酸性亮氨酸核磷酸蛋白32B在肝癌组织表达增强并促进肝癌细胞生长的研究

目的 :检测酸性亮氨酸核磷酸蛋白32B(acidic leucine-rich nuclear phosphoprotein 32B,ANP32B)在肝细胞肝癌组织中的表达水平,并探讨其在肝癌细胞生长中的作用。方法:利用国际权威公共数据库,分析肝细胞肝癌组织中ANP32B mRNA的表达及其与患者生存期间的关系;用蛋白免疫印迹法检测患者肝癌组织样本和敲除ANP32B的肝癌细胞系中的ANP32B蛋白表达水平;并用RNA干扰技术在肝癌细胞系中沉默ANP32B的表达,通过计数检测细胞生长及克隆形成,用流式细胞仪检测其细胞周期和细胞凋亡。结果:通过数据库及肝癌组织样本分析发现,肝癌组织中的ANP32B mRNA表达值(9.763±0.04)相较于癌旁组织(9.293±0.03)明显升高,蛋白表达升高1.78倍,且ANP32B高表达的肝癌患者与ANP32B低表达的患者相比,5年总生存率明显下降,差异有统计学意义(P<0.01)。体外实验发现,2组敲除ANP32B的肝癌细胞和对照组肝癌细胞相比,细胞生长速度明显减慢(29.9×10~5比23.2×10~5,15.5×10~5),克隆形成数目减少(300个比146个比135个),细胞周期发生S期阻滞(47.9%比61.5%比57.1%),细胞凋亡数略有增加(1.8%比7.3%比4.9%)。结论:ANP32B在肝癌组织中高表达,在肝癌细胞系中沉默ANP32B表达后可明显抑制细胞生长,细胞周期发生阻滞,细胞凋亡增加。

酸性亮氨酸核磷酸蛋白32B对肺癌细胞增殖、迁移、凋亡的影响

目的探究酸性亮氨酸核磷酸蛋白32B(acidic leucine⁃rich nuclear phosphoprotein 32B,ANP32B)在肺癌(lung cancer,LC)中的作用机制。方法利用TCGA公共数据库,分析肺癌组织中ANP32B的表达情况。通过Kaplan⁃Meier Plotter生物信息数据库,检索分析ANP32B表达与患者预后的关系。通过体外细胞实验检测ANP32B在肺癌细胞及正常肺上皮细胞的表达差距。在肺癌细胞系中沉默ANP32B的表达水平,利用平板克隆实验计数细胞克隆团数目,利用划痕实验观察伤口愈合情况。Western blot检测ANP32B对通路蛋白的影响。结果通过TCGA数据库分析发现ANP32B在肺癌组织中表达水平高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.001);通过Kaplan⁃Meier Plotter生物信息数据库发现ANP32B高表达的肺癌患者的总体生存期(overall survival,OS)较短(P<0.001)。通过体外细胞实验证明ANP32B在肺癌细胞的表达量高于正常肺上皮细胞。沉默ANP32B后,肺癌细胞增殖较对照组明显减慢(P<0.01),迁移能力明显下降(P<0.001)。ANP32B沉默后,凋亡相关蛋白Cleaved⁃Caspase3明显下调。结论ANP32B在肺癌组织及肺癌细胞系中高表达。沉默ANP32B表达水平后,可明显抑制A549细胞增殖、迁移。ANP32B可能抑制A549细胞的凋亡。

非骨架铝形态对HY分子筛B酸强度的影响

利用周期性的密度泛函理论,研究了HY分子筛中加入[AlO]^+和[Al(OH)]^(2+)非骨架物种时对B酸强度的影响。去质子化能和氨气吸附能结果表明:[AlO]^+和[Al(OH)]^(2+)非骨架物种的加入可增强B酸强度,增强B酸强度能力[Al(OH)]^(2+)物种强于[AlO]^+物种;NH_3在B酸位上吸附后会夺取B酸的H原子变成NH_4^+,NH_3作为给电子体系将电子转移给分子筛的B酸活性中心,B酸的酸性越强,转移的电子越多。通过几何结构参数和电子性质分析,发现非骨架物种对B酸结构的影响较小,但会影响分子筛骨架的电子结构,从而影响其酸性。

