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Analysis of Two-Dimensional Gel Electrophoresis Images of Protein from Posterior Silk Gland of Silkworm (Bombyx mori) on Day 1 and Day 4 in the 5th Instar Stage 被引量:2
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作者 WU Wei-cheng GAOQi-kang +7 位作者 CHEN Jin-e YE Jian QIAN Yang-wen LI Jian-ying LU Hua-yun MENG Zhi-qi NI Chun-xiao ZHONG Bo-xiong 《Agricultural Sciences in China》 CAS CSCD 2007年第2期249-254,共6页
The posterior silk gland (PSG) of silkworm is an important organ where fibroin is synthesized and secreted exclusively. Because fibroin constitutes 75-80% of the silk filament, the mechanism governing fibroin secret... The posterior silk gland (PSG) of silkworm is an important organ where fibroin is synthesized and secreted exclusively. Because fibroin constitutes 75-80% of the silk filament, the mechanism governing fibroin secretion, quality and yield of cocoon can be elucidated by the study on the PSG. Using two-dimensional gel electrophoresis (2-DE) and image analysis system, the changes in the protein composition in the PSG cell were investigated on the day 1 (D1) and day 4 (D4) in the 5th instar stage from five different strains of silkworm (Bombyx mori). While differences at protein level between days and strains were far less than those observed at the gene level using EST analysis. The change trends in protein composition from D1 to D4 were diverse among the different strains. The results suggest that the secretion of fibroin is regulated by multiple proteins. The site of regulation and the proteins responsible for the regulation vary with the strain, which leads to differences between strains in the capacity of fibroin secretion in the PSG cell. 展开更多
关键词 silkworm bombyx mori silk gland protein 2-DE image analysis
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Study on Bombyx mori silk treated by oxygen plasma 被引量:1
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作者 陈宇岳 林红 +2 位作者 任煜 王红卫 朱良均 《Journal of Zhejiang University Science》 EI CSCD 2004年第8期918-922,共5页
Study of the morphology, aggregation structure and properties ofBombyx mori silk treated by low temperature oxygen plasma showed that slight flutes appeared on the surface of Bombyx mori silk fiber and that its surfac... Study of the morphology, aggregation structure and properties ofBombyx mori silk treated by low temperature oxygen plasma showed that slight flutes appeared on the surface of Bombyx mori silk fiber and that its surface structure changed after plasma treatment. The conformation also changed and crystalline degree decreased. The stannic filling rate of treated fiber was improved. Because of etching, the weight of the fiber decreased but the breaking strength changed little after short-time treatment. 展开更多
