细胞外信号调节蛋白激酶5/凋亡调节蛋白信号途径在低温诱导心肌细胞损伤及凋亡中的调控作用

目的:探讨低温刺激诱导心肌细胞损伤及凋亡,以及细胞外信号调节蛋白激酶5(ERK5)/凋亡调节蛋白Bim途径的调控作用。方法:基于乳鼠原代心肌细胞,低温培养箱施加低温刺激;使用特异性小干扰RNA(siRNA)下调ERK5或Bim的表达;细胞凋亡使用流式细胞仪检测;各蛋白表达水平通过Western blot检测;细胞内钙离子、活性氧簇(ROS)水平、线粒体膜电位(ΔΨm)通过荧光标记及流式细胞仪检测。结果:在低温刺激下的心肌细胞中,ERK5 siRNA可加剧Bim蛋白表达;Bim siRNA不影响ERK5,但减轻p-ERK5表达;ERK5 siRNA导致更高的细胞凋亡率,Bim siRNA则可减弱ERK5 siRNA的促凋亡作用;ERK5 siRNA加重了细胞内钙离子超载、ROS激活、线粒体膜电位破坏,Bim siRNA则可对抗上述损伤性作用。结论:在低温干预下的心肌细胞中,下调ERK5可释放对Bim的表达抑制,加重凋亡、细胞内钙离子超载、ROS爆发,造成更严重的线粒体膜电位破坏,而下调Bim则产生反向的保护作用。结果显示ERK5/Bim途径在低温诱导心肌细胞损伤中的重要调控作用。

宫颈癌组织中BIM和Girdin蛋白表达与临床病理特征及预后的相关性分析

目的分析宫颈癌组织中Bcl-2相互作用细胞凋亡调节因子(Bcl-2 interacting mediator of cell death,BIM)和Girdin蛋白的表达情况,并探讨BIM和Girdin蛋白与宫颈癌患者临床病理特征及预后的相关性。方法选取延安大学附属医院2011年6月-2013年6月收治的136例宫颈癌患者作为研究对象,采用系统回顾性分析法分析所有患者的临床及随访资料,收集宫颈癌患者其136份癌组织标本(研究组)及136份其他良性宫颈疾病的正常组织标本(对照组)作为研究对象,所有组织标本均行BIM与Girdin蛋白的检测,分析宫颈癌组织中BIM与Girdin蛋白的表达与患者临床病理特征和预后的关系。结果宫颈癌组织中BIM及Girdin蛋白阳性表达率分别为36.03%、58.09%(P<0.05);BIM及Girdin蛋白的表达与宫颈癌患者年龄、病理类型差异均无统计学意义(P>0.05);BIM及Girdin蛋白的表达与宫颈癌患者淋巴结转移、FIGO分期、分化程度及肌层浸润深度差异有统计学意义(P<0.05);经单因素分析得出:FIGO分期、分化程度、肌层浸润深度、BIM蛋白及Girdin蛋白患者其5年生存率率差异有统计学意义(P<0.05);多因素COX比例风险回归模型分析显示,FIGOⅡ期、低分化、肌层浸润深度≥1/2、BIM蛋白阴性及Girdin蛋白阳性均为影响宫颈癌患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论在宫颈癌癌变组织中BIM呈低表达,Girdin蛋白呈高表达,随着患者FIGOⅡ期、低分化、肌层浸润深度≥1/2时BIM低表达率和Girdin蛋白高表达率均上升,且联合FIGOⅡ期、低分化、肌层浸润深度≥1/2共同为影响宫颈癌患者预后的独立危险因素。

