茶叶提取物EGCG对B16小鼠黑素瘤细胞的影响

采用倒置显微镜观察茶叶中提取物EGCG对B16小鼠黑素瘤细胞形态的影响,亚甲基蓝染色法测定EGCG对B16细胞增殖率的影响,L-多巴氧化法测定EGCG对B16细胞酪氨酸酶活力的影响,氢氧化钠裂解法测定EGCG对B16细胞黑色素生成量的影响.结果表明:EGCG作用24h,高浓度组(>60μmol)细胞胞膜融合现象明显;作用72h,高浓度组大部分细胞死亡.EGCG对B16细胞增殖率、酪氨酸酶活性、黑色素生成量均有显著抑制,呈明显的剂量效应关系,且EGCG抑制B16细胞增殖,IC50为33.99μmol.

驱虫斑鸠菊不同提取部位对小鼠B16细胞黑素合成及酪氨酸酶活性的影响

目的观察驱虫斑鸠菊不同提取部位对体外培养的小鼠B16细胞黑素合成和酪氨酸酶活性的影响。方法由驱虫斑鸠菊得到3种不同部位提取物,分别为母液(Q1)、乙酸乙酯提取物(Q2)及萃取后物质(Q3)。以体外培养的小鼠B16黑素瘤细胞为模型,以3个色素合成途径中的关键点为多靶点评价体系,其中采用MTT法测定提取物对B16小鼠黑素瘤细胞增殖的影响,采用L-DOPA氧化法测定对酪氨酸酶活性的影响,采用NaOH裂解法检测黑素含量。结果 3种提取部位对B16细胞都有一定的增殖作用,其中Q1、Q2促进增殖作用明显(P<0.01),Q3有轻微的促进增殖的作用。Q1、Q3对酪氨酸酶有不同程度的激活作用并促进黑素的合成,其中Q3在20～80μg/ml范围内促进B16细胞黑素合成作用明显(P<0.05或P<0.01),且Q3以浓度依赖方式上调酪氨酸活性。结论驱虫斑鸠菊残留的水溶性部分是稳定的调节B16细胞黑素合成的活性部位。

马尾松树皮提取物对小鼠B16黑色素瘤细胞中黑色素生成抑制效果及其机制的初步研究

目的探讨马尾松树皮提取物(Pinus massoniana bark extract,PMBE)抑制小鼠B16黑色素瘤细胞中黑色素的生成效果及其分子机制。方法 10～50μg/ml的PMBE与小鼠B16黑色素瘤细胞共培养后进行各项细胞学研究:MTT法检测PMBE对细胞的毒性;以左旋多巴为底物测定PMBE对酪氨酸酶(TYR)活性的抑制作用;DCM法检测PMBE对细胞ROS的清除能力;比色法测定PMBE对细胞内黑色素生成的抑制效果以及对细胞内还原型谷胱甘肽(GSH)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)、GSH/GSSG的影响;RT-PCR检测酪氨酸酶及其相关蛋白1(TRP-1)和2(TRP-2)在mRNA水平表达量的影响。结果 PMBE对小鼠B16黑色素瘤细胞的增殖无明显影响,并可显著减少细胞内的黑色素含量。另外,PMBE对活性氧具有很强的清除能力,同时可上调细胞内GSH/GSSG比率,从而增强细胞的还原力。PMBE还对酪氨酸酶活性表现出了一定的抑制效果,但这种抑制却并不发生在mRNA水平。结论 PMBE对小鼠B16黑色素瘤细胞内黑色素生成具有显著抑制效果并主要通过降低酪氨酸酶活性和清除活性氧来实现。