关键词 Oxygen plasma bombyx mori silk MORPHOLOGY STRUCTURE PROPERTIES
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5龄桑蚕(Bombyx mori)后部丝腺氨基酸激活酶的合成动态
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作者 石生林 徐启茂 +3 位作者 许方国 虞彦莉 崔海燕 冯树 《沈阳农业大学学报》 CAS CSCD 2003年第6期428-429,共2页
本研究通过对5龄桑蚕(Bombyxmori)后部丝腺重量及其组织内氨基酸激活酶蛋白含量的跟踪测定 ,阐明了5龄桑蚕后部丝腺蛋白质生物合成规律。结果表明 ,桑蚕在5龄期后部丝腺氨基酸激活酶的含量变化与后部丝腺的重量变化基本同步 ,均随日龄呈... 本研究通过对5龄桑蚕(Bombyxmori)后部丝腺重量及其组织内氨基酸激活酶蛋白含量的跟踪测定 ,阐明了5龄桑蚕后部丝腺蛋白质生物合成规律。结果表明 ,桑蚕在5龄期后部丝腺氨基酸激活酶的含量变化与后部丝腺的重量变化基本同步 ,均随日龄呈“S”形曲线走向。后部丝腺重量及氨基酸激活酶蛋白含量变化的“S”形曲线可用逻辑斯蒂克曲线进行描述。 展开更多
关键词 5龄桑蚕 部丝腺 氨基酸激活酶 合成动态 蛋白含量 逻辑斯蒂克曲线
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Bombyx mori Pyridoxal Kinase cDNA Cloning and Enzymatic Characterization 被引量:1
4
作者 石瑞君 张剑韵 +1 位作者 江昌俊 黄龙全 《Journal of Genetics and Genomics》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第8期683-690,共8页
Pyridoxal kinase (PLK) (EC 2.7.1.35) catalyzes the ATP-dependent phosphorylation of pyridoxal, generating pyridoxal-5'-phosphate (PLP), an important cofactor for many enzymatic reactions. Bombyx mori, similar t... Pyridoxal kinase (PLK) (EC 2.7.1.35) catalyzes the ATP-dependent phosphorylation of pyridoxal, generating pyridoxal-5'-phosphate (PLP), an important cofactor for many enzymatic reactions. Bombyx mori, similar to mammals, relies on a nutritional source of vitamin B6 to synthesize PLP. This article describes how a cDNA encoding PLK was cloned from Bombyx mori using the PCR method (GenBank accession number: DQ452397). The cDNA has an 894 bp open reading frame and encodes a protein of 298 amino acid residues with a molecular mass of 33.1 k.Da. The amino acid sequence shares 48.6% identity with that of human PLK, and it also contains signature conserved motifs of the PLK family. However, the protein is 10 or more amino acids shorter than the PLK from mammals and plants, and several amino acid residues conserved in the PLK from mammals and plants are changed in the protein. The cDNA cloned was expressed successfully in Escherichia coli using the T7 promoter/T7 RNA polymerase expression system, and the crude extracts containing the expressed product were found to have strong PLK enzymatic activity with a value of 30 nmol/min/mg, confirming that the cDNA encodes the functional PLK of Bombyx mori. This is the first identification of a gene encoding PLK in insects. 展开更多
关键词 pyridoxal kinase bombyx mori silkworm) pyridoxal-5'-phosphate (PLP) vitamin b6 metabolism genomic database
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The Mulberry Silkworm--A New Source of Bioactive Proteins
