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MyD88L265P及CD79B基因突变对原发性中枢神经系统淋巴瘤预后的影响
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作者 蒋皓云 金祺祺 +3 位作者 张丽田 李翠翠 岳宁宁 吴重阳 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期57-63,共7页
目的探究MyD88L265P及CD79B基因突变对原发性中枢神经系统淋巴瘤(PCNSL)患者预后的影响。方法收集2018年8月-2020年11月于兰州大学第二医院经开颅手术或立体定位活检术确诊的18例免疫功能正常(无HIV感染及免疫抑制药服用病史)的PCNSL患... 目的探究MyD88L265P及CD79B基因突变对原发性中枢神经系统淋巴瘤(PCNSL)患者预后的影响。方法收集2018年8月-2020年11月于兰州大学第二医院经开颅手术或立体定位活检术确诊的18例免疫功能正常(无HIV感染及免疫抑制药服用病史)的PCNSL患者临床资料进行回顾性分析。分别采用实时荧光定量PCR和一代基因测序技术检测18例PCNSL患者肿瘤组织中MyD88L265P和CD79B基因突变情况。针对可能与PCNSL首次无疾病进展生存期(PFS)和总生存期相关的指标行单因素分析,并采用Cox回归进行多因素分析。结果18例PCNSL肿瘤组织MyD88L265P突变率为38.9%,CD79B突变率为33.3%,MyD88L265P/CD79B共突变率为27.8%。单因素分析结果显示,病灶多发、病灶深部受累、肿瘤组织CD79B突变患者的PFS时间更短(P<0.05);多因素分析结果显示,病灶深部受累(HR=0.135,95%CI 0.023~0.799,P<0.05)、肿瘤组织CD79B突变(HR=0.149,95%CI 0.028~0.800,P<0.05)是PCNSL患者预后不良的独立危险因素。结论本组PCNSL患者肿瘤组织MyD88L265P、CD79B突变频率较高,这两种基因突变尤其是CD79B突变可能与PCNSL不良预后相关。 展开更多
关键词 原发性中枢神经系统淋巴瘤 MyD88l265P突变 CD79b突变 预后
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汽油车无法发动综合故障快速诊断研究分析——以大众迈腾B8L为例 被引量:1
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作者 许国永 陈炳基 《汽车维修技师》 2024年第4期81-83,共3页
本文主要分析汽油发动机作为动力主体的燃油车辆无法发动的具体故障现象以及根据故障现象快速判断故障方向的方法。详细阐述以大众迈腾B8L为例的汽油车无法发动的故障现象与原因以及测量方法,总结了汽油车无法发动故障的快速诊断诀窍。... 本文主要分析汽油发动机作为动力主体的燃油车辆无法发动的具体故障现象以及根据故障现象快速判断故障方向的方法。详细阐述以大众迈腾B8L为例的汽油车无法发动的故障现象与原因以及测量方法,总结了汽油车无法发动故障的快速诊断诀窍。内容包含汽油发动机电控系统的全部内容与要点,汽油车仍旧是社会交通工具的主体,本文仍具有一定的研究价值与意义。 展开更多
关键词 无法发动 快速诊断 b8l 电控
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Rhizobium Inoculation and Micronutrient Addition Influence the Growth,Yield,Quality and Nutrient Uptake of Garden Peas(Pisum sativum L.)
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作者 MdAbdul Quddus MdAtaur Rahman +8 位作者 Razu Ahmed Mohammad Eyakub Ali Khokan Kumer Sarker MdAlamgir Siddiky Mohibur Rahman Lamya Ahmed Alkeridis Samy Sayed Ahmed Gaber Akbar Hossain 《Phyton-International Journal of Experimental Botany》 SCIE 2024年第5期901-922,共22页
Garden pea productivity and qualities are hampered in zinc(Zn),boron(B),and molybdenum(Mo)deficient soil.Thus,the combination of micronutrients(i.e.,Zn,B,and Mo)and rhizobium is necessary to increase the productivity ... Garden pea productivity and qualities are hampered in zinc(Zn),boron(B),and molybdenum(Mo)deficient soil.Thus,the combination of micronutrients(i.e.,Zn,B,and Mo)and rhizobium is necessary to increase the productivity and quality of garden peas,since this management for garden peas is neglected in Bangladesh.Therefore,the present study was made to assess the effectiveness of rhizobium inoculant singly or in combination with the micronutrients(i.e.,Zn,B,and Mo)on growth,yield,nutrient uptake,and quality of garden peas.Treatments were:T_(1)=Control,T_(2)=Rhizobium inoculation at 50 g/kg