重组BJ46a蛋白抑制B16细胞的体外侵袭及转移

目的探讨蛇毒金属蛋白酶抑制剂BJ46a的抗肿瘤侵袭及转移作用。方法以蛇毒金属蛋白酶抑制剂BJ46a为目的基因,选择杆状病毒表达系统生产重组BJ46a蛋白,纯化并测定其生物学活性;利用Alamar blue法及Transwell小室分析法评价重组蛋白对小鼠黑色素瘤细胞B16体外生长、黏附、运动和侵袭能力的影响(n=3)。结果经ProBond亲和层析纯化出的重组BJ46a蛋白具有抑制基质金属蛋白酶(MMPs)的活性;经重组BJ46a蛋白处理的B16细胞穿过Matrigel的细胞数明显低于对照组(P<0.01),抑制率为84.8%。结论重组BJ46a蛋白能抑制B16细胞的侵袭转移。

肿瘤疫苗Ad-hDCT抑制黑色素瘤B16细胞在C57BL／6小鼠脑内增殖

目的观察肿瘤疫苗Ad-hDCT预防接种对移植到C57BL/6小鼠脑实质内的黑色素瘤B16细胞增殖的抑制作用。方法 40只C57BL/6小鼠随机分为2组:Ad-BHG对照组(20只)和Ad-hDCT免疫接种组(20只)。借助小鼠脑立体定位仪行B16细胞脑内注射;采用大体观察、流式细胞术、石蜡切片HE染色及冷冻切片CD8及F4/80抗体免疫组织化学染色等方法观察肿瘤细胞的增殖情况。结果 Ad-hDCT肌肉注射后7d,小鼠外周血内hDCT特异性CD8+INF-γ+T细胞数量显著增多(P<0.01,与Ad-BHG对照组相比)。脑内移植B16细胞后16d,Ad-BHG对照组小鼠全部死亡,而Ad-hDCT免疫组小鼠长期存活率达60%,且未见行为学异常。光镜观察,Ad-BHG组小鼠脑内B16细胞生长旺盛,移植后3d可见明显肿瘤细胞团,移植后7d脑实质内可见较大的瘤块;Ad-hDCT组小鼠脑内B16细胞的增殖被显著抑制,未见瘤块形成。免疫组织化学染色结果提示,Ad-hDCT组小鼠脑内移植B16细胞后可诱导大量CD8+T细胞进入肿瘤区。同时,Ad-hDCT组小鼠脑组织内活跃的小胶质细胞显著增多。结论肿瘤疫苗Ad-hDCT能有效刺激抗原特异性细胞毒T细胞免疫反应,此类T细胞能够到达肿瘤区,发挥识别、杀伤作用,抑制黑色素瘤B16细胞在C57BL/6小鼠脑内增殖。

TAT修饰短肽LVKEI抑制黑色素瘤B16细胞增殖及促凋亡作用

目的探讨TAT修饰短肽LVKEI(TAT-LVKEI)对黑色素瘤B16细胞增殖及凋亡的影响。方法采用CCK-8检测细胞增殖活力,采用流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡率,采用Western-blotting检测凋亡相关蛋白表达。结果TAT-LVKEI能抑制黑色素瘤细胞系B16细胞的增殖活力并将细胞周期阻滞于G 0/G 1期;TAT-LVKEI能诱导黑色素瘤细胞系B16细胞凋亡;TAT-LVKEI处理可增加Cleaved Caspase-3、Bax的表达水平,降低Bcl2、Ki-67的表达水平。结论TAT-LVKEI能抑制B16黑色素瘤细胞增殖并促使其凋亡。

桦木酸及其衍生物23-羟基桦木酸等诱导黑色素瘤细胞凋亡的研究

目的 :研究桦木酸及其衍生物 2 3 羟基桦木酸等对人黑色素瘤细胞A3 75、小鼠黑色素瘤细胞B16生长抑制及凋亡作用。方法 :应用四甲基偶氮唑盐比色 (MTT)法、光镜与电镜、琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪等对 2 3 羟基桦木酸诱导的黑色素瘤A3 75、B16细胞进行检测和观察。结果 :桦木酸及其衍生物 2 3 羟基桦木酸等在质量浓度为 8～ 80mg·L-1时对黑色素瘤细胞有显著的生长抑制作用 ,并有一定的剂量依赖关系 ,同时出现凋亡峰及梯形电泳。结论 :2 3 羟基桦木酸能强烈诱导黑色素瘤细胞凋亡 ,从而达到抑瘤的治疗效果。

十种苯丙氨酸衍生物对小鼠黑色素瘤细胞系B16的作用研究

该文研究了十种苯丙氨酸(Phe)的对位衍生物Fp、Clp、Bp、Ip、Ap、Np、Sp、Mp、Pp、Cp对小鼠黑色素瘤细胞系B16的细胞毒性、诱导细胞凋亡作用和抑制细胞成集落作用。结果表明,它们的细胞毒性大小依次为Pp、Fp、Mp、Ip、Sp、Ap、Bp。其中Mp和Ip的毒性相近,Sp和Ap的毒性相近。它们诱导细胞凋亡的作用强弱依次为Fp、Mp、Ip。其中Mp和Ip的作用相近。它们抑制细胞成集落的作用大小依次为Pp、Fp、Ip、Mp、Sp、Bp、Np、Ap。其中Pp、Fp、Ip、Mp的作用相近,Sp、Bp、Np的作用相近。初步的细胞毒理分析表明,Fp、Mp、Ip能够诱导B16细胞凋亡和抑制B16细胞形成集落。