C-erb B-2基因在肺癌中表达意义的临床研究

目的:了解C-erb B-2基因在肺癌中表达的临床意义。方法:采用免疫组化方法检测42例各类型肺癌组织和10例正常肺组织中C-erb B-2基因的表达。结果:C-erb B-2基因在正常肺组织和小细胞肺癌中未见表达,在非小细胞肺癌组织中的表达率为25.71%,其中肺鳞癌表达率为6.3%,肺腺癌为50.0%,两者差异显著(P<0.05)。C-erb B-2基因在不同组织学分级中的表达差异明显(P<0.05),低分化组为70%,中分化组为13.3%,高分化组为0。而在临床分期中的表达无显著性差异(P>0.05)。结论:C-erb B-2基因在非小细胞肺癌特别是腺癌的形成和进展中发挥重要作用,C-erb B-2基因的检测可作为非小细胞肺癌患者选择个体化治疗方案的指标。

普通小麦中Puroindoline b-2基因的分子鉴定及表达分析

Puroindoline b-2基因与小麦子粒硬度及其产量密切相关。本研究采用特异引物PCR扩增,荧光定量PCR(RTPCR)方法以及DNA测序技术,对81份国内外小麦品种(系)的Puroindoline b-2不同变异类型进行了分子鉴定,并对Puroindoline b-B2的不同变异类型在子粒、叶片以及根系部位中的表达水平进行了定量分析。结果表明,所有试验材料中的D和A基因组上均含有Pinb-D2v1和Pinb-A2v4类型,而B基因组上的Pinb-B2v3类型在所有材料中所占比例最高,为91.4%;Pinb-B2v2类型比例较低,仅为8.6%。不同变异类型间Pinb-B2基因表达量分析表明,小麦子粒中Pinb-B2v3b的表达量显著高于PinbB2v2变异类型。进一步研究表明,Pinb-B2v3b类型的相对表达量显著高于Pinb-B2v3a和Pinb-B2v3c两种类型,而此2种变异之间无明显差异(Pinb-B2v3c略高于Pinb-B2v3a变异)。不同组织间Pinb-B2基因表达量分析表明,小麦叶片中Pinb-B2的表达量显著高于根系中的表达量。本研究为进一步理解Pinb-2基因分子遗传基础提供了一定的理论依据。

p53、C-erb B-2基因在乳腺癌预后中的意义

１ｐ５３基因的功能特性野生型ｐ５３基因（ｐ５３ｗｔ）是一种肿瘤抑制基因，全长约２０ｋｂ，由１１个外显子组成，定位于１７号染色体上（１７Ｐ１３．１），对细胞的生长呈负调节作用。其编码的蛋白是一种核磷酸蛋白质，由３９３个氨基酸组成，分子量为５３ｋＤ，故...

CerbB-2基因蛋白在胃腺癌中的表达

目的研究Cerb B-2基因蛋白检测对胃腺癌的临床意义。方法应用免疫组化法对235例胃癌组织标本、95例正常切缘黏膜组织标本中的Cerb B-2基因蛋白进行检测。结果 Cerb B-2基因蛋白在胃癌组织、正常切缘组织中的高表达率分别为35.7%、9.47%,存在显著性差异(P<0.01);Cerb B-2基因蛋白表达与患者的年龄、性别、肿瘤大小及分化程度均无相关性(P>0.05),而与肿瘤的临床分期(TNM分期)、浸润深度、转移有关,且存在显著性差异(P<0.01)。结论 Cerb B-2基因蛋白与胃腺癌的发展有紧密联系,是判断胃腺癌生物学行为及预后的重要指标。

小麦puroindoline b-2 基因变异与产量相关性状的分析

puroindoline b-2(Pinb-2)是近期发现的一组与puoindoline b基因高度相似的基因。Pinb-2基因在普通小麦B基因组中存在多种变异类型,软质麦中不同变异类型间籽粒硬度存在着显著差异。在此基础上进一步分析普通小麦B基因组中的Pinb-2基因等位变异与产量相关性状以及旗叶大小的关系,并利用重组近交系(F8)群体进行染色体定位。结果表明,4种不同变异类型的材料中,拥有Pinb-2v3b类型的小麦品种千粒重、籽粒直径、穗粒数、穗粒重和单株粒重均最高,拥有Pinb-2v3b类型的小麦品种产量相关性状可能优于其他3种类型。另外,拥有Pinb-2v3a类型的小麦品种旗叶宽度、旗叶长度和旗叶面积均高于其他3种类型。采用SSR标记定位结果表明,Pinb-2v2和Pinb-2v3互为一对等位基因,位于7B染色体的长臂上,与标记Barc315连锁。这一结果为进一步研究Pinb-2基因的分子遗传基础和小麦育种提供了依据。

