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胰岛激活蛋白B聚体的各亚基克隆及表达的初步研究
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作者 潘煦文 《新疆农业科学》 CAS CSCD 2007年第3期252-258,共7页
研究将百日咳杆菌用B-G培养基活化后再在改良的S-S培养基上液体培养,用CTAB-NaCl法提取百日咳杆菌的基因组DNA。经PCR扩增出胰岛激活蛋白B聚体的四个亚基基因,分别将其克隆于pGEX-6p-1载体上,并探讨了在大肠杆菌BL21(DE3)中可溶性表达IA... 研究将百日咳杆菌用B-G培养基活化后再在改良的S-S培养基上液体培养,用CTAB-NaCl法提取百日咳杆菌的基因组DNA。经PCR扩增出胰岛激活蛋白B聚体的四个亚基基因,分别将其克隆于pGEX-6p-1载体上,并探讨了在大肠杆菌BL21(DE3)中可溶性表达IAP B聚体各亚基的可能性。通过控制诱导表达温度,S2,S3均可以实现可溶表达,以GST亲和层析得到的S2终产物0.4 mg/L培养物,S3为0.6 mg/L培养物。S4表达虽是可溶性的,但由于融合蛋白的等电点近于7,多步纯化易损失。S5的表达量太低,有待进一步分析。 展开更多
关键词 可溶性表达 胰岛激活蛋白 b聚体 GST融合蛋白
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吖啶橙-罗丹明B二聚体能量转移体系在DNA测定中的应用及机理研究 被引量:17
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作者 高峰 朱昌青 王伦 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2004年第1期85-88,共4页
首次研究了吖啶橙 罗丹明B二聚体能量转移体系作为荧光探针用于DNA的测定 ,并对其机理进行了探讨。用于鲱鱼精DNA和小牛胸腺DNA的测定 ,线性范围分别为 0 33~ 1 33mg·L- 1 ,0 33~ 3 33mg·L- 1 ,检测限分别为 1 6 3× ... 首次研究了吖啶橙 罗丹明B二聚体能量转移体系作为荧光探针用于DNA的测定 ,并对其机理进行了探讨。用于鲱鱼精DNA和小牛胸腺DNA的测定 ,线性范围分别为 0 33~ 1 33mg·L- 1 ,0 33~ 3 33mg·L- 1 ,检测限分别为 1 6 3× 10 - 3mg·L- 1 ,1 5 2× 10 - 3mg·L- 1 。对 1 0 0mg·L- 1 鲱鱼精DNA和小牛胸腺DNA的测定 ,相对标准偏差分别为 2 4 %和 2 0 %。 展开更多
关键词 吖啶橙-罗丹明b 能量转移 DNA 测定 作用机理 荧光探针
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原花青素二聚体B_2对大鼠滑膜细胞NF-κB核转运及炎症因子表达的影响 被引量:9
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作者 丁伟斌 梁统 周克元 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期803-806,共4页
目的通过观察原花青素二聚体B2(procyanidins di-mer B2,PCB2)对大鼠滑膜细胞NF-κB核转运及相关炎症因子表达的影响,探讨其抗炎的分子机制。方法免疫荧光法观察NF-κB/p65在细胞中的定位,RT-PCR检测PCB2对诱导细胞的COX-2 mRNA表达,Wes... 目的通过观察原花青素二聚体B2(procyanidins di-mer B2,PCB2)对大鼠滑膜细胞NF-κB核转运及相关炎症因子表达的影响,探讨其抗炎的分子机制。方法免疫荧光法观察NF-κB/p65在细胞中的定位,RT-PCR检测PCB2对诱导细胞的COX-2 mRNA表达,Western blot分析COX-2蛋白含量变化,ELISA测定各处理组细胞上清液中IL-1β、VEGF的含量变化。结果 TNF-α(10μg.L-1)诱导RSC-364细胞NF-κB从细胞质转运至细胞核,50μmol.L-1 PCB2明显抑制NF-κB/P65核转运;PCB2剂量依赖性抑制COX-2基因和蛋白的表达;PCB2下调了TNF-α诱导的IL-1β、VEGF的水平。结论 PCB2能有效抑制COX-2、IL-1β及VEGF的表达,其机制可能与抑制TNF-α诱导的NF-κB核转运,抑制NF-κB活化有关。 展开更多
关键词 原花青素二b2 滑膜细胞 NF-Κb TNF-Α 抗炎 核转运
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乌司他丁对髋关节置换术患者围术期D-二聚体\血栓素B2水平的影响 被引量:1