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作者 Malgorzata Lochyfiska 《Journal of Agricultural Science and Technology(A)》 2015年第8期639-645,共7页
Beyond the commonly known proteins built silk fibres--fibroin and sericin, there are almost 300 bioactive proteins in the silkworm haemolymph. The aim of this work was to present bioactive compounds obtained from the ... Beyond the commonly known proteins built silk fibres--fibroin and sericin, there are almost 300 bioactive proteins in the silkworm haemolymph. The aim of this work was to present bioactive compounds obtained from the silk fibre and isolated from the body of this insect, which may be used in medical and pharmacological applications. The most important are bioactive proteins. However, the juvenile stages of mulberry silkworm possess other very valuable active substances. 展开更多
关键词 bombyx mori L. fibroin SERICIN 1-DEOXYNOJIRIMYCIN HAEMOLYMPH silk fibre.
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Structural analysis of silk using solid-state NMR
6
作者 Tetsuo Asakura 《Magnetic Resonance Letters》 2024年第3期19-34,共16页
Silkworms and spiders are capable of generating fibers that are both highly durable and elastic in a short span of time,using a silk solution stored within their bodies at room temperature and normal atmospheric press... Silkworms and spiders are capable of generating fibers that are both highly durable and elastic in a short span of time,using a silk solution stored within their bodies at room temperature and normal atmospheric pressure.The dragline silk fiber,which is essentially a spider's lifeline,surpasses the strength of a steel wire of equivalent thickness.Regrettably,humans have yet to replicate this process to produce fibers with similar high strength and elasticity in an eco-friendly manner.Therefore,it is of utmost importance to thoroughly comprehend the extraordinary structure and fibrillation mechanism of silk,and leverage this understanding in the manufacturing of high-strength,high-elasticity fibers.This review will delve into the recent progress in comprehending the structure of silks derived from silkworms and spiders,emphasizing the distinctive attributes of solidstate NMR. 展开更多
关键词 silk bombyx mori SPIDER Solid-state NMR STRUCTURE
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New Technique to Produce Large Amount of Flat Silk by Biospinning
7
作者 Laura Beatriz Garay Andrea Nembri +7 位作者 Alana Lucia Oro Veronica Aureliana Fassina Claudia Regina das Neves Saez Alex Sandro Chiarello Naiara Climas Pereira Graziele Milani Pessini Roxelle Ethienne Ferreira Munhoz Maria Aparecida Fernandez 《Agricultural Sciences》 2014年第14期1483-1490,共8页
