兔抗B16黑素细胞多克隆抗体的制备及对黑素细胞增殖的影响

目的:制备兔抗B16黑素细胞多克隆抗体,研究其对黑素细胞增殖的影响。方法:①用B16黑素细胞颗粒抗原免疫家兔得到兔抗B16黑素细胞多克隆抗体;试管凝集法检测抗血清效价;G蛋白亲和层析纯化抗血清;②SDS-PAGE检测纯化抗体分子量大小;MTT法检测纯化抗体IgG对B16黑素细胞增殖的影响。结果:兔抗B16黑素细胞抗血清效价高达1:1280;亲和层析纯化抗血清获得的免疫球蛋白IgG,经SDS-PAGE电泳显示重链分子量大小约为66.2kD;MTT比色法显示IgG对黑素细胞增殖有抑制作用,与非IgG和未纯化血清差异显著。结论:成功制备并鉴定了高效价的兔抗B16黑素细胞多克隆抗体,纯化后所获得的高纯度IgG,对B16黑素细胞增殖具有抑制作用,为进一步研究此抗体对黑素细胞生长及色素代谢的影响,以及色素减退性疾病白癜风的发病机制奠定了基础。

新琼寡糖对小鼠B16细胞黑色素合成的影响

目的:通过测定新琼寡糖对小鼠B16细胞黑色素合成的影响,研究新琼寡糖是否具有美白性能。方法:以小鼠B16黑素细胞作为受试细胞。选择曲酸和熊果苷为阳性对照物,测定不同聚合度的A、B系列新琼寡糖对细胞增殖、细胞内酪氨酸酶活性以及细胞内黑色素合成的影响,对不同聚合度的A、B系列新琼寡糖美白性能进行了初步评价。结果:A、B系列新琼寡糖对B16黑素细胞具有低毒性,半数抑制浓度IC50约为3000μg/L。低聚合度的A系列新琼寡糖对细胞内酪氨酸酶的抑制作用较为平稳,抑制率大约为20%,低于曲酸但与熊果苷接近;高聚合度的B系列新琼寡糖对酪氨酸酶抑制作用不明显。在低浓度下B系列新琼寡糖对黑色素合成的抑制作用高于A系列新琼寡糖,与熊果苷接近。结论:提示了A、B系列新琼寡糖可直接作用于黑素细胞,具有抑制黑色素生成的功效,具有较好的应用和开发前景。