seed,T_(3)=T_(2)+Zn_(3)Mo1,T_(4)=T_(2)+B_(2)Mo1,T_(5)=T_(2)+Zn_(3)B_(2),T_(6)=T_(2)+Zn_(3)B_(2)Mo1 and T_(7)=Zn_(3)B_(2)Mo1.All treatments were arranged in a randomized complete block design and repeated all treatments in three times.The application of 3 kg Zn,2 kg B,and 1 kg Mo ha^(−1)with inoculation of Rhizobium at 50 g kg^(−1)seed(T_(6))facilitated to increase of 44.8%in the green pod and 29.7%seed yield over control.The same treatment contributed to attaining the maximum nodulation(25.3 plant^(−1)),Vitamin C(43.5 mg 100 g^(−1)),protein content(22.2%),and nutrient uptake as well as accumulation in garden peas.Among all treatment combinations,treatment T_(6)was found superior to others based on microbial activities,soil fertility,and profitability.The results of the study found that the application of 3 kg Zn,2 kg B,and 1 kg Mo ha^(−1)in combination with Rhizobium inoculation(50 g kg^(−1)seed)can improve the yield and quality of garden peas.The results of the study have the potential for the areas,where there is no use of Rhizobium inoculant or Zn,B,and Mo fertilizer for cultivation of garden pea. 展开更多
关键词 NODUlATION nutrient content Pisum sativum l. PROFITAbIlITY RHIZObIUM Zn b Mo
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Bioactive chemical constituents from the marine-derived fungus Cladosporium sp.DLT-5
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作者 Luting DAI Qingyi XIE +6 位作者 Jiaocen GUO Qingyun MA Li YANG Jingzhe YUAN Haofu DAI Zhifang YU Youxing ZHAO 《Journal of Oceanology and Limnology》 SCIE CAS CSCD 2024年第3期905-914,共10页
A new isochromanone,cladosporinisochromanone(1),accompanied by 15 known compounds(2–16)were obtained from secondary metabolites produced by marine-derived fungus Cladosporium sp.DLT-5.NMR and HRESIMS spectra elucidat... A new isochromanone,cladosporinisochromanone(1),accompanied by 15 known compounds(2–16)were obtained from secondary metabolites produced by marine-derived fungus Cladosporium sp.DLT-5.NMR and HRESIMS spectra elucidation determined the planar structure of 1.Subsequent electronic circular dichroism(ECD)experiment assigned the absolute configuration of 1.Compounds 1,2,4–6,and 10 displayed different degrees of neuroprotective activities on human neuroblastoma cells SH-SY5Y.Five compounds(1,3–5,and 13)emerged resistance to protein tyrosine phosphatase 1B(PTP1B),further kinetic analysis and molecular docking study indicated that the most potent compound 13(IC50value of 10.74±0.61μmol/L)was found as a noncompetitive inhibitor for PTP1B.Surface plasmon resonance(SPR)and molecular docking studies also demonstrated the interaction between compound 12 and Niemann-Pick C1 Like 1(NPC1L1),which has been identified as significant therapeutic target for hypercholesteremia.In addition,compounds 3,6,and 14 showed attractive inhibitory activity against the phytopathogenic fungi:Colletotrichum capsici.Therefore,library of Cladosporium metabolites is enriched and new active uses of known compounds are explored. 展开更多
