Two New Isobutyltartrate Monoesters from Coeloglossum viride (L.) Hartm. var. bracteatum (Willd.) Richter

Two new isobutyltartrate monoesters, coelovirin A (1) and B (2), were isolated from the rhizomes of Coeloglossum viride (L.) Hartm. var. bracteatum (Willd.) Richter (Orchidaceae). Their structures were elucidated as (2R, 3S)-2-isobutyltartrate1-(4-b-D-glucopyranosyloxybenzyl) ester 1 and (2R, 3S)-2-isobutyltartrate4-(4-b-D-glucopyranosyloxybenzyl) ester 2 on the basis of physical constants and spectroscopic methods including 2D NMR techniques.

HPLC法测定远志中黄曲霉毒素B1含量的不确定度评定

为评定高效液相色谱法测定远志中黄曲霉毒素B1含量的不确定度,依据国家计量技术规范JJF 1059.1—2012《测量不确定度评定与表示》,对随机选取的6个远志样品,建立数学模型,从标准溶液稀释、样品称量、样品最终定容体积和仪器测定重复性等方面分析不确定度来源,量化不确定度分量,计算合成不确定度和扩展不确定度.实验结果表明远志中黄曲霉毒素B1测定结果合成标准不确定度为0.01639μg/kg,扩展不确定度0.03278μg/kg.不确定度评定结果表明:HPLC法对远志中黄曲霉毒素B1含量的测定数据可靠,远志中黄曲霉毒素B1含量的测量不确定度主要来源于重复性实验、标准曲线的拟合、液相色谱仪的使用.

南柴胡地上部分不同极性部位抗菌作用及活性成分相关性研究

目的 探究南柴胡地上部分不同极性部位抗菌作用及活性成分相关性,阐明抗菌药效物质。方法 采用不同浓度乙醇提取及体积分数为95%的乙醇溶液提取后用乙酸乙酯和正丁醇萃取得到10个极性部位,以金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、大肠杆菌(Escherichia coli)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、白色念珠菌(Candida albican)为对象,以药敏试验、最低抑菌浓度(minimun inhibitory concentration, MIC)、最小杀菌浓度(minimun bactericidal concentration, MBC)为指标,阐释抗菌活性部位。通过UPLC-Q-TOF-MS/MS对不同极性部位进行分析,确定共有成分,用双变量相关分析和灰色关联度分析,建立共有峰峰面积与MIC之间的相关性,筛选药效物质。结果 乙酸乙酯萃取部位为最佳抗菌部位。原儿茶酸、绿原酸、金丝桃苷、亚油酸、山奈酚、异槲皮苷、水仙苷、山奈素、柴胡色原酮酸9个成分与抗菌作用高度相关。结论 本研究为南柴胡地上部分在抗菌产品开发方面提供理论支撑。

南柴胡多糖分离与组成的初步研究

南柴胡粗多糖经糖腈乙酰酯化后采用高分辨毛细管气相色谱分析 ,发现南柴胡粗多糖主要由 L -阿拉伯糖、核糖、D-木糖、D-甘露糖、D-葡萄糖、D-半乳糖等单糖组成 ,校正因子法测得它们的摩尔比为 0 .10 6∶ 2 .6 5 2∶4.0 70∶ 0 .5 19∶ 0 .930∶ 2 .5

火焰原子吸收法测定栽培柴胡中六种金属元素含量的研究

采用浓硝酸-高氯酸（V：V=4：1）常压微沸条件下消解柴胡样品，应用火焰原子吸收法测定栽培柴胡中的金属元素Ca，Mg，Fe，Cu，Zn，Pb的含量。研究了测定不同元素的仪器最佳工作条件及溶液介质对测定结果的影响，并做了方法的准确性和精密度考察。结果表明，栽培柴胡中Ca，Mg，Fe，Cu，Zn的含量分别为5588．9，1790．5，869．3，78．4，44．3μg·g^-1，Pb未检出。方法的加标回收率为99．57％～102．10％，相对标准偏差（n=9）为0．18％～2．26％。测定方法简单易行，方便快捷，结果可靠。

