靶向vegf/vegfr2基因siRNA对小鼠B16F10移植瘤生长影响

目的血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)是目前已知最重要的血管生成调节因子,VEGF与其受体(vascular endothelial growth factor receptor,VEGFR)特异性结合,调节血管及肿瘤血管的生成。本研究靶向vegf及其受体vegfr2基因小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对小鼠黑色素瘤细胞B16F10移植瘤生长的影响。方法将B16F10细胞皮下注射于C57BL6小鼠腋下,构建小鼠黑色素瘤模型。于B16F10细胞注射后7d,将目标siRNA与转染试剂Entranster^TM-invivo制成转染复合物,通过瘤内注射靶向vegf/vegfr2基因的siRNAo测量不同处理后移植瘤的体积、质量,并对肿瘤组织进行HE染色,蛋白质印迹检测肿瘤组织中VEGF/VEGFR2蛋白的表达。结果转染vegf及vegfr2 siRNA组的肿瘤体积、质量小于对照组。第12天时PBS组肿瘤体积为3322mm^3,转染vegf及vegfr2 siRNA组肿瘤体积分别为1467、1418mm^3,差异有统计学意义,F值分别为10.760和3.986,P值分别为0.002和0.025;第12天剥离肿瘤,空白对照(PBS)组肿瘤质量1.917g,转染vegf及vegfr2 siRNA组肿瘤质量不及对照组的1/2,分别为1.013.0.723g,差异均有统计学意义,F值分别为63.912和43.791,P值分别为0.013和0.003。HE染色分析显示,vegf及vegfr2siRNA干扰组肿瘤细胞稀疏,血管壁完整性不一。转染vegf或vegfr2 siRNA组肿瘤组织中VEGF及VEGFR2蛋白表达降低,分别是PBS组的0.605.0.310倍,F值分别为10.381和157.403,均P<0.0010结论靶向vegf或vegfr2的siRNA能够抑制小鼠B16F10移植瘤的生长及肿瘤血管的形成,有效抑制肿瘤组织中VEGF/VEGFR2蛋白的表达。所筛选的靶向vegf/vegfr2的siRNA可作为一种基因沉黙的方法应用于血管生成相关研究中。