运动训练对2型糖尿病大鼠肾脏NF-κB-p65和相关蛋白表达的影响及机制研究

目的:研究运动训练对2型糖尿病大鼠肾脏NF-κB-p65及相关蛋白表达的影响,以探讨运动改善2型糖尿病大鼠肾损伤的可能作用机制。方法:SD大鼠通过高脂饲料喂养6周和低剂量腹腔注射STZ的方法复制2型糖尿病大鼠实验模型。实验分为正常对照组(A),糖尿病安静组(B)和糖尿病运动组(C)。C组进行6周的有氧游泳训练,其余两组不施加干预。实验结束后,测试随机血糖、24 h UAE、T-SOD、MDA、NF-κB-p65、Activated Caspase-3和Nephrin蛋白表达,并进行电镜观察肾脏显微结构的改变。结果:1)电镜下,运动干预的C组大鼠可见滤过膜3层结构较清晰,基底膜未见明显增加,足突稍肿大、足细胞融合等症状较B组大鼠均有所改善。2)运动干预后,C组大鼠的血糖浓度、24h UAE排泄量均降低,与B组比较,均有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。3)运动干预后,C组大鼠肾皮质T-SOD活性上升而MDA含量下降,与B组比较,亦有明显差异(P<0.05或P<0.01)。4)运动干预后,C组大鼠肾皮质NF-κB-p65和Activated Caspase-3蛋白表达均明显降低,而Nephrin蛋白表达明显增加,与B组比较,差异均呈显著性(P<0.05或P<0.01)。结论:运动能降低2型糖尿病大鼠血糖,减轻肾脏病理损伤,并提高肾功能,其机制可能与运动的下调氧化应激介导的2型糖尿病大鼠肾脏核转录因子NF-κB-p65的表达,以改善效应蛋白Activated Caspase-3异常表达和恢复足细胞特异标志物-Nephrin蛋白的表达,而改善大鼠肾脏损伤的保护作用有关。

有氧运动加螺旋藻补充对2型糖尿病大鼠肾脏TLR4/NF-κB-p65的表达及炎性因子的影响

本文旨在研究有氧运动加螺旋藻补充对2型糖尿病大鼠肾脏TLR4/NF-κB-p65的表达及炎性因子的影响,以TLR4/NF-κB-p65炎症信号通路为靶点探讨运动加螺旋藻补充改善2型糖尿病大鼠肾脏损伤的可能机制。采用4周高脂饲料喂养和低剂量STZ腹腔注射的方法建立2型糖尿病大鼠实验模型,成模后将大鼠随机分为糖尿病安静对照组(DM)、糖尿病运动组(DE)、糖尿病+螺旋藻组(DS)、糖尿病运动+螺旋藻组(DES),另设正常安静对照组(NC)。运动方式采用8周的无负重游泳训练。实验末,测随机血糖、微量白蛋白、肾脏测TNF-α、TLR4和NF-κB-p65蛋白表达,并采用光镜观察肾脏微细结构的改变。结果表明:(1)光镜下可见DE组、DS组和DES组大鼠肾小球毛细血管袢面积增加;肾小管扩张、上皮细胞空洞变性、细胞聚集增加和炎症细胞稍浸润等病理变化均较DM组有所改善。(2)DE组、DS组和DES组大鼠的血糖浓度、尿微量白蛋白含量均较DM组降低(P<0.05或P<0.01);与DES组比较,DE组和DS组的血糖浓度、尿微量白蛋白含量均升高明显(P<0.05或P<0.01)。(3)DE组、DS组和DES组大鼠肾脏TNF-α、TLR4和NF-κB-p65蛋白表达均明显降低,与DM组比较,差异均呈显著性(P<0.01);与DES组比较,DE组和DS组的肾脏TNF-α、TLR4和NF-κB-p65蛋白表达明显增加(P<0.05或P<0.01)。因此,有氧运动、螺旋藻及两者联合使用有降低2型糖尿病大鼠血糖,改善肾功能,减轻肾脏损害的功效,但两者联合使用效果要好于单独使用,其机制可能与有氧运动联合螺旋藻降低TLR4/NF-κB-p65信号蛋白表达发挥抗炎作用的效果要好于单纯的有氧运动或螺旋藻使用。