南柴胡中黄酮类化合物的提取工艺优选

为优选南柴胡中总黄酮提取最佳工艺,以黄酮质量分数为考察指标,通过正交实验对水浴提取法、超声波提取法和微波提取法3种方法进行了优化。水浴法的工艺条件为:以南柴胡为原料,φ(EtOH)=50%为提取液,m(南柴胡)∶m(提取液)=1∶8,在90℃水浴中回流提取1 h;在此条件下,w(黄酮)=1.012%。超声波的工艺条件为:以南柴胡为原料,φ(EtOH)=50%为提取液,m(南柴胡)∶m(提取液)=1∶10,每次超声1 h,重复提取3次(不更换提取液);在此条件下,w(黄酮)=0.701%。微波的工艺条件为:以南柴胡为原料,φ(EtOH)=60%为提取液,m(南柴胡)∶m(提取液)=1∶16,每次微波照射15 s,重复照射6次(不更换提取液);在此条件下,w(黄酮)=0.701%。

北柴胡及春柴胡挥发油的解热作用比较

目的:通过解热作用比较北柴胡及春柴胡挥发油的差异。方法:采用干酵母所致大鼠发热模型及内毒素所致家兔发热模型,观察北柴胡及春柴胡的解热作用。结果:北柴胡及春柴胡均可降低干酵母所致大鼠体温升高和降低内毒素所致家兔体温升高,与模型组比较差异有显著性(P<0.05)。结论:北柴胡及春柴胡均具有良好的解热作用,提示春柴胡在临床上可以替换北柴胡。

不同产地狭叶柴胡中柴胡皂苷含量的测定

目的测定不同产地狭叶柴胡中柴胡总皂苷及柴胡皂苷a的含量。方法采用可见分光光度法和高效液相色谱法。结果不同产地狭叶柴胡药材中的柴胡总皂苷和柴胡皂苷a的含量差异较大,且同一药材中柴胡总皂苷与柴胡皂苷a含量的高低不一致,未显示出相关性。结论为保证狭叶柴胡药材的质量和疗效,应制定药材中柴胡皂苷的限量标准。

狭叶柴胡中黄酮类化合物含量及其动态变化研究

【目的】揭示不同物候期狭叶柴胡茎、叶等不同器官中黄酮类化合物含量及其动态变化规律,为其综合开发利用提供科学依据。【方法】采用紫外可见光分光光度法测定狭叶柴胡各器官中黄酮类化合物的含量,并比较不同物候期狭叶柴胡茎、叶中黄酮类化合物含量变化趋势。【结果】在狭叶柴胡不同器官中,黄酮类化合物主要积累在茎、叶、花及幼嫩果实中,其中以叶中的含量最高,为2.259%;而根和成熟果实中的含量很低,分别为0.032%和0.046%。在茎、叶的发育过程中,盛花期的黄酮类化合物含量最高,坐果时含量有所下降,果实成熟时含量又开始上升,至枯萎前期,两者的黄酮类化合物含量又恢复到一个较高水平。【结论】对狭叶柴胡中黄酮类物质的开发利用应重点选择叶片,并在狭叶胡植株枯萎前期采收其地上部分,以达到综合利用的目的。

春柴胡总黄酮含量及HPLC指纹图谱研究

目的:建立春柴胡总黄酮含量分析方法及黄酮类成分的高效液相色谱指纹图谱。方法:采用可见分光光度法测定总黄酮的含量,采用高效液相色谱法对不同采收期及不同部位春柴胡中黄酮类成分进行分析,建立春柴胡的指纹图谱。结果:4月到5月采收的春柴胡黄酮含量较高;总黄酮含量为叶>全草>茎>根。应用"中药色谱指纹图谱相似度评价软件"生成了春柴胡药材的共有模式图,共有12个共有峰,各共有峰之间分离度较好,精密度、重复性和稳定性试验中各共有峰相对保留时间和相对峰面积的RSD均小于3%,符合指纹图谱要求。结论:不同采收期和不同药用部位春柴胡的黄酮类成分差异显著,本研究为春柴胡资源的综合利用开发提供了科学依据。

