B lymphoma Moloney murine leukemia virus insertion region 1: An oncogenic mediator in prostate cancer

B lymphoma Moloney murine leukemia virus insertion region 1 (BMI1), a core member of polycomb repressive complex 1 (PRC1), has been intensely investigated in the field of cancer epigenetics for decades. Widely known as a critical regulator in cellular physiology, BMI1 is essential in self-renewal and differentiation in different lineages of stem cells. BMI1 also plays a significant role in cancer etiology for its involvement in pathological progress such as epithelial–mesenchymal transition (EMT) and cancer stem cell maintenance, propagation, and differentiation. Importantly, overexpression of BMI1 is predictive for drug resistance, tumor recurrence, and eventual therapy failure of various cancer subtypes, which renders the pharmacological targeting at BMI1 as a novel and promising therapeutic approach. The study on prostate cancer, a prevalent hormone-related cancer among men, has promoted enormous research advancements in cancer genetics and epigenetics. This review summarizes the role of BMI1 as an oncogenic and epigenetic regulator in tumor initiation, progression, and relapse of prostate cancer.

血清miR-340-5p、Bmi-1与老年急性脑梗死后血管性认知障碍的相关性研究

目的探讨血清微小RNA-340-5p(miR-340-5p)、B细胞特异性Moloney小鼠白血病病毒整合位点1(Bmi-1)与老年急性脑梗死后血管性认知障碍(VCI)的相关性。方法选取2021年3月至2023年2月就诊的103例老年急性脑梗死患者作为研究对象,根据MoCA评分将患者分为VCI组(n=60)和无VCI组(n=43)。比较2组患者的一般资料;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测2组血清中miR-340-5p、Bmi-1的表达情况;ENCORI预测miR-340-5p与Bmi-1的靶向关系;Pearson法分析VCI患者血清miR-340-5p与Bmi-1表达水平相关性;Spearman相关分析血清miR-340-5p、Bmi-1水平与MoCA评分的相关性;Logistic回归分析老年急性脑梗死患者发生VCI的影响因素;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-340-5p、Bmi-1水平对老年急性脑梗死患者发生VCI的诊断价值。结果VCI组患者吸烟史、既往脑梗病史占比显著高于无VCI组(P<0.05),MoCA评分显著低于无VCI组,差异有统计学意义(P<0.05);与无VCI组相比,VCI组miR-340-5p表达水平均明显降低(P<0.05),Bmi-1表达水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);ENCORI网站预测结果显示,miR-340-5p与Bmi-1可能存在靶向关系;且VCI组患者血清miR-340-5p表达水平与Bmi-1呈负相关,血清miR-340-5p表达与MoCA评分呈正相关,Bmi-1表达与MoCA评分呈负相关(P<0.05);Logistics回归分析结果显示,MoCA评分、miR-340-5p是影响老年急性脑梗死患者发生VCI的保护因素(P<0.05),吸烟史、既往脑梗死病史、Bmi-1是影响老年急性脑梗死患者发生VCI的危险因素(P<0.05);ROC曲线分析结果显示,血清miR-340-5p、Bmi-1表达水平(AUC=0.851、0.886)对老年急性脑梗死后VCI有良好的诊断效果,且二者联合诊断效果更佳(AUC=0.947,Z二者联合-miR-340-5p=3.018、P=0.003,Z二者联合-Bmi-1=2.636,P=0.008)。结论老年急性脑梗死后VCI患者血清,miR-340-5p表达下调,Bmi-1表达上调,二者表达水平与老年急性脑梗死患者发生VCI过程密切相关。

