指纹图谱技术结合化学计量学评价五味子醇提物质量探索研究

目的:优化五味子乙醇提取工艺,建立其醇提物HPLC指纹图谱并结合化学计量学综合分析其质量。方法:基于单因素试验,采用L9(34)正交试验设计,系统研究了乙醇浓度、提取时间、提取次数及料液比等因素对五味子中五味子醇甲和五味子乙素的提取率产生的影响。按最优提取工艺制备9批五味子乙醇提取物,建立其高效液相色谱(HPLC)指纹图谱。以共有峰峰面积为变量,结合化学计量学方法包括系统聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)法对9批五味子醇提物质量进行分析。结果:确定最佳提取工艺为:采用80%乙醇作为溶剂,料液比为1:10,进行2次回流提取,每次持续1 h。在9批五味子提取物指纹图谱中共有32个共有峰,并成功鉴定出X18(五味子醇甲)、X29(五味子甲素)和X32(五味子乙素),相似度高于0.94。HCA和PCA结果均显示9批样品有聚为四类的趋势,共有峰X1、X2、X3、X13、X17、X19、X21和X30是引起样品间差异的主要化学成分。结论:所优选的提取工艺稳定可行,不同批次五味子提取物的质量一致性较高,但不同样品间仍存在一定差异。

Extraction and Application Prospects of Artemisia leucophylla(Turcz. ex Bess.) C.B.Clarke

The main components of Artemisia leucophylla(Turcz.ex Bess.) C.B.Clarke extract are volatile oils,flavonoids,lignans,terpenoids,etc.Studies have shown that A.leucophylla has bactericidal,anti-inflammatory,anti-oxidant,anti-ultraviolet functions,and it has large development space and application value in many fields.This paper first introduced the growth resource distribution,active component extraction method,composition and efficacy of A.leucophylla,and analyzed the application prospects in daily necessities,in order to provide reference for the in-depth research,development and utilization of A.leucophylla.

基于液质联用技术对大叶柴胡中多炔烯类化合物神经毒性的代谢组学研究

目的研究大叶柴胡中多炔烯类化合物的神经毒性机制,评价柴胡属植物的用药安全性。方法采用超高效液相色谱串联四级杆-飞行时间质谱技术并结合现代药理学的研究方法,对大叶柴胡中多炔烯类化合物给药后大鼠的脑脊液进行代谢组学研究,探讨多炔烯类化合物的可能毒性作用机制。结果结合模式识别和多元统计分析,最终共鉴定出4个潜在生物标志物,柴胡毒素给药组1-(3,4-二甲氧苯基)-1,2-乙二醇-1-氧基-b-D-糖苷和D(L)-鸟氨酸-L-丙氨酸的含量显著上升,3-氧代-3-脲基丙酸酯和辛胺含量显著下降,提示多炔烯类毒素可能作用于氧化应激与脂代谢通路继而引起毒性反应。结论本研究揭示了大叶柴胡中多炔烯类化合物神经毒性的潜在机制,为柴胡属及其他中药临床前毒性研究提供参考。

响应面法优化酶解-超声双辅助双水相体系制备五味子提取物

在单因素实验的基础上,以五味子乙素得率为响应值,采用响应面法优化了酶解-超声双辅助双水相体系制备五味子提取物的工艺条件,并比较了双水相体系、酶辅助双水相体系、超声辅助双水相体系及酶解-超声双辅助双水相体系等方法对五味子乙素的提取效果。结果表明,酶解-超声双辅助双水相体系制备五味子提取物的最佳条件为:乙醇体积分数27.45%、硫酸铵质量分数25.82%、超声时间56 min、液固比30.98∶1(mL∶g),在此条件下,五味子乙素得率为1.77 mg·g^(-1),与模型预测值(1.76 mg·g^(-1))接近;酶解-超声双辅助双水相体系制备的五味子乙素得率显著高于双水相体系、酶辅助双水相体系及超声辅助双水相体系,说明前处理可有效促进双水相体系对五味子乙素的富集。

大叶柴胡愈伤组织继代培养及其RAPD分析

以野生的大叶柴胡为材料,通过离体培养诱导产生愈伤组织,利用RAPD分子标记的方法,在DNA水平上分析野生植株和愈伤组织的遗传变异.从13个10碱基引物中筛选出7个引物,对它们的PCR扩增结果进行了分析.结果表明柴胡愈伤组织与野生苗相比出现了DNA水平变异.

