转基因水稻B2A68事件特异性检测方法的建立

利用hiTAIL-PCR方法扩增获得转基因水稻B2A68中T-DNA右边界591 bp的旁侧序列,该序列位于水稻第3染色体上。参考已公布的该插入位点的水稻基因组序列和载体左边界序列分别设计上下游引物,扩增获得外源基因插入位点的左边界925 bp旁侧序列。以左右旁侧序列为基础,建立了转基因水稻B2A68事件特异性定性检测方法。采用该方法可从转基因水稻B2A68中扩增到521 bp和307 bp的2条特异性目标条带,其它水稻不会扩增到条带或者上述相同大小的目标条带。该方法特异性强,检测灵敏度达到0.1%,能满足海关、工商、农业等部门的检测需求。