B19微小病毒70-mer寡核苷酸探针的设计

目的 设计B19微小病毒诊断基因芯片的寡核苷酸探针。方法 以微小病毒B19为例 ,利用BLAST软件对其序列进行比对并获得特异序列 ;利用软件Oligo 6设计特异性高、Tm值接近、长度均一的寡核苷酸探针。 结果 获得 12条 70 mer寡核苷酸探针 ,用于芯片打印及病毒检测。结论 利用BLAST系统和生物学软件Oligo

肾移植术后微小病毒B19V感染与相关贫血的临床特点分析

目的探讨肾移植术后受者人微小病毒B19(human parvovirus B19,B19V)感染所致贫血的临床特点及其治疗方案。方法以在中国人民解放军联勤保障部队第九二四医院器官移植中心接受同种异体肾移植手术的5例受者术后出现顽固性贫血为观察对象,实验室检查均为小细胞低色素性贫血,在排除常见贫血原因后,血液宏基因二代测序(metagenomic next-generation sequencing,mNGS)检测人微小病毒B19V阳性,给予患者促红素、口服铁剂、静脉注射人免疫球蛋白(400 mg/kg,第1~5天)、调整免疫抑制方案(他克莫司部分减量,部分调整他克莫司为环孢素)等综合治疗。结果在5例患者中,经综合治疗后,4例(80%)患者病情得到明显缓解,1例出现复发,经再次静脉注射人免疫球蛋白后好转,治疗期间1例合并急性排斥反应。结论肾移植术后对于出现不明原因贫血且进行性加重的患者,应警惕人微小病毒B19V感染的可能。规范疗程静脉注射人免疫球蛋白是肾移植术后人微小病毒B19V感染导致纯红细胞再生障碍性贫血的首选治疗方法,对于复发患者,再次应用仍然有效。联合调整免疫抑制剂方案等综合治疗,可获得理想疗效。同时在治疗期间还需密切监测移植肾功能状态,防止出现移植肾排斥反应。

无偿献血人群人微小病毒B19感染状况调查

目的在现有血液筛查模式下,对苏州地区无偿献血者感染人微小病毒B19的情况进行调查研究。方法随机选取2022年9―12月苏州地区无偿献血者893名,用ELISA法进行B19血清学IgG、IgM抗体检测,并对抗体阳性者进行B19 DNA real-time PCR检测。结果893份标本中,B19抗体总阳性率为20.7%(185/893),IgG、IgM抗体阳性率分别为19.4%(173/893)、1.9%(17/893),2者有差异(P<0.05);男性与女性B19 IgG及IgM抗体阳性率(20.1%,1.5%vs 18.0%,2.6%)均无差异(P>0.05);B19 IgG抗体阳性率随着献血者年龄增长逐渐升高(P<0.05),但IgM抗体阳性率无差异(P>0.05);不同血型人群B19 IgG及IgM抗体阳性率均无差异(P>0.05);重复献血者B19 IgG抗体阳性率高于初次献血者(21.5%vs 15.9%)(P<0.05),IgM抗体阳性率则无差异(P>0.05);在B19抗体阳性标本中,检出B19 DNA阳性3份,阳性率为1.6%(3/185)。结论苏州地区无偿献血者B19抗体阳性率较其他地区偏低且多为既往感染,但仍存在一定比例的急性感染和持续感染,有经血传播风险,在今后输血尤其是高风险易感人群中应特别重视。

1例肝移植术后人微小病毒B19感染致纯红细胞再生障碍性贫血的护理

目的:总结1例肝移植术后人微小病毒B19感染致纯红细胞再生障碍性贫血的护理经验。方法:对某三级甲等医院器官移植中心收治的1例肝移植术后人微小病毒B19感染致纯红细胞再生障碍性贫血病人的护理经过进行总结和分析。结果:病人血红蛋白趋于稳定,顺利出院,出院后复查病情平稳,未见血红蛋白进行性下降。结论:对肝移植术后人微小病毒B19感染致纯红细胞再生障碍性贫血病人采取积极有效的病情观察、用药护理、感染防控以及心理护理,并做好出院后的延续护理,可取得良好的临床效果。