针康法对糖尿病缺血性脑卒中大鼠外周血清NF-κB-p65、TNF-α表达的影响

目的:通过建立糖尿病缺血性脑卒中大鼠模型,探讨针康法对大鼠外周血清NF-κB-p65、TNF-α表达的影响。方法:将192只大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、针刺组、康复组、针康组。采用高脂高糖饲料结合STZ注射及改良线栓法建立糖尿病缺血性脑卒中模型。观察不同的治疗方法对外周血清NF-κB-p65、TNF-α表达的影响。结果:与针康组比较,术后7天针刺组、康复组NF-κB-p65含量下降低于针康组(P<0.01,P<0.05);术后14天、21天针刺组含量下降低于针康组(P<0.05)。与针康组比较,术后7天TNF-α针刺组、康复组含量明显下降(P<0.05);术后14天针刺组含量下降明显低于针康组(P<0.05)。结论:针康法能够降低糖尿病脑卒中大鼠血清炎性因子的表达,进而改善缺血性脑卒中后神经功能缺损及胰岛素抵抗。

三氧化二砷联合维生素C对多发性骨髓瘤患者MMP-13、NF-κB-p65、C/EBPα表达及预后的影响

目的探讨三氧化二砷联合维生素C对多发性骨髓瘤患者基质金属蛋白酶(MMP)-13、核因子(NF)-κB-p65、CCAAT增强子结合蛋白(C/EBP)α表达及预后的影响。方法选择多发性骨髓瘤患者102例,依据随机表法随机分为观察组51例与对照组51例。对照组采用常规化疗方案,观察组采用三氧化二砷联合维生素C治疗。两组疗程均为12 w。比较两组治疗效果,治疗前后血浆MMP-13水平、NF-κB-p65蛋白阳性表达和C/EBPαmRNA表达及预后情况。结果观察组总有效率(86.27%)明显高于对照组(66.67%,P<0.05)。两组治疗后血浆MMP-13水平较治疗前均明显降低(观察组:t=18.270,对照组:t=10.805,均P<0.05);观察组治疗后血浆MMP-13水平明显低于对照组(t=10.549,P<0.05)。两组治疗后NF-κB-p65蛋白表达阳性率较治疗前均明显降低(观察组:χ2=28.990,对照组:χ2=11.492,均P<0.05);观察组治疗后NF-κB-p65蛋白表达阳性率明显低于对照组(χ2=5.830,P<0.05)。两组治疗后C/EBPαmRNA表达较治疗前均明显升高(观察组:t=24.277,对照组:t=8.913,均P<0.05);观察组治疗后C/EBPαmRNA表达明显高于对照组(t=8.570,P<0.05)。观察组PFS和OS均明显长于对照组(均P<0.05)。结论三氧化二砷联合维生素C对多发性骨髓瘤患者疗效良好,可下调MMP-13和NF-κB-p65蛋白表达,上调C/EBPα蛋白表达,且预后良好。

大黄牡丹汤对炎症相关性结直肠癌的治疗作用及对TLR4/My D88/NF-κB-p65信号通路的影响

目的:探讨大黄牡丹汤(DHMD)对炎症相关性结直肠癌(CAC)的治疗作用,以及对TLR4/MyD88/NF-κB-p65通路的影响。方法:构建小鼠CAC模型,给予DHMD处理,对小鼠一般状况进行观察和评估;ELISA检测小鼠IL-1β、IL-6、IL-10和TNF-α表达,Western blot和免疫组化染色法检测小鼠结直肠组织TLR4、MyD88和NF-κB-p65表达。结果:与模型组相比,DHMD干预后,小鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α水平降低,而IL-10水平升高,且小鼠结直肠中TLR4、MyD88、NF-κB-p65表达降低。结论:DHMD可改善炎症反应、减轻CAC症状,抑制结肠癌发生,且对TLR4/MyD88/NF-κB-p65信号通路激活具有调节作用。

