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Inhibitory effect of Cyrtomium falcatum on melanogenesis in α-MSH-stimulated B16F10 murine melanoma cells
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作者 Xian-Rong Zhou Jung Hwan Oh +5 位作者 Fatih Karadeniz Hyunjung Lee Hyo Eun Kim Migeon Jo Youngwan Seo Chang-Suk Kong 《Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine》 SCIE CAS 2023年第9期403-410,共8页
Objective:To explore the anti-melanogenic potential of Cyrtomium falcatum.Methods:The effects of Cyrtomium falcatum crude extract and its solvent fractions on tyrosinase activity,melanin content,and the expressions of... Objective:To explore the anti-melanogenic potential of Cyrtomium falcatum.Methods:The effects of Cyrtomium falcatum crude extract and its solvent fractions on tyrosinase activity,melanin content,and the expressions of melanogenesis-related genes and proteins were analyzed inα-melanocyte-stimulating hormone(α-MSH)-stimulated B16F10 cells.Results:α-MSH treatment significantly increased tyrosinase activity,and extracellular and intracellular melanin content,as well as the expression levels of tyrosinase,microphthalmia-associated transcription factor(MITF),tyrosinase-related protein(TRP)-1,and TRP-2 in B16F10 cells.Treatment with Cyrtomium falcatum crude extract and its solvent fractions reduced tyrosinase activity and extracellular and intracellular melanin content and downregulated the expression levels of tyrosinase,MITF,TRP-1,and TRP-2 in a dose-dependent manner.Conclusions:Cyrtomium falcatum has potential anti-melanogenesis effects and can be used as a potential source material in cosmeceutical industry for the research and development of novel lead molecules with whitening properties. 展开更多
关键词 Cyrtomium falcatum MELANOGENESIS Α-MSH b16f10 melanoma cells
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Mushroom Tyrosinase Inhibition and Antimelanogenesis Activities of <i>Bacopa monnieri</i>(L.) Methanol Extract in B16F10 Melanoma Cells 被引量:2
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作者 T. N. Shamu Junna Lalitha Manohar Shinde 《Journal of Biosciences and Medicines》 2020年第5期189-202,共14页