非小细胞肺癌组织中丝苏氨酸激酶11与细胞死亡调解子抗体表达检测的临床意义

目的探讨非小细胞肺癌组织中丝苏氨酸激酶11（STK11）、细胞死亡调解子抗体（BIM）表达检测的临床意义。方法选取2014年3月至2015年3月河北省胸科医院接收的非小细胞肺癌患者65例，收集切除后的非小细胞肺癌组织标本及癌旁正常组织。采用免疫组织化学技术对标本中STK11、BIM的表达进行研究。结果非小细胞肺癌组织中的STK11阳性表达率低于旁癌组织[63．08％（41／65）比92．31％（60／65）]（x^2=16．022，P〈0．05），非小细胞肺癌组织中的BIM的阳性表达率高于旁癌组织[61．54％（40／65）比21．54％（14／65）]（x^=21．413，P〈0．05）。淋巴结转移患者非小细胞肺癌组织中STK11阳性表达率显著低于未转移淋巴结患者[41．38％（12／29）比80．56％（29／36）]（P〈0．05）；Ⅰ～Ⅱ期患者非小细胞肺癌组织中STK11的阳性表达率显著高于Ⅲ～Ⅳ期[72．55％（37／51）比28．57％（4／14）]（P〈0．05）；高分化患者的非小细胞肺癌组织中STK11阳性表达率显著高于中分化、低分化[89．47％（17／19）比51．61％（16／31）、53．33％（8／15）]（P〈0．05）。腺癌患者非小细胞肺癌组织中STK11阳性率显著高于鳞癌[78．13％（25／32）比48．48％（16／33）]（P〈0．05）。Ⅰ～Ⅱ期的BIM阳性表达率显著高于Ⅲ～Ⅳ期[70．59％（36／51）比28．27％（4／14）]（P〈0．05）；高分化患者非小细胞肺癌组织阳性表达率显著高于中分化、低分化[89．47％（17／19）比45．16％（14／31）、60．oo％（9／15）]（P〈0．05）。腺癌BIM阳性率高于鳞癌[75．oo％（24／32）比48．48％（16／33）]（P〈O．05）。结论STK11、BIM表达水平可作为判定非小细胞肺癌转移及预后的生物学指标。

Bim蛋白、端粒酶蛋白在骨恶性纤维组织细胞瘤中的表达及临床意义

目的探讨淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)相互作用的细胞凋亡调节因子(bcl-2 interacting mediator of cell death,Bim)蛋白、端粒酶蛋白在骨恶性纤维组织细胞瘤中的表达及临床意义。方法采用免疫组化(EnVisionTM)法分别检测40例骨恶性纤维组织细胞瘤组织(观察组)及40例骨恶性纤维组织细胞瘤旁组织(对照组)中Bim、端粒酶蛋白的表达情况。结果 Bim蛋白、端粒酶蛋白在观察组、对照组阳性率的差异均有统计学意义(χ2=8.71,P<0.01;χ2=22.17,P<0.01)。Bim蛋白、端粒酶蛋白的表达均与骨恶性纤维组织细胞瘤直径、临床分期有关(P<0.05),而与患者年龄、性别、肿瘤部位及组织学类型无关(P>0.05)。Bim蛋白与端粒酶蛋白在骨恶性纤维组织细胞瘤组织中的表达呈显著负相关(r=-0.56,P<0.01)。结论 Bim蛋白和端粒酶蛋白均参与了骨恶性纤维组织细胞瘤的形成,同时检测这2项指标有利于判断肿瘤恶性程度及预后。

Bim蛋白在骨恶性纤维组织细胞瘤中的表达及临床研究

目的探讨Bim蛋白在骨恶性纤维组织细胞瘤中的表达及其临床意义。方法收集2005年2月至2008年2月蔚州矿业公司职工医院确诊为骨恶性纤维组织细胞瘤的患者40例,采用免疫组织化学(EnVisionTM)法分别检测40例骨恶性纤维组织细胞瘤及40例骨恶性纤维组织细胞瘤旁组织中Bim的表达情况。结果 Bim在骨恶性纤维组织细胞瘤组织、骨恶性纤维组织细胞瘤旁组织中阳性表达率分别为25.00%、67.50%,差异有统计学意义(P<0.01)。Bim的表达与肿瘤部位、患者性别、年龄及组织学类型无关,差异无统计学意义(P>0.05),但与肿瘤大小、临床分期、5年生存期及紫杉醇治疗有关,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Bim在骨恶性纤维组织细胞瘤组织中呈现低表达,其低表达可在一定程度上反映骨恶性纤维组织细胞瘤的生物学行为及5年生存期的状况。