人干扰素α2b-胸腺肽α1融合基因在家蚕细胞中的表达和活性研究

根据细胞因子协同作用的特点,采用重组DNA技术构建了人干扰素(IFN)α2b 胸腺肽(THY)α1融合基因,克隆到pBacPAK8上,获得重组转移载体pBacPAK IFN THY.与线形化Bm BacPAK6病毒基因组DNA共转染家蚕细胞,经过体内重组,筛选到重组病毒Bm BacPAK IFN THY.将Bm BacPAK IFN THY感染家蚕细胞进行表达.DNA印迹证明IFN THY已插入Bm BacPAK6中(4kb左右的杂交带);SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳、蛋白质印迹证明IFN THY在家蚕细胞中得到了表达(分子质量为 2 3ku左右),且具有IFN蛋白的免疫原性;微量细胞病变抑制法和玫瑰花结法显示 96h的表达产物IFN活性为 3 72× 10 4U/ml,12 0h表达产物IFN活性为 3 10× 10 5U/ml,4 8～ 72h表达产物IFN活性较低;4 8～ 12 0h表达产物的玫瑰花结形成率均在 10 %以上.结果表明融合基因在家蚕细胞中得到了高效表达,表达的融合蛋白具有IFN α2b和THY

c-erbB-2癌基因蛋白及ER、PR在乳腺癌中的表达及临床意义

目的:探讨影响乳腺癌治疗及预后的相关因素。方法:采用免疫组化方法(LSAB法)检测乳腺癌C-erbB-2(Her-2/neu)蛋白及雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)在乳腺癌中的表达。结果:98例乳腺癌患者肿瘤组织的检测结果示C-erbB-2过度表达率与乳腺癌的组织学分级呈相关(P<0.05);ER、PR的阳性表达率分别为63.7%和60.2%;并与C-erbB-2过度表达率呈显著负相关(P<0.05)。结论:C-erbB-2蛋白及雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)的表达情况在一定程度上反应了乳腺癌的生物学行为,应有助于临床上乳腺癌治疗方案的选择及判断预后。

CDKN2B-AS1基因多态性与子宫内膜异位症的相关性研究

目的:研究细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子2B-反义RNA(CDKN2B-AS1)基因多态性与子宫内膜异位症(EM)的相关性。方法:选择2017年12月至2019年7月邯郸市中心医院和河北医科大学第四医院收治的子宫内膜异位症的患者112例为病例组,另取同期因宫外孕、输卵管黏连等手术患者112例为对照组,采用DNA PCR测序法检测所有受试者血液CDKN2B-AS1基因多态性,分析CDKN2B-AS1基因rs10965235位点多态性与EM临床分期的关系,采用Logistic回归分析CDKN2B-AS1基因多态性对EM易感性的影响。结果:病例组与对照组年龄、BMI、月经周期、CDKN2B-AS1 rs4977574位点等位基因A与G、AA与AG+GG基因型频率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。CDKN2B-AS1基因rs4977574位点与AA基因型比较,AG+GG基因型与EM易感性无关(OR=1.105,95%CI:0.819-1.491;P=0.124)。与对照组比较,病例组CDKN2B-AS1基因rs10965235位点等位基因C、CC基因型频率高,等位基因A、CA+AA基因型频率低(χ2=4.397、4.075,P=0.036、0.044),差异有统计学意义。与Ⅰ~Ⅱ期比较,III^IV期EM患者CDKN2B-AS1基因rs10965235位点CC基因型频率高、CA+AA基因型频率低,差异有统计学意义(χ2=5.168,P=0.023)。CDKN2B-AS1基因rs10965235位点,与CC基因型比较,携带CA+AA基因型可降低EM易感性(OR=0.564,95%CI:0.347-0.917,P=0.000)。结论:CDKN2B-AS1基因rs4977574位点与EM易感性无关,rs10965235位点基因多态性与中国北方女性EM易感性有关。

慢性铅暴露小鼠海马细胞凋亡相关基因的表达

目的探讨发育期慢性铅暴露对小鼠海马B-细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcelllymphoma/leukemia-2,bcl-2)和bcl-2相关X基因(bcl-2associateX,bax)mRNA表达的影响。方法用RT-PCR法检测慢性铅暴露时小鼠海马bcl-2和baxmRNA表达水平。结果慢性铅暴露可使小鼠脑海马bcl-2mRNA表达水平明显下降,而baxmRNA表达水平明显增加,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论慢性铅暴露可使小鼠脑海马bcl-2mRNA表达水平显著下降,而baxmRNA表达水平显著增加。

乳腺癌的基因研究进展

乳腺癌的基因研究主要涉及几个方面：①探索乳腺癌发生发展中的基因变化及这些变化之间的关系；②研究基因变化与乳腺癌发生发展的关系及治疗对基因变化的影响；③探讨基因变化的细胞与临近的正常细胞及宿主环境（激素及生长因子等）之间的相互关系；④寻找逆转或抑制这些...