关键词 Cladosporium sp. marine-derived fungus neuroprotective effects protein tyrosine phosphatase 1b(PTP1b) Niemann-Pick C1 like 1(NPC1l1) antifungal activity
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大众迈腾B8L轿车启动系统工作过程与故障诊断分析
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作者 周云龙 《现代工业经济和信息化》 2024年第4期84-85,170,共3页
以大众迈腾B8L轿车发动机启动系统为例,分析启动系统的工作过程以及当启动系统出现故障时的诊断流程和思路。分析认为,维修人员熟悉该车发动机启动系统的工作过程,能够对启动系统工作条件是否正常进行判断,以及可以熟练掌握该车发动机... 以大众迈腾B8L轿车发动机启动系统为例,分析启动系统的工作过程以及当启动系统出现故障时的诊断流程和思路。分析认为,维修人员熟悉该车发动机启动系统的工作过程,能够对启动系统工作条件是否正常进行判断,以及可以熟练掌握该车发动机启动系统的诊断流程。 展开更多
关键词 迈腾b8l 启动系统 工作过程 故障诊断
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迈腾B8L发动机无法启动故障诊断与排除
6
作者 解艳超 李海岗 +2 位作者 郭丽娜 郑春伟 郝魁 《汽车实用技术》 2024年第5期143-147,共5页
以高职国赛“汽车故障检修”选用的迈腾B8L为对象,诊断与排除电气系统的典型部件损坏造成发动机无法启动的故障。首先,描述了发动机无法启动的故障现象:全车不上电、起动机无法运转及起动机运转不着车等;其次,介绍迈腾B8L的启动策略:整... 以高职国赛“汽车故障检修”选用的迈腾B8L为对象,诊断与排除电气系统的典型部件损坏造成发动机无法启动的故障。首先,描述了发动机无法启动的故障现象:全车不上电、起动机无法运转及起动机运转不着车等;其次,介绍迈腾B8L的启动策略:整车上电策略及起动机运转策略;再次,选取点火开关损坏造成的不上电故障,动力总线损坏造成的起动机不运转故障,起动继电器及其线路损坏造成的起动机不运转故障,曲轴位置传感器及其线路损坏造成的不着车故障;最后,对点火开关、动力总线、启动继电器及其线路、曲轴位置传感器及其线路的故障进行了诊断与排除。在不使用故障诊断仪的前提下,为以上四大部件损坏造成的发动机无法启动故障,提供了系统、全面、有效的排除方法,也为诊断与排除其他部件的故障提供了详细的参考依据。 展开更多
关键词 发动机 高职国赛 迈腾b8l 无法启动 典型部件 故障诊断 故障排除
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羊口疮病毒B2L和F1L截短融合基因原核表达产物的免疫原性分析 被引量:1
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作者 鲜思美 郑维豪 +7 位作者 梁倩 张友 杨倩 顾庆林 包涛涛 青成欣 杜鹏 邱进杰 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期185-190,共6页
为分析羊口疮病毒(OrfV)B2L和F1L截短融合基因表达蛋白的反应原性,本研究分别选取B2L、F1L基因序列的主要抗原区域,采用重叠延伸PCR将二者融合后克隆至原核表达载体pET-32a中,构建重组质粒pET-32a-B2L-F1L,通过PCR、双酶切和测序鉴定,... 为分析羊口疮病毒(OrfV)B2L和F1L截短融合基因表达蛋白的反应原性,本研究分别选取B2L、F1L基因序列的主要抗原区域,采用重叠延伸PCR将二者融合后克隆至原核表达载体pET-32a中,构建重组质粒pET-32a-B2L-F1L,通过PCR、双酶切和测序鉴定,结果显示获得1080 bp的B2L-F1L融合基因目的片段,测序结果经比对分析正确无误,表明正确构建了重组表达质粒pET-32a-B2L-F1L。将pET-32a-B2L-F1L转化BL21(DE3)后经IPTG诱导,SDS-PAGE检测结果显示表达了39 ku的重组蛋白rB2L-F1L。采用Ni-IDA亲和层析方法纯化重组蛋白,经western blot鉴定,结果显示获得39 ku的单一特异性条带,表明rB2L-F1L的纯化效果和免疫原性均较好。采用rB2L-F1L纯化蛋白皮下多点注射免疫羔羊,采用ELISA方法检测免疫后不同时间羔羊血清中的OrfV抗体、IL-2、IFN-γ和IL-4细胞因子。结果显示,与生理盐水组相比,rB2L-F1L能够诱导羔羊产生OrfV特异性抗体,并可显著或极显著诱导羔羊分泌IL-2、IFN-γ和IL-4细胞因子(P<0.05、P<0.01);与弱毒活疫苗组比较,除在免疫后14 d~28 d时rB2L-F1L诱导羔羊产生的IL-2水平显著低于弱毒活疫苗组外(P<0.05),其他细胞因子在各时段两组均无显著差异(P>0.05)。本研究首次将OrfV优势抗原基因融合表达并分析了融合蛋白的免疫原性,为OrfV的检测技术和基因工程亚单位疫苗的研发奠定了良好基础。 展开更多
关键词 羊口疮病毒 b2l基因 F1l基因 截短表达 免疫原性分析
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非洲猪瘟病毒B646L基因序列分析及p72蛋白质结构与细胞抗原表位预测 被引量:2
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作者 罗世民 李中波 《江苏农业科学》 北大核心 2023年第16期141-146,共6页