Melanocytes that form stratum basale of skin epidermis express tyrosinase enzyme, which catalyzes initial two rate-limiting steps in the biotransformation of tyrosine into dark pigment called melanin. Even today, Tyro... Melanocytes that form stratum basale of skin epidermis express tyrosinase enzyme, which catalyzes initial two rate-limiting steps in the biotransformation of tyrosine into dark pigment called melanin. Even today, Tyrosinase inhibitors are among the promising candidates in cosmetic industry for skin-lightening formulations. Overexpression of tyrosinase causes excess melanin biosynthesis and deposition resulting in dark skin color. Moreover, localized overexpression of tyrosinase cause variety of hyperpigmentation disorders like melanoma, melasma, chloasma, dark patches, liver patches, etc. There has been a renewed interest in the natural products as main ingredients in the formulation of safe products for skin-whitening and treatment options for hyperpigmentation disorders. In the present communication, the results of our investigations on tyrosinase inhibition, modulation of intracellular tyrosinase and melanin levels in cultured B16F10 melanoma cells by Bacopa monnieri (L.) methanol extract (BME) are presented and discussed as safe option for skin lightening and to treat hyperpigmentation disorders. BME showed 11%, 29%, 54% and 80% inhibition of mushroom tyrosinase activity at an initial 100, 200, 400 and 600 μg of extract. Treatment of α-melanocyte stimulating hormone (α-MSH) stimulated cultured murine melanoma B16F10 cells with 100 μg/ml of the extract showed a decrease in the levels of cellular melanin and cellular tyrosinase content by 22% and 46% respectively. The cytotoxicity studies by MTT assay revealed that the LC50 of the BME is ≥1000 μg/ml in cultured mouse melanoma B16F10 and HEK293 cells. 展开更多
关键词 TYROSINASE Bacopa monieri b16f10 cells MELANIN Α-MSH
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乌贼墨多糖提取物的制备及其对B16F10细胞的影响 被引量:9
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作者 曹少谦 刘亮 +3 位作者 朱孟飞 陈秋平 戚向阳 杨华 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期906-912,共7页
为了探索乌贼墨多糖(SIP)对体外培养的B16F10细胞的生物学效应,以乌贼墨为原材料,对SIP进行提取分离,并研究SIP提取物对B16F10细胞活力、细胞内酪氨酸酶活性及黑色素合成等的影响。结果表明,SIP提取的最优条件为提取温度40℃,料液比1∶3... 为了探索乌贼墨多糖(SIP)对体外培养的B16F10细胞的生物学效应,以乌贼墨为原材料,对SIP进行提取分离,并研究SIP提取物对B16F10细胞活力、细胞内酪氨酸酶活性及黑色素合成等的影响。结果表明,SIP提取的最优条件为提取温度40℃,料液比1∶3,提取时间4h,提取次数3次,在此条件下SIP得率为14.12 mg·g^(-1)。SIP提取物对B16F10细胞形态有一定影响,对细胞活性、酪氨酸酶活性和黑色素合成均有一定抑制作用,且呈现一定剂量效应。综上可知,SIP提取物能抑制黑色素合成,具有作为美白剂的发展前景,这为乌贼墨合理利用提供了一定科学依据。 展开更多
关键词 乌贼墨 多糖 提取 b16f10细胞
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光甘草定诱导小鼠黑色素瘤B16F10细胞凋亡的机制研究 被引量:9
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作者 高彩霞 王艳明 +2 位作者 李德芳 唐晓峰 郑秋生 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期836-842,共7页