过表达miR-17—92基因簇对前列腺癌细胞生物学特性的影响及机制

目的探讨过表达miR-17-92基因簇对前列腺癌细胞生物学特性的影响及潜在机制。方法采用过表达miR-17-92基因的质粒转染包装细胞，并构建过表达miR-17-92基因簇的前列腺癌DU145-17-92细胞。采用xCelligence系统实时动态监测DU145-control和DU145-17-92细胞的生长能力，采用Ki-67抗原检测技术和原位末端转移酶标记技术（TUNEL）分别检测DU145-control和DU145-17-92细胞中细胞增殖和凋亡情况，采用流式细胞术分析DU145-control和DU145-17-92细胞的细胞周期，采用Western blot检测DU145-control和DU145-17-92细胞中凋亡相关蛋白和增殖相关蛋白的表达。结果xCelligence系统监测显示，从接种24 h后，DU145-17-92细胞的生长速度显著高于DU145-control细胞（P〈0.01）。细胞培养24、48、72 h后，DU145-control组的Ki-67阳性细胞率分别为（56.57±1.68）%、（85.48±0.26）%和（90.85±2.08）%，DU145-17-92组的Ki-67阳性细胞率分别为（73.64±0.68）%、（93.43±1.23）%和（97.36±0.86）%，两组仅在培养24 h时差异有统计学意义（P〈0.01）。细胞培养24、48、72 h后，DU145-control组的细胞凋亡率分别为（6.76±0.09）%、（14.51±0.86）%和（20.73±1.64）%，DU145-17-92组的细胞凋亡率分别为（1.86±0.15）%、（7.90±0.40）%和（4.92±0.48）%，差异均有统计学意义（均P〈0.01）。Western blot检测显示，DU145-control和DU145-17-92细胞中，Bcl-2家族促凋亡蛋白（BIM）的表达水平分别为0.83±0.00和0.16±0.00, 人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物（PTEN）蛋白的表达水平分别为0.91±0.00和0.13±0.00，差异均有统计学意义（均P〈0.01）。过表达miR-17-92基因簇促进了蛋白激酶B（Akt）中丝氨酸473位点（p-Akt-473）的磷酸化，但对308位点（p-Akt-308）的磷酸化无明显影响。DU145-control和DU145-17-92细胞中磷酸化细胞外信号调节激酶（p-ERK）蛋白的表达水平分别为0.21±0.01和0.72±0.01，差异有统计学意义（P〈0.01）。结论过表达miR-17-92基因簇能显著影响DU145细胞的生长、增殖、凋亡和细胞周期等生物学特性，这与凋亡调控相关蛋白BIM和抑癌蛋白PTEN表达的下调有关，Akt和ERK信号通路的活化及凋亡相关蛋白表达水平的失调也起着重要的作用。

Bim蛋白在抗肿瘤中的研究进展

B细胞淋巴瘤-2细胞死亡相互作用调节子(B cell lymphoma-2 interacting mediator of cell death,Bim)是B细胞淋巴瘤(B cell lymphoma,Bcl)-2家族中的重要组成部分,也是Bcl-2凋亡蛋白家族中仅有一个BH3同源结构域的蛋白。Bim通过BH3结构域与Bcl-2中凋亡成员结合或直接活化促凋亡分子,诱导细胞凋亡。Bim蛋白的低表达与多种肿瘤的发生发展、预后及抗肿瘤药物的耐药性等密切相关。调控Bim蛋白表达已成为当前研究热点。该文将对Bim蛋白在抗肿瘤中的研究进展作综述。