为探究非洲猪瘟病毒B646L基因序列的碱基组成特点,及预测该基因所编码的p72蛋白质结构与细胞抗原表位,利用PCR技术对非洲猪瘟病毒B646L基因ORF框的序列进行扩增、测序及碱基组成分析;运用软件EXPASY、PRABI与SWISS-MODEL对p72蛋白质进... 为探究非洲猪瘟病毒B646L基因序列的碱基组成特点,及预测该基因所编码的p72蛋白质结构与细胞抗原表位,利用PCR技术对非洲猪瘟病毒B646L基因ORF框的序列进行扩增、测序及碱基组成分析;运用软件EXPASY、PRABI与SWISS-MODEL对p72蛋白质进行理化性质分析及二、三级结构预测;运用在线软件ABCpred Prediction、Scratch、IEDB和NetCTL对p72蛋白在B、T细胞的抗原表位进行预测。结果表明,非洲猪瘟病毒B646L基因ORF框序列全长为1941 bp,其中,碱基A含量为26.9%,T含量为28.9%,G含量为24.2%及C含量为20.0%,A+T的含量为55.8%,G+C的含量为44.2%,AT含量显著高于GC含量;该序列共编码646个氨基酸,p72蛋白大小为76 ku;在整个p72蛋白分子的二、三级结构中,α-螺旋占19.35%,β-转角占5.42%,无规卷曲占50.15%,扩展链为25.08%,以无规卷曲为主要结构;该蛋白存在细胞质的概率最大,其次是细胞核,存在于线粒体、高尔基体和内质网的概率较低;p72蛋白B淋巴细胞优势抗原表位分别为12~18 aa、27~37 aa、45~55 aa、77~88 aa、110~120 aa;T淋巴细胞优势抗原表位分别为203~212 aa、298~307 aa、520~531 aa。说明非洲猪瘟病毒B646L基因ORF框序列呈明显AT偏好性;p72蛋白为一亲水性蛋白,其高级结构主要以无规卷曲为主,且具有B、T淋巴细胞优势抗原表位,是检测试剂和疫苗研发的理想靶标。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 b646l基因 p72蛋白 序列分析 结构预测 抗原表位预测
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PRELID3B基因mRNA在不同品种乌骨鸡肌肉组织中的表达规律研究
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作者 姬改革 刘一帆 +5 位作者 屠云洁 单艳菊 邹剑敏 章明 巨晓军 束婧婷 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期156-160,共5页
PRELID3B基因(PRELIP Domain Containing 3B)是调控乌骨鸡黑色素沉积的重要候选基因。为探讨PRELID3BmRNA在不同品种乌骨鸡肌肉发育中的表达情况,以丝羽乌骨鸡和余干乌骨鸡为材料,采用实时荧光定量PCR技术,检测出雏后不同发育时期胸肌... PRELID3B基因(PRELIP Domain Containing 3B)是调控乌骨鸡黑色素沉积的重要候选基因。为探讨PRELID3BmRNA在不同品种乌骨鸡肌肉发育中的表达情况,以丝羽乌骨鸡和余干乌骨鸡为材料,采用实时荧光定量PCR技术,检测出雏后不同发育时期胸肌和腿肌中PRELID3BmRNA的表达情况,并将基因表达量与肌肉色度L值进行相关性分析。结果发现,2个品种胸肌和腿肌的肌肉色度L值都随日龄的增长呈逐渐下降的趋势;2周龄后,2个品种的胸肌和腿肌L值出现差异(P<0.05)。丝羽乌骨鸡胸肌和腿肌PRELID3B mRNA表达变化趋势基本一致,都是前高后低;余干乌骨鸡胸肌和腿肌PRELID3BmRNA表达变化趋势不一致,其中胸肌在10周龄之后呈升高的趋势。14周龄之后,2个品种的胸肌和腿肌PRELID3BmRNA表达都出现差异(P<0.05)。品种间比较,14周龄之后胸肌PRELID3BmRNA表达在品种间出现差异(P<0.05);腿肌则是在2周龄、6周龄和14周龄时品种间出现差异(P<0.05)。肌肉色度L值与基因表达的相关性结果显示,2个品种的腿肌色度L值都与基因表达量呈负相关(P<0.05)。结果提示PRELID3B基因mRNA表达在不同品种乌骨鸡腿肌中的变化规律基本一致,基因表达量与腿肌色度变化具有相关性,PRELID3B基因可能在调控乌骨鸡腿肌黑色素沉积方面具有重要作用。 展开更多
关键词 乌骨鸡 肌肉 PRElID3b基因 MRNA表达 色度l
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镉胁迫对小白菜(Brassica campestris L.)抗氧化机理的影响 被引量:15
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作者 刘可慧 于方明 +4 位作者 李明顺 周振明 谌斌 蓝殿 孙双玉 《生态环境》 CSCD 北大核心 2008年第4期1466-1470,共5页
采用水培的方法,研究了不同Cd2+水平(0、1、2.5、5、10、15mg·L-1)对小白菜(Brassica campestris L.)抗氧化酶(SOD、POD、CAT)活性、非酶物质(SH、GSH、PCs)含量以及生长的影响。结果表明,小白菜叶片和根系SOD活性随Cd处理质量浓... 采用水培的方法,研究了不同Cd2+水平(0、1、2.5、5、10、15mg·L-1)对小白菜(Brassica campestris L.)抗氧化酶(SOD、POD、CAT)活性、非酶物质(SH、GSH、PCs)含量以及生长的影响。结果表明,小白菜叶片和根系SOD活性随Cd处理质量浓度的增加呈降低的变化趋势,POD、CAT活性以及MDA含量随Cd处理质量浓度的增加而增加。小白菜的生物量、根长、株高、叶绿素质量分数随Cd处理质量浓度的增加显著降低(P<0.05),表明Cd抑制了小白菜的生长,破坏了叶绿素的合成。小白菜地上、地下部镉质量分数均随Cd处理质量浓度的增加而显著增加(P<0.05)。当Cd处理质量浓度为15mg·L-1,小白菜地上、地下部镉质量分数分别达到637.5、1663.0mg·kg-1,表明小白菜对Cd有良好的富集效果。小白菜根系与叶片中SH、GSH和PCs含量均随Cd处理质量浓度增加而增加的变化趋势,表明SH、GSH和PCs在解毒小白菜Cd毒害中起着重要作用。 展开更多
关键词 CD 小白菜 抗氧化酶 非酶物质
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杀虫剂胁迫对小白菜B. campestris体内营养物质和黄曲条跳甲P. striolata取食的影响 被引量:2
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作者 傅建炜 魏辉 +2 位作者 李建宇 占志雄 尤民生 《农业环境科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期1253-1257,共5页