siRNA干扰BMI-1基因对膀胱癌EJ细胞增殖的调控作用及其机制

目的:对比观察膀胱癌EJ细胞及人膀胱移行上皮细胞中BMI-1基因及下游p16INK4a、p14ARF基因的mRNA及蛋白表达水平,探讨siRNA干扰BMI-1基因后对EJ细胞增殖的影响及其调控机制。方法:细胞免疫荧光观察BMI-1、p16INK4a和p14ARF蛋白在EJ细胞中表达情况及定位。Real-time RT-PCR检测EJ细胞及膀胱正常移行上皮细胞中3种基因的表达水平,Western blotting检测蛋白水平。构建干扰BMI-1基因siRNA,通过脂质体转染导入EJ细胞中,设立空白对照和阴性干扰对照组,检测BMI-1及下游p16、p14基因表达水平及蛋白表达水平的变化;以CCK-8检测细胞生长观察siRNA干扰BMI-1表达对EJ细胞增殖的抑制作用;用流式细胞术分析细胞凋亡的改变。结果:BMI-1mRNA及蛋白水平在EJ细胞表达高于膀胱移行上皮细胞,而p16INK4a和p14ARFmRNA及蛋白在EJ细胞表达水平稍低于膀胱移行上皮细胞。siRNA干扰BMI-1后可以上调EJ细胞中其下游p16和p14 mRNA及蛋白水平,使EJ细胞增殖能力下降,细胞凋亡增多。结论:siRNA干扰BMI-1基因表达对EJ细胞的体外生长具有明显的抑制作用,其作用机制与上调其下游p16INK4a、p14ARF基因的表达有关。

Bmi-1基因过表达对人正常胃黏膜上皮细胞株GES-1增殖的影响

目的:探讨原癌基因B淋巴瘤莫洛尼鼠白血病病毒插入区1(Bmi-1)过表达对人正常胃黏膜上皮细胞株GES-1增殖的影响。方法:采用逆转录病毒介导转染方法将携带原癌基因Bmi-1的质粒或空质粒稳定转染GES-1细胞,通过real-time PCR及Western blotting在mRNA及蛋白水平鉴定转染效果。流式细胞术检测过表达Bmi-1对GES-1细胞周期的影响。应用CCK-8(Cell Counting Kit-8)试剂盒检测稳定转染Bmi-1对GES-1细胞增殖的影响。结果:Real-time PCR及Western blotting结果均表明成功建立稳定转染Bmi-1基因的GES-1细胞株。流式细胞术结果表明,过表达Bmi-1基因使GES-1细胞G0/G1期减少,G2/M期和S期细胞增多。生长曲线显示,过表达Bmi-1基因使GES-1细胞增殖速度明显提高。结论:过表达Bmi-1基因能调控GES-1细胞的细胞周期,促进GES-1细胞的增殖。

Bmi-1基因的过表达对人结肠癌细胞株SW480/CD133^+细胞增殖的影响

目的探讨Bmi-1基因过表达对人结肠癌细胞株SW480/CD133^+细胞增殖的影响。方法用携带Bmi-1基因的质粒(pMSCV-Bmi-1)感染人结肠癌SW480/CD133^+细胞,作为观察组(pMSCV-Bmi-1/CD133^+组);以空质粒(pMSCV)感染SW480/CD133+细胞,作为空质粒对照组(pMSCV/CD133^+组);空白对照组不作任何处理,常规培养。用实时荧光PCR和免疫印迹法分别检测细胞中Bmi-1 mRNA水平和蛋白表达的水平;平板克隆实验检测细胞增殖能力的变化。结果观察组Bmi-1 mRNA和蛋白表达的水平均较空质粒对照组和空白对照组显著增高(均P<0.01)。观察组、空质粒对照组和空白对照组的细胞克隆形成率分别为(88.45±5.79)%,(52.33±3.62)%和(54.66±4.03)%,观察组分别高于空质粒对照组和空白对照组(均P<0.01)。结论成功地将Bmi-1基因导入SW480/CD133^+细胞,并能使其在mRNA水平和蛋白水平稳定、持续地表达。Bmi-1过表达可以显著增强人结直肠癌SW480/CD133^+细胞的克隆形成能力,促进SW480/CD133^+细胞增殖。