敲低B-细胞淋巴瘤/白血病-2原癌基因对子宫颈癌细胞顺铂敏感性的研究

目的探讨子宫颈癌C4-1细胞敲低B-细胞淋巴瘤/白血病-2原癌基因(Bcl-2)的表达,提高人子宫颈癌C4-1细胞对顺铂(DDP)化疗敏感性的作用与机制。方法应用敲低Bcl-2慢病毒转染子宫颈癌C4-1细胞,将其分为对照组、空载组及敲低组,上述分组通过DDP处理后分别作为对照+DDP组、空载+DDP组和敲低+DDP组。采用RT-PCR法检测C4-1细胞Bcl-2 mRNA表达水平,采用流式细胞仪检测C4-1细胞凋亡率,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测C4-1细胞对DDP的敏感性。结果敲低组与空载组及正常对照组比较,C4-1细胞的凋亡率明显增加(P<0.05),C4-1细胞Bcl-2 mRNA表达量降低;敲低组+DDP组与空载+DDP组和对照+DDP组比较IC50值降低,上述差异均有统计学意义(P<0.05)。结论慢病毒转染子宫颈癌C4-1细胞敲低Bcl-2表达可增加凋亡率,提高子宫颈癌C4-1细胞对顺铂的敏感性。

新疆小麦籽粒硬度Puroindoline b相关基因等位变异的分子检测

Puroindoline b-2(Pinb-2)基因与籽粒硬度基因Puroindoline b序列高度相似,与小麦籽粒硬度及其产量性状密切相关。本研究以3个籽粒硬度基因(Pina-D1,Pinb-D1和Pinb-2)的特异性功能标记对新疆99份冬小麦和24份春小麦品种(系)进行分子标记检测。在123份新疆小麦品种(系)中Pina-D1和Pinb-D1基因位点Pina-D1a、Pina-D1b、Pinb-D1a和Pinb-D1b等位变异的频率分别为85.4%、14.6%、57.7%和42.3%;在Pinb-2位点,39.0%的小麦品种含Pinb-2v2(低千粒重)等位基因,61.0%的小麦品种含Pinb-2v3(高千粒重)等位变异。在3个位点基因型组合分析表明,在所检测的新疆小麦种质中共有6种基因型组合,其中2种软质麦基因型Pina-D1a/Pinb-D1a/Pinb-2v2,Pina-D1a/Pinb-D1a/Pinb-2v3和3种硬质麦Pina-D1a/Pinb-D1b/Pinb-2v2、Pina-D1a/Pinb-D1b/Pinb-2v3、Pina-D1b/Pinb-D1a/Pinb-2v2、Pina-D1b/Pinb-D1a/Pinb-2v3,其分布频率分别为19.5%、22.8%、13.05%、30.1%、6.5%和8.1%。新疆冬小麦共有5种基因型组合,在不同类型冬麦资源中,具有高千粒重的软质麦类型Pina-D1a/Pinb-D1a/Pinb-2v3的分布频率大小顺序为地方品种(52.9%)>自育品种(25.6%)>引进品种(12.8%),与之相反,具有较高千粒重的硬质麦类型Pina-D1a/Pinb-D1b/Pinb-2v3和PinaD1b/Pinb-D1a/Pinb-2v3的分布频率大小顺序为:引进品种(53.8%)>自育品种(32.5%)>地方品种(5.9%);新疆春小麦共有6种基因型组合,在不同类型春麦资源中,具有高千粒重的软质麦类型Pina-D1a/Pinb-D1a/Pinb-2v3的分布频率大小顺序为:早期品种(20.0%)>晚期品种(10.5%),与之相反,具有较高千粒重的硬质麦类型Pina-D1a/Pinb-D1b/Pinb-2v3和Pina-D1b/Pinb-D1a/Pinb-2v3的分布频率大小顺序为:晚期品种(47.4%)>早期品种(45.8%)。新疆小麦以硬质麦为主,在软冬麦、硬冬麦、软春麦和硬春麦中均是具有Pinb-2v3(高千粒重)等位变异类型的分布频率高于具有Pinb-2v2(低千粒重)等位变异类型。将3个位点特异性标记结合起来使用,不仅能有效的应用于小麦与籽粒硬度改良,同时能应用于小麦产量性状改良方面。