NF-κB-p65、ICAM-1和细胞凋亡在力竭性运动诱发延迟性心肌损伤中的作用

目的:观察反复力竭性游泳运动后,不同时相大鼠心肌组织中核转录因子-κB(NF-κB)-p65、细胞间黏附因子-1(ICAM-1)和细胞凋亡的动态变化,以评价在运动延迟性心肌损伤中的作用。方法:采用反复力竭性游泳运动建立延迟性心肌损伤大鼠模型。将无训练的80只Wistar雄性大鼠随机分为安静对照组和反复力竭性运动后即刻组、3 h组、6 h组、12 h组、24 h组、48 h组和96 h组。每组10只大鼠(n=10)。分别于末次运动后即刻、3、6、12、24、48 h和96 h快速取出心脏,应用免疫组化染色法和DNA原位末端标记(TUNEL)法检测大鼠心肌组织中NF-κB-p65和ICAM-1表达的水平和细胞凋亡的动态变化。结果:与安静对照组比较,反复力竭性运动后不同时相大鼠心肌细胞中NF-κB-p65和ICAM-1蛋白的表达及细胞凋亡指数均显著增加(分别为P<0.05和P<0.01),其中心肌细胞中NF-κB-p65的表达和细胞凋亡于运动后48 h达高峰,ICAM-1蛋白的表达于运动后即刻达高峰,运动后96 h有所减轻。结论:反复力竭性运动可以造成早期心肌缺血缺氧损伤,刺激心肌细胞中NF-κB-p65和ICAM-1表达的水平的升高,促进炎症反应,并诱导心肌细胞凋亡,进一步加重运动后早期心肌损伤,诱发延迟性心肌损伤。

桃红四物汤对大鼠肢体缺血-再灌注损伤骨骼肌长链非编码RNA H19、核因子κB-p65表达的影响

目的:观察桃红四物汤对大鼠肢体缺血-再灌注损伤骨骼肌长链非编码RNA H19(LncRNA H19)、核因子κB-p65(NF-κB-p65)表达的影响。方法:选取2月龄雄性SD大鼠78只,随机分成空白组、模型组、桃红四物汤组、LncRNA H19阻滞剂组,其中空白组6只,其余每组24只。除空白组外,其他各组均阻断血流复制左后肢缺血-再灌注损伤模型,桃红四物汤组在造模前予以桃红四物汤灌胃,LncRNA H19阻滞剂组予以LncRNA H19阻断剂尾静脉注射预处理。HE染色法观察复灌后4 h腓肠肌形态及病理性改变,DAPI法观察复灌后4 h各组腓肠肌细胞凋亡变化。RT-qPCR检测复灌后(0、2、4、8 h)腓肠肌LncRNA H19、NF-κB-p65 mRNA表达,Western blot法检测0、2、4、8 h腓肠肌NF-κB-p65表达。结果:HE染色结果显示,桃红四物汤组和LncRNA H19阻断剂组肌纤维破坏及炎症浸润程度较模型组减轻。DAPI荧光染色结果显示,桃红四物汤组、LncRNA H19阻断剂组细胞凋亡率低于模型组;桃红四物汤组细胞凋亡率明显低于LncRNA H19阻断剂组,差异有统计学意义(均P<0.05)。RT-qPCR和Western blot法检测结果显示,与同一时间点空白组比较,模型组、桃红四物汤组、LncRNA H19阻断剂组LncRNA H19、NF-κB-p65表达上调,差异有统计学意义(均P<0.05)。与同一时间点模型组比较,桃红四物汤组、LncRNA H19阻断剂组、NF-κB-p65表达下调,差异有统计学意义(均P<0.05),并且不同时间点显示相同倾向性。结论:桃红四物汤可降低肢体缺血-再灌注损伤骨骼肌中LncRNA H19-NF-κB信号通路表达,减少骨骼肌细胞凋亡,减轻肢体缺血-再灌注损伤。LncRNA H19可能是大鼠肢体缺血-再灌注骨骼肌损伤病理机制中的关键上游分子。NF-κB-p65蛋白可能是大鼠肢体缺血-再灌注骨骼肌损伤病理机制中的关键蛋白。