Beyond the production of silk thread, there are several studies showing that the silk is a great biomaterial for surgical sutures and grafts. This paper shows a new technique to produce silk thread changing the natura... Beyond the production of silk thread, there are several studies showing that the silk is a great biomaterial for surgical sutures and grafts. This paper shows a new technique to produce silk thread changing the natural cycle of silk production, which is the production of cocoons. This new method has the purpose of producing a silk fabric free of impurities, through flat surfaces. Six different surfaces were tested: Glass, Formica Surface, Steel and Zinc Sheets, Cotton tissue and Burlap Bag. The first five surfaces had not presented enough larvae alive for statistical analysis, because there were several damages in silkworms larvae that resulted in mortality and low silk production. On the other hand, the burlap bag surface presented good results for web construction by biospinning and its use was indicated for silk industry focused on biomaterials. The present study suggested the potential of naturally biospun web, using Bombyx mori, to develop a new technique to produce silk thread matrices that will have several applications at the industry and production of biomedical materials. 展开更多
关键词 silkWORM bombyx mori L. silk Thread biomaterial
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人脑源性神经营养因子基因(hBDNF)在转基因家蚕丝腺中的特异表达 被引量:10
8
作者 段建平 徐汉福 +3 位作者 马三垣 邓党军 王峰 夏庆友 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期248-252,共5页
家蚕丝腺具有强大合成与分泌蛋白质的能力,利用其作为生物反应器生产高附加值外源蛋白有着广阔的市场前景。以人血白细胞基因组DNA为模板,扩增并克隆了人脑源性神经营养因子基因(hBDNF)核苷酸序列。序列分析表明,克隆的hBDNF核苷酸序列... 家蚕丝腺具有强大合成与分泌蛋白质的能力,利用其作为生物反应器生产高附加值外源蛋白有着广阔的市场前景。以人血白细胞基因组DNA为模板,扩增并克隆了人脑源性神经营养因子基因(hBDNF)核苷酸序列。序列分析表明,克隆的hBDNF核苷酸序列与已发表序列(GenBank登录号:NM_170735)的同源性为100%。随后采用家蚕丝胶基因(Ser1)启动子,以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为筛选标记,将hBDNF构建到piggyBac转座表达载体并注射入家蚕早期胚胎,在G1代筛选获得了54头转基因阳性个体。经分子检测证实,hBDNF已整合到家蚕基因组并在丝腺有较高水平的特异表达。 展开更多
关键词 人脑源性神经营养因子 丝腺生物反应器 家蚕 表达
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桑白皮中sanggenon B对脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症反应的影响 被引量:13
9
作者 吴永祥 吴丽萍 +3 位作者 胡长玉 万志兵 李丰伯 金泰完 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期1132-1137,共6页
采用硅胶柱层析等方法从桑白皮中分离出抗炎活性化合物,通过波谱分析进行化合物结构鉴定。体外培养RAW264.7细胞,构建脂多糖(LPS)诱导炎症模型,采用噻唑蓝(MTT)法测定细胞活性,利用Griess法和酶联免疫吸附(ELISA)法分别检测炎症因子一... 采用硅胶柱层析等方法从桑白皮中分离出抗炎活性化合物,通过波谱分析进行化合物结构鉴定。体外培养RAW264.7细胞,构建脂多糖(LPS)诱导炎症模型,采用噻唑蓝(MTT)法测定细胞活性,利用Griess法和酶联免疫吸附(ELISA)法分别检测炎症因子一氧化氮(NO)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)的释放量,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot技术分别测定诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、环氧合酶-2(COX-2)mRNA和蛋白的表达水平。结果显示:桑白皮乙醇提取物(MRE)能显著抑制LPS诱导的RAW264.7细胞NO的分泌水平,且呈现量效关系。对桑白皮进行分离,得到1种抗炎活性化合物,经波谱数据分析,确定其为已知的Diels-Alder加合物桑根酮B(sanggenon B)。抗炎活性表明,sanggenon B显著下调了炎症因子NO、TNF-α、IL-6的合成,并抑制了RAW264.7细胞中i NOS、COX-2 mRNA和蛋白的表达水平。研究表明,从桑白皮中分离出的sanggenon B具有一定的抗炎作用,其抗炎机制可能与调控炎症因子的合成,降低i NOS、COX-2表达有关。 展开更多
