微RNA-205对帕金森病大鼠脑额叶皮层纹状体多巴胺能神经元凋亡的影响

目的探讨微RNA-205(miR-205)通过胰岛素样生长因子-1(IGF-1)/蛋白激酶B(Akt)/叉头框蛋白O3a(FoxO3a)通路对帕金森病(PD)大鼠脑额叶皮层纹状体多巴胺能神经元凋亡的调控作用。方法将30只雄性Sprague Dawley大鼠随机分为干预组、阴性对照(NC)组、假手术组,每组10只。干预组、NC组大鼠经脑立体定位仪注射6-羟多巴胺建立PD模型,假手术组大鼠注射等体积的生理盐水。建模成功后24 h,干预组和NC组大鼠于纹状体内分别注射miR-205双链寡核苷酸抑制剂(miR-205-inhibitor)及miR-205阴性对照试剂(miR-205-inhibitor-NC)2μL,假手术组大鼠注射等量的磷酸缓冲盐溶液。观察干预1周后大鼠一般情况,比较各组大鼠异常不自主动作(AIM)评分;脱氧核糖核苷末端转移酶介导的缺口末端标记法检测各组大鼠纹状体神经元凋亡情况;实时荧光定量聚合酶链式反应检测各组大鼠纹状体中miR-205及IGF-1、Akt、FoxO3a mRNA表达;Western blot检测各组大鼠纹状体中IGF-1、Akt、磷酸化Akt(p-Akt)、FoxO3a、磷酸化FoxO3a(p-FoxO3a)蛋白表达。结果干预1周后,假手术组大鼠进食、饮水、活动正常;NC组大鼠进食、进水、活动减少,活动时动作缓慢或姿势异常,部分有易激惹、狂躁、自残行为;干预组大鼠上述症状轻于NC组。NC组、干预组大鼠AIM评分和神经元凋亡率均显著高于假手术组(P<0.001);干预组大鼠AIM评分和神经元凋亡率显著低于NC组(P<0.001)。NC组、干预组大鼠纹状体中miR-205 mRNA相对表达量显著高于假手术组(P<0.001),干预组大鼠纹状体中miR-205 mRNA相对表达量显著低于NC组;NC组、干预组大鼠纹状体中IGF-1 mRNA相对表达量显著低于假手术组(P<0.001),干预组大鼠纹状体中IGF-1 mRNA相对表达量显著高于NC组(P<0.001);3组大鼠纹状体中Akt、FoxO3a mRNA相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。NC组、干预组大鼠纹状体中IGF-1蛋白相对表达量及p-Akt/Akt、p-FoxO3a/FoxO3a显著低于假手术组(P<0.001);干预组大鼠纹状体中IGF-1蛋白相对表达量及p-Akt/Akt、p-FoxO3a/FoxO3a显著高于NC组(P<0.001)。结论通过抑制大鼠脑额叶皮层纹状体中miR-205表达可抑制多巴胺能神经元凋亡,改善PD症状,其机制可能与上调IGF-1表达及p-Akt、p-FoxO3a水平有关。

血浆miR-205在乙肝病毒相关肝脏疾病中的表达及其作为乙肝病毒所致肝细胞癌诊断标志物的价值

目的:探讨microRNA-205(miR-205)在乙型肝炎(乙肝)病毒(HBV)相关肝脏疾病患者血浆中的表达水平及其作为乙肝病毒所致肝细胞癌早期诊断标志物的潜在价值。方法:选取56例健康人群、63例慢性乙肝患者(CHB)、59例乙肝肝硬化患者(HBV-LC)及64例乙肝肝细胞癌患者(HBV-HCC),采用实时荧光定量PCR技术验证miR-205在4组人群血浆中的表达差异水平及其诊断效能。结果:miR-205在HBV-HCC患者血浆中的表达水平明显低于健康人群及HBV-LC组,P值均小于0.001,而与CHB组相比则无显著统计学差异(P=0.921)。受试者工作特征(ROC)曲线分析显示血浆miR-205对鉴别诊断HBV-HCC与健康人群、HBV-LC具有重要的意义,曲线下面积(AUC)分别为0.885(敏感性:96.9%,特异性:67.9%)和0.781(敏感性:96.9%,特异性:54.2%)。并且,血浆miR-205联合甲胎蛋白(AFP)在HBV-HCC与HBV-LC的鉴别中AUC及特异性可明显得到提高。进一步研究发现,血浆miR-205在从AFP<400ng/ml的HBV-HCC、HBV-LC患者中鉴别出HBV-HCC的AUC为0.815,敏感性为100%,明显优于AFP。结论:血浆miR-205虽然不能鉴别CHB与HBV-HCC,但其作为标志物应用于HBV-HCC的早期诊断,尤其是监控由乙肝肝硬化发展至肝细胞癌过程的潜在价值是不可忽视的。

miR-205-5p在HBV相关肝癌患者血清中表达及临床意义

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)相关肝癌患者血清中miR-205-5p的表达水平及其临床意义。方法收集34例HBV相关肝癌患者、41例慢性肝病患者、19例健康对照血清样本,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测其miR-205-5p的表达水平,受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-205-5p用于HBV相关肝癌诊断的价值。结果 HBV相关肝癌患者血清miR-205-5p表达水平低于健康对照组与慢性肝病组,差异有统计学意义(P<0.05)。不同血清甲胎蛋白水平、乙肝病毒载量、病灶数、肿瘤大小及癌栓的HBV相关肝癌患者之间,血清miR-205-5p表达无相关性(P>0.05)。ROC曲线分析显示,血清mi R-205-5p区分HBV相关肝癌患者与健康对照的ROC曲线下面积(AUC)为0.812,诊断敏感度与特异度分别为79.4%、73.7%。结论 miR-205-5p有望成为一种新的HBV相关肝癌诊断标记物。