肾移植术后微小病毒B19复发感染诊疗分析

目的总结肾移植术后受者感染微小病毒B19(human parvovirus B19,HPV-B19)且多次复发的诊断方法、临床表现及防治措施。方法2020年6月至2022年5月于华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植中心行肾移植术后感染HPV-B19的37例受者中有8例复发,本研究对这8例受者的临床表现、诊疗措施、实验室检查及预后进行回顾性分析和总结。结果8例受者经过多疗程静脉注射丙种球蛋白(intravenous immunoglobulin G,IVIG)、转换免疫抑制剂及降低免疫抑制强度等综合治疗后,贫血症状改善,血红蛋白(hemoglobin,Hb)水平稳定,并在复发时使用同样治疗措施有效。8例受者最后1次复发后继续随访1年,8例受者再无复发且Hb水平稳定[(136.8±12.0)g/L],整个感染期间肾功能稳定。结论肾移植术后受者因免疫力低下,易感染HPV-B19且容易复发。当受者感染HPV-B19后,应定期监测Hb及网织红细胞水平,尤其是治疗好转的受者一旦再次出现Hb进行性下降应立即引起重视,进一步通过聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)法检测HPV-B19 DNA来判断是否复发。HPV-B19感染时应首选静脉注射IVIG来抗感染,当病情反复时,再次应用仍然有效且起到巩固治疗效果。结合调整免疫抑制剂方案及降低免疫抑制强度等综合治疗,可获得理想疗效。

人微小病毒B19感染的研究进展

近年来人微小病毒B19(human parvovirus B19)作为人类疾病的重要病原已愈来愈广泛受到重视。大量研究成果不但揭示了B19病毒的致病机理,Th-1介导的细胞免疫应答,而且发展了B19感染的诊断和B19污染血制品的筛查技术,并且为疫苗的研制奠定了基础。这里对人类B19病毒的病原学特征、致病机理、临床症状及实验室诊断方法和技术进行了较全面的综述。

人微小病毒B19及硒与大骨节病关系的研究

目的 研究人微小病毒B19(B19)感染和硒与大骨节病的关系。方法 采用聚合酶链反应 (PCR)及荧光法检测大骨节病病区儿童血清B19DNA和红细胞硒含量 ,并与非病区健康儿童进行对比分析。结果 大骨节病病区儿童血清B19感染率显著高于非病区儿童 ,红细胞硒含量显著低于非病区儿童 ,低硒营养状态的儿童B19感染率明显高于正常硒水平的儿童。结论 我国大骨节病病区存在着B19感染的流行 ,低硒可能是B19感染发生和发展的条件。

儿童抽动障碍与微小病毒B_(19)感染和免疫功能

目的:探讨抽动障碍(TD)与人微小病毒B19(HPV-B19)、巨细胞病毒(CMV)、A型链球菌感染和免疫功能的关系及其临床意义。方法:采用酶联免疫吸附法测定60例TD患儿血清HPV-B19-IgM,CMV-IgM,采用凝集反应测定抗链球菌溶血素“O”抗体滴度(ASO),并行血常规、免疫功能检查。对照组为20例正常儿童。结果:60例TD患儿中有14例(23·3%)HPV-B19-IgM阳性,而健康儿童均为阴性(χ2=5·67,P<0·05)。两组儿童CMV-IgM阳性率、ASO滴度及外周血血红蛋白、白细胞计数和血小板数及体液免疫(IgA、IgG、IgM)比较差异无统计学显著性。细胞免疫功能检测CD4+细胞百分比、CD4+/CD8+细胞比值及NK阳性细胞百分比HPV-B19-IgM阳性组(25·76±10·21%,0·78±0·42,8·77±5·64%)与HPV-B19-IgM阴性组(26·89±9·08%,0·88±0·35,9·61±6·45%)均较对照组(38·31±6·95%,1·58±0·29,14·83±4·16%)明显降低,而CD8+细胞百分比(HPV-B19-IgM阳性组为32·98±10·3%,HPV-B19-IgM阴性组为32·58±9·04%)较对照组(24·82±5·54%)明显升高(P<0·01)。结论:抽动障碍患儿HPV-B19感染率较高。细胞免疫功能紊乱可能是各种原因导致儿童TD发生的一个共同途径。