3D腹腔镜结肠癌根治手术疗效分析及预后评价

目的探讨3D腹腔镜结肠癌根治手术疗效及安全性,分析Bmi-1和CDX-2表达与结肠癌临床病理特征及预后的关系。方法对比分析腹腔镜手术与开腹手术2组切口总长度、手术时间、术中失血量、清扫淋巴结数目、术后12 h疼痛评分、肠功能恢复时间及术后平均住院日7项指标;采用免疫组化EliVision TM plus两步法检测结肠癌组织Bmi-1和CDX-2的表达,分析其与患者年龄、瘤体大小、分化等级、淋巴结转移及5年内复发转移5项临床病理特征的相关性。结果腹腔镜组与开腹组比较,手术时间、清除淋巴结数目无显著差异,但切口总长度小,手术失血量少,术后12 h疼痛评分低,肠功能恢复快,术后平均住院日短。结肠癌组织Bmi-1和CDX-2阳性率分别为79.1%和64.2%。Bmi-1表达与年龄、瘤体大小、分化等级无关,在有淋巴结转移、5年内复发转移患者中其阳性率显著高于无淋巴结转移、5年内无复发转移者;CDX-2表达与年龄、瘤体大小无关,在低分化等级、有淋巴结转移、5年内复发转移患者中其阳性率显著低于(高+中)分化、无淋巴结转移、5年内无复发转移者。Bmi-1和CDX-2表达呈负相关性。结论3D腹腔镜结肠癌手术具有满意的根治效果和安全性,癌组织Bmi-1高表达、CDX-2低表达预示术后易发生复发转移,患者预后不良。

类转录激活因子效应物核酸酶介导的E-cad和Bmi-1基因联合干预鼻咽癌的体外研究

目的:检测类转录激活因子效应物核酸酶(transcription activator-like effector nuclease,TALEN)介导的E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)、B细胞特异性莫洛尼氏白血病毒插入位点1(B-lymphoma Moloney murine leukemia virus insertion region-1,Bmi-1)基因联合干预对鼻咽癌细胞生物学行为的影响。方法:构建多位点基因打靶载体p UC-DS1-E-cad-2ANeo-DS2(以下简称E-cad打靶载体)和p UC-DS1-Bmi-1 sh RNA-Zeo-DS2(以下简称Bmi-1打靶载体),将E-cad打靶载体、Bmi-1打靶载体及佛山科学技术学院分子医学研究院前期构建的TALEN载体以不同组合转染鼻咽癌CNE-2细胞。采用PCR检测靶基因的整合,Western印迹检测靶基因蛋白表达水平变化,细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)检测细胞增殖能力变化,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡变化,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力变化。结果:靶基因E-cad和Bmi-1 sh RNA表达元件成功整合到鼻咽癌CNE-2细胞的基因组中;转染后鼻咽癌CNE-2细胞中E-cad的蛋白表达水平明显上升,Bmi-1的蛋白表达水平明显下降;干预E-cad及Bmi-1不影响细胞的增殖、周期和凋亡,但显著抑制细胞的迁移和侵袭能力,且E-cad和Bmi-1联合干预比单独干预更能显著抑制鼻咽癌CNE-2细胞体外迁移能力(均P<0.01)。结论:TALEN介导的E-cad和Bmi-1联合干预能有效抑制鼻咽癌CNE-2细胞的体外迁移和侵袭,可为人类癌症的基因治疗建立前期的实验基础。

miR-370、Bmi-1、Nrf2在肺癌中的表达及其与临床病理特征的相关性

目的分析微小核糖核酸-370(miR-370)、B细胞特异性莫洛氏鼠白血病病毒插入位点1(Bmi-1)、核转录相关因子-2(Nrf2)在肺癌中的表达及其与患者临床病理特征的关系。方法选择我院收治的73例肺癌患者的癌组织标本,并保留同期38例肺癌患者距肿瘤边缘5 cm的癌旁组织标本。比较miR-370、Bmi-1、Nrf2在肺癌组织及癌旁组织中的表达情况,分析miR-370、Bmi-1、Nrf2表达与肺癌临床病理特征及预后的关系。结果肺癌组织miR-370高表达率低于癌旁组织,Bmi-1、Nrf2阳性表达率高于癌旁组织,差异均有统计学意义(P<0.05)。miR-370、Bmi-1、Nrf2表达在不同性别、年龄、肿瘤大小及细胞分型中的差异无统计学意义(P>0.05),在淋巴结转移、TNM分期中的差异有统计学意义(P<0.05)。miR-370高表达患者生存率明显高于低表达患者,Bmi-1、Nrf2阳性表达患者生存率明显低于阴性表达患者(P<0.05)。COX回归模型分析显示,淋巴结转移、TNM分期、Bmi-1及Nrf2是影响预后的危险因素,miR-370是保护因素。结论 miR-370、Bmi-1、Nrf2表达与肺癌患者临床病理特征相关,能够反映肿瘤的恶性生物学行为,可作为肺癌患者预后评估的参考指标。