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作者 成建庆 葛叶盈 +3 位作者 徐云 郑书芬 康亚梅 江琰迪 《浙江医学》 CAS 2011年第8期1152-1154,共3页
目的观察不同剂量乌司他丁对髋关节置换术患者围术期D-二聚体(DD)、血栓素B2(TXB2)水平的影响。方法选择80例无血液系统疾病(包括凝血功能障碍)的ASAI~Ⅱ级择期髋关节置换术患者,随机分为对照组(I组)、乌司他丁30万U组(Ⅱ组... 目的观察不同剂量乌司他丁对髋关节置换术患者围术期D-二聚体(DD)、血栓素B2(TXB2)水平的影响。方法选择80例无血液系统疾病(包括凝血功能障碍)的ASAI~Ⅱ级择期髋关节置换术患者,随机分为对照组(I组)、乌司他丁30万U组(Ⅱ组)、乌司他丁60万U组Ⅱ组)、乌司他丁1D0万U组(IV组),每组20例;分别于术前(T1)、术毕(T2)、术后3h(T3)、术后12h(T2)和术后24h(T5)采血测定DD、TXB2水平并进行比较分析。结果与术前比较,4组患者T2~115时DD水平升高(P〈0.05)。I、Ⅱ组T2~T5时TXB2水平升高(P〈0.01).Ⅲ和IV组T2~T3时的变化无统计学意义(P〉0.05),T4~T5时逐渐升高(P〈0.01);与I组比较,Ⅱ、Ⅲ、IV组T2~T2时DD水平降低(P〈0.01),Ⅱ组T:~T3、Ⅲ组和IV组T2~T2时血浆TXB2水平降低(P〈0.01);与Ⅱ组比较。Ⅲ、IV组T2~L时DD、TXB2水平降低(P〈0.01)。结论术中静脉滴注60~100万U乌司他丁,可在一定时间内降低患者血浆DD、TXB2水平,改善其围术期的高凝状态。 展开更多
关键词 胰蛋白酶抑制剂 D-二血栓素b2 髋关节置换术
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Cyclobutane Pyrimidine Dimer Accumulation in Relation to UV-B Sensitivity in Rice Cultivars 被引量:1
5
作者 李韶山 王艳 +2 位作者 王小菁 宾金华 刘颂豪 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2000年第6期576-581,共6页
Five rice ( Oryza sativa L.) cultivars, widely planted in South China, were grown in greenhouse with or without supplemental UV_B radiation at level of 13.6 kJ·m -2 ·d -1 . After 15 day_UV_B treat... Five rice ( Oryza sativa L.) cultivars, widely planted in South China, were grown in greenhouse with or without supplemental UV_B radiation at level of 13.6 kJ·m -2 ·d -1 . After 15 day_UV_B treatment, significant intraspecific differences were observed in plant height, photosynthetic rate and total biomass. Based on the total biomass accumulation, cultivar “Tesanai” was found to be the most sensitive, and cultivar “Luhuangzhan” was the most tolerant species to UV_B radiation. UV_B induced cyclobutane pyrimidine dimer (CPD) in rice DNA were quantified by ELISA with specific monoclonal antibody. CPD accumulations in DNA extracted from 5 rice cultivars were remarkably increased by UV_B radiation, and it was confirmed that there was a strong positive correlation between CPD accumulation and the inhibition of total biomass. Photorepair was proved to be the predominant mode of CPD repair in UV_B irradiated rice. Light_dependent removal of CPD was very fast as compared with dark repair. Different levels of CPD accumulation among rice cultivars were related with different capacity of CPD photorepair. Capacity of light_dependent CPD removal may play an important role in UV_B resistance of rice. 展开更多