墨旱莲乙醇提取物动物致色素作用和对小鼠B16黑素瘤细胞黑素生成的影响

目的选择离体实验中对黑色素合成的关键酶—酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)有激活作用的墨旱莲(旱莲草),研究其动物致色素作用和对小鼠B16黑素瘤细胞黑素生成及相关基因犤TYR、TYR相关蛋白(TRP-1/2)mRNA犦表达的影响。方法以棕色豚鼠为动物模型,用Schmorl法染色,计数含黑素的细胞;用多巴(DOPA)-氧化酶染色,计算每100个基底细胞中DOPA阳性细胞数。培养的小鼠B16黑素瘤细胞以四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法、氢氧化钠(NaOH)法和体外氧化DOPA反应方法分别测定细胞的增殖活性、黑素生成量及TYR活性;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定TYR及其TRP-1/2基因的表达。结果墨旱莲乙醇提取物可使豚鼠表皮基底层中含黑素颗粒细胞增多,使豚鼠表皮内DOPA阳性细胞增多(P<0.05);具有促进小鼠B16黑素瘤细胞黑素合成及TYR活性作用(P<0.05),对细胞TYR基因有上调作用,而对TRP-1/2mRNA的表达无明显作用。结论墨旱莲乙醇提取物具有促进黑素合成及上调酪氨酸酶基因表达的作用,对白癜风色素恢复有较好应用和开发的前景。

榄香烯诱导小鼠黑色素瘤B16细胞凋亡的实验研究

目的:观察榄香烯对小鼠黑色素瘤B16细胞增殖和凋亡的影响。方法:不同浓度榄香烯体外处理小鼠黑色素瘤B16细胞,采用MTT比色法、流式细胞仪分析技术及荧光染色等方法,检测榄香烯对小鼠黑色素瘤B16细胞增殖和凋亡的影响。结果:榄香烯能抑制B16细胞增殖,使细胞停滞于G0/G1期,S期细胞明显减少,其作用呈明显浓度依赖性。形态学及流式细胞术分析结果均提示:在本实验条件下,榄香烯可诱导B16细胞凋亡,其诱导作用亦显示明显的浓度依赖关系。在此基础上,进一步分析发现:榄香烯可诱导B16细胞原癌基因bcl-2表达降低,抑癌基因p53表达增强。结论:榄香烯在体外通过干扰细胞周期、诱导细胞凋亡明显抑制B16细胞增殖,其作用机制可能与其诱导癌基因bcl-2表达减少、p53表达增加有关。

原儿茶酸对小鼠黑色素瘤B16细胞酪氨酸酶活力及黑色素生成的抑制效应

酪氨酸酶是生物体内黑色素合成的关键酶,其抑制剂有着广泛的应用前景.从天然药物的有效成分中筛选安全的酶抑制剂具有重要意义.以小鼠黑色素瘤B16细胞为模型,研究了天然药物有效成分原儿茶酸对黑色素生成和酪氨酸酶活力的影响.实验结果显示:原儿茶酸可显著降低细胞的黑色素含量,浓度为10μmol/L时使黑色素含量降低60%.进一步研究发现,原儿茶酸对小鼠黑色素瘤B16细胞粗提取和共培养体系中的酪氨酸酶均有较强的抑制作用.对粗提酪氨酸酶的活力半抑制浓度(IC50)约为160μmol/L,与共培养体系中酪氨酸酶活力的抑制、抑制剂浓度和作用时间有关,10μmol/L作用54h可使酪氨酸酶活力下降88%.本研究为原儿茶酸作为酪氨酸酶抑制剂的开发应用奠定了基础.