Bmi-1 siRNA对人白血病K562细胞增殖的影响及其机制

目的探讨Bmi-1 siRNA对人白血病K562细胞增殖的影响及其作用机制。方法通过脂质体将化学合成针对Bmi-1基因的siRNA转染K562细胞,采用MTT法观察Bmi-1 siRNA对K562细胞增殖的抑制作用;流式细胞术分析细胞周期变化;Western blot检测Bmi-1siRNA对K562细胞中Bmi-1和P16蛋白表达的影响。结果Bmi-1 siRNA能明显延长K562细胞的倍增时间、G1期比例增加;下调Bmi-1表达的同时上调P16蛋白表达。结论体外化学合成的Bmi-1 siRNA对K562细胞的体外增殖具有明显的抑制作用,下调Bmi-1蛋白表达的同时上调P16蛋白表达。

高迁移率族蛋白B1过表达对子宫内膜癌细胞增殖、周期和凋亡的影响及机制研究

目的:探讨高迁移率族蛋白(HMG)B1过表达对子宫内膜癌细胞增殖、周期和凋亡的影响及机制。方法:将对数生长期的Ishikawa细胞分为三组:pcDNA3.0组、pcDNA3.0-HMGB1组与对照组。pcDNA3.0组、pcDNA3.0-HMGB1组分别转染pcDNA3.0载体与pcDNA3.0-HMGB1载体,对照组以等体积的磷酸盐缓冲液进行转染。采用MTT法检测细胞增殖指数、Transwell小室检测细胞侵袭与转移指数、流式细胞仪检测细胞凋亡与细胞周期、Western blot检测蛋白表达。结果:转染后36、72 h,pcDNA3.0-HMGB1组的细胞增殖指数高于pcDNA3.0组与对照组(均P<0.05),细胞凋亡指数低于pcDNA3.0组与对照组(均P<0.05)。转染后36、72 h,pcDNA3.0-HMGB1组的G_(0)/G_(1)期比例高于pcDNA3.0组与对照组(均P<0.05),S期和G_(2)/M期比例低于pcDNA3.0组与对照组(均P<0.05)。转染后36、72 h,pcDNA3.0-HMGB1组的细胞侵袭与转移指数高于pcDNA3.0组与对照组(均P<0.05)。转染后36、72 h,pcDNA3.0-HMGB1组的B细胞特异性小鼠白血病病毒插入位点1(Bmi-1)、HMGB1蛋白相对表达水平高于pcDNA3.0组与对照组(均P<0.05)。结论:HMGB1过表达能促进子宫内膜癌细胞增殖、侵袭、转移及Bmi-1蛋白表达,抑制细胞凋亡,调节细胞周期。

急性早幼粒细胞白血病预后的影响因素及miR-218与Bmi-1表达的相关性分析

目的分析急性早幼粒细胞白血病(APL)预后的影响因素及微RNA(miRNA/miR)-218与B细胞特异性莫洛尼白血病毒插入位点1(Bmi-1)表达的相关性。方法选取2014年9月至2018年9月于内蒙古医科大学第三附属医院确诊并系统治疗的110例APL患者作为APL组,选取同期在本院因疾病筛查需进行骨髓活检、最终明确造血系统功能正常的60例患者的骨髓活检标本作为对照组,比较两组miR-218与Bmi-1信使RNA(mRNA)的表达水平。对所有APL患者进行长期随访并记录生存结局,对比不同生存结局APL患者的骨髓活检标本组织中miR-218与Bmi-1 mRNA表达水平差异,分析miR-218与Bmi-1表达水平对APL患者生存情况的预测价值。采用Cox回归模型分析APL患者生存预后的影响因素。结果APL组患者骨髓活检标本组织中miR-218 mRNA表达水平低于对照组(0.55±0.09比0.62±0.10),Bmi-1 mRNA的表达水平高于对照组(1.28±0.27比1.09±0.21)(P<0.01)。Pearson检验发现,APL患者骨髓活检标本组织中miR-218 mRNA的表达水平与Bmi-1 mRNA的表达水平呈负相关(P<0.05)。死亡组患者骨髓活检标本组织中miR-218 mRNA的表达水平低于存活组(0.52±0.09比0.59±0.08),Bmi-1 mRNA的表达水平高于存活组(1.34±0.25比1.19±0.20)(P<0.01)。骨髓活检标本组织中,miR-218表达水平预测APL患者随访期死亡的最佳截断值为0.565,受试者工作特征曲线下面积为0.848(95%CI 0.771~0.925),灵敏度、特异度分别为72.41%、74.44%;Bmi-1表达水平预测APL患者随访期死亡的最佳截断值为1.185,受试者工作特征曲线下面积为0.823(95%CI 0.735~0.912),灵敏度、特异度分别为73.53%、75.58%。死亡组的危险度分级高危、染色体核型非典型核型、白细胞计数≥20×10^(9)/L、miR-218<0.565、Bmi-1>1.185患者比例均高于存活组,诱导治疗方案中的全反式视黄酸(ATRA)+DA(柔红霉素和阿糖胞苷)患者比例低于存活组(P<0.05或P<0.01)。Cox回归分析显示,危险度分级高危、染色体核型非典型核型、白细胞计数≥20×10^(9)/L、miR-218<0.565、Bmi-1>1.185是APL患者随访期死亡的独立危险因素,诱导治疗方案ATRA+DA是APL患者随访期死亡的保护性因素(P<0.05)。结论APL患者骨髓标本组织中miR-218 mRNA低表达、Bmi-1 mRNA高表达参与病情进展,且是影响其生存预后的重要因素。