通过体外和体内模型研究光甘草定对小鼠黑色素瘤B16F10细胞增殖的抑制作用及其分子机制。B16F10细胞经光甘草定处理后可抑制其增殖,且具有浓度依赖性;诱导B16F10细胞凋亡,观察到明显的细胞凋亡状态,细胞内凋亡相关基因及蛋白Bax表达显... 通过体外和体内模型研究光甘草定对小鼠黑色素瘤B16F10细胞增殖的抑制作用及其分子机制。B16F10细胞经光甘草定处理后可抑制其增殖,且具有浓度依赖性;诱导B16F10细胞凋亡,观察到明显的细胞凋亡状态,细胞内凋亡相关基因及蛋白Bax表达显著上升,Bcl-2则表达下调。进一步的研究发现,经光甘草定处理后的B16F10细胞中,培养基中葡萄糖含量升高,而ATP含量、乳酸生成均降低;细胞内糖酵解相关基因及蛋白HK2、Ldha表达下调。同时,经光甘草定处理后,移植瘤小鼠的肿瘤组织生长受到明显抑制,肿瘤组织内细胞凋亡率显著升高,Bax表达明显上升,而Bcl-2、HK2和Ldha则表达均下调。说明,光甘草定在一定浓度范围内抑制了小鼠黑色素瘤B16F10细胞的增殖,诱导细胞凋亡,而其诱导细胞凋亡的机制可能与调控糖酵解相关基因的表达相关。 展开更多
关键词 光甘草定 b16f10细胞 糖酵解 细胞凋亡
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B16F10/ESAT-6-GPI-IL-21瘤苗安全性及抗肿瘤效应研究 被引量:4
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作者 何向锋 王净 +6 位作者 余方流 赵枫姝 蔡凯 张洪义 陈峻崧 陈登宇 窦骏 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期779-782,共4页
目的:评估B16F10/ESAT-6-GPI-IL-21瘤苗用于C57BL/6小鼠的安全性及其诱导的抗肿瘤免疫效应。方法:应用免疫荧光、FCM检测瘤苗细胞ESAT-6-GPI的表达情况;以Western blot方法检测瘤苗细胞IL-21的表达情况;动物实验检测瘤苗体内应用的安全... 目的:评估B16F10/ESAT-6-GPI-IL-21瘤苗用于C57BL/6小鼠的安全性及其诱导的抗肿瘤免疫效应。方法:应用免疫荧光、FCM检测瘤苗细胞ESAT-6-GPI的表达情况;以Western blot方法检测瘤苗细胞IL-21的表达情况;动物实验检测瘤苗体内应用的安全性;制备荷瘤鼠术后免疫模型,评价瘤苗免疫效果。结果:B16F10/ESAT-6-GPI-IL-21瘤苗细胞表面有靶抗原ESAT-6-GPI表达,并分泌IL-21。于C57BL/6小鼠皮下接种2×105个B16F10/ESAT-6-GPI-IL-21瘤苗细胞,60天内未见致瘤,但能够诱导小鼠产生有效的抗肿瘤免疫效应。结论:B16F10/ESAT-6-GPI-IL-21瘤苗致瘤性明显下降,低剂量应用具有安全性,能够诱导小鼠产生有效的抗肿瘤免疫效应。 展开更多
关键词 b16f10细胞 IL-21 ESAT-6 GPI 肿瘤疫苗
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胡桃醌对小鼠黑色素瘤细胞B16F10体内迁移的影响 被引量:5
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作者 陈丽 张建 +2 位作者 汪思应 黄德武 顾为望 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2012年第9期978-982,共5页
目的:研究胡桃醌对小鼠黑色素瘤细胞B16F10体内迁移的影响。方法:采用小鼠B16/F10黑色素瘤人工肺转移模型研究胡桃醌对肿瘤细胞血道转移的作用。结果:与溶剂对照组相比,4.5、3、1.5和0.75mg/kg胡桃醌组显著减少小鼠黑色素瘤B16F10血道转... 目的:研究胡桃醌对小鼠黑色素瘤细胞B16F10体内迁移的影响。方法:采用小鼠B16/F10黑色素瘤人工肺转移模型研究胡桃醌对肿瘤细胞血道转移的作用。结果:与溶剂对照组相比,4.5、3、1.5和0.75mg/kg胡桃醌组显著减少小鼠黑色素瘤B16F10血道转移(P<0.05),其抑制率分别为27.30%、55.35%、31.52%和25.34%;3mg/kg胡桃醌与阳性对照组相比,抑瘤率无统计学差异(P>0.05)。结论:胡桃醌可抑制小鼠黑色素瘤B16F10血道转移。 展开更多
关键词 胡桃醌 b16f10 血道转移
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Beclin-1基因shRNA慢病毒载体的构建及其对B16F10细胞自噬及活力的影响 被引量:1
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作者 贾艳艳 赵莹莹 +6 位作者 余祖华 何雷 廖成水 李静 郁川 张春杰 李银聚 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期2609-2616,共8页