狭叶柴胡营养器官中柴胡皂苷和黄酮类化合物的积累部位及含量比较

采用植物解剖学、组织化学定位和紫外分光光度计分析方法,对狭叶柴胡各营养器官(根、茎、叶)的结构特征、营养器官中柴胡皂苷和黄酮类化合物的积累部位及其含量进行比较研究。结果表明:(1)狭叶柴胡根由周皮、中柱鞘薄壁组织和次生维管组织组成,茎由表皮、皮层和维管柱组成,叶为等面叶结构,其营养器官的结构均表现出对旱生环境的适应性。(2)组织化学定位显示,柴胡皂苷在狭叶柴胡根中主要分布在维管形成层和次生韧皮部及次生木质部靠近维管形成层的木薄壁细胞中,在茎中主要分布在表皮、皮层、维管形成层及韧皮薄壁细胞中,在叶中主要分布于表皮和叶肉中;狭叶柴胡的黄酮类化合物在茎中主要分布于表皮、棱角处的厚角组织及部分皮层细胞中,在叶中主要分布于表皮和位于叶缘及下表皮内的厚角组织中,在根内分布很少。(3)定量分析表明,柴胡总皂苷在狭叶柴胡根、茎、叶中的含量分别为2.635%、1.045%和0.981%;而黄酮类化合物在根、茎、叶中的含量分别为0.032%、1.212%和2.259%;定量分析结果与组织化学实验结果相符。研究表明,柴胡总皂苷在狭叶柴胡的根中含量最高,支持《中国药典》以根入药的结论;而且狭叶柴胡叶中的黄酮类化合物含量较高,建议对狭叶柴胡的叶进行综合开发利用。

氮磷钾肥对柴胡产量的影响

目的：研究氮肥（N）、磷肥（P2O5）、钾肥（K2O）配施对柴胡产量的影响。方法：采用三因子二次回归饱和D-最优设计。结果：柴胡生物量的最优施肥方案为氮肥120．3～333．3kg／hm^2、磷肥0～939．45kg／hm^2、钾肥0～227．25kg／hm^2；根冠比的最优施肥方案为氮肥62．66～333．3kg／hm^2、磷肥0—922．54kg／hm^2、钾肥0～227．25kg／hm^2；根产量的最优施肥方案为氮肥34．5～333．3kg／hm^2、磷肥0—939．45kg／hm^2、钾肥0-227．25kg／hm^2。结论：柴胡的产量与氮、磷、钾的施肥量有紧密联系。

柴胡超临界二氧化碳萃取物化学成分气相-质谱联用分析

目的 :研究柴胡超临界 CO2 萃取物的化学成分。方法 :应用气 /质联用技术对柴胡超临界 CO2 萃取物进行分析。结果 :从萃取物中分离并鉴定出 11种化合物 ,其中主要组分为饱和及不饱和脂肪酸 ,含量占气化产物总量的 96 .2 %。结论 :本研究为柴胡的开发利用提供了实验依据。

狭叶柴胡愈伤组织诱导的研究

目的:研究诱导狭叶柴胡愈伤组织产生的条件。方法:通过使用不同激素(6-BA,2,4-D,KT)不同配比,优选诱导愈伤组织的最佳培养基。结果:最佳诱导条件为:MS培养基+6-BA 3 mg/L,2,4-D 0.1 mg/L,KT 0.6 mg/L,在最佳诱导条件下,愈伤组织生长良好。结论:调节植物激素的配比,可有效的诱导植物愈伤组织的产生。

中药远志对慢性应激抑郁大鼠BDNF及其受体TrkB mRNA表达的影响

目的探讨远志YZ-50对慢性应激大鼠脑源性神经营养因子BDNF及其受体TrkB mRNA表达的影响。方法采用健康雄性Ⅱ级Wistar大鼠慢性应激抑郁模型,一步法抽提总RNA,分光光度计测光密度值。β-actin做内参照,RT-PCR技术检测BDNF及其受体TrkB mRNA在慢性应激大鼠海马组织的表达,从分子水平探讨在给予远志YZ-50后BDNF及其受体TrkB mRNA在慢性应激抑郁大鼠海马组织的变化规律。本实验共设5组,分别是空白对照、慢性应激模型组、地昔帕明、YZ-50低剂量组、YZ-50高剂量组。结果YZ-50各剂量组均显示活性,能显著提高慢性应激抑郁大鼠海马区BDNF及其受体TrkB mRNA的表达,与模型组相比具有显著性差异。高剂量组作用最好,与模型组相比P<0.01。结论YZ-50能够提高慢性应激抑郁模型大鼠海马区BDNF及其受体TrkB mRNA的基因转录,加强神经元营养,促进应激损伤的神经元恢复,从而改善应激抑郁模型大鼠的抑郁症状,有效发挥抗抑郁作用。

