点击化学制备AChE/MAO-B双抑制剂及活性评价

通过点击化学(Click)设计、合成了22个香豆素衍生物。多数化合物在微摩尔范围内表现出良好的AChE和MAO-B双抑制活性,具有良好的生物相容性。尤其是一种名为A2B5的化合物,对AChE和MAO-B的IC_(50)分别为(0.23±0.02)、(0.31±0.03)μmol/L,是最佳的AChE/MAO-B双抑制剂。实验结果表明香豆素基团是一类有效的AChE和MAO-B双抑制活性基团,羟基取代苯环的存在能够增强抑制活性。分子对接研究发现A2B5是双位点抑制剂,苯基部分结合到AChE的CAS位点,香豆素结合到PAS位点,三氮唑环占据两个活性位点的中间峡谷。A2B5的香豆素部分结合到MAO-B的入口空腔,苯基部分结合到底物空腔,并嵌入到Tyr435、Tyr398和FAD形成的“芳香笼”。总之,香豆素C7位置取代衍生物可以被开发为AChE/MAO-B双抑制剂,为进一步开发抗阿尔茨海默病的双靶点药物提供一个新的起点。

吲哚醌抗帕金森病药理作用研究进展

帕金森病(Parkinson′s disease,PD)是一种神经退行性病变,治疗药物主要有拟多巴胺药和抗胆碱药两大类,多巴胺类及其增效剂现有长足发展,包括单胺氧化酶-B(monoamine oxidase B,MAO-B)抑制剂、儿茶酚-氧位-甲基转移酶抑制剂、麦角类和非麦角类多巴胺(dopamine,DA)受体激动剂、DA前体药物,中药大麻类和吲哚醌等。吲哚醌作为内源特异抗老化酶MAO-B抑制剂,有多种药理活性,其机制还涉及多种蛋白调节的活性。

选择性MAO-B抑制剂TM-5对胶质瘤U87细胞自噬和凋亡的影响

目的探讨选择性单胺氧化酶B(MAO-B)抑制剂TM-5对胶质瘤U87细胞体外自噬及凋亡的影响。方法正常培养胶质瘤细胞株U87,随机分为6组:对照组不做处理,5、10、25、50、100μmoL/L TM-5组分别予以5、10、25、50、100μmoL/L TM-5处理细胞,每组设3个复孔。采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测促凋亡蛋白Bcl-2相关蛋白X(Bax)、抑凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的基因表达;蛋白质免疫印迹(WB)检测细胞凋亡相关蛋白Bax和切割后半胱氨酸蛋白酶3(cleaved caspase-3)以及自噬相关标志蛋白Beclin-1、自噬相关蛋白1轻链-Ⅱ(LC3-Ⅱ)和P62表达。结果与对照组比较,10、25、50、100μmoL/L TM-5组U87细胞存活率降低(P<0.05),选取5、10、25μmoL/L TM-5组(细胞存活率>50%)进行后续实验。与对照组比较,10、25μmoL/L TM-5组相对细胞凋亡率、细胞中LC3-Ⅱ和Bax蛋白相对表达量升高,差异有统计学意义(P<0.05);5、10、25μmoL/L TM-5组U87细胞中促凋亡基因Bax mRNA相对表达水平、Beclin-1和cleaved caspase-3蛋白相对表达量升高,抑凋亡基因Bcl-2 mRNA、P62蛋白相对表达量降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论TM-5可抑制胶质瘤U87细胞存活,可上调Beclin-1、LC3-Ⅱ、Bax和cleaved caspase-3,下调Bcl-2和P62表达,诱导细胞自噬和凋亡。

龙牙楤木总甙对小鼠B型单胺氧化酶及蛋白质合成的影响

龙牙楤木总甙对小鼠肝、脑组织中B 型单胺氧化酶(BMAO) 具有明显的抑制作用,并能明显促进幼年小鼠肝脏蛋白质、核酸合成,体外实验表明其对BMAO

鹿茸提取物对老年小鼠衰老指标的影响

本文观察了鹿茸水提物(0.5～1.0g/kg)对老年小鼠(24月龄)及青年小鼠(1月龄)某些衰老指标的影响。结果表明鹿茸水提取物可明显降低血清中胆固醇、甘油三酯含量;增加脑和肝蛋白质含量;降低脑和肝MDA含量;增强脑和肝SOD活性;抑制脑和肝MAO-B活性;增加脑内5-HT、NE和DA含量。鹿茸水提物对老年小鼠上述指标的影响较青年小鼠更明显,提示鹿茸对老年小鼠具有抗衰老作用。