关键词 cyclobutane pyrimidine dimer (CPD) DNA repair RICE UV_b sensitivity
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Oct4B1基因沉默通过调控AKT/GSK-3β/β-catenin通路对膀胱癌T24细胞上皮间质转化的影响及机制研究 被引量:1
6
作者 甄洪涛 王朝亮 《实用癌症杂志》 2022年第8期1219-1223,1228,共6页
目的探讨Oct4B1基因沉默通过蛋白激酶B/糖原合成酶激酶3β/β-连环素(AKT/GSK-3β/β-catenin)通路对膀胱癌细胞上皮间质转化(EMT)的影响。方法Oct4B1-shRNA质粒和阴性对照质粒转入T24细胞,为shRNA组、shRNA-NC组,转染后AKT激动剂处理,... 目的探讨Oct4B1基因沉默通过蛋白激酶B/糖原合成酶激酶3β/β-连环素(AKT/GSK-3β/β-catenin)通路对膀胱癌细胞上皮间质转化(EMT)的影响。方法Oct4B1-shRNA质粒和阴性对照质粒转入T24细胞,为shRNA组、shRNA-NC组,转染后AKT激动剂处理,为shRNA+AKT激动剂组、shRNA-NC+AKT激动剂组。检测4组侵袭、迁移及E-cadherin、Vimentin、N-cadherin、p-AKT、p-GSK-3β及β-catenin蛋白表达。结果与shRNA组比较,shRNA+AKT激动剂组、shRNA-NC组、shRNA-NC+AKT激动剂组穿膜细胞数、迁移率、E-cadherin蛋白表达量较高(P<0.05),且shRNA+AKT激动剂组<shRNA-NC组<shRNA-NC+AKT激动剂组(P<0.05)。与shRNA组比较,shRNA+AKT激动剂组、shRNA-NC组、shRNA-NC+AKT激动剂组Vimentin、N-cadherin、p-AKT、p-GSK-3β、β-catenin蛋白表达量较低(P<0.05),且shRNA+AKT激动剂组>shRNA-NC组>shRNA-NC+AKT激动剂组(P<0.05)。结论沉默Oct4B1可抑制膀胱癌细胞侵袭、转移及EMT过程,其机制可能与AKT/GSK-3β/β-catenin有关。 展开更多
关键词 膀胱癌 上皮间质转化 结合转录因子4 b1 蛋白激酶b 糖原合成酶激酶3Β Β-连环素
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正常及炎症状态人牙髓中八聚体结合转录因子4B的表达 被引量:1
7
作者 韦曦 孔倩颖 +2 位作者 黄奕俊 刘路 张芳 《中华口腔医学研究杂志(电子版)》 CAS 2012年第2期7-10,共4页
目的研究人正常及炎症牙髓组织中八聚体结合转录因子4B(Oct-4B)的表达特点,检测大肠杆菌脂多糖刺激后人牙髓细胞(HDPCs)中Oct-4B的表达水平,以探讨Oct-4B在牙髓炎症中的可能作用。方法采用免疫组织化学和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方... 目的研究人正常及炎症牙髓组织中八聚体结合转录因子4B(Oct-4B)的表达特点,检测大肠杆菌脂多糖刺激后人牙髓细胞(HDPCs)中Oct-4B的表达水平,以探讨Oct-4B在牙髓炎症中的可能作用。方法采用免疫组织化学和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测正常及炎症牙髓组织中Oct-4B的表达情况。RT-PCR检测1mg/L脂多糖刺激HDPC24、48、72h后Oct-4B和热休克蛋白70(HSP70)表达水平的变化。结果正常牙髓组织中未检测到Oct-4B的表达,炎症牙髓组织病灶处牙髓成纤维细胞和炎症细胞胞质中Oct-4B表达强阳性。炎症牙髓组织中Oct-4BmRNA水平显著高于正常牙髓组织(P<0.05)。脂多糖刺激48、72h后,HDPC中Oct-4B和HSP70mRNA水平同步上调(P<0.05)。结论 Oct-4B在炎症牙髓组织中高表达,且脂多糖刺激可上调牙髓细胞内Oct-4B表达,Oct-4B可能参与牙髓炎症修复过程。 展开更多
关键词 牙髓细胞 结合转录因子4b 牙髓炎
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Effects of different light conditions on repair of UV-B-induced damage in carpospores of Chondrus ocellatus Holm
