结果:甲状腺乳头状癌组织中BTG3蛋白阳性率低于癌旁组织(P<0.05)。TPC-1细胞0、24、72 h的OD值BTG3过表达组明显低于阴性对照组和空白对照组相应时间点的OD值(均P<0.001)。TPC-1细胞BTG3过表达组细胞侵袭迁移能力和E-钙粘蛋白水平高于阴性对照组和空白对照组(均P<0.05);波形蛋白、N-钙粘蛋白水平低于阴性对照组和空白对照组(均P<0.05)。结论:BTG3在甲状腺乳头状癌组织中低表达;甲状腺乳头状癌细胞过表达BTG3后,其增殖、侵袭和迁移能力下降,波形蛋白、N-钙粘蛋白和E-钙粘蛋白水平发生变化。

胃癌组织中miR-106b、BTG3的表达变化及意义

目的探讨胃癌组织中微小RNA(miR)-106b、B细胞转位基因3(BTG3)的表达变化及临床意义。方法选择胃癌患者103例,于术中采集患者胃癌组织及其癌旁(距肿瘤边缘>5 cm)正常组织,采用实时荧光定量PCR技术检测胃癌组织及其癌旁正常组织中miR-106b、BTG3 mRNA表达,分析二者表达与胃癌患者临床病理特征的关系及二者之间的相关性。结果胃癌组织及癌旁正常组织中miR-106b相对表达量分别为4.56±1.02、1.26±0.32,BTG3 mRNA相对表达量分别为0.57±0.14、1.21±0.37。胃癌组织中miR-106b相对表达量较癌旁正常组织高(t=31.329,P=0.000),BTG3相对表达量较癌旁正常组织低(t=16.419,P=0.000)。胃癌组织中miR-106b表达与胃癌淋巴结转移、脉管癌栓、TNM分期有关(P均<0.05),而与患者性别、年龄及肿瘤大小、分化程度无关(P均>0.05)。胃癌组织中BTG3 mRNA表达与脉管癌栓、TNM分期有关(P均<0.05),而与患者性别、年龄及肿瘤大小、淋巴结转移、分化程度无关(P均>0.05)。胃癌组织中miR-106b表达与BTG3表达呈负相关(r=-0.681,P=0.003)。结论胃癌组织中miR-106b表达上调,而BTG3表达下调,二者可能共同参与胃癌的发生发展。

结直肠癌组织中BTG3蛋白表达及意义

目的检测结直肠癌组织中B细胞转位基因3(BTG3)蛋白的表达情况,并探讨其临床意义。方法选择结直肠癌患者120例,取手术切除的癌组织及其对应的癌旁正常组织。采用免疫组化法检测组织中BTG3蛋白表达水平,分析BTG3蛋白表达与患者临床病理特征的关系。结果结直肠癌组织及癌旁组织中BTG3蛋白的阳性表达率分别为24. 17%和70. 00%,结直肠癌组织中BTG3蛋白阳性表达率低于癌旁组织(P <0. 01)。TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、肿瘤侵及浆膜、伴淋巴结转移和肝转移患者结直肠癌组织中BTG3蛋白表达阳性率低于TNM分期Ⅰ～Ⅱ期、未侵及浆膜、无淋巴结转移和肝转移患者(P均<0. 01)。结论结直肠癌组织中BTG3蛋白表达下调,BTG3低表达与结直肠癌的发生、发展有关。

miR-106b-5p对人结直肠癌HT-29细胞迁移和侵袭的影响及作用机制研究

目的:探讨miR-106b-5p对人结直肠癌HT-29细胞迁移和侵袭能力的影响及作用机制。方法:体外培养人结直肠癌HT-29细胞,分为anti-miR-106b-5p组(转染miR-106b-5p inhibitors)、anti-NC组(转染inhibitors control)和Blank组(未转染)。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中miR-106b-5p的表达水平,Transwell实验分析各组细胞迁移和侵袭能力,蛋白免疫印迹法(Western blot)分析上皮间质转化(EMT)标志分子E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的表达,双荧光素酶报告基因实验和Western blot验证miR-106b-5p是否靶向B细胞转位基因3(BTG3)。结果:与Blank组和anti-NC组相比,anti-miR-106b-5p组HT-29细胞中miR-106b-5p的表达量明显降低(P<0.05),迁移和侵袭细胞数明显减少(P<0.05),上皮相关E-cadherin的表达上调(P<0.05),间充质相关N-cadherin和Vimentin的表达下调(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验和Western blot证实miR-106b-5p可靶向负调控BTG3的表达。结论:抑制miR-106b-5p的表达能够抑制人结直肠癌HT-29细胞的迁移和侵袭能力,其作用机制可能与miR-106b-5p靶向促进BTG3的表达、阻碍EMT进程有关。

BTG3在胰腺导管腺癌中的表达及其预后价值

目的 探讨B细胞转位基因3（BTG3）在胰腺导管腺癌（PDAC）中的表达情况及其与肿瘤术后复发转移的关系.方法 收集在嘉兴市第二医院保存的6例冷冻PDAC组织和癌旁组织,以及3例正常胰腺组织,应用实时荧光定量PCR（qPCR）检测组织中BTG3的表达情况.收集2009年6月至2016年12月在嘉兴市第二医院治疗的52例PDAC患者的癌组织和癌旁组织及10例正常胰腺组织,采用免疫组织化学染色检测组织中BTG3的表达情况.通过χ2检验、Kaplan-Meier法和Cox回归模型,分析BTG3表达与PDAC患者临床病理学特征及生存预后之间的关系.结果qPCR检测结果显示,PDAC组织中BTG3表达水平（0.63±0.17）低于癌旁组织（0.96±0.04）和正常胰腺组织（1.00）（t=4.673、5.502,P值均〈0.05）.免疫组化检测结果显示,BTG3主要表达在细胞质中.PDAC组织中高表达BTG3的比例为25.0%（13/52）,低于癌旁组织的65.4%（34/52）和正常组织的7/10（χ2=17.120,5.849;P值均〈0.05）.BTG3的低表达与肿瘤原发灶、TNM分期有关（χ2=7.704,P=0.006;U=154.000,P=0.018）.生存分析结果发现,低表达BTG3的患者术后无病生存率小于高表达者（χ2=192.493;P〈0.01）.多因素分析结果表明,BTG3低表达是影响PDAC患者术后生存的独立预后因素（RR=3.366,95%CI：1.040~10.889,P=0.043）.结论 BTG3可能参与PDAC的发生发展,其低表达可能与PDAC患者预后不良相关.