关键词 桑白皮 桑根酮b RAW264.7细胞 炎症 Diels-Alder加合物
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禽马立克氏病毒糖蛋白B基因在家蚕中的表达 被引量:7
10
作者 肖庆利 季平 +3 位作者 何家禄 崔治中 秦爱建 吴祥甫 《蚕业科学》 CAS CSCD 1997年第2期104-108,共5页
将马克克氏病毒(Marek'sdiseasevirus,MDV)糖蛋白B(gB)基因克隆入转移载体pBac-PAK8中,得到重组转移载体质粒pBacPAK(gB)。经限制性酶切图谱结合Southernblot分析鉴定表明,gB基因以正确方向插入转移载体,受多角体蛋白基... 将马克克氏病毒(Marek'sdiseasevirus,MDV)糖蛋白B(gB)基因克隆入转移载体pBac-PAK8中,得到重组转移载体质粒pBacPAK(gB)。经限制性酶切图谱结合Southernblot分析鉴定表明,gB基因以正确方向插入转移载体,受多角体蛋白基因启动子控制。将此转移载体与经CvnI酶切线性化的亲本病毒Bm-BacPAK6DNA通过脂质体法共转梁家蚕细胞,只有发生重组的病毒才有复制增殖的能力。然后通过蓝白斑筛选、结合点杂交,纯化得到重组的空斑病毒vBM,用该重组病毒接种家蚕5龄幼虫,对表达产物进行SDS-PAGE分析,检测到gB基因在家蚕中高效表达,表达产物的分子量主要为97KD,表达量约为1mg/mL血淋巴。 展开更多
关键词 马立克氏病毒 家蚕 核型多角体病毒 基因表达
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家蚕B型清道夫受体基因的鉴定及系统发生与表达分析 被引量:5
11
作者 董占鹏 柴春利 +4 位作者 代方银 潘敏慧 杜周和 胡海 鲁成 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期743-753,共11页
B型清道夫受体(SR-B)是清道夫受体超基因家族成员,参与机体的脂类代谢、动脉粥样硬化形成或保护、宿主免疫损害防御、凋亡细胞清除和细胞粘附等重要生命过程。基于家蚕全基因组数据,利用比较基因组学方法,鉴定获得了14个家蚕B型清道夫... B型清道夫受体(SR-B)是清道夫受体超基因家族成员,参与机体的脂类代谢、动脉粥样硬化形成或保护、宿主免疫损害防御、凋亡细胞清除和细胞粘附等重要生命过程。基于家蚕全基因组数据,利用比较基因组学方法,鉴定获得了14个家蚕B型清道夫受体基因,这些基因分布在至少5条染色体上,其内含子的大小从几十到近万个碱基对。系统发生分析表明,14个家蚕B型清道夫受体基因分布在3个类群:第1类群中分布的9个基因和第3类群中分布的3个基因,分别与类群中其它昆虫的同源基因形成明显的直系同源关系;第2类群中分布有2个基因,此类群中不同昆虫的同源基因之间的进化关系较为复杂。EST数据和芯片数据分析表明,多数家蚕B型清道夫受体基因具有转录活性。RT-PCR检测结果显示,有8个家蚕B型清道夫受体基因在5龄第3天幼虫组织中表达,并具有不同的表达模式,推测这些基因可能行使不同的功能。研究结果为进一步诠释家蚕B型清道夫受体基因的功能奠定了基础。 展开更多
关键词 家蚕 b型清道夫受体基因 生物信息学分析 系统发生 组织表达
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Bmo-miR-2755*对丝素蛋白基因BmFib-L和BmP25表达的调控作用 被引量:3
12
作者 范洋洋 陈晨 +4 位作者 王欣 宋菲 唐顺明 易咏竹 沈兴家 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期847-853,共7页
为了研究家蚕miRNA对丝素蛋白基因表达的调控作用,采用生物信息学方法筛选获得对家蚕丝素轻链基因(BmFib-L)和P25蛋白基因(BmP25)有潜在调控作用的Bmo-miR-2755*。利用半定量RT-PCR技术分析Bmo-miR-2755*及其靶基因BmFib-L、BmP2... 为了研究家蚕miRNA对丝素蛋白基因表达的调控作用,采用生物信息学方法筛选获得对家蚕丝素轻链基因(BmFib-L)和P25蛋白基因(BmP25)有潜在调控作用的Bmo-miR-2755*。利用半定量RT-PCR技术分析Bmo-miR-2755*及其靶基因BmFib-L、BmP25在家蚕4~5龄期幼虫后部丝腺和5龄3 d幼虫不同组织器官中的表达水平,结果显示三者在后部丝腺组织中的表达水平都较高,呈现严格的时空特异性。以pcDNA3质粒为载体,构建Bmo-miR-2755*的重组表达载体pcDNA3[ie1-egfpprimiR-2755*-SV40];以pGL3.0-Basic质粒为载体,分别构建BmFib-L 3'UTR、BmP25 3'UTR与荧光素酶报告基因luc融合的重组报告质粒pGL3.0[A3-luc-Fib-L-3'UTR-SV40]和pGL3.0[A3-luc-P25-3'UTR-SV40]。以海肾荧光素酶表达载体pRL-CMV为内参,分别将构建的Bmo-miR-2755*重组表达载体和2个重组报告质粒共转染BmN细胞,通过检测细胞中的荧光素酶活性,明确Bmo-miR-2755*可显著下调BmFib-L基因的表达,并能上调BmP25基因的表达,但上调作用未达显著水平。上述结果为研究家蚕miRNA的功能和阐明蚕丝蛋白基因表达调控分子机制提供了新的实验数据。 展开更多