纳米氧化锌对小鼠B16黑素瘤细胞生长和分化的影响

为评价纳米氧化锌(Zn O NPs)在皮肤病治疗和化妆品应用方面的生理毒性,以小鼠B16黑素瘤细胞为细胞模型,研究15、30、90 nm下Zn O NPs对B16细胞的体外生长和分化的影响及其作用机制。以不加纳米氧化锌和加体相氧化锌的处理分别作阴性、阳性对照。结果表明,15、30 nm,体相Zn O NPs处理与B16细胞共培养作用3 d,当Zn O NPs为4μg/m L以下时,Zn O NPs并未明显抑制细胞生长,引起细胞死亡;当Zn O NPs浓度大于8μg/m L时,明显抑制细胞生长。随着Zn O NPs浓度增加,细胞体积变小,细胞间隙变大,黏附性降低,细胞变圆,从培养瓶底脱落死亡。Zn O NPs诱导细胞中酪氨酸酶(TYR)、酪氨酸酶相关蛋白1(TYRP-1)、酪氨酸相关酶相关蛋白2(TYRP-2)的mRNA表达量升高,导致细胞内酪氨酸酶活性和黑色素生成水平增高,促进了B16黑素瘤细胞的分化。相同Zn O NPs浓度下,15 nm Zn O NPs比30、90 nm Zn O NPs作用明显。

复色1号方对小鼠B16黑素瘤细胞增殖及酪氨酸酶活性的影响

目的探讨复色1号方对小鼠B16黑素瘤细胞增殖及酪氨酸酶活性的影响。方法采用MTT法测定不同浓度的复色1号方对小鼠B16黑素瘤细胞增殖的影响,多巴速率氧化法测定对酪氨酸酶活性的影响,对其结果进行统计分析。结果复色1号方浓度在0.001～0.01g/l,范围内对小鼠B16黑素瘤细胞的增殖与对照组相比无统计学意义(P>0.05),0.05～0.1g/l浓度范围内对小鼠B16黑素瘤细胞的增殖与对照组相比有显著意义(P<0.05),呈现一定的抑制作用;复色1号方在0.001～0.1g/l浓度范围内对小鼠B16黑素瘤细胞中酪氨酸酶活性的影响与对照组相比,各浓度含药培养基组的A值均有显著性差异(P<0.05),呈剂量依赖性激活作用。在0.001～0.01g/l浓度范围内,复色1号方的最佳激活浓度为0.01g/l。结论复色1号方没有促进小鼠B16黑素瘤细胞增殖的作用;在一定浓度范围内(0.001～0.1g/l),对小鼠B16黑素瘤细胞酪氨酸酶的活性呈剂量依赖型激活作用。

卡泊三醇对小鼠黑素瘤B16细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨不同浓度卡泊三醇(CPT)对小鼠黑素瘤B16细胞增殖及凋亡的影响。方法不同浓度CPT作用于体外培养的小鼠黑素瘤B16细胞24h,在倒置显微镜下观察细胞密度及形态,采用MTT比色法和AnnexinV/PI染色法分别检测细胞增殖抑制率和凋亡率。结果与对照组相比,CPT浓度为1,10μg/mL组中B16细胞密度及形态无明显变化,也无增殖抑制作用(P>0.05)。而当CPT为102,103μg/mL时,细胞密度减少,形态由多角形变为略圆钝,甚至皱缩,对细胞增殖呈剂量依赖性的抑制作用(P<0.05)。CPT为1,10,102μg/mL时对B16细胞无凋亡诱导作用(P>0.05),而103μg/mL时则明显促进细胞凋亡(19.17±0.31)%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CPT≤10μg/mL对B16细胞密度形态、增殖抑制率和凋亡率无明显影响;CPT≥102μg/mL能改变B16细胞形态,并呈浓度依赖性地抑制其增殖;而当CPT≥103μg/mL时能诱导B16细胞凋亡。