青藤碱对PKC-α/NF-κB-p65通路的抑制作用及机制

目的:探讨过表达蛋白激酶C-α(protein kinase C-α,PKC-α)对HEK-293T细胞中核因子-κB-p65(nuclear factor-κB-p65,NF-κB-p65)磷酸化水平的影响,并检查青藤碱(sinomenine,SIN)对PKC-α/NF-κB-p65信号通路的抑制作用。方法:采用PCR技术扩增大鼠PKC-α基因蛋白质编码区(complete sequence coding,CDS)序列,将其插入到pIRES2-EGFP空载质粒中,构建野生型(wide type,WT)PKC-α过表达质粒(pIRES2-PKC-α-WT,PKC-α^(WT));在PKC-αWT质粒的基础上,将PKC-α第25位丙氨酸(A)与368位赖氨酸(K)分别突变为谷氨酸(E)和精氨酸(R),即构建持续活化(constitutively active,CA)突变型PKC-α过表达质粒(pIRES2-PKC-α-A25E,PKC-α^(CA))和显性负性(dominant negative,DN)突变型PKC-α过表达质粒(pIRES2-PKC-α-K368R,PKC-α^(DN))。本课题组前期构建的大鼠野生型NF-κB-p65过表达质粒(pIRES2-NF-κB-p65,p65^(WT))分别与上述各PKC-α过表达质粒共同转染HEK-293T细胞,免疫印迹法检测PKC-α、NF-κB-p65的表达及磷酸化水平。再将上述不同质粒转染HEK-293T细胞,46 h后予50 ng/mL SIN处理细胞2 h,再行免疫印迹实验分析SIN对PKC-α、NF-κB-p65磷酸化的影响。结果:菌液PCR及测序证实,上述PKC-α过表达质粒构建成功。在HEK-293T中过表达PKC-αWT或PKC-αCA可促进NF-κB-p65的磷酸化,且过表达PKC-αCA时尤为显著,而过表达PKC-αDN后NF-κB-p65的磷酸化无明显变化。SIN处理可抑制PKC-α^(WT)、PKC-α^(CA)和PKC-α^(DN)转染组HEK-293T细胞中PKC-α的磷酸化,同时也能抑制过表达PKC-α^(WT)上调的NF-κB-p65磷酸化修饰,但不影响过表达PKC-αCA和PKC-αDN对NF-κB-p65的磷酸化作用。结论:过表达PKC-α可促进HEK-293T细胞中NF-κB-p65的磷酸化,SIN处理HEK-293T细胞后可通过抑制PKC-α的磷酸化下调NF-κB-p65的磷酸化修饰。

吴茱萸碱通过NF-κB-p65信号通路抑制人结肠癌细胞SW480的迁移和侵袭

目的探讨吴茱萸碱(evodiamine,EVO)对人结肠癌细胞SW480迁移与侵袭的影响,并初步探究其潜在的分子机制。方法以CCK-8法测定不同浓度(0、0.375、0.75、1.5、3、6、12μmol/L)的EVO对SW480细胞处理不同时间(24、48、72 h)的增殖抑制作用;以划痕实验检测EVO对SW480细胞迁移的影响;Transwell实验检测EVO对SW480细胞侵袭的影响;Western blot检测IκBα、p-IκBα、NF-κB-p65、p-NF-κB-p65、MMP-9、MMP-2、MMP-13等蛋白的表达水平;免疫荧光实验检测EVO作用于SW480细胞后p-NF-κB-p65和MMP-9的蛋白表达情况;NF-κB-p65的激活剂LPS预处理SW480细胞后,Western blot检测EVO对IκBα、p-IκBα、NF-κB-p65、p-NF-κB-p65、MMP-9、MMP-2等蛋白表达的影响。结果 EVO呈时间及浓度依赖性抑制SW480细胞的增殖;经EVO作用后,SW480细胞的迁移能力下降(P<0.01),侵袭能力下降,呈浓度依赖性(P<0.01);EVO可以抑制NF-κB-p65信号通路(P<0.05);EVO对NF-κB-p65的抑制作用能被LPS削弱(P<0.05)。结论 EVO能抑制SW480细胞的迁移和侵袭,其机制可能是通过抑制IκBα的磷酸化,进而抑制NF-κB-p65的磷酸化,最终抑制下游基因MMP-9的表达。

人胃癌组织中NF-κB-p65的表达及临床意义

目的研究人胃癌组织中NF-κB-p65的表达及其对临床病理特征的影响。方法应用免疫组织化学方法检测42例人胃癌石蜡包埋组织、12例癌旁石蜡包埋组织中NF-κB-p65在细胞质和细胞核的表达,分析其在胃癌组织中的表达与临床病理特征之间的相关性。结果人胃癌组织中NF-κB-p65在细胞质和细胞核表达均显著高于癌旁组织(P<0.001);人胃癌组织中NF-κB-p65在细胞质和细胞核表达呈显著相关(P<0.001),与肿瘤分期、浸润深度、淋巴结转移、远处转移和肿瘤的大小呈显著相关(P<0.01)。结论人胃癌组织中NF-κB-p65的表达上调,与胃癌临床进展密切相关。