人类微小病毒B19感染在桥本甲状腺炎发生中的作用

目的探讨人类微小病毒B19感染(parvovirus B19,B19)在桥本甲状腺炎(Hashimoto’s thyroiditis,HT)发生中的作用。方法对32例手术切除的HT患者甲状腺组织及16例甲状腺腺瘤患者腺瘤旁正常甲状腺组织,分别用原位杂交法(ISH)和免疫组化(IHC)SP法检测B19病毒DNA和病毒蛋白的表达。结果B19ISH阳性信号同时来源于甲状腺滤泡上皮细胞和间质浸润的淋巴细胞,而IHC阳性信号大多表达于增生甲状腺滤泡上皮细胞,少数表达于间质浸润的淋巴细胞。在HT中,ISH和IHC阳性率分别为71·9%(23/32)和56·3%(18/32),而腺瘤旁正常甲状腺组织中,阳性率分别为12·5%(2/16)和6·25%(1/16),两者比较差异有统计学意义(ISH:χ2=12·783,P=0·000;IHC:χ2=9·158,P=0·001)。结论HT患者甲状腺组织B19感染率明显高于腺瘤旁正常甲状腺组织,提示HT可能是一种新的B19相关性人类疾病,B19感染在桥本甲状腺炎的发生中可能起重要的作用。

人微小病毒B19VP1独特区蛋白的表达及纯化

目的利用原核表达系统表达人微小病毒B19的VP1独特区蛋白,大量发酵培养细菌后纯化蛋白,为制备VP1蛋白的mAb奠定基础。方法构建重组质粒VP1-PQE30,转化大肠杆菌M15,测序正确后发酵培养、IPTG诱导表达,通过SDS-PAGE及Western blot分析表达产物,表达蛋白经AKTA explorer 100快速纯化系统纯化。结果成功地构建原核表达系统VP1-PQE30-M15,经IPTG诱导发酵培养细菌可大量表达VP1蛋白,纯化后蛋白纯度达95%以上。结论重组表达质粒可表达VP1独特区蛋白,高纯度蛋白对制备VP1mAb及疫苗具有重要意义。

17例人微小病毒B19肝炎患者临床特点分析

目的探讨人微小病毒B19肝炎患者的临床特征。方法对17例感染人微小病毒B19患者的病历资料进行回顾性分析,总结肝损害的特点和临床特征。结果 17例人微小病毒B19肝炎患者均有发热(100%),有全身乏力14例(82.4%)、关节、肌肉痛9例(52.9%)、咽痛6例(35.3%)、食欲减退11例(64.7%)、皮疹5例(29.4%)、脾肿大12例(70.6%),肝肿大7例(41.2%)、淋巴结肿大3例(17.6%)、黄疸5例(29.4%);除血ALT和AST升高外,伴有羟丁酸脱氢酶、乳酸脱氢酶、腺苷脱氨酶升高和淋巴细胞百分比升高;起病急,临床表现复杂,但多呈急性自限性过程,肝功能恢复较快,预后较好。结论对不明原因肝损害同时伴有上述特征者,除常规筛查常见的嗜肝病毒外,及时检测血清抗人微小病毒B19抗体Ig M,能帮助明确一部分患者的病因。