北五味子乙素体外抗氧化及抑菌作用的研究

对北五味子乙素进行抗氧化及体外抑菌实验。结果表明:北五味子乙素对自由基的清除效果明显,其中对.OH清除作用大于相同浓度的VC,其半数清除浓度为0.2mg.mL-1;对O2-.清除作用小于VC,其半数清除浓度为0.24mg.mL-1。北五味子乙素提取液对金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、沙门氏菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌均有一定的抑制作用,其中对白色念珠菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用最强,最低抑菌浓度为0.25mg.mL-1,对根霉、黑曲霉、南阳酵母无明显抑菌活性。

北五味子乙素清除自由基及体外抑菌作用的研究

对五味子乙素进行清除自由基及体外抑菌实验。结果表明:五味子乙素对自由基的清除效果明显,其中对羟自由基清除作用大于相同质量浓度的VC,其半数清除质量浓度为0.2mg/mL;对超氧阴离子自由基清除作用小于VC,其半数清除质量浓度为0.24mg/mL。五味子乙素提取液对金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、沙门氏菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌均有一定的抑制作用,其中对白色念珠菌和金黄色葡萄球菌的抑制作用最强,最低抑菌浓度为0.25mg/mL,对根霉、黑曲霉、南洋酵母无明显抑菌活性。

RP-HPLC测定南、北五味子中三种木脂素类成分的含量

采用反相高效液相色谱（ RP-HPLC）法检测五味子中三种木脂素类成分的含量。色谱柱为Agilent C18色谱柱（250 mm ×4.6 mm，5μm），流动相为甲醇-水（75：25），流速1.0 mL/min，检测波长250 nm，柱温30℃，进样量10μL。结果表明，3种成分的进样量分别在4~800、4~400、4~400μg/mL范围与各自峰面积积分值呈良好的线性关系（ r 分别为0.9993，0.9998，0.9999），平均回收率分别为98.44%，98.86%和97.84%，RSD分别为1.24%，1.87%和1.18%（n 均为5）。北五味子中五味子醇甲、五味子甲素和五味子乙素含量分别为7.196，1.344，3.476 mg/g，南五味子中不含五味子醇甲，五味子甲素、五味子乙素的含量依次为59.065，3.213 mg/g。该方法快速、准确、重现性好，可用于南、北五味子中木脂素类成分的分析，评价不同来源五味子的质量。

Two new C-glucoside oxanthrones from Rumex gmelini

Two new C-glucoside oxanthrones, 6-methoxyl-10-hydroxyaloin A （1） and 6-methoxyl-10-hydroxyaloin B （2）, were isolated from the roots of Rumex gmelini Turcz. Their structures were elucidated on the basis of spectroscopic techniques and chemical means C 2009 Zhen Yue Wang. Published by Elsevier B.V. on behalf of Chinese Chemical Society. All fights reserved.

正交试验法优选五味子的提取工艺

目的研究五味子提取的最佳工艺条件。方法以提取液中五味子乙素含量为指标,用正交设计优选醇提工艺。结果与结论加6倍量80%乙醇提取3次,3h/次为醇提最佳工艺条件。

基于实时景深扩展-大图影像拼接与偏振光显微鉴别技术的柴胡及其4种混淆品的生药学研究

目的基于实时景深扩展-大图影像拼接与偏振光显微鉴别技术,对柴胡2个基原品种柴胡Bupleurumchinense或狭叶柴胡B.scorzonerifolium及4种市场常见混淆品(竹叶柴胡B.marginatum、藏柴胡B.marginatumvar.stenophyllum、锥叶柴胡B.bicaule、大叶柴胡B.longiradiatum)的性状、微性状及显微鉴别特征进行系统的对比研究,为柴胡的鉴别及质量控制提供科学依据。方法性状鉴别研究采用性状及微性状鉴别法,显微鉴别研究采用普通光明场与偏振光暗场对比观察法,结合实时景深扩展成像、大图影像拼接技术,拍摄获取药材组织横切面全息彩色影像图。结果获取了柴胡及其混淆品的性状及微性状影像数据,首次获取了该类药材横切面显微鉴别普通光及偏振光全息彩色影像数据。对柴胡2个基原品种及其4种混淆品进行了系统的生药学研究。与《中国药典》2020年版相比,性状鉴别补充研究了精细微性状鉴别特征,对柴胡药材根或根茎的上、中、下部位横切面进行对比观察,确定了柴胡药材根或根茎上部横切面组织构造最具特征性,为最佳的横切面显微研究部位。结论可以综合应用性状、微性状、横切面及粉末显微鉴别特征鉴定柴胡及其4种混淆品,特别是药材横切面组织偏振光全息彩色影像显微特征具有显著鉴别意义。