MMP-13、IL-17、NF-κB-p65在多发性骨髓瘤患者血清中的表达及其临床应用价值

目的探讨基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、白细胞介素-17(IL-17)、核转录因子kppa B-p65(NF-κB-p65)在多发性骨髓瘤(MM)患者血清中的表达及其临床应用价值。方法选取2018年10月至2019年9月期间我院收治住院的86例MM患者作为研究对象,依据MM患者入院后的X线检查有无MM骨病,将患者划分为有MM骨病的MM骨病组(58例)和无MM骨病的MM组(28例);另选取于我院行健康体检正常的人群40例作为对照组,对MM患者及对照组的临床资料及血清MMP-13、IL-17、NF-κB-p65水平进行分析,探讨血清中MMP-13、IL-17、NF-κB-p65水平在MM及相关骨病临床诊断中的意义。结果MM骨病组和MM组血清MMP-13、IL-17、NF-κB-p65水平明显高于对照组,且MM骨病组以上三指标的血清表达水平均高于MM组(P均<0.001);单因素分析结果显示,MM骨病组与MM组在年龄、CRP水平、血清MMP-13、血清IL-17和血清NF-κB-p65水平方面存在明显差异(P<0.05);多因素回归分析结果显示,血清MMP-13≥7.5 pg/mL、血清IL-17≥30 pg/mL和血清NF-κB-p65≥2100 pg/mL是MM患者发生骨病的独立预测因素;ROC曲线分析结果显示,血清MMP-13、IL-17、NF-κB-p65水平联合预测MM骨病的AUC值明显高于三者单独诊断时的AUC值(P<0.05);经治疗后,依据MM患者治疗疗效划分为有效组(45例)和无效组(41例),发现有效组血清MMP-13、IL-17、NF-κB-p65水平均明显低于无效组(P<0.05)。结论血清MMP-13、IL-17、NF-κB-p65水平在MM及相关骨病患者血清中呈较高表达,血清三项指标联合检测对于临床上预测与诊断MM骨病具有较好的应用价值,且可能用于MM临床疗效的评估。

肺癌组织中NF-κB-p65 mRNA与CD15s蛋白的表达及与细胞凋亡的关系

目的探讨核转录因子κB-p65(NF-κB-p65)、CD15s蛋白在肺癌组织中的表达及其与细胞凋亡的关系,为进一步探索肺癌发生和发展机制提供依据。方法收集手术切除的70例肺癌组织及15例癌旁正常组织标本,分别用RT-PCR方法、TUNEL法、免疫组织化学染色法检测肺癌组织及癌旁组织中NF-κB-p65mRNA的表达、凋亡指数及组织中CD15s蛋白表达情况。结果 NF-κB-p65 mRNA在肺癌组织中的表达高于癌旁正常肺组织(P<0.05),其中在腺癌组织表达较强,小细胞癌组织表达次之,鳞癌组织表达较弱,前两者表达强于后者(P<0.05)。肺癌组织中的细胞凋亡指数[(5.40±0.72)%]低于癌旁正常肺组织[(9.39±0.42)%],差别有统计学意义(P<0.05)。肺癌组织中NF-κB-p65mRNA表达水平和细胞凋亡指数呈负相关(r=-0.532,P<0.001)。肺癌组织中CD15s蛋白的表达阳性率为64.3%,15例癌旁正常肺组织CD15s蛋白的表达均为阴性。不同病理类型、不同淋巴结转移情况、不同分化程度、不同TNM分期的肺癌组织NF-κB-p65 mRNA和CD15s蛋白的表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论 NF-κB-p65和CD15s可能在肺癌浸润、转移过程起促进作用。NF-κB-p65的表达与凋亡指数呈负相关,前者可能促进肺癌细胞的分化、增殖,在肺癌中发挥抗凋亡作用。