全髓关节置换与半髓置换对高龄股骨颈骨折患者关节功能及BALP、DPD、TRACP5b的影响

目的探讨全航关节置换与骨水泥型人工半航置换对高龄股骨颈骨折患者髓关节功能及血清BALP、DPD、TRACP5b水平的影响。方法回顾性分析2018年1月至12月于东方市人民医院接受手术治疗的高龄股骨胫骨骨折患者80例的临床资料,根据手术方法不同分为A组与B组,各40例。A组患者实施骨水泥型人工半髓置换术,B组患者实施全航关节置换术。比较两组患者临床指标;比较两组患者术前及术后1个月、3个月、6个月的髓关节功能评分;比较两组患者术前、术后6个月时的血清BALP、DPD、TRACP5b水平。结果A组患者手术时间、下床时间短于B组患者,术中出血量、术后出血量少于B组患者;与术前比,术后1个月至6个月两组患者航关节功能评分逐渐升高,且术后各时间点A组均高于B组;与术前比,术后6个月两组患者血清BALP均升高,A组高于B组,血清DPD、TRACP5b均下降,A组低于B组(均P<0.05)。结论骨水泥型人工半髓置换可有效改善高龄股骨颈骨折患者手术状况,改善航关节功能,稳定骨代谢指标水平,效果优于全髓关节置换。

酸性亮氨酸核磷酸蛋白32B促肿瘤机制的体外研究

目的:探讨酸性亮氨酸核磷酸蛋白32B(acidic leucine-rich nuclear phosphoprotein 32B,ANP32B)促进肿瘤发生、发展的分子机制,为其可能作为治疗靶点提供理论依据。方法:利用免疫沉淀联合质谱技术寻找和验证ANP32B相互作用蛋白;免疫荧光技术检测ANP32B和核浆转运蛋白α6(karyopherinα6,KPNA6)在细胞内的定位;采用短发夹RNA(short hairpin RNA,sh RNA)沉默KPNA6的表达;行GST-pulldown实验明确ANP32B与KPNA6直接结合及相互作用的区域。结果:通过免疫沉淀和质谱鉴定发现,ANP32B与KPNA6间存在相互作用,两者的结合不依赖ANP32B N端1~161氨基酸序列。体外GST-pulldown实验证实,KPNA6与ANP32B间存在直接的相互作用,且两者结合依赖ANP32B的核定位信号。利用sh RNA抑制KPNA6的表达后,并不影响ANP32B的核内定位。结论:ANP32B通过核定位信号序列与KPNA6结合,两者在细胞核中有明显的共定位,而敲除KPNA6并不影响ANP32B的核内定位。

天癸散敷脐干预围绝经期妇女骨量减少的临床疗效观察

目的研究以天癸散敷脐对围绝经期妇女的骨量减少进行干预,观察其临床疗效。方法101例骨量减少的围绝经期妇女随机分为两组,干预组51例,对照组50例,两组受试对象均给予基础治疗,干预组给予天癸散敷脐,疗程为3个月,对照组给予安慰剂(凡士林)敷脐,采用VAS疼痛评分评定疗效,并观察治疗前后骨密度(BMD)、骨源性碱性隣酸酶(BALP)、抗酒石酸酸性憐酸酶-5b(TRACP-5b)以及转化生长因子-β1(TGF-β1)等指标。结果干预组干预后能明显降低患者VAS评分和BALP和TRACP-5b含量(P<0.001),提高腰椎骨密度T值和TGF-β1水平(P<0.001)。两组干预后VAS评分、TRACP-5b和TGF-β1比较差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。结论天葵散可以通过提高患者血TGF-β1含量,全面调节成骨细胞和破骨细胞的活性,从而起到提高患者腰椎T值和改善临床症状的作用。