五味子中1个新的联苯环辛烯类木脂素

目的研究中药五味子Schisandra chinensis的木脂素类化学成分。方法采用硅胶柱色谱、中压反相柱色谱、半制备和制备液相对五味子中富含木脂素类成分的石油醚萃取部位进行分离、纯化,通过波谱数据鉴定化合物的结构。结果从五味子中分离得到了26个化合物,分别鉴定为绿叶五味子素B(1)、sphaerandrin A(2)、sieverlignan E(3)、arisanschinin G(4)、widdaranalF(5)、戈米辛A(6)、戈米辛B(7)、戈米辛D(8)、戈米辛G(9)、(-)-戈米辛K_(1)(10)、(+)-戈米辛K_(2)(11)、(-)-戈米辛L_(1)(12)、(+)-戈米辛M_(1)(13)、戈米辛N(14)、当归酰戈米辛H(15)、当归酰戈米辛O(16)、当归酰戈米辛Q(17)、苯甲酰戈米辛Q(18)、五味子醇甲(19)、五味子甲素(20)、五味子乙素(21)、五味子丙素(22)、五味子酯丙(23)、neglschisandrin E(24)、7(18)-dehydroschisandro A(25)、安五脂素(26),其中24个为联苯环辛烯类木脂素(1~4、6~25)。结论化合物1为新化合物,化合物2~5为首次从该植物中分离得到。

基于中药炮制“醋制入肝”理论醋五味子对急性肝损伤作用谱效关系研究

目的以“醋制入肝”中药炮制理论为基础,采用HPLC法分析不同醋制时间五味子成分变化,探讨成分变化与抗肝损伤作用关联,明确醋五味子保肝活性物质基础。方法应用HPLC法建立10批生五味子及醋制1、2、3、4、5、6 h五味子指纹图谱,检测五味子醇甲、五味子乙素、五味子甲素、丙烯酰胺、5-羟甲基糠醛(5-HMF)、五味子酯甲水平。以CCl4诱导小鼠急性肝损伤为动物模型,结合血清生化指标天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的变化,运用灰色关联度法联合偏最小二乘法分析其保肝作用成分与药效之间的关联性。结果10批五味子指纹图谱中,以五味子醇甲色谱峰为参比峰,标定出共有峰23个,其中特征峰6个;对10批生五味子及不同醋制时间下五味子指纹图谱与对照指纹图谱相似度组内对比发现,相似度均在0.913~0.999;随着蒸制时间的延长,五味子中5-HMF整体呈上升趋势;醋制3 h时五味子酯甲较生五味子质量分数略有增加,而后随着时间延长逐渐减小;醋制1~6 h内五味子醇甲、五味子甲素和五味子乙素质量分数较生五味子变化不大。与模型组比较,醋制2、3、6 h组AST、ALT、TNF-α、MDA水平显著降低,SOD水平显著升高(P<0.01);醋制1 h组AST、MDA水平显著降低,SOD水平显著升高(P<0.01);醋制4 h组AST、ALT水平显著降低,SOD水平显著升高(P<0.01);醋制5 h组AST、ALT、TNF-α水平显著降低,SOD水平显著升高(P<0.01)。组间对比发现,醋制3 h组药效学指标明显较好,随着炮制时间延长,与醋制3 h组比较,醋制4、5、6 h组血清中AST、ALT、TNF-α、MDA水平有不同程度升高,SOD含量下降。故以醋制3 h五味子指纹图谱与药效学之间关联性建立谱-效关系研究,经灰色关联度法联合偏最小二乘法分析,5-HMF、五味子乙素、五味子醇甲为改善小鼠肝损伤的主要贡献成分。结论醋制3 h五味子对CCl4诱导急性肝损伤小鼠的作用效果最佳,其中五味子乙素、5-HMF及五味子醇甲对小鼠生化指标影响较显著。

基于ITS2条形码鉴定柴胡与大叶柴胡

为准确鉴定柴胡与大叶柴胡,该研究共48份柴胡、大叶柴胡药材,扩增ITS2序列并进行测序,采用CodonCode Aligner软件进行序列拼接,用软件MEGA5.0分析比对确定不同的单倍型,并基于K2P模型进行遗传距离等分析。采用相似性搜索法、最近距离法、构建邻接树(NJ树)法对柴胡与大叶柴胡进行鉴定。结果显示柴胡与大叶柴胡种间最小K2P距离为0.049,远远大于柴胡种内最大K2P距离0.013。NJ树显示大叶柴胡独自聚为一支,可明显与柴胡区分。因此应用ITS2条形码可以准确鉴定柴胡及大叶柴胡。