B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒插入位点1促进炎症微环境中人结直肠癌细胞HT-29细胞上皮-间质转化及侵袭

目的 探讨原癌基因B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒插入位点1(Bmi-1)对炎症微环境中人结直肠癌细胞HT-29细胞肿瘤迁移及上皮-间充质转化(EMT)的作用及机制。方法 实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)及Western blot法,检测Bmi-1、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的基因水平及Bmi-1蛋白水平,酶联免疫吸附剂测定法检测上清TNF-α和IL-6水平。噻唑蓝比色法和Transwell侵袭试验分别检测细胞增殖和侵袭能力,Western blot法检测EMT相关标记及核因子-κB (NF-κB)通路关键蛋白。结果 HT-29细胞经人急性单核细胞白血病细胞条件培养基(THP-1-CM)刺激后,Bmi-1、TNF-α和IL-6的基因表达均增高(1.86±0.08比1.00±0.05,2.38±0.13比1.00±0.14,3.00±0.15比1.00±0.05,P<0.01),Bmi-1蛋白含量增高(1.68±0.08比1.00±0.05,P<0.01),上清TNF-α和IL-6水平也有不同程度增加[(73±4) pg/ml比(32±4) pg/ml、(140±9) pg/ml比(42±9) pg/ml,P<0.01]。沉默Bmi-1基因后,HT-29细胞分泌TNF-α和IL-6的水平下降[(31±3)、(56±8) pg/ml]。THP-1-CM刺激后,细胞侵袭性增加,但对细胞增殖无影响。进一步检测发现,EMT相关标记E-钙黏素表达下调,波形蛋白和N-钙黏附素水平及NF-κB通路关键蛋白NF-κB p65的磷酸化上调。沉默Bmi-1基因后,减弱细胞侵袭,上皮细胞-间充质转化受抑制,NF-κB通路活化受抑制。结论 Bmi-1可能参与调控THP-1-CM诱导的HT-29细胞炎性因子的产生,并通过上皮细胞-间充质转化影响侵袭,与NF-κB通路活性有关。

BMI-1基因在儿童急性白血病中表达的意义

目的研究BMI-l基因在儿童急性白血病患者中的表达及临床意义。方法收集2008年7月1日-2009年4月30日郑州大学第三附属医院和郑州市其他医院的初诊急性白血病患儿标本46例,对照组标本30例。实验经患儿监护人知情同意,并经医院伦理委员会批准。运用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测其外周血BMI-1 mRNA表达水平,应用SPSS12.0软件进行数据分析。结果1.BMI-l基因在儿童急性白血病中的表达水平显著高于对照组(P<0.05);2.粒细胞性白血病中该基因部分表达或弱表达,而各型B淋巴细胞性白血病中均有表达,且高于粒细胞性白血病(P<0.05);3.联合化疗未缓解组其表达水平高于缓解组,但二者比较差异无统计学意义(P>0.05),缓解后均未检测到BMI-1 mRNA;4.初治组、复发组与完全缓解组比较,前二者BMI-1 mRNA表达均显著高于后者(P<0.05);初治组、复发组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),完全缓解组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论BMI-1基因在儿童急性白血病中表达增高,完全缓解者该基因表达水平趋于正常,提示BMI-1基因可能参与急性白血病的发生、发展过程,并可作为急性白血病的发病、复发及治疗和预后判断的指标之一。