羟基积雪草甙对慢性铝中毒痴呆小鼠的治疗作用

目的研究羟基积雪草甙(madecassoside,MC)对慢性铝中毒痴呆小鼠的保护作用。方法葡萄糖酸铝按铝400 mg.kg-1.d-1灌胃90 d建立慢性铝中毒痴呆小鼠模型。通过HE染色、Morris水迷宫试验和生化实验,观察MC三种剂量(30、60和120 mg.kg-1.d-1)同步给药90d对小鼠海马神经元损伤、空间学习记忆能力和脑组织单胺氧化酶B(MAO-B)活性的影响。结果与模型组比较,30和60 mg.kg-1.d-1MC明显减轻铝过负荷所致的海马神经元损伤,明显缩短小鼠寻找平台潜伏期(s)(35.9±10.9 vs 16.5±8.4和19.6±10.5)(P<0.05);同时三种剂量MC均明显降低小鼠脑组织中MAO-B活性(U.h-1.mg-1prot)(18.9±1.8 vs 14.6±1.7,13.7±2.3和13.6±1.4)(P<0.05)。结论MC对慢性铝中毒小鼠海马神经元有保护作用,改善痴呆小鼠学习记忆能力。

莲房原花青素改善小鼠学习记忆障碍的研究

目的:研究莲房原花青素(LSPC)抑制东莨菪碱和乙醇致小鼠学习记忆障碍的作用,并探讨其作用机制。方法:100只昆明小鼠分两批(50,50)进行实验,每批实验皆为5组,即正常对照组、模型组、22.5、45、90mg/kgbwLSPC组,每组10只,分别灌胃等量生理盐水、生理盐水、LSPC22.5、45、90mg/kgbw。20d后制备学习记忆障碍模型。按0.1ml/10gbw分别i.p.3mg/kgbw东莨菪碱或40%乙醇,采用Y迷宫法测定LSPC对小鼠学习记忆的影响。对于乙醇诱导的学习记忆障碍小鼠,Y迷宫结束后,取脑组织,采用试剂盒检测脑组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和B型单胺氧化酶(MAO-B)的含量及活性。结果:22.5和90mg/kgbwLSPC对东莨菪碱致学习记忆障碍小鼠有显著的改善作用。而三种不同剂量的LSPC对乙醇致学习记忆障碍小鼠均有显著的改善作用;而且可减少小鼠脑中MDA的含量、提高SOD活性和降低MAO-B活性。结论:LSPC对东莨菪碱和乙醇诱导的小鼠学习记忆障碍都有很好的改善效果。对于乙醇诱导的小鼠学习记忆障碍,LSPC的改善作用机制可能与抑制乙醇引起的小鼠脑中MAO-B活性的升高,同时减少神经元的氧化损伤有关。

调理心肾中药对拟痴呆大鼠脑组织中肾上腺能受体功能的影响

电损伤可造成大鼠拟痴呆动物模型。用受体放射性配基结合分析法,观察到:大鼠大脑皮层、海马和小脑组织中α_1受体的B_(max)值显著降低,调理心肾中药和对照西药喜德镇(Hydergin)均可明显提高拟痴呆动物脑组织中α_1受体的B_(max)值,使接近正常对照组。电损伤没有引起大鼠脑组织中的MAO-B活性升高,调理心肾中药和西药对MAO-B活性亦无明显调节作用。