8
作者 鞠青 肖慧 +1 位作者 王悠 唐学玺 《Chinese Journal of Oceanology and Limnology》 SCIE CAS CSCD 2015年第3期664-678,共15页
We evaluated the effects of ultraviolet-B (UV-B) radiation and different light conditions on the repair of UV-B-induced damage in carpospores of Chondrus ocellatus Holm (Rhodophyta) in laboratory experiments. Carp... We evaluated the effects of ultraviolet-B (UV-B) radiation and different light conditions on the repair of UV-B-induced damage in carpospores of Chondrus ocellatus Holm (Rhodophyta) in laboratory experiments. Carpospores were treated daily with different doses of UV-B radiation for 48 days, when vertical branches had formed in all treatments; after each daily treatment, the carpospores were subjected to photosynthetically active radiation (PAR), darkness, red light, or blue light during a 2-h repair stage. Carpospore diameters were measured every 4 days. We measured the growth and cellular contents of cyclobutane pyrimidine dimers (CPDs), chlorophyll a, phycoerythrin, and UV-B-absorbing mycosporine-like amino acids (MAAs) in carpospores on Day 48. Low doses of UV-B radiation (36 and 72 J/m2) accelerated the growth of C. ocellatus. However, as the amount of UV-B radiation increased, the growth rate decreased and morphological changes occurred. UV-B radiation significant damaged DNA and photosynthetic pigments and induced three kind of MAAs, palythine, asterina-330, and shinorine. PAR conditions were best for repairing UV-B-induced damage. Darkness promoted the activity of the DNA dark- repair mechanism. Red light enhanced phycoerythrin synthesis but inhibited light repair of DNA. Although blue light, increased the activity of DNA photolyase, greatly improving remediation efficiency, the growth and development of C. ocellatus earpospores were slower than in other light treatments. 展开更多
关键词 Chondrus ocellatus Holm UV-b radiation blue light red light REPAIR
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核酸碱基的非谐性振动:Ⅲ,DNA叠加二聚体的一维和二维红外光谱
9
作者 王桂秀 王建平 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2012年第4期411-422,共12页