癌基因B细胞特异的莫洛尼白血病病毒插入位点1基因和埃兹蛋白在大肠癌组织的表达及意义

目的观察癌基因B细胞特异的莫洛尼白血病病毒插入位点1基因（Bmi-1）和埃兹蛋白（Ezrin）在大肠癌组织中的表达，探讨Bmi-1和Ezrin与大肠癌的相关性。方法采用免疫组织化学法检测75例大肠癌患者手术切除的肿瘤组织和癌旁组织中Bmi-1和Ezrin表达水平。结果Bmi-1在癌旁组织中阳性表达率为22．67％（17／75），在大肠癌组织中阳性表达率为85．33％（64／75），两者差异有统计学意义（P〈0．01），Bmi-1表达水平与大肠癌浸润深度、TNM分期、淋巴结转移有关（P〈0．05）；Ezrin在癌旁组织中阳性表达率为13．33％（10／75），在大肠癌组织中阳性表达率为72．00％（54／75），两者差异有统计学意义（P〈0．01），Ezrin表达水平与大肠癌组织学分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关（P〈0．05）。结论检测Bmi-1和Ezrin有助于评估大肠癌患者的不良预后。

沉默1型免疫缺陷病毒短转录诱导物连接因子-1对乳腺癌细胞多西他赛耐药性的逆转作用

目的探讨沉默1型免疫缺陷病毒短转录诱导物连接因子-1(FBI-1)表达对乳腺癌细胞MCF-7多西他赛耐药性的逆转作用,及其可能的调控机制。方法用梯度浓度递增法建立MCF-7多西他赛耐药(MCF-7/DR)细胞株,并设置空白组、对照组和实验组。空白组不作任何转染处理;对照组转染空载体;实验组转染FBI-1特异性siRNA干扰序列载体。用实时荧光定量聚合酶链反应法检测细胞FBI-1和B细胞特异性moloney鼠白血病病毒插入位点1(Bmi-1)mRNA的表达水平,用噻唑蓝法检测MCF-7/DR细胞对多西他赛的敏感性,用流式细胞术检测10 nmol·L^(-1)多西他赛作用24 h后MCF-7/DR细胞周期和凋亡率的变化,用Western blot法检测Bmi-1蛋白的表达水平。结果多西他赛抑制空白组和实验组MCF-7/DR细胞增殖的耐药指数分别为33.08±2.33和5.24±0.35。干预24 h后,实验组、对照组和空白组的细胞凋亡率分别为(28.97±5.96)%,(7.69±1.92)%和(5.25±1.78)%,G1期细胞比例分别为(67.23±5.89)%,(58.97±5.24)%和(56.28±4.86)%,Bmi-1蛋白相对表达水平分别为0.14±0.02,0.65±0.08和0.63±0.05,实验组的上述指标与对照组和空白组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论沉默FBI-1表达可引起MCF-7/DR细胞G1期阻滞,促使细胞凋亡,同时通过下调Bmi-1蛋白的表达,逆转MCF-7/DR细胞对多西他赛的耐药性。

EZH2和Bmi-1基因在膀胱移行细胞癌组织中的表达及其意义

目的观察EZH2和Bmi—1基因在膀胱正常组织和癌组织中的表达及在膀胱肿瘤发生和发展中的作用。方法应用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）和实时定量PCR的方法，检测EZH2和Bmi。1基因在膀胱正常黏膜（共15例）和膀胱癌中（共70例）的相对表达量，以膀胱癌T24细胞株作为阳性对照。结果在膀胱正常黏膜中，EZH2和Bmi-1基因的mRNA不表达或低表达。而在膀胱癌组织中，两者的表达量明显高于对照组，差异有统计学意义（P〈0．01）。EZH2基因在低度恶性倾向尿路上皮乳头状肿瘤（PUNLMP）组、低分级组和高分级组的表达量分别为：0．1082±0．1880、0．0740±0．0984、0．1885±0．2144，与对照组（0．0158±0．0208）比较，P值分别为〉0．05、〈0．01和〈0．01；在浸润性膀胱癌的表达（0．2069±0．2241）高于表浅性膀胱癌（0．0868±0．1233），其差异有统计学意义（P〈0．01）。Bmi-1基因在PUNLMP组、低分级组和高分级组的表达量分别为：0．6654±0．7668、0．4955±0．4553、0．7986±0．9259与对照组（0．1745±0．0973）比较，P值分别为〉0．05、〉0．05和〈0．01；在浸润性膀胱癌组（0．8368±1．0041）的表达高于表浅性膀胱癌组（0．5505±0．4992），但差异无统计学意义（P〉0．05）。结论EZH2和Bmi-1基因在膀胱癌的发生中起重要作用，并且EZH2与膀胱癌的发生、进展相关。