非小细胞肺癌组织中核因子-κB-p65 mRNA及基质金属蛋白酶-1的表达及其与肿瘤转移的相关性

目的探讨核因子-κB-p65(Nuclear factor-κB-p65,NF-κB-p65)与基质金属蛋白酶-1(Matrix metalloproteases-1,MMP-1)在非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)组织中的表达及其与肿瘤浸润、转移、凋亡的相关性。方法收集50例手术切除的NSCLC组织及15例癌旁正常组织标本,RT-PCR法检测NSCLC及癌旁正常组织中NF-κB-p65 mRNA的表达,免疫组化法检测MMP-1蛋白的表达,TUNEL法检测细胞凋亡指数。结果 NSCLC组织中NF-κB-p65 mRNA的表达量显著高于癌旁正常组织(P<0.05);在腺癌组织中的表达量显著高于鳞癌组织(P<0.05);NSCLC组织中MMP-1蛋白阳性率显著高于癌旁正常组织(P<0.01);NF-κB-p65 mRNA和MMP-1蛋白的表达与TNM分期、分化程度、淋巴结转移、病理类型有关(P<0.05或<0.01),与年龄、性别无关(P>0.05);直线相关分析发现,NSCLC组织中NF-κB-p65 mRNA与MMP-1蛋白的表达相关;NSCLC组织中的细胞凋亡指数显著低于癌旁正常组织,且与NF-κB-p65 mRNA的表达量呈负相关(r=-0.547,P<0.001)。结论 NSCLC组织中NF-κB-p65 mRNA与MMP-1蛋白的表达具有相关性,NF-κB-p65 mRNA的表达与细胞凋亡指数呈负相关,NF-κB-p65通过一定的途径调控MMP-1蛋白的表达,NF-κB与MMP-1共同参与了肿瘤发生、发展的过程,NF-κB-p65发挥抗凋亡作用。

补阳还五汤调控NF-κB-P65及P-P65治疗脑出血大鼠的作用机制研究

动态观察补阳还五汤对脑出血(ICH)大鼠脑组织的NF-κB-P65,P-P65表达及改良大鼠神经功能严重程度评分(mNSS)影响,探讨其机制。方法:(1)建立胶原酶来诱导的大鼠脑出血模型;(2)60只SD大鼠随机分为假手术组(Sham,n=15),模型组(ICH,n=15)、补阳还五汤组(BYHWT,n=15)、米诺环素组(MHC,n=15),每日1次灌胃,2mL/次,分别在3、7、14d,观察各组mNSS评分及NF-κB-P65、P-P65表达。结果:(1)BYHWT、MHC分别与Sham、ICH组比较,在3、7、14d的mNSS比较差异有统计学(P<0.05),而BYHWT组及MHC组间比较差异无统计学意义(P>0.05);(2)BYHWT与ICH比较,在7d的P-P65的表达差异无统计学意义(P>0.05),而其而余时间点NF-κB-P65、P-P65的表达比较差异有统计学意义(P<0.05);MHC与ICH比较,在3天、7天、14天的NF-κB-P65及P-P65的表达比较差异有统计学(P<0.05);BYHWT与MHC比较,在7天、14天的P-P65的表达比较差异有统计学(P<0.05)。结论:补阳还五汤通过调控ICH大鼠脑组织NF-κB-P65及P-P65的表达,发挥脑保护作用。

纳葛胶囊对心肌缺血模型大鼠心肌组织NF-κB-P65和IκB-α基因表达的影响

目的:观察纳葛胶囊对Wistar大鼠心肌缺血模型中细胞内核转录因子-κB(NF-κB-P65)活性和人核因子κB抑制蛋白α(IκB-α)的RNA表达,从而研究该药对心肌缺血作用的可能机制。方法:健康Wistar大鼠90只,随机分为空白组、模型组、心通口服液阳性对照组及纳葛胶囊高、中、低剂量组。采用高脂饲料联合异丙肾上腺素注射法制备大鼠心肌缺血模型,运用聚合酶链反应技术检测大鼠心肌组织NF-κB-P65及IκB-α的基因表达。结果:纳葛胶囊高、中、低剂量组与各模型组及心通口服液组比较,NF-κB-P65基因表达显著降低,而IκB-α基因表达显著升高,差异均具有统计学意义(p﹤0.05)。结论:纳葛胶囊可以通过降低NF-κB-P65的表达水平,并提高IκB-α的基因表达,调节内皮损伤介导的炎症反应,从而改善具有冠心病心肌缺血的作用。