用量子化学计算方法研究了DNA碱基单体及其15个B型和2个G-四链体的叠加二聚体的非谐性振动光谱特征.研究发现,从碱基单体到二聚体,C=O伸缩模式之间的相互作用很强,表现在其非谐性振动频率和非谐性常数都发生了明显的改变,特别是在含碱基... 用量子化学计算方法研究了DNA碱基单体及其15个B型和2个G-四链体的叠加二聚体的非谐性振动光谱特征.研究发现,从碱基单体到二聚体,C=O伸缩模式之间的相互作用很强,表现在其非谐性振动频率和非谐性常数都发生了明显的改变,特别是在含碱基G的叠加体中.这些变化能在一维和二维红外光谱中很好地表现出来.利用振动模式的势能分布和非谐性常数的组成分析,讨论了叠加二聚体中C=O模式的离域化程度. 展开更多
关键词 量子化学计算 b型DNA叠加二 G-四链叠加二 非谐性频率 非谐性常数
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从瘀论治肺癌简况 被引量:8
10
作者 苏标堃 柳德灵 《实用中医内科杂志》 2017年第4期89-91,共3页
肺癌可归属"肺积""息积""息贲"等范畴,为正气内虚,瘀毒、血瘀、痰瘀等集聚成瘤,总属本虚标实。乃"瘀"与"毒"结合,有不同侧重,瘀具有重要地位。肿瘤细胞产生促凝物质或分泌细胞因子... 肺癌可归属"肺积""息积""息贲"等范畴,为正气内虚,瘀毒、血瘀、痰瘀等集聚成瘤,总属本虚标实。乃"瘀"与"毒"结合,有不同侧重,瘀具有重要地位。肿瘤细胞产生促凝物质或分泌细胞因子、血浆D-二聚体、血栓素B2(TXB2)、一氧化氮(NO)、活性氧(ROS)及6-酮前列环F1α(6Keto-PGF1α)异常,均可致血液处于高度浓、黏、聚、凝状态,舌像异常。血府逐瘀汤、补阳还五汤、鸦胆子油乳注射液、艾迪注射液、华蟾素注射液、榄香烯注射液、复方苦参注射液、康艾注射液、康莱特注射液等活血化瘀法治疗血瘀为主肺癌具有重要意义。 展开更多
关键词 肺癌 肺积 息积 息贲 瘀毒 血瘀 痰瘀 血浆D-二血栓素b2(TXb2) 一氧化氮(NO) 活性氧(ROS) 6-酮前列环F1α 血府逐瘀汤 补阳还五汤 鸦胆子油乳注射液 艾迪注射液 华蟾素注射液 榄香烯注射液 复方苦参注射液 康艾注射液 康莱特注射液 活血化瘀 综述
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OCT4B1在牙髓细胞的表达及其对凋亡相关因子的调控作用
11
作者 黄蓉 刘路 韦曦 《中华口腔医学研究杂志(电子版)》 CAS 2013年第2期8-11,共4页
目的研究人牙髓细胞(HDPCs)中八聚体转录结合因子4剪接异构体B1(OCT4B1)的表达及基因转染OCT4B1后对凋亡相关因子的影响。方法实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和荧光原位杂交(FISH)技术检测正常HDPCs中OCT4B1的表达;利用慢病毒载体构建OC... 目的研究人牙髓细胞(HDPCs)中八聚体转录结合因子4剪接异构体B1(OCT4B1)的表达及基因转染OCT4B1后对凋亡相关因子的影响。方法实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和荧光原位杂交(FISH)技术检测正常HDPCs中OCT4B1的表达;利用慢病毒载体构建OCT4B1高表达模型并转染HDPCs,检测半胱氨酸天冬氨酸特异蛋白酶(Caspase)3和7的表达变化。结果 OCT4B1表达于正常HDPCs且在第三代中表达最高;上调OCT4B1后与空载体组相比,OCT4B1高表达组Caspase-3、Caspase-7 mRNA表达降低(P<0.05)。结论 HDPCs中上调OCT4B1可抑制Caspase-3和Caspase-7的表达,说明OCT4B1参与细胞应激反应,可能与细胞凋亡相关。 展开更多
关键词 牙髓细胞 转录结合因子4剪接异构b1 半胱氨酸天冬氨酸特异蛋 白酶3 半胱氨酸天冬氨酸特异蛋白酶7
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抗大豆胰蛋白酶抑制剂单链抗体表达与纯化方法优化
12
作者 刘玉婷 王琼 +4 位作者 谢亮 程小玲 彭静 屈品均 辛化伟 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期287-292,共6页
[目的]利用大肠杆菌毒素蛋白VTB的五聚体化结构域(VT1B)及梭菌纤维素酶的纤维素结合结构域(CBD),异源表达其与抗大豆胰蛋白酶抑制剂单链抗体(anti-BBI Sc Fv)的融合蛋白,对该单链抗体表达与纯化方法进行优化。[方法]构建CBD-VT1B-... [目的]利用大肠杆菌毒素蛋白VTB的五聚体化结构域(VT1B)及梭菌纤维素酶的纤维素结合结构域(CBD),异源表达其与抗大豆胰蛋白酶抑制剂单链抗体(anti-BBI Sc Fv)的融合蛋白,对该单链抗体表达与纯化方法进行优化。[方法]构建CBD-VT1B-anti-BBI Sc Fv融合蛋白大肠杆菌表达系统;应用Ni-NTA树脂与微晶纤维素两步亲和层析法提纯单链抗体融合蛋白。[结果]单链抗体融合蛋白在大肠杆菌中得到大量表达,通过两步纯化法获得了高纯度的融合蛋白,纯度比Ni-NTA树脂一步纯化法提高约12~34%;五聚体融合蛋白与纤维素的结合能力及蛋白纯化效率比单体蛋白提高约1倍。[结论]通过增加纤维素标签和五聚体化结构域,抗大豆胰蛋白酶抑制剂五聚体化单链抗体融合蛋白的纯化效果得到提高。 展开更多