利用RNA干扰技术构建稳定沉默Beclin-l基因的B16F10小鼠黑色素瘤细胞系,分析稳转细胞系的自噬水平和活力,为探讨Beclin-1基因、自噬与肿瘤三者关系奠定基础。构建小鼠Beclin-l基因干扰载体,转染至293T细胞,获得慢病毒颗粒,将病毒颗粒感... 利用RNA干扰技术构建稳定沉默Beclin-l基因的B16F10小鼠黑色素瘤细胞系,分析稳转细胞系的自噬水平和活力,为探讨Beclin-1基因、自噬与肿瘤三者关系奠定基础。构建小鼠Beclin-l基因干扰载体,转染至293T细胞,获得慢病毒颗粒,将病毒颗粒感染B16F10细胞,通过加压筛选、有限稀释、细胞驯化得到稳定转染m-Beclin-1-shRNA1的B16F10细胞系。采用RT-PCR和免疫荧光技术检测对Beclin-l的干扰效果,Western blot和透射电镜分析稳转细胞系中自噬标志物LC3蛋白表达及自噬小体形成情况,CCK-8法检测稳转细胞系的活力。结果表明,成功构建了靶向抑制Beclin-l基因表达的shRNA,纯化的慢病毒滴度为1×10^(8) TU·mL^(-1),建立的细胞系中Beclin-1 mRNA和蛋白表达都受到不同程度的抑制,mRNA的沉默效率约为75%(P<0.01),发现干预Beclin-1表达能够抑制LC3-Ⅱ蛋白的表达及自噬小体的形成数量,降低B16F10细胞活力。以上结果表明,干扰Beclin-1表达能够有效降低B16F10细胞自噬活性,促进B16F10细胞死亡,这为探讨Beclin-1基因功能及自噬在抗肿瘤中的作用奠定重要基础。 展开更多
关键词 RNA干扰 b16f10细胞 Beclin-1基因 慢病毒载体 细胞自噬
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GnRH/M2融合蛋白致敏DC疫苗对黑色素瘤B16F10细胞移植瘤的抑制 被引量:1
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作者 曹荣月 马云菲 +4 位作者 袁玉婷 张昕黎 李曼曼 苗梓韬 金亮 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期468-475,共8页
目的:制备促性腺激素释放激素(gonadotropin releasing hormone,GnRH)与M2的融合蛋白(GnRH/M2),研究由该融合蛋白致敏而成的DC疫苗对黑色素瘤B16F10细胞小鼠移植瘤的抑制作用。方法:构建表达载体p ET28a-ans B-CGnRH3-hinge-MVP-M2质粒... 目的:制备促性腺激素释放激素(gonadotropin releasing hormone,GnRH)与M2的融合蛋白(GnRH/M2),研究由该融合蛋白致敏而成的DC疫苗对黑色素瘤B16F10细胞小鼠移植瘤的抑制作用。方法:构建表达载体p ET28a-ans B-CGnRH3-hinge-MVP-M2质粒,该质粒转化的工程菌在乳糖的诱导下,融合蛋白ans B-C-GnRH3-hinge-MVP-M2以包涵体形式表达,经超声破碎、洗涤和乙醇分级沉淀纯化后,通过酸水解将蛋白多肽GnRH3-hinge-MVP-M2释放出来,并通过DEAE-52阴离子交换层析进行分离。将此融合多肽致敏DC获得DC疫苗。构建黑色素瘤B16F10细胞小鼠移植瘤模型,按接种疫苗不同,分为:环磷酰胺组(CTX)、GnRH/M2融合蛋白致敏DC组(GDC)、肿瘤细胞裂解物致敏DC组(BDC)、GnRH/M2融合蛋白致敏DC+环磷酰胺组(GDCTX)、肿瘤细胞裂解物致敏DC+环磷酰胺组(BDCTX)和生理盐水组(NS),观察GnRH/M2疫苗对模型小鼠的移植瘤生长、CTL杀伤能力和T细胞增殖的作用。结果:成功构建p ET28a-ans B-C-GnRH3-hinge-MVP-M2质粒并高效表达融合蛋白。GDC组移植瘤生长明显慢于NS组(P<0.05),且与BDC组相似(P>0.05);GDCTX组抑瘤效果虽进一步提高,但与CTX组相比差异无统计学意义(P>0.05)。各实验组对B16F10细胞的杀伤作用和对T细胞增殖作用均优于阴性对照组(P<0.05或P<0.01),且GDC组与BDC组间差异不显著(P>0.05)。结论:初步证明融合多肽GnRH/M2致敏的DC疫苗能有效抑制黑色素瘤B16F10细胞小鼠移植瘤的生长。 展开更多
关键词 促性腺激素释放激素 树突状细胞 b16f10细胞 黑色素瘤 融合蛋白
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T-钙黏蛋白对B16F10黑素瘤细胞周期调节的研究 被引量:3
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作者 牛艳东 白秀会 +6 位作者 李娜 曹娜 陆海涛 胡晓梅 陆洁 孙立新 段昕所 《临床和实验医学杂志》 2013年第18期1440-1442,共3页
目的探讨T-钙黏蛋白对B16F10黑素瘤细胞周期的影响。方法应用脂质体LipofectamineTM2000将构建的pEGFP-N1-T-钙黏蛋白以及pEGFP-N1空载体转染至B16F10细胞,OPTI-MEM培养基体外培养6 h后RPMI-1640继续培养24 h,应用碘化丙啶标记,流式细... 目的探讨T-钙黏蛋白对B16F10黑素瘤细胞周期的影响。方法应用脂质体LipofectamineTM2000将构建的pEGFP-N1-T-钙黏蛋白以及pEGFP-N1空载体转染至B16F10细胞,OPTI-MEM培养基体外培养6 h后RPMI-1640继续培养24 h,应用碘化丙啶标记,流式细胞仪检测T-钙黏蛋白对B16F10黑素瘤细胞周期的影响。结果转染T-钙黏蛋白组G0/G1期和G2/M期细胞比率分别为(60.917±1.897)%、(8.513±0.651)%,明显高于未转染组的(53.563±1.856)%、(2.627±0.434)%和pEGFP-N1空载体组的(53.880±2.164)%、(2.770±0.466)%,差异有显著性(P<0.05);转染T-钙黏蛋白组S期细胞比率为(30.570±1.368)%,低于未转染组的(43.810±2.003)%及pEGFP-N1空载体组的(43.350±2.629)%,差异有统计学意义(P<0.05)。未转染组与转染pEGFP-N1空载体组各期差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 T-钙黏蛋白使B16F10细胞G0/G1期和G2/M期比率增高,S期比率降低。 展开更多