肝素结合蛋白、核因子κB亚基p65及神经元特异性烯醇化酶与心脏骤停患者预后的相关性

目的分析心肺复苏(CPR)患者血清肝素结合蛋白(HBP)、核因子κB(NF-κB)亚基p65及神经元特异性烯醇化酶(NSE)对预后的影响。方法收集2020年9月至2022年9月杭州师范大学附属医院急诊重症监护室接受治疗的心脏骤停(CA)患者,经CPR后,将满足入选条件且存活超过48 h的CPR患者纳入分析,根据患者入院治疗1个月后格拉斯哥-匹兹堡脑功能表现分级(CPC)分为预后良好组(CPC评分1~2级)和预后不良组(CPC评分3~5级),并记录两组性别、年龄、基础疾病及CA原因。同时,分别于自主循环恢复(ROSC)即刻、ROSC后6 h、12 h、24 h、48 h五个时间点采集其外周血,监测CPR患者血清HBP、NF-κB亚基p65、NSE的变化,分析HBP、NF-κB亚基p65及NSE与急性生理与慢性健康状况(APACHE)Ⅱ评分、格拉斯哥昏迷评分(GCS)的相关性,并采用ROC曲线分析判断HBP、NF-κB亚基p65及NSE对CPR预后的影响。结果最终共有30例患者CPR成功并存活超过48 h。其中预后良好组11例,预后不良组19例。预后不良组HBP、NF-κB亚基p65、NSE、APACHEⅡ评分较预后良好组升高,预后良好组GCS评分高于预后不良组,差异具有统计学意义(P<0.05)。HBP、NF-κB亚基p65、NSE在CPR后分别在ROSC后6 h、12 h、24 h达到最高峰。血清HBP、NF-κB亚基p65、NSE均与APACHEⅡ评分呈正相关(P<0.01),与GCS评分呈负相关(P<0.01)。ROC曲线分析显示HBP、NF-κB亚基p65、NSE判断CPR预后AUC分别为0.871、0.579、0.802,敏感度分别为96.3%、81.1%、93.8%,特异度分别为91.1%、78.2%、97.8%,提示HBP、NF-κB亚基p65及NSE均可预测CPR患者预后的严重程度。HBP、NF-κB亚基p65、NSE联合预测CPR患者预后不良的AUC和敏感度分别为0.953、97.7%,均高于单一指标预测(P<0.05)。结论CA患者CPR后出现不同程度的炎症反应和神经功能损伤,HBP、NF-κB亚基p65及NSE可用于早期评估复苏后患者病情严重程度及判断预后,且三者联合价值更高。

心痛泰对动脉硬化兔主动脉NF-κBp65、TNF-α、IL-10的影响

目的:观察心痛泰对动脉粥样硬化(AS)兔的血脂及主动脉组织NF-κB-p65、TNF-α和IL-10的影响。方法:120只清洁级日本大耳白兔随机分为6组,空白组、模型组、心痛泰高剂量、中剂量及低剂量组、瑞舒伐他汀钙组,采用高脂喂养加免疫损伤造模,造模同时予以相应药物灌胃。60 d后,采血测定血脂,取胸主动脉用免疫组化法测定TNF-α、IL-10,用Rt-PCR法测定NF-κB-p65的m RNA表达,Western Blot法测定NF-κB-p65的蛋白表达。结果:心痛泰各组和瑞舒伐他汀钙组降低血脂的差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。与模型组比较,心痛泰中、高剂量组和瑞氟伐他汀钙组动脉组织中的NF-κB-p65、TNF-α、IL-10的变化的差异有统计学意义(P<0.01)。结论:心痛泰能减轻AS炎症反应,作用机制可能是通过降低血脂、减少NF-κB-p65和TNF-α的表达,提高抗炎因子IL-10,从而减轻血管炎症,达到治疗AS的目的。