早期自然流产胚胎组织中微小病毒B19感染的研究

目的 :应用聚合酶链反应 (PCR)技术检测早、中期自然流产患者胚胎及胎盘等组织中的微小病毒B19,对比分析早期流产的原因。方法 :收集早期自然流产患者的胚胎绒毛组织和母亲血清 ,孕中期自然流产胎儿的胎盘、胎儿组织和母亲血清 ,足月分娩者的胎盘组织及母亲血清 ,应用PCR检测微小病毒B19DNA ,同时检测母血清抗体。结果 :6 1例早期流产胚胎绒毛中 ,3例 (5 % )B19病毒阳性 ;4 5例孕中期胚胎组织中 ,5例 (11% )检测出B19病毒 ;5 0例足月分娩胎盘组织中未检测出B19病毒。早期流产患者血清中特异性抗体IgG检出 31%、IgM阴性 ;检出孕中期母血清B19病毒特异性抗体IgG占 35 %、IgM占 11%。结论 :B19病毒是导致早期流产的原因之一 。

人类微小病毒B19感染与急性肝炎的关系

目的 探讨B19感染在急性肝炎病因学中的作用。方法 对21例急性非甲～戊型肝炎病人、32例健康儿及36例甲肝病儿进行近期B19感染的检查,包括B19 DNA检查、间接免疫荧光法检测B19表面蛋白抗原,并比较B19阳性组、甲肝组、病因未明组的临床、实验室特征及肝功恢复时间。结果 21例中B19 DNA阳性4例(19％),对照组B19 DNA均阴性,差异有显著意义。B19 DNA阳性4例中2例检测到B19特异性抗原,对照组均阴性,差别无显著意义。4例B19感染病人、17例病因未明者及甲型肝炎病人在发热、黄疸及关节症状方面无显著差异;但B19感染组皮疹的发生高于另外两组。血清ALT及胆红素水平3组间无明显差异。B19感染组肝功能迅速恢复正常,3例于2周内恢复,4周全部恢复正常。结论B19感染可能为小儿急性肝炎的较重要病毒病因。

病毒性心肌炎患儿微小病毒B19感染的研究

目的探讨病毒性心肌炎患儿微小病毒B19(HPV B19)感染的状况及其相关性。方法应用巢式聚合酶链反应法对60例病毒性心肌炎患儿(观察组)及30例健康体检儿童(对照组)血浆中微小病毒B19-DNA进行检测,并对观察组中HPV B19-DNA检测阳性与阴性两组中血CK、CK-MB及心功能指标进行比较。结果观察组 B19-DNA检测阳性率为26．7％(16／60例),对照组B19-DNA检测均为阴性,两组比较差异有显著性(P<0．01)。观察组中HPV B19-DNA检测阳性与阴性的两组中血CK、CK-MB值差异无显著性(P>0．05)。心功能指标LVSF比较差异有显著性(P<0．01),SV比较差异亦有显著性(P<0．05)。结论小儿病毒性心肌炎与HPV B19感染有关, HPV B19可能是小儿病毒性心肌炎主要病原之一;HPV B19感染所致小儿病毒性心肌炎的心功能改变中左室功能受累程度较重。

组织细胞性坏死性淋巴结炎中微小病毒B19的检测及其意义

目的研究人微小病毒B19感染与组织细胞性坏死性淋巴结炎(histiocytic necrotizing lymphadenitis,HNL)的关系。方法采用双盲法在32例真性HNL患者及13例正常对照淋巴结活检组织中用巢式PCR和免疫组化染色检测B19病毒基因组DNA和病毒蛋白。结果在32例真性HNL患者淋巴结中,B19病毒DNA和病毒蛋白阳性率分别为90·0%和59·4%,而在对照淋巴结中,两者阳性率分别为53·8%和23·1%。统计学分析显示在真性HNL中B19病毒基因组DNA及病毒蛋白的阳性率更高(P<0·05)。结论B19病毒在真性HNL中有更高感染率,推测与真性HNL的发病可能有一定关系。