β-淀粉样肽损伤后小鼠脑单胺氧化酶B、白细胞介素6的变化及中药的干预作用

目的观察β-淀粉样肽(Aβ)25-35致痴呆小鼠模型脑单胺氧化酶B(MAO-B)、白细胞介素-6(IL-6)的改变及中药脑复聪的干预作用.方法脑室内注射Aβ25-35造成痴呆模型小鼠,用Morris水迷宫测空间学习记忆功能;用比色法测MAO-B活性;免疫组化检测IL-6.结果模型小鼠的Morris水迷宫潜伏期(81.3±13.4)s,比对照组(34.2±10.9)s延长(P<0.05);大脑皮层和海马的MAO-B活性(120.12±10.15)、(83.60±5.29)均较对照组(93.09±10.54)、(50.39±9.16)升高(P<0.05～0.01),海马齿状回有大量IL-6免疫荧光阳性细胞.经脑复聪治疗后,水迷宫潜伏期(43.7±12.7)s缩短(P<0.05);海马的MAO-B活性(47.11±6.57)回降(P<0.01);IL-6免疫阳性神经细胞减少.结论抑制海马MAO-B的过度激活,减少自由基的产生,减少氧化应激反应,抑制小胶质细胞产生炎性因子IL-6,缓解Aβ的损伤作用,阻断AD发病的重要环节,是中药脑复聪治疗AD的重要机理之一.

草问荆总生物碱对小鼠脑单胺氧化酶-B活性的影响

目的 研究草问荆总生物碱 (TAEP)对小鼠脑单胺氧化酶 -B(MAO-B)活性的影响 ,揭示 TAEP对中枢神经系统抑制作用的机制。方法 采用紫外分光光度法测定 MAO-B的活性。结果 TAEP对小鼠脑 MAO-B具有明显的激活作用 ,并具有对抗烟肼酰胺抑制小鼠脑 MAO-B活性的作用。结论 TAEP是 MAO-B的激动药 ,有单胺代谢作用 ,这可能是

梅花鹿胎盘脂质的抗衰老作用

观察了梅花鹿胎盘脂质(0.25 g/kg)对青年小鼠(1 月龄)和老年小鼠(24 月龄)某些衰老生化指标的影响。结果表明,鹿胎盘脂质可显著抑制小鼠脑和肝脏中单氨氧化酶-B(MAO-B)的活性,提高脑和肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)的活性;降低小鼠心肌组织脂褐素的含量;明显提高小鼠皮肤和尾腱中羟脯氨酸(HYP)的含量。鹿胎盘脂质对老年小鼠上述生化指标的影响较青年小鼠更明显,提示鹿胎盘脂质对老年小鼠具有抗衰老作用。

雌激素类药物对去卵巢大鼠认知功能的影响

目的 :观察去卵巢 ( OVX)成年雌鼠的认知功能、脑内神经生化学改变及补充雌激素的影响。方法 :通过跳台法测试动物被动及主动回避反应 ,神经生化学手段测定相关酶及受体活性。结果 :OVX组大鼠的学习记忆能力明显下降 ;大脑皮层和海马部位的胆碱乙酰化转移酶 ( Ch AT)活性显著低下 ;大脑皮层胆碱能 M受体和 N-甲基 -D-天门冬氨酸 ( NMDA)受体结合活性明显降低而单胺氧化酶 B( MAO-B)活性增加。经补充苯甲酸雌二醇 ( EB)或植物雌激素 NH1 9966周后 ,其学习记忆明显改善 ,上述生化指标均接近正常。结论 :推测雌激素和 NH1 996可通过影响中枢胆碱能 。

新疆肉苁蓉抗自由基损伤的研究

肉苁蓉对Ｏ＿３造成的小鼠体力、御寒能力和对缺氧的耐受力降低，血浆及肝、脑脂质过氧化物含量增加，脑Ｂ型单胺氧化酶活力提高，血清超氧化物歧化酶活力降低均有明显抑制作用。

2,3-吲哚醌对大鼠脑内单胺类神经递质含量与释放的影响

目的研究2,3-吲哚醌对大鼠脑内单胺类神经递质含量与释放的影响。方法给予Wistar大鼠2,3-吲哚醌(50,200 mg.kg-1,ip),2h后测定其纹状体Ach,DA含量;在脑片灌流液中加入2,3-吲哚醌(50,200μmol.L-1),测定其对纹状体及皮质脑片DA,5-HT,NE释放的影响。结果大鼠腹腔给予2,3-吲哚醌,其纹状体Ach和DA的浓度均有增加(P<0.05和P<0.01);脑片灌流液中加入2,3-吲哚醌促进皮质和纹状体内DA释放(P<0.01)。结论2,3-吲哚醌具有调节脑内DA和Ach两种神经递质功能平衡的作用。