五味子乙素的药理作用及其分子机制的研究进展

五味子是木兰科植物五味子的干燥成熟果实,是著名的滋补性中药,习称"北五味子"。其单体活性成分五味子乙素具有保肝、抗炎、抗肿瘤及抗氧化等多种药理作用,临床广泛应用于肝病的防护与治疗、心脑血管疾病、多种神经退行病变等领域。现对五味子乙素的药理作用、安全性及生物利用度等相关国内外最新研究现状作一系统综述,为进一步研究、开发和合理应用五味子乙素提供参考。

五味子果核的色泽与化学成分的相关性研究

目的测定五味子果核表面颜色的数值即L*、a*、b*值与五味子果核有效成分的量,研究五味子果核色泽与化学成分的相关性。方法用数理统计方法即运用数理统计软件SPSS 20.0建立五味子果核表面色度值即L*、a*、b*值与五味子甲素、五味子乙素、五味子醇甲、五味子酯甲之间的多元线性回归方程,再进行F检验,确定各色度值分别对五味子有效成分的影响程度。结果色度值L*与五味子甲素呈显著性负相关(r≥0.5),其它色度值与木脂素呈极低度(r≤0.2)或低度(0.2<r<0.5)相关。结论利用五味子的色度值可推测其有效成分量高低,可用于五味子商品等级的划分,为更好地评价五味子质量提供科学依据。

兴安升麻根茎的化学成分研究

目的研究兴安升麻Cimicifuga dahurica根茎的化学成分。方法利用正、反相硅胶柱色谱、制备薄层色谱、Sephadex LH-20凝胶色谱等方法对兴安升麻乙醇提取物进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据对化合物的结构进行鉴定。结果共分离得到12个化合物,分别鉴定为升麻醇(1)、异阿魏酸(2)、升麻槭素B(3)、阿魏酸(4)、升麻醇-3-O-β-D-木糖苷(5)、25-O-乙酰基升麻醇-3-O-β-D-木糖苷(6)、24-O-乙酰基-异北升麻醇-3-O-β-D-木糖苷(7)、E-3-(3″-甲基-2″-亚丁烯基)-2-吲哚酮(8)、甲基阿魏酸(9)、升麻醇-3-酮(10)、25-O-乙酰基升麻醇(11)、β-谷甾醇(12)。结论化合物9为首次从该属植物中分离得到,化合物3、7、10为首次在该植物中分离得到。

RP-HPLC法测定保肝丸中五味子甲、乙、丙素及熊果酸

目的 建立RP-HPLC法测定保肝丸中五味子甲、乙、丙素及熊果酸的量,对保肝丸的制剂质量提供保障。方法 采用ZORBAX SB-C_（18）（150 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱;流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液（67：33）,体积流量1.0mL/min;紫外检测波长为210 nm;柱温30℃;进样量10μL。结果 五味子甲、乙、丙素及熊果酸的最低检测质量浓度分别为0.016、0.019、0.020、0.025 mg/L,线性范围分别为3.906-250.000、5.323-340.000、3.225-205.000、5.323-340.000 mg/L。供试样品中五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素及熊果酸的平均回收率分别为100.79%、101.09%、101.26%、101.16%;精密度RSD分别为1.76%、1.69%、1.80%、1.86%;重复性试验RSD分别为1.77%、1.66%、1.49%、1.56%;稳定性试验分别为1.61%、1.39%、1.60%、1.56%。保肝丸（0.560 mg）含五味子甲、乙、丙素及熊果酸平均量分别为0.444、1.066、0.3125、1.068μg/丸。结论 该方法简便、灵敏度高、重复性好、回收率高,是检测五味子甲、乙、丙素及熊果酸质量浓度的可信方法。

宽苞糙苏根降三萜化学成分研究

目的研究宽苞糙苏Phlomis umbrosa var. latibracteata根降三萜类化学成分。方法用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、以及制备高效液相色谱等多种色谱分离手段进行分离纯化,用有机波谱手段鉴定分离得到的化合物结构。结果从宽苞糙苏根的95%乙醇提取物中分离得到8个降三萜类化合物,分别鉴定为糙苏醛A(1)、糙苏酮(2)、糙苏四醇A(3)、糙苏四醇B(4)、糙苏六醇A(5)、糙苏六醇B(6)、糙苏六醇C(7)、糙苏六醇D(8)。结论化合物1为新化合物,化合物3、4、6~8为首次从宽苞糙苏中分离得到的化合物,这些化合物表现出一定的肿瘤细胞抑制活性。