关键词 T-钙黏蛋白 b16f10黑素瘤细胞pEGFP—N1 细胞周期 流式细胞技术
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白芨水提物对小鼠黑色素瘤B16F10细胞增殖与迁移的影响 被引量:3
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作者 令狐浪 李成龙 姚晓东 《遵义医学院学报》 2018年第4期408-412,417,共6页
目的探讨白芨水提物对小鼠黑色素瘤B16F10细胞增殖与迁移的影响。方法使用水提醇沉法提取白芨粗多糖,同时保留有机小分子物质部分;采用CCK8试剂检测不同浓度的两部分提取物对B16F10细胞存活率及增殖的影响;细胞划痕检测提取物对B16F10... 目的探讨白芨水提物对小鼠黑色素瘤B16F10细胞增殖与迁移的影响。方法使用水提醇沉法提取白芨粗多糖,同时保留有机小分子物质部分;采用CCK8试剂检测不同浓度的两部分提取物对B16F10细胞存活率及增殖的影响;细胞划痕检测提取物对B16F10细胞迁移的影响,以及ELISA法检测迁移相关蛋白的表达情况。结果与对照组相比,白芨水提物均能降低B16F10细胞的存活率和增殖能力,并与浓度呈正相关,其中多糖和有机小分子物质的半数抑制浓度(IC_(50))分别为51.14μg/mL和40.61μg/mL;此外,白芨水提物对细胞迁移也具有抑制作用,并能下调MMP-2和MMP-9的表达,与对照组相比,中、高浓度的下调作用具有显著性差异。结论白芨水提物能够抑制B16F10细胞的增殖与迁移能力,其作用可能通过下调迁移相关蛋白MMP-2和MMP-9的表达有关。 展开更多
关键词 白芨 水提物 b16f10细胞 细胞增殖 细胞迁移
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赤芝提取物的抗氧化美白及细胞增殖作用研究
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作者 木开代斯·买合木提 陈建 +1 位作者 焦春伟 谢意珍 《世界中医药》 CAS 北大核心 2024年第7期949-956,共8页
目的:研究赤芝提取物(GLE)抗氧化美白及细胞增殖作用。方法:以测定GLE中糖类含量,体外1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除力、蘑菇酪氨酸酶活性抑制力、抑制B16F10细胞黑色素... 目的:研究赤芝提取物(GLE)抗氧化美白及细胞增殖作用。方法:以测定GLE中糖类含量,体外1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基清除力、蘑菇酪氨酸酶活性抑制力、抑制B16F10细胞黑色素合成及酪氨酸酶活性抑制、结晶紫实验和划痕实验为评价指标,研究GLE抗氧化美白及对L929成纤维细胞增殖的作用。结果:GLE中富含总糖、多糖,GLE相较于β-熊果苷对DPPH自由基和ABTS自由基表现出较弱的清除作用,其自由基清除率半抑制浓度(IC 50)分别为1.6 mg/mL和1.2 mg/mL;对蘑菇酪氨酸酶活性有很强的抑制能力,基于α-MSH促黑激素细胞表型造模实验显示,0.4 mg/mL和0.8 mg/mL的GLE具有显著抑制B16F10细胞酪氨酸酶活性以及黑色素生成的作用;GLE具有促进L929成纤维细胞增殖作用。结论:GLE是美白及功能食品开发利用领域的候选者。 展开更多
关键词 赤芝提取物 酪氨酸酶活性 b16f10细胞 黑色素 自由基 抗氧化 增殖 L929成纤维细胞
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羟喜树碱对黑素瘤B16F10细胞侵袭和凋亡的影响及作用机制
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作者 胡巍 柳航 许耶 《药学服务与研究》 CAS 2022年第1期8-12,共5页
目的:观察羟喜树碱(hydroxycamptothecin,HCPT)对黑素瘤B16F10细胞侵袭能力以及凋亡相关蛋白p53和Bcl-2表达的影响,并探讨其抑制黑素瘤细胞的作用机制。方法:分别用5、10、20、50μmol/L的HCPT处理B16F10细胞24 h及48 h,采用Transwell... 目的:观察羟喜树碱(hydroxycamptothecin,HCPT)对黑素瘤B16F10细胞侵袭能力以及凋亡相关蛋白p53和Bcl-2表达的影响,并探讨其抑制黑素瘤细胞的作用机制。方法:分别用5、10、20、50μmol/L的HCPT处理B16F10细胞24 h及48 h,采用Transwell实验评价细胞的侵袭能力。采用Western blot和RT-PCR检测p53和Bcl-2蛋白表达和mRNA表达。结果:Transwell实验结果显示,与空白组比较,HCPT不同浓度组(除HCPT 5μmol/L组外)B16F10细胞体外侵袭能力明显下降(P<0.01)。HCPT能显著升高p53的mRNA和蛋白水平,同时降低Bcl-2的mRNA和蛋白水平(P<0.01),并呈现出明显的剂量依赖性和时间依赖性。结论:HCPT能够明显降低B16F10细胞的体外侵袭能力,干预B16F10细胞中p53和Bcl-2的表达,从而促进肿瘤细胞凋亡。 展开更多
