HLA-B新等位基因B＊9536和B＊4612的测序分析和确认

目的研究人类白细胞抗原（humanleukocyteantigen，HLA）新等位基因HLA-B＊9536和B＊4612的分子机制。方法采用Invitrogen抽提试剂盒抽提标本DNA，利用单链特异性引物PCR方法扩增样本HL-B基因第2～4外显子，对PCR产物直接进行HLA-B基因第2、3、4外显子双向测序分析。结果先证者标本存在2个HLA-B等位基因，经HLABlast验证均为新的等位基因，新的等位基因序列已递交GenBank（EU081878和EU081879），经世界卫生组织HLA命名委员会正式命名为HLA_B＊9536和HLA-B＊4612。HLA-B＊9536第2～4外显子序列与最接近的B＊1505相比，在第3外显子存在一个碱基的不同，即第544位G—A改变，导致第158位氨基酸Ala—Thr；HLA-B＊4612第2～4外显子序列与最接近的B＊4601相比，在第3外显子存在一个碱基的不同，即第363位G→C导致第97位氨基酸Arg—Set。结论在同一标本中发现两个新的HLA-B等位基因，并被世界卫生组织HLA命名委员会正式命名。