曲酸寡肽对小鼠B16黑素瘤细胞酪氨酸酶活性及黑色素合成的影响

目的探讨曲酸寡肽对小鼠B16黑素瘤细胞酪氨酸酶活性及黑色素合成的影响。方法以小鼠B16黑素瘤细胞为受试对象,分别用曲酸寡肽和曲酸对其进行干预,测定细胞增殖率,细胞的酪氨酸酶活性及细胞的黑色素含量。结果曲酸寡肽对细胞形态及数量无显著影响;曲酸寡肽能够有效抑制酪氨酸酶活性,抑制率高于曲酸,但二者之间差异无统计学意义(P>0.05)。曲酸寡肽能够有效抑制黑色素合成,低浓度时抑制率高于曲酸,高浓度时抑制率低于曲酸,二者之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论曲酸寡肽对小鼠B16黑素瘤细胞的形态及数量无明显影响,与曲酸相比,细胞毒性低。低浓度(≤0.01g/L)曲酸寡肽既能有效抑制酪氨酸酶活性,又能有效抑制黑色素的合成,优于曲酸,具有潜在的应用价值。

青蒿素类药联合紫杉醇对小鼠黑色素瘤B16细胞的增殖抑制作用

目的观察青蒿琥酯(ATS)、双氢青蒿素(DHA)和紫杉醇(Taxol)及ATS联合Taxol对小鼠黑色素瘤B16细胞的增殖抑制作用,评价各组药物对小鼠黑色素瘤B16细胞的杀伤作用,初步探讨ATS与Taxol联合给药对小鼠黑色素瘤B16细胞是否有协同增效作用。方法采用CCK-8法检测ATS、DHA和Taxol单药对小鼠黑色素瘤B16细胞作用24 h和48 h的抑制作用,并计算半数抑制浓度(IC_(50))值;检测ATS联合Taxol不同配比AT(1∶1)、AT(3∶2)和AT(7∶3)对小鼠黑色素瘤B16细胞作用48 h的抑制作用。运用质量作用中效定理和药物合并指数定理分析两药联合是否具有协同增效作用。结果 ATS、DHA和Taxol单药作用于小鼠黑色素瘤B16细胞的IC_(50)值,在24 h时,分别为126.56,86.09,3.27μmol·L^(-1);在48 h时,分别为1.36,15.11,0.97μmol·L^(-1)。ATS联合Taxol 3个浓度组AT(1∶1)、AT(3∶2)和AT(7∶3)对小鼠黑色素瘤B16细胞作用48 h,联合用药合并指数(CI)均小于1。结论 ATS、DHA和Taxol单药对小鼠黑色素瘤B16细胞的增殖抑制作用随着药物浓度和时间的增加而明显增加,呈剂量和时间依赖性。青蒿琥酯联合紫杉醇抑制小鼠黑色素瘤B16细胞增殖,有良好的协同增效作用。

基于B16细胞评价体系研究复方中药的美白功效

酪氨酸酶(Tyrosinase,TYR)是黑色素合成过程中的关键性限速酶,检测中药提取物对TYR活性的影响,筛选出对TYR活性抑制效果较好的美白中药,并对其进行组方,筛选出其中高效低毒的最佳复方,测定最佳复方对B16细胞中TYR活性和黑色素含量的影响并研究其作用机制。方法 体外检测中药提取物对TYR活性的影响,MTT检测复方中药安全浓度范围,测定B16细胞中TYR活性和黑色素含量,并通过进行CAMVA,对其进行眼刺激性分析;ELISA与RT-qPCR法分别检测最佳复方对B16细胞内参与调控酪氨酸酶表达的TYR、TRP-1、TRP-2、MITF蛋白表达水平与mRNA转录水平,并探讨其作用机制。结果 7种中药提取物对TYR活性均有抑制作用,且抑制率与样品浓度呈正相关,浓度为30 g·L-1时抑制率最高;5种复方对TYR活性均有抑制作用,且抑制率跟样品浓度呈正相关,其中复方E对TYR活性的抑制作用最强且细胞毒性最小,复方E处理细胞的安全浓度范围为0~1 g·L-1,CAMVA试验结果显示复方E浓度小于20 g·L-1时具有良好安全性;当复方E质量浓度为0.25~1 g·L-1时,对TYR活性具有明显抑制作用(P < 0.05)。0.05~1 g·L-1复方中药对黑色素生成均具有抑制作用,且其抑制率呈现一定的浓度依赖性。经复方E处理后B16细胞内TYR、TRP-1、TRP-2、MITF的蛋白表达水平与mRN转录水平明显抑制(P < 0.05),当复方E浓度为1 g·L-1时抑制效果最强。结论 复方中药可以通过下调TYR、TRP-1、TRP-2、MITF蛋白的表达,进而抑制TYR活性,最终达到减少黑色素形成的目的。