肾移植术后人类微小病毒B19感染致纯红细胞再生障碍性贫血2例并文献复习

目的探讨肾移植术后人类微小病毒(HPV)B19感染致纯红细胞再生障碍性贫血(纯红再障)的诊断和治疗特点。方法总结南方医科大学南方医院器官移植科收治的2例肾移植术后HPV B19感染致纯红再障的病例,结合文献复习讨论该病的临床特点、诊断方法、治疗过程及预后。结果两例肾移植受者术后早发严重贫血且进行性加重,输血治疗无效。排除导致贫血的其他原因,综合骨髓穿刺活检、荧光聚合酶链反应(PCR)检测HPV DNA等方法诊断为HPV B19感染致纯红再障。经调整免疫抑制方案、静脉注射用免疫球蛋白(IVIG)等治疗后2例患者贫血症状明显改善。结论对于肾移植术后早期不明原因、进行性加重的贫血患者,特别是伴随网织红细胞缺乏者,应考虑HPV B19感染致纯红再障的可能性。骨髓穿刺及荧光PCR检测结果是诊断纯红再障的主要依据,免疫抑制剂减量和应用IVIG治疗是主要治疗措施。经治疗后,患者预后较好,但易复发。

人微小病毒B19-DNA定量检测在儿童免疫性血小板减少症中的意义

目的 探讨人微小病毒（HPV）B19-DNA定量检测在儿童免疫性血小板减少症（ITP）中的意义。方法 采用实时荧光定量PCR技术对126例ITP患儿和40例健康儿童血清标本进行HPVB19-DNA定量检测,同时检测其血小板相关抗体。结果 ITP患儿HPVB19阳性率（DNA载量〉10^3Copies/m L为阳性）为34.9%;健康儿童均为阴性,两组间差异有极显著性（P〈0.01）。新诊断ITP B19-DNA平均载量为10^7.55±2.05Copies/m L,持续性ITP为10^6.01±1.98Copies/m L,慢性ITP为10^4.72±1.07Copies/m L,三组间差异有极显著性（P〈0.01）;在ITP组中,HPVB19阳性的患儿血小板相关抗体PAIg G、PAIg A均显著高于HPVB19阴性ITP患儿,且B19DNA阳性组中DNA高载量的组别（≥10^7Copies/m L）血小板相关抗体显著高于DNA低载量的组别（10^3～10^7Copies/m L）。结论 本组研究提示,HPVB19感染可能是导致小儿ITP的重要因素之一,且急性型和持续性ITP病毒DNA载量较高。血小板相关抗体浓度和HPVB19的DNA载量呈正相关。

17例人微小病毒B19肝炎患者临床特点分析

目的探讨人微小病毒B19肝炎患者的临床特征。方法对17例感染人微小病毒B19患者的病例资料进行回顾性分析,总结肝损害的特点和临床特征。结果 17例人微小病毒B19肝炎患者均有发热(100%),有全身乏力14例(82.4%)、关节、肌肉痛9例(52.9%)、咽痛6例(35.3%)、食欲减退11例(64.7%)、皮疹5例(29.4%)、脾肿大12例(70.6%),肝肿大7例(41.2%)、淋巴结肿大3例(17.6%)、黄疸5例(29.4%);除血ALT和AST升高外,伴有羟丁酸脱氢酶、乳酸脱氢酶、腺苷脱氨酶升高和淋巴细胞百分比升高;起病急,临床表现复杂,但多呈急性自限性过程,肝功能恢复较快,预后较好。结论对不明原因肝损害同时伴有上述特征者,除常规筛查常见的嗜肝病毒外,及时检测血清抗人微小病毒B19抗体Ig M,能帮助明确一部分患者的病因。

无偿献血员血清人微小病毒B_(19)感染情况调查

目的 了解当地献血员中人微小病毒B19(HPVB19)感染情况 ,为预防HPVB19感染提供初步依据 ;方法 随机抽查 110名无偿献血员所供血液 ;以聚合酶链反应技术检测血清中HPVB19 DNA的表达。结果 测出HPVB19DNA阳性 2 3名 ,阳性率达 2 0 9%。