铝过负荷致小鼠脑神经元退变与脑单胺氧化酶B的关系

目的:采用铝负荷致小鼠脑损伤模型,探讨铝致神经元退行性变与脑单胺氧化酶B代谢失衡的关系。方法:每鼠侧脑室内分别注射浓度为0.125%、0.25%、0.5%的AlCl3 3μl,连续给药5天,建立不同量铝过负荷致脑损伤小鼠模型。于给药后第10天、第20天和第30天测定小鼠学习记忆功能、海马病理形态学改变、单胺氧化酶B(Monoamine oxidase B,MAO-B)活性。结果:铝过负荷致小鼠脑内MAO-B活力显著升高和CA1区出现明显神经元丢失及核固缩;上述指标均呈剂量依赖性和时间依赖性改变。结论:铝过负荷致神经元退变可能与其干扰脑单胺氧化酶B代谢有关。

益智灵对D-半乳糖所致小鼠亚急性衰老模型的作用研究

采用D-半乳糖引起小鼠亚急性衰老模型,观察益智灵的抗脑衰作用。结果显示:1g/kg,3g/kg益智灵可提高脑衰小鼠的学习和记忆;降低脑组织中过氧化脂质、脂褐质和B型单胺氧化酶活性;同时提高胸腺指数和脾脏指数。证明益智灵有明显抗脑衰作用。

天麻对小鼠脑内单胺氧化酶活性的影响

目的 :考察天麻提取物对D 半乳糖所致亚急性损伤小鼠脑内单胺氧化酶B(MAO B)活性的影响。方法 :采用D 半乳糖诱导小鼠脑内MAO B活性升高 ,小鼠腹腔注射 (ip)天麻提取物 30d后 ,测定其脑内MAO B的活性。 结果 :小鼠ip天麻提取物 0 .2 5 ,0 .5 ,1.0g·kg-130d后 ,均能显著降低MAO B活性 ,与D 半乳糖模型组比较 ,差异有极显著性 (P <0 .0 1)。结论 :说明天麻提取物能抑制D 半乳糖所致亚急性损伤小鼠脑内MAO B的活性 。

帕金森病治疗药物的研究进展

帕金森病是一种进展缓慢的神经系统疾病，严重影响老年人的健康与生活质量。本文对已临床使用或正在临床试验的司来吉兰、培高利特、他利克索、卡麦角林、拉扎贝胺、托卡朋、恩他卡朋、罗匹尼罗等１０多个药物的疗效、作用机制、给药剂量方案与毒副作用等作一简述。

祁州漏芦对大鼠B型单胺氧化酶活性的抑制作用

体外实验证明,祁州漏芦乙醇提取物能显著抑制大鼠大脑线粒体B型单胺氧化酶(MAO—B)的活性,而对肝MAO—B活性的抑制作用仅为对脑抑制作用的50％左右。酶促动力学研究表明,祁州漏芦对MAO—B活性的抑制作用属竞争性抑制。

常春胶囊对亚急性衰老模型小鼠自由基代谢的影响

昆明种小白鼠每日颈背皮下注射５％Ｄ－半乳糖０．５ｍｌ，４０天可造成亚急性衰老模型。在注射Ｄ－半乳糖的同时，分别灌服常春胶囊水煎剂１２．５ｇ／ｋｇ和２５ｇ／ｋｇ两种剂量，并与青春宝作了对比观察。结果表明，常春胶囊可显著地提高衰老小鼠红细胞中的ＳＯＤ、ＣＡＴ、ＧＳＨ－Ｐｘ的活性和脏器组织中ＳＯＤ的活性（Ｐ＜０．０１），明显减少衰老小鼠血液和组织中ＬＰＯ的形成，显著地抑制鼠脑中ＭＡＯ－Ｂ活性和脏器组织中ＬＦ的生成量，并可提高衰老小鼠尾腱中羟脯氨酸和胶原蛋白含量（Ｐ＜０．０５）。提示常春胶囊具有较好的消除自由基、抗衰老的作用。