鸡爪皮胶原多肽对蘑菇酪氨酸酶及B16黑色素瘤细胞的作用

研究分子质量低于3 kDa鸡爪皮胶原多肽对蘑菇蘑菇酪氨酸酶的抑制及对小鼠B16黑色素瘤细胞黑色素合成的影响。以L-多巴为底物,研究胶原肽对蘑菇酪氨酸酶抑制作用及抑制动力学。然后采用B16黑色素瘤细胞验证提取鸡爪皮胶原多肽的安全性及对黑色素合成影响的效果。结果表明,分子质量低于3 kDa的鸡爪皮胶原多肽抑制蘑菇酪氨酸酶的IC50值为0.570 mg/mL,抑制属于非竞争性抑制,米氏常数Km和抑制常数Ki分别为24.68μmol/mL和10.76 mg/mL。鸡爪皮胶原多肽在0~200μg/mL的质量浓度范围内对细胞的增殖活性没有影响,而且能够有效地抑制细胞黑色素的生成。

蛋白酶活化受体1在B16F10瘤细胞体内外迁移中的作用

目的:研究蛋白酶活化受体 1(PAR1)在肿瘤细胞转移过程中的作用,评估凝血系统与肿瘤转移的关系。方法:首先通过逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和 Western-blot 方法检测了 siRNA 对 B16F10 黑色素瘤细胞中 PAR1的内源表达的影响,然后在 PAR1 受 siRNA 干扰的情况下检测 B16F10细胞在体内外迁移能力,其结果与未受siRNA 干扰的试验结果相对照,来确定 PAR1 在 B16F10 瘤细胞体内外迁移中的作用。结果:75nmol/L 的 siRNA 干扰48h 后可明显抑制 B16F10中 PAR1 的表达,其转录水平抑制率是60%,蛋白水平的抑制率为85%;体外迁移实验表明,PAR1 表达量减少后与对照组相比细胞迁移能力减弱(P<0.01);动物实验表明.干扰 B16F10细胞中的 PAR1后,肿瘤细胞经血管迁移能力减弱,在肺部形成的转移瘤数目减少(P<0.01)。结论:PAR1 具有促进肿瘤细胞迁移作用。开发 PAR1 封闭剂有望抑制肿瘤转移,可作为研制抗肿瘤转移药物的新靶点。

刺梨不同提取成分对B16细胞增殖及酪氨酸酶活性的影响

[目的]评价刺梨不同提取成分对小鼠黑色素瘤B16细胞增殖和细胞内酪氨酸酶活性的影响,为刺梨在美白化妆品领域的开发应用奠定基础。[方法]分别采用水提法、醇提法和超声提取法获得刺梨多糖、黄酮和多酚,分别采用苯酚-硫酸法、亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠法和Folin-Ciocaltean法检测其纯度。以刺梨多糖(200、400、800、1 600μg·mL-1)、刺梨黄酮(30、60、120、240μg·m L-1)、刺梨多酚(40、80、160、320μg·mL-1)及维生素C干预B16细胞,采用MTT法检测B16细胞增殖活性,倒置显微镜观察B16细胞形态和数量,多巴氧化法检测酪氨酸酶活性。[结果]刺梨多糖的提取率最高,可达45.33%;刺梨黄酮的纯度最高,可达52.50%。刺梨不同提取成分对B16细胞增殖和酪氨酸酶活性均有一定的抑制作用,且呈现显著的浓度依赖性,与正常组比较,具有统计学差异(P<0.05)。刺梨不同提取成分各剂量组均可抑制B16细胞的增殖,增加细胞碎片,且呈显著的浓度依赖性;药物处理48h后,刺梨多糖、刺梨黄酮和刺梨多酚抑制B16细胞增殖的IC50分别为649.83、105.87、134.16μg·m L-1,抑制酪氨酸酶活性的IC50分别为376.13、57.51、82.42μg·mL-1,其中刺梨黄酮(60、120、240μg·mL-1)和刺梨多酚(80、160、320μg·mL-1)对B16细胞酪氨酸酶的抑制作用优于阳性对照维生素C,具有统计学差异(P<0.05)。[结论]刺梨的不同提取成分对小鼠黑色素瘤B16细胞增殖和酪氨酸酶活性均有一定的抑制作用,其中刺梨黄酮的活性最佳,刺梨多酚次之,提示刺梨在皮肤美白等方面具有潜在的研究价值。