表没食子儿茶素没食子酸酯对脊髓损伤大鼠氧自由基与炎症因子及凋亡因子的影响

目的研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对脊髓损伤(SCI)大鼠急性期抗氧化、抗炎与抗凋亡作用。方法除假手术外,建立大鼠脊髓半切损伤模型。SCI大鼠给予药物治疗(阳性药组予甲泼尼龙100 mg/kg,EGCG低、中、高剂量组分别予EGCG 25、50、100 mg/kg,模型组予生理盐水10 mL/kg腹腔内注射),24 h后取受损脊髓局部组织,电子显微镜下观察脊髓组织超微结构,测定脊髓组织中活性氧簇水平、抗氧化酶系统活性、凋亡相关因子的蛋白水平以及血清中炎症因子的含量。结果电镜显示,EGCG各组脊髓形态好于模型组。且与模型组比较,EGCG组SCI大鼠脊髓组织中活性氧簇与一氧化氮(NO)水平降低(P<0.05),诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白含量减少(P<0.01);抗氧化酶系统的活性得到提高(P<0.05);血清炎症因子与脊髓组织凋亡相关因子蛋白的表达减少(P<0.05)。结论 EGCG能减少SCI大鼠急性期氧自由基、炎症因子与凋亡相关因子的表达。

蒙古牛BTG2启动子的克隆与初步功能分析

BTG2是新型细胞抗增殖因子BTG/Tob基因家族成员之一,在猪、牛中均报道存在品种和个体表达差异,但相关分子机理有待揭示。为阐明蒙古牛不同个体BTG2差异表达的分子机理,3个独立蒙古牛个体BTG2预测启动子序列(ATG起始密码子上游1766bp)被克隆、测序。序列比对发现,克隆序列与基因组组装BTG2启动子序列分别存在99.94%,98.64%,98.58%同源性,而且同源性最高的序列重组到哺乳动物表达载体pEGFP-N1后,由此获得的表达框架导入到HeLa细胞有受神经生长因子诱导表达的特性,该结果和已有报道一致。表明蒙古牛BTG2启动子序列被成功克隆,由此奠定了后续分离、鉴定该启动子上顺式元件和反式作用因子的基础。

Bcl-2抑制剂维奈托克的新合成工艺

本研究报道了B-细胞淋巴瘤-2基因(Bcl-2)抑制剂维奈托克(1)的新合成工艺。以2,4-二氟苯甲酸(2)为原料,经羟化、甲酯化得到4-氟水杨酸甲酯(4),与哌嗪偶联得到4-(1-哌嗪基)水杨酸甲酯(5),再经还原胺化、缩合得到2-(1H-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基氧基)-4-[4-[[2-(4-氯苯基)-4,4-二甲基-1-环己烯-1-基]甲基]哌嗪-1-基]苯甲酸甲酯(9),最后经水解、缩合反应得1。该路线规避了文献报道的昂贵的中间体1-(三异丙基硅基)-5-羟基-7-氮杂吲哚(12)及其复杂的制备过程,选择性地在2的2-位引入羟基,避开了因使用2,4-二氟苯甲酸甲酯(13)而造成的反应选择性差、收率低、纯化困难等不利因素,降低了制备成本,简化了工艺。

金丝桃苷对高糖和氧化损伤所致内皮细胞凋亡的影响

目的:研究金丝桃苷(HP)对高糖和氧化损伤所致内皮细胞凋亡的影响。方法:体外培养内皮细胞,分为正常细胞、正常细胞+HP、高糖损伤、高糖+HP、H2O2损伤与H2O2+HP组,采用MTT法测定内皮细胞的活力,并采用RT-qPCR法、Westernblot法分别测定B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)蛋白及其mRNA表达水平,Bcl-2相关X蛋白(Bax)及其mRNA表达水平。结果:与各自损伤组比较,高糖+HP、H2O2+HP组内皮细胞损伤程度显著减轻(P<0.01),高糖+HP、H2O2+HP组内皮细胞Bcl-2mRNA和蛋白表达显著增强(P<0.01),BaxmRNA和蛋白表达显著减弱(P<0.01)。结论:HP通过抑制Bax的表达,上调Bcl-2的表达而拮抗高糖、氧化损伤导致的内皮细胞凋亡,对糖尿病性视网膜病变血管内皮细胞具有一定的保护作用。