关键词 羟喜树碱 黑素瘤 b16f10细胞 细胞凋亡 作用机制
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甘草查尔酮A抑制小鼠黑色素瘤B16F10细胞增殖机制研究 被引量:10
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作者 王艳明 刘瑛 +4 位作者 阎新燕 司玲玲 高彩霞 于丽娜 郑秋生 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期967-972,共6页
目的研究甘草查尔酮A抑制B16F10细胞增殖机制。方法 SRB法检测甘草查尔酮A对B16F10细胞增殖影响,Giemsa染色法观察细胞形态变化,比色法检测B16F10细胞内、外黑色素含量,Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡率,流式细胞术测定细胞周期分布... 目的研究甘草查尔酮A抑制B16F10细胞增殖机制。方法 SRB法检测甘草查尔酮A对B16F10细胞增殖影响,Giemsa染色法观察细胞形态变化,比色法检测B16F10细胞内、外黑色素含量,Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡率,流式细胞术测定细胞周期分布,Q-PCR法检测细胞凋亡相关基因B淋巴细胞-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、细胞周期蛋白(Cyclin E2)和细胞周期蛋白依赖性激酶-2(CDK2)的mRNA表达。结果甘草查尔酮A能有效抑制B16F10细胞增殖,呈现浓度依赖性和时间依赖性;随药物浓度增加,细胞增殖速度降低,细胞形态由树突状变为固缩圆球状,并伴有黑色素颗粒物出现,且细胞内、外黑色素含量呈浓度依赖性增加趋势,甘草查尔酮A能使细胞阻滞在G1期,在低浓度时,诱导细胞分化,高浓度时,诱导细胞凋亡;同时,甘草查尔酮A下调凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax比率,抑制周期相关蛋白Cyclin E2、CDK2的mRNA表达。结论甘草查尔酮A抑制B16F10细胞增殖机制可能是通过使B16F10细胞G1期阻滞,进而诱导细胞分化和凋亡。 展开更多
关键词 b16f10 甘草查尔酮A 增殖抑制率 黑色素含量 细胞分化 细胞凋亡 细胞周期阻滞
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AG490下调STAT3活化增强葫芦素B对B16F10黑素瘤细胞的抑制作用 被引量:1
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作者 李晶晶 张延亭 +3 位作者 徐丽慧 莫宏波 欧阳东云 何贤辉 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期579-583,共5页
目的:研究Jak2/STAT3特异性抑制剂AG490对葫芦素B(CuB)抑制B16F10黑素瘤细胞效应的影响,并探讨其作用机制。方法:用MTS法检测细胞增殖状态;用碘化丙锭(PI)染色分析细胞凋亡和细胞周期分布;用免疫印迹检测p-STAT3以及STAT3蛋白的表达情... 目的:研究Jak2/STAT3特异性抑制剂AG490对葫芦素B(CuB)抑制B16F10黑素瘤细胞效应的影响,并探讨其作用机制。方法:用MTS法检测细胞增殖状态;用碘化丙锭(PI)染色分析细胞凋亡和细胞周期分布;用免疫印迹检测p-STAT3以及STAT3蛋白的表达情况。结果:CuB以时间与浓度依赖方式抑制B16F10黑素瘤细胞的生长,AG490预处理能增强CuB对B16F10细胞的抑制作用;PI染色分析显示,AG490能增强CuB诱导B16F10细胞凋亡的比率;免疫印迹检测表明,CuB引起B16F10细胞中STAT3的活化(p-STAT3),AG490能明显下调p-STAT3蛋白的表达水平。结论:阻断Jak/STAT3的活化可增强CuB对B16F10黑素瘤细胞的抑制作用。 展开更多
关键词 AG490 葫芦素B b16f10黑素瘤细胞 STAT3
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茶多酚对小鼠黑色素瘤细胞B16F10体外增殖和迁移的影响 被引量:1
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作者 刘芳君 蓝吴涛 +3 位作者 李鹏飞 许冬梅 张磊 朱芷葳 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第4期1280-1286,共7页
【目的】研究茶多酚对小鼠黑色素瘤细胞B16F10增殖和迁移的影响,以期为将茶多酚用于肿瘤的治疗提供依据。【方法】用不同浓度茶多酚(0.05、0.10和0.15 g/L)处理B16F10细胞,不处理(0 g/L)的作为对照组,采用CCK-8法检测各组细胞生长情况,... 【目的】研究茶多酚对小鼠黑色素瘤细胞B16F10增殖和迁移的影响,以期为将茶多酚用于肿瘤的治疗提供依据。【方法】用不同浓度茶多酚(0.05、0.10和0.15 g/L)处理B16F10细胞,不处理(0 g/L)的作为对照组,采用CCK-8法检测各组细胞生长情况,计算生长抑制率;不同浓度茶多酚处理细胞24 h后,采用划痕试验评价细胞的迁移能力;通过实时荧光定量PCR和Western blotting检测B16F10细胞中小眼畸形相关转录因子(microphthalmia-associated transcription factor,MITF)和黑色素形成限速酶(tyrosinase,TYR)mRNA和蛋白的表达水平。