关键词 抗大豆胰蛋白酶抑制剂单链抗(anti-bbI ScFv) 化结构域(VT1b) 纤维素结合结构域(CbD)
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Linkage with cathepsin B-sensitive dipeptide promotes the in vitro and in vivo anticancer activity of PEGylated tumor necrosis factor-alpha(TNF-α) against murine fibrosarcoma 被引量:4
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作者 DAI ChuanYun FU Ya +4 位作者 LI Biao WANG YiGuang ZHANG Xuan WANG JianCheng ZHANG Qiang 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2011年第2期128-138,共11页
To improve the pharmacological profile of tumor necrosis factor alpha(TNF-α),we have synthesized a new PEGylated prodrug,PEG-vcTNF-α,using a cathepsin B-sensitive dipeptide(valine-citrulline,vc) to link branched PEG... To improve the pharmacological profile of tumor necrosis factor alpha(TNF-α),we have synthesized a new PEGylated prodrug,PEG-vcTNF-α,using a cathepsin B-sensitive dipeptide(valine-citrulline,vc) to link branched PEG and TNF-α.PEG-modified TNF-α without the dipeptide linker(PEG-TNF-α) and unconjugated TNF-α were also tested as controls.It was found for the first time that TNF-α released from PEG-vcTNF-α was specifically dependent on the presence of cathepsin B.PEG-vcTNF-α induced higher cytotoxicity and greater apoptosis against L929 murine fibrosarcoma cells than PEG-TNF-α.Reversal of these effects by a cathepsin-B inhibitor confirmed that these effects were mediated by cathepsin B-specific release of TNF-α.In vivo pharmacokinetics studies demonstrated that the plasma stability of PEG-vcTNF-α was significantly increased compared to TNF-α.Finally,the improved anticancer efficacy of PEG-vcTNF-α and the distinct activities among the three formulations confirmed the positive contribution of both PEGylation and the dipeptide linkage to the improved drug-like properties of PEG-vcTNF-α.The results here indicate that linking proteins and PEG via the cathepsin B-sensitive dipeptide may be a promising strategy for developing protein therapeutics. 展开更多