C57BL/6J小鼠黑色素瘤肺转移模型的构建

目的探讨建立C57BL/6 J小鼠黑色素瘤肺转移模型的影响因素,包括肿瘤的接种方式、细胞接种数量和成瘤周期。方法体外培养小鼠黑色素瘤细胞B16F10。1)取6~8周龄,雄性小鼠18只,随机分三组,每组6只,分别采取尾静脉注射、腹腔注射和皮下注射方式,每只小鼠注射100μL(3×10~6个细胞)B16F10细胞悬液,2周后,解剖小鼠并观察黑色素瘤的生长和转移情况;2)分3组,同上,经尾静脉分别注射3×10~6个细胞、1×10~6个细胞、3×10~5个细胞,2周后,解剖小鼠并观察黑色素瘤的生长和转移情况;3)分3组,同上,尾静脉注射1×10~6个细胞,分别于1周、2周、3周解剖小鼠,观察黑色素瘤的生长和转移情况。结果 1)尾静脉注射小鼠黑色素瘤细胞,小鼠发生肺转移的成功率为100%,而腹腔注射和皮下注射未发生肺转移。2)接种小鼠黑色素瘤细胞数量为1×10~6时,发生肺部转移的黑色素瘤细胞数量适中;接种细胞数量为3×10~6时,发生肺部转移的黑色素瘤细胞数量过多;接种细胞数量为3×10~5时,发生肺部转移的黑色素瘤细胞数量较少。3)尾静脉注射1×10~6个小鼠黑色素瘤细胞,饲养2周后,可以观察到黑色素瘤细胞明显的肺部转移,且不会导致小鼠死亡;饲养3周,黑色素瘤细胞肺部转移数量过多,且小鼠死亡过半;饲养1周,黑色素瘤细胞肺部转移数量较少。结论经尾静脉注射1×10~6个小鼠黑色素瘤细胞,生长2周时间,为构建C57BL/6 J小鼠黑色素瘤肺转移模型的推荐方法。

虎耳草对小鼠B16细胞酪氨酸酶活性的影响

为了阐明虎耳草不同极性溶剂提取物对小鼠B16黑色素瘤细胞增殖及酪氨酸酶活性的影响,用虎耳草提取物干预B16细胞,利用倒置显微镜观察给药后细胞的形态和数量,通过噻唑蓝(MTT)法分析虎耳草对细胞增殖活性的影响,通过多巴氧化法分析虎耳草对细胞内酪氨酸酶活性的影响。研究结果表明,虎耳草不同溶剂提取物对B16细胞的增殖活性均表现出一定的抑制作用,呈现浓度依赖性,虎耳草样品1~4对细胞增殖活性产生50%的抑制(IC_(50))时对应的质量浓度分别为74.52,103.48,109.60和65.54μg/mL,样品4抑制细胞增殖能力最强。虎耳草样品1~5对B16细胞内酪氨酸酶活性均表现为抑制作用,其中样品1~2和4~5的IC_(50)值依次为163.79,107.36,362.64以及307.50μg/mL,样品2抑制细胞内酪氨酸酶能力最好。综上所述,虎耳草不同极性溶剂提取物对小鼠B16黑色素瘤细胞增殖和细胞内酪氨酸酶活性都存在一定的抑制作用。