BMI-1基因对人胰腺癌SW1990细胞放射敏感性影响及机制研究

目的研究BMI-1对胰腺癌SW1990细胞放射敏感性影响及可能机制。方法选取4 Gy X线及慢病毒下调BMI-1表达作为干预条件,用克隆形成实验观察对SW1990细胞增殖能力的影响,流式细胞仪检测对细胞凋亡及细胞周期的影响,Western blot检测对上皮间充质转化(EMT)的影响。结果克隆形成实验和流式细胞仪发现,与其他组比较,下调BMI-1表达并经4 Gy X线照射后细胞增殖能力最低,凋亡率最高(P<0.05)。流式细胞仪检测细胞周期发现,与对照组相比,4 Gy X线照射后细胞G0/G1期比例下降,G2/M期比例上升(P<0.05);而下调BMI-1后细胞G0/G1期比例上升,G2/M期比例下降(P<0.05)。Western blot发现4 Gy X线照射后E-cadherin表达上调,而Vimentin表达下调(P<0.05)。结论下调BMI-1可增强胰腺癌SW1990细胞放射敏感性,其机制可能与细胞周期及EMT进程相关。

BMI1作为头颈鳞癌干细胞标志物的研究进展

头颈部鳞状细胞癌作为一种常见的恶性肿瘤,在诊断和治疗方面已取得了一定进展,然而其五年生存率仅为50%。许多临床研究表明B细胞特异莫洛尼鼠白血病病毒整合位点1(B cell-specific moloney murine leukemia virus insertion site 1,BMI1)基因在促进头颈鳞癌干细胞的迁移、侵袭和恶化等方面起关键作用,对患者的治疗和预后有显著影响,可作为头颈鳞癌干细胞的诊断标志物。针对这一特点,笔者复习近年来国内外关于BMI1对头颈鳞癌干细胞及其临床治疗的影响作一综述,有助于进一步认识BMI1对头颈鳞癌干细胞的作用机制,可为该病精准靶向治疗和制定个性化治疗方案提供新思路。