采用生物测定与生理生化方法,研究不同杀虫剂胁迫下小白菜B.campestris体内的蛋白质和可溶性糖含量变化,以及对黄曲条跳甲(P.striolata)取食的影响。结果显示,杀虫剂处理对小白菜体内蛋白质含量的影响不显著,但对小白菜体内可溶性糖含... 采用生物测定与生理生化方法,研究不同杀虫剂胁迫下小白菜B.campestris体内的蛋白质和可溶性糖含量变化,以及对黄曲条跳甲(P.striolata)取食的影响。结果显示,杀虫剂处理对小白菜体内蛋白质含量的影响不显著,但对小白菜体内可溶性糖含量的影响显著。统计分析表明,杀虫剂处理后,黄曲条跳甲对小白菜的取食与植株体内蛋白质含量呈显著的负相关(P<0.05),与小白菜的可溶性糖含量呈极显著的正相关(P<0.01)。 展开更多
关键词 杀虫剂胁迫 小白菜 营养物质 黄曲条跳甲 取食选择
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非洲猪瘟病毒B646L和F778R双基因PCR检测方法的构建
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作者 王慧 钟菊花 +3 位作者 杨俊 杜丽飞 王红兵 刘俊琦 《激光生物学报》 CAS 2023年第6期554-560,共7页
为建立一种能够快速检测非洲猪瘟病毒(ASFV)的普通PCR方法,本研究分别以ASFV B646L和F778R基因为靶序列设计了两对特异性引物,建立ASFV B646L和F778R双基因普通PCR方法,并对其特异性、灵敏性及重复性进行检测。结果显示:该PCR体系(25.0... 为建立一种能够快速检测非洲猪瘟病毒(ASFV)的普通PCR方法,本研究分别以ASFV B646L和F778R基因为靶序列设计了两对特异性引物,建立ASFV B646L和F778R双基因普通PCR方法,并对其特异性、灵敏性及重复性进行检测。结果显示:该PCR体系(25.0μL体系)的最优组合为Pfu酶0.2μL、10×Reaction Buffer 2.5μL、2.5 mmol/L d NTP Mixture 2.5μL、B646L上下游引物各1.5μL、F778R上下游引物各0.5μL、DNA模板1.0μL;退火温度为57℃、退火时间为30 s、72℃延伸2.5 min,30个循环。该方法仅针对ASFV B646L和F778R基因进行特异性扩增,无交叉反应。同时对B646L和F778R阳性质粒的最低检测下限分别为7.2×10^(7)copies/μL、1.5×10^(6)copies/μL,试验重复性良好。本研究对于提高ASFV临床诊断的准确性、特异性和高效性具有重要价值,为其快速检测提供了可靠的技术支撑。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 多重PCR b646l基因 F778R基因 快速检测
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乌菜BcVIL2基因克隆及春化响应表达分析 被引量:3
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作者 桂尚枝 刘雪晴 +7 位作者 王英 唐小燕 赵龙龙 李广 吴思文 温宏伟 汪承刚 陈国户 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2023年第9期1843-1851,共9页
【目的】从乌菜(Brassica campestris L.)中克隆VIN3⁃LIKE 2(VIL2)基因并进行生物信息学与表达分析,为进一步研究BcVIL2基因功能奠定基础。【方法】以‘徽乌19’为试验材料,利用同源克隆等技术获得BcVIL2基因,对其序列进行蛋白分子量(MW... 【目的】从乌菜(Brassica campestris L.)中克隆VIN3⁃LIKE 2(VIL2)基因并进行生物信息学与表达分析,为进一步研究BcVIL2基因功能奠定基础。【方法】以‘徽乌19’为试验材料,利用同源克隆等技术获得BcVIL2基因,对其序列进行蛋白分子量(MW)、糖基化位点、二级结构等生物信息学分析;利用荧光定量PCR等技术分析其应答春化表达模式。【结果】BcVIL2基因ORF(Open reading fragment)全长为1296 bp,共编码431个氨基酸,属于亲水性蛋白,预测含有1个潜在的糖基化位点和59个潜在的磷酸化位点,蛋白分子量为47.91 kDa,理论等电点(pI)为8.27;其二级结构主要由α⁃螺旋与无规则卷曲组成;亚细胞定位预测其可能在细胞核中发挥作用;同源序列比对分析显示该基因与芸薹属植物VIL2基因同源性较高;亲缘进化树分析也显示该基因与白菜(B.rapa,syn.B.campestris)和芥菜(B.juncea)VIL2基因亲缘关系很近;荧光定量PCR结果表明,盛花期时BcVIL2基因在根中表达量最低,在荚中表达量最高,而叶中表达量显著低于茎和花中表达量;一月苗龄植株春化后BcVIL2基因的表达量显著低于未春化时的表达量。【结论】乌菜VIL2基因响应春化负表达,与春化反应相关基因BraA01g032910.3C、BraA05g026410.3C与BraA10g016160.3C密切相关,可能存在互作关系,本研究结果为深入分析BcVIL2基因的功能提供了良好基础。 展开更多
关键词 乌菜 VIl2 春化 基因克隆 表达分析
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非洲猪瘟病毒B318L蛋白的多克隆抗体的制备及应用 被引量:1
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作者 刘晓红 刘宏扬 +4 位作者 叶光强 焦爽 宿志民 黄丽 翁长江 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期922-929,共8页