关键词 tumor necrosis factor alpha PEGYLATION cathepsin b-sensitive dipeptide antitumor effect
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蝉蜕HPLC定量分析方法的建立和质量评价研究 被引量:3
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作者 曹馨慈 徐金娣 +4 位作者 孔铭 周桂荣 何毅 毛茜 李松林 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期1909-1913,共5页
目的建立蝉蜕Cicadae Periostracum中乙酰多巴胺二聚体A和B的定量分析方法,并用于蝉蜕药材的质量评价。方法建立HPLC-UV方法,并进行方法学验证,同时对4个基原40批市售药材的2种乙酰多巴胺二聚体进行含量测定,并进行聚类分析。采用优化的... 目的建立蝉蜕Cicadae Periostracum中乙酰多巴胺二聚体A和B的定量分析方法,并用于蝉蜕药材的质量评价。方法建立HPLC-UV方法,并进行方法学验证,同时对4个基原40批市售药材的2种乙酰多巴胺二聚体进行含量测定,并进行聚类分析。采用优化的Alltima C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,乙腈-水流动相,2种成分能与其他色谱峰分开,并达到基线分离,在测定浓度范围内线性关系良好,平均加样回收率在97.53%~102.75%,方法精密度和重复性的RSD均小于5%,样品在24 h内稳定;依据2种乙酰多巴胺二聚体含量进行聚类分析。结果所建立的分析方法简便,准确度和精密度良好,能作为蝉蜕药材常规定量评价方法;40批蝉蜕药材可聚为3类,但2种乙酰多巴胺二聚体的含量没有基原特征性。黑蚱蝉基原的蝉蜕商品中乙酰多巴胺二聚体的含量差异较大,可能与不同来源的商品污染泥沙的量不同有关。结论山蝉、华南蚱蝉和蟪蛄基原的蝉蜕含有较高的乙酰多巴胺二聚体,且整体色谱特征与黑蚱蝉基原蝉蜕相似,是蝉蜕药材的潜在资源,严控泥沙应该是保证蝉蜕药材质量稳定一致的主要措施。 展开更多
关键词 蝉蜕 乙酰多巴胺二A 乙酰多巴胺二b 质量评价 黑蚱蝉 山蝉 华南蚱蝉 蟪蛄
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LC-MS/MS法分析注射用哌拉西林钠的杂质谱 被引量:3
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作者 崔广青 周小溪 +1 位作者 秦爱方 赵正保 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1612-1628,共17页
目的:建立LC-MS/MS法分析注射用哌拉西林钠中的有关物质的杂质谱。方法:采用Kromasil Eternity-5 C18(2.1 mm×150 mm,3.5μm)色谱柱,以0.2%甲酸溶液(A)-乙腈(B)为流动相,进行梯度洗脱,流速0.2 m L·min–1;通过光电二极管阵列... 目的:建立LC-MS/MS法分析注射用哌拉西林钠中的有关物质的杂质谱。方法:采用Kromasil Eternity-5 C18(2.1 mm×150 mm,3.5μm)色谱柱,以0.2%甲酸溶液(A)-乙腈(B)为流动相,进行梯度洗脱,流速0.2 m L·min–1;通过光电二极管阵列检测器(PDA)及电喷雾离子化串联质谱检测法,采集杂质谱的PDA数据、质谱的母离子及子离子数据,结合质谱的降解规律,杂质的色谱行为,相关对照品的裂解规律,以及主成分哌拉西林钠的合成与降解反应,进行未知杂质结构解析,并对该结构进行初步验证。结果:在所建立的条件下,杂质谱中哌拉西林钠及其杂质分离良好,分离出5组同分异构体,共检测到16个较大杂质峰,其中,8个杂质峰为已知杂质峰,分别为BP杂质E、BP杂质A、BP杂质C、BP杂质C同分异构体、BP杂质B、BP杂质B同分异构体、BP杂质F、BP杂质D,8个未知杂质峰中,分别为哌拉西林2个异构体、BP杂质B降解物、哌拉西林去4-乙基-2,3-二氧代-1-哌嗪降解物、哌拉西林去4-乙基-2,3-二氧代-1-哌嗪降解物异构体、BP杂质A与B二聚体、BP杂质A与B二聚体的异构体、哌拉西林二聚体。结论:建立的LC-MS/MS法能有效地洗脱、分离注射用哌拉西林钠的杂质,并分析其杂质谱,为哌拉西林钠的原料和相关制剂质量控制和工艺优化提供了参考依据。 展开更多
关键词 青霉素类抗生素 哌拉西林钠 液相色谱-质谱联用 杂质结构推测 杂质检测 光电二极管阵列检测器(PDA) 哌拉西林杂质谱 哌拉西林异构 哌拉西林杂质b降解物 哌拉西林去4-乙基-2 3-二氧代-1-哌嗪降解物 哌拉西林杂质A和b 哌拉西林二
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