关键词 miRNA 家蚕 bmo-miR-2755* 丝素轻链基因 P25基因 表达调控
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家蚕和果蝇的抗菌肽cecropin B基因的原核表达及抑菌活性分析 被引量:3
13
作者 杨莹 王成林 +3 位作者 徐家萍 尤征英 凌琳 周敬波 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期246-253,共8页
动物抗菌肽天蚕素(cecropin)因具有抗菌谱广、活性较强、不易产生耐药性等特点而成为新型抗菌剂开发的材料。为了探讨通过原核表达的途径高效获取天然cecropin,以重叠PCR方法分别人工合成家蚕(Bombyx mori)和果蝇(Drosophilamelanogast... 动物抗菌肽天蚕素(cecropin)因具有抗菌谱广、活性较强、不易产生耐药性等特点而成为新型抗菌剂开发的材料。为了探讨通过原核表达的途径高效获取天然cecropin,以重叠PCR方法分别人工合成家蚕(Bombyx mori)和果蝇(Drosophilamelanogaster)的抗菌肽cecropin B基因(CecB2)并克隆至T载体,测序确认后分别克隆至pET-32a载体,转化至E.coli BL21(DE3)宿主菌进行表达。通过SDS-PAGE和Western blotting检测到2种目的蛋白均得到表达,但表达量存在差异,Bradford法测定纯化后的BmCecB2融合蛋白和DmCecB2融合蛋白的质量浓度分别为0.6、2.0 mg/mL。经Ni-NTA亲和层析纯化和透析处理后的2种产物的抗菌活性存在明显差异:DmCecB2和BmCecB2的质量浓度为10 mg/mL时,对E.coli DH5α的抑菌圈直径分别为15、8 mm左右,最小抑菌浓度分别为0.05、0.10 mg/mL。以上结果说明DmCecbB2的原核表达效率及表达产物的抑菌活性均明显高于BmCecB2。用生物信息学方法分析家蚕和果蝇的CecB2蛋白在结构上存在差异,这可能是导致2种产物活性不同的主要原因。 展开更多
关键词 家蚕 果蝇 抗菌肽 CECROPIN b 原核表达 抗菌活性 基因结构
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家蚕体内因缺乏维生素B_6而引起的若干代谢变动 被引量:8
14
作者 张剑韵 黄龙全 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期436-440,共5页
采用不含桑叶粉末、以去维生素牛乳酪蛋白为蛋白源的准合成饲料饲育家蚕Bombyxmori 5龄幼虫 ,探讨了缺乏维生素B6 (VB6 )对蚕体氨基酸代谢、脂肪酸代谢以及转氨酶活力的影响。缺乏VB6 引起支链氨基酸分解代谢受阻 ,幼虫体液中大量积累... 采用不含桑叶粉末、以去维生素牛乳酪蛋白为蛋白源的准合成饲料饲育家蚕Bombyxmori 5龄幼虫 ,探讨了缺乏维生素B6 (VB6 )对蚕体氨基酸代谢、脂肪酸代谢以及转氨酶活力的影响。缺乏VB6 引起支链氨基酸分解代谢受阻 ,幼虫体液中大量积累亮氨酸、缬氨酸和异亮氨酸。同时因绢丝腺发育停滞 ,丝氨酸也在体液中积累。另一方面 ,缺乏VB6 幼虫体液中赖氨酸、脯氨酸、精氨酸、甲硫氨酸和谷氨酸含量减少 ,其中赖氨酸尤为突出。推测缺乏VB6 引起赖氨酸分解代谢亢进。结果还表明 ,缺乏VB6 幼虫体内脂肪酸代谢异常 。 展开更多
关键词 家蚕 准合成饲料 缺乏维生素b6 氨基酸代谢 脂肪酸代谢
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VB_6对家蚕氮代谢的影响 被引量:4
15
作者 徐豫松 徐俊良 《蚕业科学》 CAS CSCD 2001年第1期34-37,共4页
用人工饲料无菌饲育方式 ,分析维生素B6(VB6)对家蚕丝腺生长、血淋巴蛋白质浓度、血淋巴游离氨基酸组成变化及氮代谢终产物尿酸形成的影响。结果表明 :5龄期家蚕在缺乏VB6条件下 ,丝腺生长严重受阻碍 ,血淋巴蛋白质不能正常合成 ,使体... 用人工饲料无菌饲育方式 ,分析维生素B6(VB6)对家蚕丝腺生长、血淋巴蛋白质浓度、血淋巴游离氨基酸组成变化及氮代谢终产物尿酸形成的影响。结果表明 :5龄期家蚕在缺乏VB6条件下 ,丝腺生长严重受阻碍 ,血淋巴蛋白质不能正常合成 ,使体内氨基酸转化利用率下降 ,氮代谢终产物尿酸的排泄量增加 ,血淋巴中部分游离氨基酸浓度下降 ,特别是合成丝蛋白质主要成分的Ala、Ser和Tyr等蚕体非必需氨基酸的组成比率显著减少 ,而Gly、Orn和Cysta等的浓度增加异常 ,导致血淋巴中游离氨基酸组成动态平衡破坏 ,显示蚕体内因VB6缺乏引起氨基酸代谢失调。 展开更多
关键词 维生素b6 家蚕 氮代谢
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致病菌与非致病菌诱导对家蚕抗菌肽基因defensinA/B的表达定量分析 被引量:2
16
作者 唐芬芬 杨伟克 +2 位作者 邵榆岚 杨海 白兴荣 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2013年第3期1282-1285,共4页
在致病菌(Bacillus bombyseptieus)与非致病菌(Escherichia coli)诱导家蚕后的不同时间,采用实时荧光定量PCR方法,对抗菌肽基因defensinA/B在脂肪体中的表达进行了定量分析。结果表明,在家蚕被注射黑胸败血芽孢杆菌致病菌和非致病菌(大... 在致病菌(Bacillus bombyseptieus)与非致病菌(Escherichia coli)诱导家蚕后的不同时间,采用实时荧光定量PCR方法,对抗菌肽基因defensinA/B在脂肪体中的表达进行了定量分析。结果表明,在家蚕被注射黑胸败血芽孢杆菌致病菌和非致病菌(大肠杆菌)后的3、9、12 h,检测到脂肪体中的Bm-defA/B的转录活性上调,Bm-defB的响应活性高于Bm-defA,Bm-defB对黑胸败血芽孢杆菌致病菌的响应快于Bm-defA,提示Bm-defensins在家蚕对抗细菌侵染的免疫反应中发挥重要的作用。 展开更多