GM3通过MMP-9调节B16细胞的运动性

目的通过不同的方法来研究GM3对MMP-9的调节作用。并进一步验证了GM3对细胞运动性的调节。方法分别用RT-PCR,Zymography,HPTLC,western blotting和transwell的方法来检测MMP-9的mRNA表达水平,MMP-9的活性,GM3,Akt的磷酸化以及细胞的运动性。结果通过几种不同的方法来研究是否GM3参与MMP-9的调空:a.通过转染半乳糖转移酶的顺反序列来调节GM3的表达,从而初步证明GM3可以调节MMP-9的表达;b.通过外加GM3可以清楚的观察到MMP-9的表达量升高;c.神经节苷脂抑制剂D-PDMP的加入更进一步的证明了MMP-9的表达始终与GM3的表达相关;另外,通过PI3K抑制剂的试验进一步证明了GM3通过PI3K来调节MMP-9的表达。在此基础上,更进一步的证明了神经节苷脂可以调节细胞的运动性。结论GM3可以通过PI3K/Akt信号传导途径来正调控MMP-9的表达,并且调节细胞的运动性。

祛白片挥发油的GC-MS分析及其对黑色素瘤细胞B16脱黑色素模型的影响

目的 对祛白片挥发油进行GC-MS分析,研究其对黑色素瘤细胞B16脱黑色素模型的影响。方法 水蒸气蒸馏法提取挥发油后,GC-MS分析鉴定其成分。H_(2)O_(2)诱导建立B16细胞脱黑色素模型,在光镜下观察细胞生长状态,CCK-8法检测脱黑色素细胞增殖,NaOH裂解法检测黑色素形成,酶标法检测挥发油对酪氨酸酶活性的影响。结果 挥发油成分中1-甲基-2,4-二(丙-1-烯-2-基)-1-乙烯基环己烷含量最高,(2E,4E)-deca-2,4-二醛次之,4a-甲基-1-亚甲基-7-(丙-1-烯-2-基)十氢萘再次之。祛白片各剂量挥发油作用24 h后脱黑色素细胞数、细胞增殖活性、黑色素合成增加,作用48 h后减少。不同剂量祛白片挥发油对酪氨酸酶呈不同趋势作用。结论 祛白片挥发油中含量最高的为脂肪烃类,其次为环烃类,有促进脱黑色素细胞生长繁殖、升高黑色素水平的作用。

姜黄素抗小鼠黑色素瘤分子机制的初步研究

目的:探究姜黄素抗小鼠B16黑色素瘤生长与Bcl-2、P53、肿瘤细胞内谷胱甘肽的关系。方法:构建C57BL/6 J移植性小鼠B16黑色素瘤模型考察姜黄素对黑色素瘤体生长的影响,MTT法检测姜黄素对B16细胞的增殖活力的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡及Bcl-2、P53基因的表达,HPLC分析技术检测姜黄素对C57BL/6 J小鼠B16黑色素瘤组织内GSH水平的影响。结果:姜黄素对C57BL/6 J移植性小鼠B16黑色素瘤生长的抑制作用呈剂量及时间依赖性;姜黄素作用B16细胞24h,Bcl-2蛋白表达减弱,P53蛋白表达增强;姜黄素使C57BL/6 J小鼠B16黑色素瘤组织内的GSH含量下降。结论:姜黄素体内抑制小鼠B16黑色素瘤的生长;体外抑制B16细胞的生长,并能诱导部分细胞凋亡,其作用机制可能与其下调Bcl-2蛋白的表达,上调P53蛋白的表达及耗竭肿瘤组织内GSH含量有关。