非洲猪瘟病毒(ASFV)B318L是ASFV编码的晚期蛋白,具有香叶基香叶基合成酶活性。为了制备B318L的多克隆抗体并将其初步应用,本研究利用PCR方法从重组质粒p CAGGS-HA-B318L中扩增ASFV B318L基因构建重组表达质粒p GEX-6p-1-B318L,经PCR和... 非洲猪瘟病毒(ASFV)B318L是ASFV编码的晚期蛋白,具有香叶基香叶基合成酶活性。为了制备B318L的多克隆抗体并将其初步应用,本研究利用PCR方法从重组质粒p CAGGS-HA-B318L中扩增ASFV B318L基因构建重组表达质粒p GEX-6p-1-B318L,经PCR和测序鉴定正确后转化大肠杆菌BL21(DE3)经IPTG诱导并克隆至p GEX-6p-1载体中,采用GST亲和层析柱纯化重组蛋白,利用SDS-PAGE检测该蛋白的表达,采用western blot鉴定重组蛋白的纯化效果和反应原性,采用超微量紫外分光光度计测定蛋白浓度。结果显示,在约60 ku处出现特异性条带,且重组B318L蛋白(rB318L)主要以可溶性形式表达;纯化后在约60 ku处出现了单一特异性条带,经超微量紫外分光光度计测定蛋白浓度为10 mg/m L。将纯化的r B318L 4次免疫小鼠并于3免后一周采血,采用western blot鉴定该多克隆抗体(pAb),经Protein G亲和层析介质纯化后采用SDS-PAGE进一步鉴定纯化效果,采用间接ELISA检测p Ab的效价。结果显示,制备的小鼠血清(pAb)在60 ku处出现特异性条带,其与原核表达的r B318L发生了反应;该p Ab包含重、轻链且纯度较好,且其效价可达1∶32000。将不同剂量的p CAGGS-HA-B318L(1μg、2μg、4μg)分别转染HEK293T细胞,24 h后收集细胞,将MOI 1的ASFV HLJ/18株感染猪肺泡巨噬细胞(PAM),并分别于感染后6 h、12 h、24 h收集细胞。上述细胞均经相应处理后分别采用western blot、间接免疫荧光试验(IFA)(pCAGGS-HA-B318L转染剂量为1μg)检测制备的p Ab的反应原性。Western blot结果显示,HEK293T细胞中出现约35 ku的特异性条带,并随转染质粒浓度的增加B318L蛋白表达量增多;ASFV感染24 h后的PAM在35 ku处出现特异性条带,其余时间点均无该条带。IFA结果显示,过表达B318L蛋白的HEK293T细胞中出现红色荧光;ASFV感染12 h后的PAM中出现红色荧光,24 h后PAM中红色荧光的量增加。将制备的B318L p Ab用于免疫共沉淀(Co-IP)试验检测293T细胞中过表达的B318L、ASFV感染PAM后内源表达的B318L,以及两种细胞中表达的B38L蛋白与p Ab、Protein A/G Magnetic beads三者结合物的反应性。结果显示,B318L p Ab可以检测到上述细胞中内源过表达和外源表达的B318L蛋白以及结合在beads上的B318L蛋白,均出现约35 ku的特异性条带。上述结果表明,B318L蛋白是ASFV晚期表达的蛋白,且制备并纯化的B318L p Ab反应原性较强,既可以与HEK293T细胞中过表达的B318L蛋白也可以与ASFV感染的PAM中内源表达的B318L蛋白反应,反应原性较强,且可以用于Co-IP试验检测细胞中表达的B318L蛋白,本研究为深入研究ASFV B318L的生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 b318l蛋白 多克隆抗体
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基于LIN线通信的迈腾B8L汽车灯光系统原理探析 被引量:1
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作者 文富强 《科技资讯》 2023年第17期79-82,共4页
近年来,随着汽车技术的飞速发展,汽车已呈现出向电动化、智能化、电子化、共享化等多方向发展的趋势,未来的汽车会像手机一样成为人们生活的伙伴,而这一切的发展都离不开汽车数据总线技术的发展与应用。该文主要从大众迈腾B8L汽车灯光... 近年来,随着汽车技术的飞速发展,汽车已呈现出向电动化、智能化、电子化、共享化等多方向发展的趋势,未来的汽车会像手机一样成为人们生活的伙伴,而这一切的发展都离不开汽车数据总线技术的发展与应用。该文主要从大众迈腾B8L汽车灯光系统原理分析与研究出发,阐述了LIN线工作原理及故障原因分析、汽车灯光系统组成及控制原理等,从而为LIN线的故障诊断与维修提供参考。 展开更多
关键词 汽车灯光系统 迈腾b8l lIN线 原理
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羊口疮病毒内脏和口唇感染株B2L和F1L基因的比较分析
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作者 吴姣 富国文 +4 位作者 四朗玉珍 曾琴 白卫兵 班旦 樊月圆 《云南农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2023年第4期580-586,共7页
【目的】分析内脏和口唇感染羊传染性脓疱病病毒主要致病因子F1L和B2L基因和蛋白的差异,为进一步研究该病毒的致病机制提供参考。【方法】对内脏和口唇感染株F1L和B2L基因进行PCR扩增后克隆测序,运用生物信息学软件对其序列及编码蛋白... 【目的】分析内脏和口唇感染羊传染性脓疱病病毒主要致病因子F1L和B2L基因和蛋白的差异,为进一步研究该病毒的致病机制提供参考。【方法】对内脏和口唇感染株F1L和B2L基因进行PCR扩增后克隆测序,运用生物信息学软件对其序列及编码蛋白的二级结构、磷酸化位点和跨膜结构域进行预测和分析。【结果】内脏株和口唇株的F1L基因长度均为1 564 bp,分别编码342和343个氨基酸;B2L基因长度均为1 370 bp,均编码378个氨基酸。内脏和口唇感染株B2L基因核苷酸序列同源性为97.80%,氨基酸序列同源性为98.15%;两者的F1L基因核苷酸序列同源性为95.49%,氨基酸序列同源性为87.20%。氨基酸组成显示:内脏和口唇感染株B2L蛋白缬氨酸含量最高;口唇株F1L蛋白亮氨酸含量最高,内脏株F1L蛋白精氨酸含量最高。【结论】羊口疮病毒内脏和口唇感染株的B2L基因保守性良好,而F1L基因差异明显,本结果可为进一步研究羊口疮病毒致病机制提供参考。 展开更多
关键词 羊口疮病毒 口唇感染株 F1l基因 b2l基因 生物信息学分析
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IVF-ET对子代胎盘PEG3、L3MBTL1、NF-κB表达的影响及临床意义
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作者 朱珍 高海燕 +2 位作者 董自江 李艳 陆薇 《中国计划生育学杂志》 2023年第10期2311-2316,共6页