1株具有抗肝癌活性的狭叶柴胡内生真菌的鉴定

目的对1株具有抗肝癌活性的狭叶柴胡内生真菌CHS4进行菌种鉴定,并对其抗肝癌活性进行初步检测。方法采用传统分类学方法及电子显微镜观察对CHS4进行形态鉴定,并采用真菌鉴定通用引物V9D与LS266对其基因组DNA进行扩增得到ITS序列,将已经测得的序列结果与Gen Bank中已知序列进行Blast分析,从而进行分子鉴定。利用MTT法对菌CHS4的乙醇粗提物进行抗肝癌活性检测。结果内生真菌CHS4经鉴定为链格孢属真菌互隔交链孢霉(Alternaria alternata);该菌株发酵液的乙醇粗提物对肝癌细胞HepG-2的抑制作用与其浓度成正相关,且IC50值为75.11μg/m L。结论从狭叶柴胡中分离到一株具有抗肝癌作用的内生真菌CHS4,可作为生产抗肝癌药物的候选资源。

北柴胡及春柴胡挥发油的抗炎镇痛作用的实验研究

目的:比较北柴胡与春柴胡挥发油抗炎镇痛作用的差异。方法:采用小鼠耳廓肿胀和小鼠腹腔毛细血管通透性实验,比较北柴胡与春柴胡的抗炎作用;以热板法和扭体法比较北柴胡与春柴胡的镇痛作用。结果:北柴胡10 g.kg-1剂量组、春柴胡5 g.kg-1、10 g.kg-1剂量组可对抗二甲苯所致小鼠耳肿胀,可减少醋酸致小鼠毛细血管通透性增加,与模型组比较有显著性差异;北柴胡10 g.kg-1剂量组、春柴胡10 g.kg-1剂量组还可减少小鼠扭体次数,提高小鼠的痛阈值。结论:北柴胡和春柴胡均具有一定的抗炎作用,春柴胡抗炎疗效优于北柴胡。北柴胡和春柴胡对化学性和物理性刺激具有一定的镇痛作用,但两者疗效无显著性差异。

不同因素对狭叶柴胡悬浮细胞生长的影响

为了通过悬浮细胞培养的方法获取柴胡的生物活性成分,本文对愈伤组织接种量、摇瓶溶氧水平、茉莉酸甲酯可能影响悬浮细胞生长的因素进行了考察,并建立了一个快速生长的狭叶柴胡悬浮细胞培养体系。实验结果表明狭叶柴胡悬浮细胞生长最佳条件为:无菌条件下狭叶柴胡愈伤组织接种量为2.0g;250mL锥形瓶中添加MS培养液体积为100mL;培养液中加入的茉莉酸甲酯浓度为22.5mg·L-1。该研究表明通过调节接种量、培养液体积、茉莉酸甲酯浓度,可有效地促进狭叶柴胡悬浮细胞的生长,为今后柴胡生物活性成分的研究奠定基础。

柴胡皂甙的组织化学研究

对北柴胡和南柴胡进行了柴胡皂甙组织化学定位和定量分析,确定柴胡根中形成层以外的皮部皂甙含量较高,木质部含量甚微,柴胡皂甙浓度变化是与柴胡根的皮部与木部面积之比成正相关,而与根半径成负相关。

狭叶柴胡愈伤组织原生质体的制备及纯化

[目的]以狭叶柴胡愈伤组织为材料,旨在筛选出适合愈伤组织原生质体制备及纯化的最优条件。[方法]研究了酶的种类及浓度、稳渗剂种类、酶解时间及蔗糖分离液浓度等因素对狭叶柴胡愈伤组织原生质体制备和纯化的影响。[结果]最佳适宜条件为:2%纤维素酶+1%离析酶,0.6mol·L^(-1)甘露醇为稳渗剂,27℃避光预裂解2h后酶解4h。在最优条件下,原生质体产量可达1.26×10~6个·g-1。在上述条件不变情况下,用21%蔗糖溶液进行提纯,得到的原生质体纯化结果较好,纯化后原生质体产量可达0.75×10~6个·g-1。[结论]该研究结果为进一步利用原生质体进行狭叶柴胡基因工程工作奠定了技术基础。