【结果】与对照组相比,0.05 g/L茶多酚对B16F10细胞增殖无明显抑制作用(P>0.05),0.10和0.15 g/L茶多酚对B16F10细胞的增殖能力有极显著的抑制作用(P<0.01),且浓度越高,抑制作用越强;0.05、0.10和0.15 g/L茶多酚对B16F10细胞的迁移均有极显著的抑制作用(P<0.01);实时荧光定量PCR和Western blotting结果显示,随着茶多酚浓度的升高,MITF和TYR mRNA和蛋白的表达量均呈浓度依赖性降低,与对照组相比,0.05 g/L茶多酚显著降低MITF mRNA和蛋白的表达(P<0.05),0.10和0.15 g/L茶多酚均极显著降低MITF mRNA和蛋白的表达(P<0.01),0.10和0.15 g/L茶多酚均极显著降低TYR mRNA和蛋白的表达(P<0.01)。【结论】0.10和0.15 g/L茶多酚对B16F10细胞的增殖和迁移均有明显的抑制作用,并且能降低黑色素生成基因MITF和TYR的表达,表明茶多酚能抑制黑色素瘤的进展。 展开更多
关键词 黑色素瘤b16f10细胞 茶多酚 增殖 迁移
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人参皂苷Rb1对过氧化氢诱导的B16F10鼠黑素瘤细胞凋亡的保护作用 被引量:1
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作者 刘海平 高华 付洪军 《中国麻风皮肤病杂志》 2014年第6期327-330,共4页
目的:确定人参皂苷Rb1对过氧化氢诱导的B16F10黑素瘤细胞凋亡的保护作用。方法:将B16F10细胞随机分为对照组,H_2O_2组和Rb1+H_2O_2组(细胞培养液中分别加入10 mg/L、20 mg/L、50 mg/L的人参皂苷Rb1和H_2O_2)。分别测定B16F10细胞活力、... 目的:确定人参皂苷Rb1对过氧化氢诱导的B16F10黑素瘤细胞凋亡的保护作用。方法:将B16F10细胞随机分为对照组,H_2O_2组和Rb1+H_2O_2组(细胞培养液中分别加入10 mg/L、20 mg/L、50 mg/L的人参皂苷Rb1和H_2O_2)。分别测定B16F10细胞活力、LDH漏出量、线粒体膜电位及细胞凋亡水平。结果:H_2O_2作用24 h后,B16F10细胞活力降低至对照组的53.77%,而Annexin V和PI阳性细胞比例为25.6%,显著高于对照组(P<0.01)。50 mg/L人参皂苷Rb1预处理后,B16F10细胞活力为对照组的77.75%,较H_2O_2组增加44.6%(P<0.01)。Annexin V和PI阳性细胞比例为14.4%,明显低于H_2O_2组(P<0.01),并且LDH漏出率明显降低,线粒体膜电位显著升高。结论:人参皂苷Rb1对H_2O_2所致的B16F10黑素瘤细胞凋亡具有保护作用,有效提高其抗氧化应激能力。 展开更多
关键词 人参皂苷RB1 b16f10细胞 凋亡
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全反式维甲酸对小鼠黑色素瘤B16F10细胞生物学行为的影响
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作者 郑先珍 姚秋娥 +3 位作者 石三军 李欣 卢来春 赵语 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第22期2169-2175,共7页
目的探讨全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)对小鼠黑色素瘤B16F10细胞体外增殖、迁移、凋亡、致瘤性的影响及其初步作用机制。方法采用MTT法检测ATRA对小鼠黑色素瘤细胞B16F10和小鼠成纤维细胞L929增殖能力的影响。显微镜下... 目的探讨全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)对小鼠黑色素瘤B16F10细胞体外增殖、迁移、凋亡、致瘤性的影响及其初步作用机制。方法采用MTT法检测ATRA对小鼠黑色素瘤细胞B16F10和小鼠成纤维细胞L929增殖能力的影响。显微镜下观察给药后两种细胞的形态变化,应用划痕实验和Transwell实验检测ATRA对B16F10细胞迁移能力的影响,分别采用DAPI染色和Annexin V-FITC/PI染色观察B16F10细胞凋亡情况,JC-1染色实验检测B16F10细胞线粒体膜电位,荧光分光光度计检测B16F10细胞中Caspase-9、Caspase-3的活化情况,利用体内成瘤实验观察ATRA对B16F10细胞致瘤性的影响。结果 MTT结果显示ATRA呈浓度依赖性地抑制B16F10细胞和L929细胞增殖,但B16F10细胞的存活率明显低于L929细胞的存活率(P<0.05);分别以低、中、高3个浓度(6.25、16、40μmol/L)的ATRA处理细胞24 h后,显微镜下可见B16F10细胞在中浓度时呈凋亡样改变,高浓度时细胞基本死亡,丧失正常形态;而L929细胞形态仅在高浓度时发生显著变化;划痕实验和Transwell实验提示B16F10细胞的体外迁移能力在中浓度即受到明显抑制(P<0.05);继续以中浓度(16μmol/L)的ATRA作用B16F10细胞24 h,DAPI染色可见细胞核裂解,甚至可见凋亡小体;Annexin V-FITC/PI染色结合流式细胞仪测得细胞凋亡率为(37.27±4.42)%;JC-1染色实验提示线粒体膜电位明显降低;荧光分光光度计测得给药后Caspase-9、Caspase-3显著被活化,活性分别增加了(1.54±0.00)、(3.09±0.01)倍(P<0.05);成瘤实验结果显示ATRA处理后的B16F10细胞致瘤性显著降低(P<0.01),甚至消失。结论 ATRA能显著抑制B16F10细胞体外增殖、迁移能力,并能通过降低线粒体膜电位,活化Caspase-9、Caspase-3蛋白诱导细胞凋亡,进而抑制B16F10致瘤性。 展开更多