目的:观察体外受精-胚胎移植(IVF-ET)对子代胎盘父系表达基因3(PEG3)、父系印记基因L3MBTL1(L3MBTL1)、核转录因子-κB(NF-κB)表达水平影响及其临床意义。方法:选取2021年6月-2022年12月在本院产科行IVF-ET的剖宫产产妇及自然受孕剖宫... 目的:观察体外受精-胚胎移植(IVF-ET)对子代胎盘父系表达基因3(PEG3)、父系印记基因L3MBTL1(L3MBTL1)、核转录因子-κB(NF-κB)表达水平影响及其临床意义。方法:选取2021年6月-2022年12月在本院产科行IVF-ET的剖宫产产妇及自然受孕剖宫产产妇各45例为IVF-ET组、对照组。胎盘娩出后收集两组胎盘组织,应用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、Western blot法测定胎盘组织中PEG3、L3MBTL1、NF-κB mRNA及蛋白表达;比较不同新生儿结局IVF-ET产妇胎盘组织中PEG3、L3MBTL1、NF-κB mRNA及蛋白表达;应用Spearman相关系数分析胎盘组织中各指标表达与新生儿结局关系。结果:IVF-ET组胎盘组织中PEG3、L3MBTL1 mRNA及蛋白表达均低于对照组,NF-κB mRNA及蛋白表达高于对照组;IVF-ET组中出现不良新生儿结局产妇胎盘组织中PEG3、L3MBTL1 mRNA及蛋白表达均低于无不良新生儿结局产妇,NF-κB mRNA及蛋白表达高于无不良新生儿结局产妇(均P<0.05)。Spearman相关系数分析显示,IVF-ET产妇胎盘组织中PEG3、L3MBTL1 mRNA及蛋白表达与新生儿结局呈正相关,NF-κB mRNA及蛋白表达与新生儿结局呈负相关(均P<0.05)。结论:IVF-ET子代胎盘PEG3、L3MBTL1、NF-κB异常表达,且表达与不良新生儿结局有关。 展开更多
关键词 体外受精-胚胎移植 胎盘组织 父系表达基因3 l3MbTl1 核转录因子-Κb 新生儿结局 相关性
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Role of nitrification inhibitor DMPP(3,4-dimethylpyrazole phosphate) in NO^-_3-N accumulation in greengrocery( Brassica campestris L. ssp. chinensis ) and vegetable soil 被引量:18
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作者 XUChao WULiang-huan +1 位作者 JUXiao-tang ZHANGFu-suo 《Journal of Environmental Sciences》 SCIE EI CAS CSCD 2005年第1期81-83,共3页
The influence of nitrification inhibitor(NI) 3,4 dimethylpyrazole phosphate(DMPP) on nitrate accumulation in greengrocery( Brassica campestris L. ssp. chinensis ) and vegetable soil at surface layer were investigated ... The influence of nitrification inhibitor(NI) 3,4 dimethylpyrazole phosphate(DMPP) on nitrate accumulation in greengrocery( Brassica campestris L. ssp. chinensis ) and vegetable soil at surface layer were investigated in field experiments in 2002 and 2003 Results showed that NI DMPP took no significant effect on yields of edible parts of greengrocery, but it could significantly decrease NO - 3 N concentration in greengrocery and in vegetable soil at surface layer. In addition, NI DMPP could reduce the NO - 3 N concentration during the prophase stage of storage. 展开更多
关键词 dimethylpyrazole phosphate(DMPP) NO^-_3-N vegetable soil greengrocery( brassica campestris l. ssp. chinensis )
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A Genetic Linkage Map of Brassica campestris L.ssp. pekinensis (syn. B. rapa L. ssp. pekinensis) 被引量:8
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作者 YU Shuan-cang, WANG Yong-jian and ZHENG Xiao-yingBeijing Vegetable Research Center, Beijing 100089 , P. R. China 《Agricultural Sciences in China》 CAS CSCD 2003年第1期49-55,共7页