瑞舒伐他汀对载脂蛋白E基因缺陷小鼠动脉粥样硬化及LOX-1、NF-κBp65表达的影响

目的探讨3-羟-3-甲基戊二酰辅酶A(HMG-Co A)还原酶抑制剂瑞舒伐他汀对载脂蛋白E(Apo E)基因缺陷小鼠动脉粥样硬化及主动脉凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)、核因子-κB p65(NF-κB p65)表达的影响。方法 20只6周龄雄性Apo E基因缺陷小鼠随机分为高脂模型组(n=10)、瑞舒伐他汀药物干预组(n=10),高脂饮食喂养13周;10只6周龄C57BL/6J(野生型,W T)雄性小鼠作为正常对照组,正常饮食喂养13周。13周后,摘眼球取血测定血浆总胆固醇(TCH)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)的水平。处死小鼠取主动脉,行HE染色;采用Western blotting和RT-PCR检测定量分析主动脉组织LOX-1、NF-κB p65表达变化。结果与高脂模型组比较,瑞舒伐他汀药物干预组血清中TCH、TG、LDL-C水平明显降低(P<0.05)。HE染色结果显示,与正常对照组相比,高脂模型组主动脉粥样硬化病变程度明显加重,瑞舒伐他汀药物干预组主动脉粥样硬化病变程度减轻。与正常对照组相比,高脂模型组主动脉LOX-1、NF-κB p65蛋白和m RNA的表达均明显增加(P<0.05),瑞舒伐他汀药物干预组LOX-1、NF-κB p65蛋白和m RNA的表达均减少(P<0.05)。结论瑞舒伐他汀可明显降低血脂,减轻Apo E基因缺陷小鼠主动脉组织粥样硬化病变程度,其抗动脉粥样硬化作用可能与下调LOX-1、NF-κB p65的表达有关。

薯蓣皂苷片含药血清对IL-17和TNF-α诱导大鼠滑膜细胞株RSC-364NF-κB p65、STAT3及VEGF影响的实验研究

目的观察薯蓣皂苷片含药血清对白细胞介素-17(interieukin-17,IL-17)联合肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)诱导大鼠滑膜细胞株(rat synovial cell-364,RSC-364)核转录因子-κB(nuclear factor of kappaB,NF-κB)、信号转导子和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription3,STAT3)及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响,探讨薯蓣皂苷片抑制类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)血管新生可能的作用机制。方法实验设空白对照组、细胞模型组、薯蓣皂苷片含药血清组、雷公藤多苷片(阳性对照)含药血清组。制备薯蓣皂苷片和雷公藤多苷片含药血清;用IL-17和TNF-α联合刺激RSC-364建立RA细胞模型,薯蓣皂苷片与雷公藤多苷片含药血清分别进行干预,应用TransAMTMNF-κB p65活性检测试剂盒检测NF-κB p65的DNA结合活性,应用Western blot方法观察STAT3蛋白的表达及应用实时荧光定量PCR方法观察VEGF mRNA表达。结果与空白对照组比较,IL-17和TNF-α联合诱导的细胞模型组核蛋白提取物中NF-κB p65DNA结合活性、STAT3蛋白表达及VEGF mRNA表达均显著增高(P<0.01,P<0.05);与模型组比较,薯蓣皂苷片含药血清组、雷公藤多苷片含药血清组NF-κB p65的DNA结合活性、STAT3蛋白表达及VEGF mRNA表达均显著降低(P<0.01,P<0.05)。薯蓣皂苷片含药血清组与雷公藤多苷片含药血清组组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论薯蓣皂苷片可能通过抑制NF-κB信号转导通路中NF-κB p65的活性和酪氨酸蛋白激酶家族Janus kinase(JAK)-信号转导子和转录激活因子信号转导通路中STAT3蛋白表达来抑制VEGF mRNA表达,从而起到抑制RA血管新生的作用。

NF-kappa B p65和VEGF在原发性肝癌中的表达及意义

[目的]探讨核转录因子(NF-kappa B p65)和血管内皮生成因子(VEGF)在晚期原发性肝癌(HCC)组织和正常肝脏组织中的表达及其意义。[方法]采用免疫组织化学染色SP法检测65例晚期HCC组织切片(其中36例直径≥5cm,16例5cm>直径>2cm,13例直径≤2cm;28例肝内病灶数目大于1个,37例肝内病灶数目为1个)和30例正常肝脏组织(对照组)中NF-kappa B p65和VEGF抗体的表达水平,采用秩和检验方法分析其差异性,并再以直线相关方法分析NF-kappa B p65和VEGF在HCC中表达的相关性。[结果]各肿瘤组随肿瘤直径的增大,NF-kappa B p65和VEGF表达水平均出现递增的趋势。肝内(肿瘤数目>1个)NF-kappa B p65和VEGF表达水平强于肝内无转移组(P<0.05)。NF-kappa B p65和VEGF在HCC中表达呈正相关。[结论]VEGF有促进肝癌生长和侵袭转移作用,而NF-kappaBp65在HCC生长中有促进VEGF表达上调的作用。