miR-135a-5p增强舌鳞状细胞癌细胞对奥沙利铂敏感性研究

目的探讨miR-135a-5p增强舌鳞状细胞癌细胞对奥沙利铂(oxaliplatin,L-OHP)敏感性的作用及其可能机制。方法采用实时荧光定量PCR法检测人口腔角质形成细胞(human oral keratinocyte,HOK)和舌鳞状细胞癌细胞系CAL-27、SCC9、SCC25细胞中miR-135a-5p和B淋巴瘤莫洛尼鼠白血病病毒插入区1(B-lymphoma Moloney murine leukemia virus insertion region-1,BMI1)mRNA相对表达量,采用Western blot法检测4种细胞BMI1蛋白相对表达量。对数生长期SCC25细胞分为miR-NC组(转染miR-NC)、miR-135a-5p模拟物组(miR-135a-5p模拟物)和空白对照组(不进行转染操作),采用实时荧光定量PCR法检测3组细胞miR-135a-5p和BMI1 mRNA相对表达量,采用Western blot法检测3组细胞BMI1蛋白相对表达量,采用荧光素酶报告实验检测miR-135a-5p与BMI1的靶向关系。SCC25细胞加入不同浓度L-OHP,采用CCK-8实验检测L-OHP对细胞的半数抑制浓度,确定L-OHP在后续实验中的浓度。对数生长期SCC25细胞再分为miR-NC+pcDNA-NC组(转染miR-NC和pcDNA-NC)、miR-135a-5p模拟物+pcDNA-NC组(转染miR-135a-5p模拟物和pcDNA-NC)、miR-135a-5p模拟物+pcDNA-BMI1组(转染miR-135a-5p模拟物和pcDNA-BMI1)、对照组(不进行转染操作),采用实时荧光定量PCR法检测细胞miR-135a-5p和BMI1 mRNA相对表达量,采用Western blot法检测细胞BMI1蛋白相对表达量,采用EdU增殖实验检测细胞增殖情况,采用Transwell实验检测迁移细胞数和侵袭细胞数,采用流式细胞术检测细胞凋亡率。结果CAL-27、SCC9、SCC25细胞miR-135a-5p相对表达量(0.43±0.04、0.62±0.09、0.41±0.07)均低于HOK细胞(1.00±0.15)(P<0.05),BMI1 mRNA(4.57±0.67、2.64±0.59、5.82±0.87)和蛋白(0.61±0.22、0.34±0.28、1.00±0.24)相对表达量均高于HOK细胞(1.00±0.31、0.21±0.14)(P<0.05);与HOK细胞比较,SCC25细胞miR-135a-5p、BMI1 mRNA和蛋白相对表达量差异最大,选用SCC25细胞进行后续实验。miR-135a-5p模拟物组细胞miR-135a-5p相对表达量高于miR-NC组、空白对照组(P<0.05),BMI1 mRNA和蛋白相对表达量均低于miR-NC组、空白对照组(P<0.05);miR-NC组细胞miR-135a-5p、BMI1 mRNA和蛋白相对表达量与空白对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。miR-135a-5p靶向BMI1。miR-135a-5p模拟物+pcDNA-BMI1组、miR-135a-5p模拟物+pcDNA-NC组miR-135a-5p相对表达量均高于对照组、miR-NC+pcDNA-NC组(P<0.05),miR-135a-5p模拟物+pcDNA-BMI1组与miR-135a-5p模拟物+pcDNA-NC组比较差异无统计学意义(P>0.05)。miR-135a-5p模拟物+pcDNA-BMI1组、miR-135a-5p模拟物+pcDNA-NC组BMI1 mRNA和蛋白相对表达量、L-OHP对细胞的半数抑制浓度、EdU阳性细胞数、迁移细胞数、侵袭细胞数均低于对照组、miR-NC+pcDNA-NC组(P<0.05),miR-135a-5p模拟物+pcDNA-BMI1组均高于miR-135a-5p模拟物+pcDNA-NC组(P<0.05)。miR-135a-5p模拟物+pcDNA-BMI1组、miR-135a-5p模拟物+pcDNA-NC组细胞凋亡率高于miR-NC+pcDNA-NC组、对照组(P<0.05),miR-135a-5p模拟物+pcDNA-BMI1组低于miR-135a-5p模拟物+pcDNA-NC组(P<0.05);以上指标miR-NC+pcDNA-NC组与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论miR-135a-5p通过靶向抑制BMI1表达,增强舌鳞状细胞癌细胞对L-OHP的敏感性。

老年肺腺癌胸腔积液沉淀物免疫组化检测技术的临床诊断应用

目的探索胸腔积液沉淀物免疫组化检测技术在老年患者肺腺癌临床诊断、判断转移的作用。方法选取30例原发肺腺癌伴胸腔积液的老年患者为试验组,30例良性胸腔积液老年患者为对照组。分析细胞角蛋白7(CK7)、甲状腺转录因子-1(TTF1)、新天冬氨酸蛋白酶A(Napsin A)、钙调蛋白(CR)、B细胞特性莫洛尼鼠白血病病毒插入位点1(Bmi-1)在胸腔积液沉淀物及肺组织中的表达水平及其与临床特征的关系。结果CK7、TTF1、Napsin A和Bmi-1在试验组中的高表达率分别为100.0%,86.7%,93.3%和83.3%,而在对照组中分别为13.3%,10.0%,10.0%和6.7%,差异均有统计学意义(均P<0.001)。各指标蛋白表达与临床病理特征均无显著相关性。结论胸腔积液沉淀物细胞蜡块免疫组化检测(以Bmi-1蛋白表达为补充检测手段)可替代传统实体病理切片,用作临床诊断老年肺腺癌的重要参考指标,有耐受性好、安全性佳等优点。