A molecular genetic map of Chinese cabbage was constructed with a 102 recombinant inbred (RI) population from a cross of two cultivated Chinese cabbage lines 177 and 276, using AFLP and RAPD markers. 352 markers inclu... A molecular genetic map of Chinese cabbage was constructed with a 102 recombinant inbred (RI) population from a cross of two cultivated Chinese cabbage lines 177 and 276, using AFLP and RAPD markers. 352 markers including 265 AFLP markers and 87 RAPD markers were integrated into 17 linkage groups. It covered a total of 2 665. 7 cM with an average interval of 7. 6 cM. AFLP marker is efficient for map construction while it easily forms clusters to cause big gaps in map. A total of 13.92 % abnormal segregation markers distributed in the map. The molecular genetic map is fundamental for gene localization, comparative genomics, and QTL mapping of important agronomic traits. 展开更多
关键词 brassica campestris l. ssp. pekinensis(syn. b. rapa l. ssp. pekinensis) Genetic linkage map AFlP RAPD
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Effect of Nitrogen and Sulfur Supply on Glucosinolates in Brassica campestris ssp.chinensis 被引量:10
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作者 CHEN Xin-juan ZHU Zhu-jun NI Xiao-lei QIAN Qiong-qiu 《Agricultural Sciences in China》 CAS CSCD 2006年第8期603-608,共6页
Glucosinolates (GSs) are a group of plant secondary metabolites containing abundant nitrogen (N) and sulfur (S) mainly in Brassica and have the beneficial effects on human health including anti-carcinogenic, cho... Glucosinolates (GSs) are a group of plant secondary metabolites containing abundant nitrogen (N) and sulfur (S) mainly in Brassica and have the beneficial effects on human health including anti-carcinogenic, cholesterol-reducing and other pharmacological effects. The objective of this study was to investigate the effect of different concentrations of N (5, 10, and 20 mmol L-a, denoted by N5, N10 and N20) and S (0,5, 1, and 2 mmol L^-1, denoted by S0.5, S1 and S2) on the yield and GSs in pakchoi (Brassica campestris L. ssp. chinensis var. communis) in hydroponics. Results showed that N10 and N20 significantly enhanced the yield compared with N5, however, N20 had a negative effect relative to N10. Only with N10 and N20 low S supply (S0.5) reduced the yield. The concentrations of aliphatic GSs, aromatic GS and total GSs were enhanced by N5 and indolyl GSs were enhanced by N20. S2 enhanced the concentration of individual GS and total GSs. The concentrations of indolyl GSs were maximized in N20S2 treatment, whereas the highest concentrations of aliphatic GSs, aromatic GS and total GSs were found in N5S2 treatment. Effects of N and S on aliphatic GSs were higher than on indolyl GSs. The results suggest that the accumulation of aliphatic GSs and aromatic GS could be enhanced by low N and high S and restricted by high N while that of indolyl GSs could be enhanced by high N and high S. 展开更多
关键词 GlUCOSINOlATE NITROGEN SUlFUR brassica campestris l. ssp. chinensis var. communis
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