关键词 家蚕 黑胸败血芽孢杆菌 大肠杆菌 defensinA b 实时荧光定量PCR
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家蚕Bmβ-COP基因结构及功能
17
作者 杜周和 樊玉杰 +3 位作者 刘俊凤 刘彬斌 濮佳 陈义安 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第4期1840-1846,共7页
采用克隆测序、生物信息学分析及表达谱检测等方法,分析了家蚕Bmβ-COP基因的结构和功能特征,探索其与丝蛋白合成的关系。结果表明,Bmβ-COP基因在家蚕基因组中为单一拷贝,也没有选择性剪接异构体存在;在不同产丝能力的家蚕品种及其不... 采用克隆测序、生物信息学分析及表达谱检测等方法,分析了家蚕Bmβ-COP基因的结构和功能特征,探索其与丝蛋白合成的关系。结果表明,Bmβ-COP基因在家蚕基因组中为单一拷贝,也没有选择性剪接异构体存在;在不同产丝能力的家蚕品种及其不同组织间没有表达差异;Bmβ-COP基因与不同家蚕品种间丝物质生产能力差异没有直接关联,但破坏它会影响丝腺的发育和功能,对家蚕丝蛋白合成、分泌产生不利影响。 展开更多
关键词 家蚕 bmβ-COP基因 膜泡运输 选择性剪接 丝蛋白
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家蚕Bmtdh基因的克隆与序列分析
18
作者 李春峰 范晓东 +2 位作者 刘文明 黄科 周泽扬 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期553-561,共9页
克隆了家蚕苏氨酸脱氢酶基因(Bmtdh),其cDNA长1 310 bp(No.ABA43639.1),包括227 bp 5′-UTR和1 026 bp的完整开放读码框(ORF)。Bmtdh在家蚕基因组上以单拷贝形式存在,编码342个氨基酸,其Ile29-Val322区域是一个完整的表面异构酶功能域... 克隆了家蚕苏氨酸脱氢酶基因(Bmtdh),其cDNA长1 310 bp(No.ABA43639.1),包括227 bp 5′-UTR和1 026 bp的完整开放读码框(ORF)。Bmtdh在家蚕基因组上以单拷贝形式存在,编码342个氨基酸,其Ile29-Val322区域是一个完整的表面异构酶功能域。表达谱分析与EST数据的分析表明,Bmtdh在丝腺和卵巢中的转录水平高于其它组织,并且Bmtdh在家蚕4龄眠期、5龄早期的转录水平也很高,而在卵期(G2胚胎)和1龄早期没有检测到其转录表达,表明Bmtdh基因可能参与了蚕丝蛋白的合成过程。 展开更多
关键词 家蚕 苏氨酸脱氢酶基因 丝腺 克隆 序列分析
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家蚕bHLH转录因子BmASCa_4基因的生物信息学分析及功能预测
19
作者 王琦 常虹 王荣 《长治学院学报》 2011年第5期21-25,共5页
家蚕的基因测序工作已于2003年10月完成,但是对于其bHLH转录因子BmASCa4基因的生物信息学分析及功能预测鲜有报道。文章利用生物信息学的方法,就家蚕bHLH转录因子BmASCa4基因结构及功能进行了分析,研究结果表明:家蚕bHLH转录因子BmASCa... 家蚕的基因测序工作已于2003年10月完成,但是对于其bHLH转录因子BmASCa4基因的生物信息学分析及功能预测鲜有报道。文章利用生物信息学的方法,就家蚕bHLH转录因子BmASCa4基因结构及功能进行了分析,研究结果表明:家蚕bHLH转录因子BmASCa4基因结构信息只来自一条EST序列,该基因在编码区内无内含子;BmASCa4由l'sc基因编码,在促进神经前体的形成中发挥作用。 展开更多
关键词 家蚕 bHLH bmASCa4 生物信息学
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家蚕蚕蛹过敏原CPH30的表达、纯化、免疫学鉴定及B细胞抗原表位预测 被引量:4
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作者 胡维 梁志林 +1 位作者 王良录 刘志刚 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期377-381,共5页
【目的】克隆、表达纯化出家蚕Bombyx mori蚕蛹过敏原蛋白CPH30(cuticular protein hypothetical 30 precursor),并对其进行免疫学鉴定及B细胞抗原表位预测。【方法】通过蛋白组学方法分析CPH30蛋白的潜在过敏原性,人工化学合成该蛋白基... 【目的】克隆、表达纯化出家蚕Bombyx mori蚕蛹过敏原蛋白CPH30(cuticular protein hypothetical 30 precursor),并对其进行免疫学鉴定及B细胞抗原表位预测。【方法】通过蛋白组学方法分析CPH30蛋白的潜在过敏原性,人工化学合成该蛋白基因,将基因连接到p ET-28a载体上,重组质粒转化至大肠杆菌Escherichia coli BL21,IPTG诱导基因表达。通过镍亲和层析获取高纯度蛋白,用Western blot方法对蛋白进行免疫学鉴定。通过DNAStar软件分析其潜在的B细胞表位。【结果】成功构建出CPH30基因的表达载体;表达纯化出CPH30蛋白,SDS-PAGE电泳结果显示分子量为25 k Da左右;Western blot结果显示,CPH30蛋白与家蚕过敏患者血清具有Ig E结合性,证明CPH30具有免疫原性;利用DNAStar软件成功分析出氨基酸序列第57-69和150-158位为潜在的B细胞表位。【结论】成功克隆表达出CPH30蛋白,并成功鉴定出其免疫原性,为家蚕蚕蛹过敏反应性疾病的特异性诊断和疫苗治疗奠定理论基础。 展开更多
关键词 家蚕 CPH30蛋白 过敏原 免疫学鉴定 b细胞表位 免疫原性
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