关键词 全反式维甲酸 恶性黑色素瘤 b16f10细胞 增殖 迁移 凋亡 致瘤性
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大蒜提取物对B16F10细胞内黑色素生成的抑制作用
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作者 姚欣 曾洁琳 +4 位作者 沈衡平 刘朕 范丽霞 杨安平 刘辉 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期666-671,共6页
采用MTT法测定大蒜提取物、二胜肽和六胜肽3种物质对B16F10细胞活力的影响,且在非毒剂量下,分别评价此3种物质对B16F10细胞黑色素生成和细胞形态的影响;在单因素试验基础上,采用正交试验设计大蒜提取物、二胜肽和六胜肽组合物中各组分... 采用MTT法测定大蒜提取物、二胜肽和六胜肽3种物质对B16F10细胞活力的影响,且在非毒剂量下,分别评价此3种物质对B16F10细胞黑色素生成和细胞形态的影响;在单因素试验基础上,采用正交试验设计大蒜提取物、二胜肽和六胜肽组合物中各组分的用量,检测组合物对B16F10细胞黑色素生成抑制率的影响,并利用Western blot检测最佳组合物对黑色素合成相关蛋白TYR、TRP-1和TRP-2表达的影响。结果表明:0.00~2.50μg/mL的大蒜提取物、0.00~4.00μg/mL的二胜肽或六胜肽对B16F10细胞的细胞活力和细胞形态均没有显著影响;大蒜提取物在0.00~2.50μg/mL、二胜肽和六胜肽在0.00~4.00μg/mL内呈剂量依赖性的抑制黑色素的生成;当大蒜提取物、二胜肽、六胜肽质量浓度分别为2.50、1.00、0.50μg/mL时的组合物抑制黑色素的生成作用效果最佳;该最佳组合物对黑色素合成相关蛋白TYR、TRP-1和TRP-2的表达具有明显的抑制作用,表明组合物抑制黑色素的生成与TYR、TRP-1和TRP-2蛋白水平的降低有关。 展开更多
关键词 b16f10细胞 大蒜提取物 二胜肽 六胜肽 黑色素 细胞活力 细胞形态 抑制作用
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构建稳定表达小鼠RAE1ε的B16F10细胞株
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作者 陈敏华 宁晓敏 +1 位作者 李冬锟 钱莉 《齐齐哈尔医学院学报》 2019年第7期797-799,共3页
目的 通过转染及流式细胞术筛选获得稳定表达小鼠RAE1ε分子的B16F10细胞株。方法 将本研究团队前期构建的含有小鼠RAE1ε基因的真核表达载体通过脂质体法转染B16F10细胞,经流式细胞仪(flow cytometry,FCM)筛选后,建立稳定高表达的B16... 目的 通过转染及流式细胞术筛选获得稳定表达小鼠RAE1ε分子的B16F10细胞株。方法 将本研究团队前期构建的含有小鼠RAE1ε基因的真核表达载体通过脂质体法转染B16F10细胞,经流式细胞仪(flow cytometry,FCM)筛选后,建立稳定高表达的B16F10细胞株,将该细胞株与NK细胞共培养后,检测IFN-γ的分泌情况。结果 建立了稳定表达RAE1ε基因的B16F10细胞株,该细胞株上的RAE1ε具有刺激NK细胞高分泌IFN-γ的功能。结论 获得了稳定表达RAE1ε分子的B16F10细胞株,为后续研究奠定了物质基础。 展开更多
关键词 RAE1ε 转染 b16f10细胞
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构建稳定表达PDL1的B16F10细胞株
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作者 宁晓敏 李冬琨 钱莉 《齐齐哈尔医学院学报》 2020年第5期543-545,共3页
目的通过转染及流式细胞仪(flow cytometry,FCM)筛选出稳定表达小鼠细胞程式死亡配体1(Programmed cell death ligand 1,PDL1)的B16F10细胞株。方法将携带PDL1的真核表达质粒通过脂质体法转染到B16F10细胞株中,经FCM进行多次分选,筛选... 目的通过转染及流式细胞仪(flow cytometry,FCM)筛选出稳定表达小鼠细胞程式死亡配体1(Programmed cell death ligand 1,PDL1)的B16F10细胞株。方法将携带PDL1的真核表达质粒通过脂质体法转染到B16F10细胞株中,经FCM进行多次分选,筛选出稳定表达PDL1的B16F10细胞株,将其与抗CD3/抗CD28抗体活化的CD4^+T细胞共培养48 h后,FCM检测CD4^+T细胞表面CD69以及CD25的表达。结果建立了稳定表达PDL1的B16F10细胞株,该细胞株表面的PDL1可诱导CD4^+T细胞高表达CD25。结论成功地得到了稳定表达PDL1的B16F10细胞株,为后续研究奠定了物质基础。 展开更多
关键词 PDL1 稳定表达 b16f10细胞株
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