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猪瘟病毒E2基因抗原结构域A、B、C、D区在大肠杆菌中的表达 被引量:9
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作者 张永国 刘湘涛 +3 位作者 韩雪清 胡建和 张彦明 谢庆阁 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期182-185,共4页
采用PCR技术扩增出猪瘟病毒E2基因抗原结构域A、B、C、D区并克隆于PGEM Teasy载体上,测序结果表明插入的为猪瘟病毒E2基因抗原结构域,切出目的基因,将目的基因克隆到表达质粒pProEX HTb中,获得重组质粒经PCR、酶切和序列分析鉴定E2基因... 采用PCR技术扩增出猪瘟病毒E2基因抗原结构域A、B、C、D区并克隆于PGEM Teasy载体上,测序结果表明插入的为猪瘟病毒E2基因抗原结构域,切出目的基因,将目的基因克隆到表达质粒pProEX HTb中,获得重组质粒经PCR、酶切和序列分析鉴定E2基因抗原结构域插入的位置、大小和读码框均正确,SDS PAGE检测表明受体菌经IPTG诱导后能表达E2基因抗原结构域蛋白,Westernblot检测表明受体菌诱导表达E2基因抗原结构域蛋白可与猪瘟阳性血清发生特异性反应。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 e2基因抗原结构域 A区 b c D区 大肠杆菌 基因表达
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丹酚酸A激活AKT/mTOR/4EBP1通路缓解脂多糖诱导的H9c2心肌细胞凋亡和氧化应激 被引量:20
2
作者 崔勤涛 王俊华 +3 位作者 刘晓晨 王学惠 马海英 苏国宝 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2020年第1期16-23,共8页
目的探究丹酚酸A(Sal A)对脂多糖(LPS)诱导的氧化应激性损伤H9c2心肌细胞增殖、凋亡,以及蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/起始因子4E结合蛋白(4EBP1)通路相关蛋白表达的影响。方法用LPS诱导制备H9c2心肌细胞氧化应激性损... 目的探究丹酚酸A(Sal A)对脂多糖(LPS)诱导的氧化应激性损伤H9c2心肌细胞增殖、凋亡,以及蛋白激酶B(AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/起始因子4E结合蛋白(4EBP1)通路相关蛋白表达的影响。方法用LPS诱导制备H9c2心肌细胞氧化应激性损伤模型,分别用含Sal A 5,10和20 mg·L^-1的DMEM培养基培养细胞24 h,加LPS 1 mg·L^-1继续孵育24 h。用5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)染色观察H9c2心肌细胞存活;采用流式细胞术检测H9c2心肌细胞凋亡和线粒体膜电位;用试剂盒检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)和超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量;Western印迹法检测胱天蛋白酶3、胱天蛋白酶9、存活蛋白、Bax/Bcl-2,AKT、磷酸化AKT(p-AKT)、mTOR、p-mTOR、4EBP1和p-4EBP1蛋白表达水平。结果与细胞对照组比较,模型组EdU红色标记的细胞减少(P<0.05);与模型组比较,Sal A 5,10和20 mg·L^-1处理组EdU红色标记的细胞增多(P<0.05)。Sal A能降低培养液中LDH活性及细胞内MDA和GSH含量,增加胞内SOD活性(P<0.05),减少心肌细胞的凋亡率(P<0.05),降低心肌细胞线粒体膜电位的下降速度(P<0.05)。Sal A 10和20 mg·L^-1处理后,活化胱天蛋白酶3、活化胱天蛋白酶9和Bax/Bcl-2蛋白水平显著下调(P<0.05),存活蛋白水平显著上调(P<0.05);与细胞对照组比较,模型组AKT/mTOR/4EBP1磷酸化水平均显著降低(P<0.05)。与模型组比较,Sal A 10和20 mg·L^-1组AKT和mTOR磷酸化水平均显著升高(P<0.05)。结论Sal A通过激活AKT/mTOR/4EBP1通路、减少心肌细胞凋亡并降低心肌细胞线粒体膜电位的下降速度,减缓了LPS诱导的H9c2心肌细胞凋亡和氧化应激,表明Sal A对LPS造成的氧化应激损伤心肌细胞具有保护作用。 展开更多
关键词 丹酚酸A 蛋白激酶b 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 起始因子4e结合蛋白 H9c2 细胞凋亡 氧化应激
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3Gyγ射线照射和丝裂霉素C对大鼠肝脏细胞色素P450含量及其同工酶CYP2B1、CYP2E1活性的影响 被引量:3
3
作者 严敏芬 郝福荣 +4 位作者 许立明 童顺高 季华钧 沈芝芬 金一尊 《辐射研究与辐射工艺学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第4期246-250,共5页
为研究3Gyγ射线全身照射和丝裂霉素C(MitomycinC,MMC)对雄性(Sprague-Dawley,SD)大鼠肝脏细胞色素P450含量、CYP2B1、CYP2E1活性的影响,分别给大鼠腹腔注射1mg/kgd的MMC(分1d,连续3d及6d用药三组),3mg/kg的MMC1d,3Gyγ射线全身照射,3G... 为研究3Gyγ射线全身照射和丝裂霉素C(MitomycinC,MMC)对雄性(Sprague-Dawley,SD)大鼠肝脏细胞色素P450含量、CYP2B1、CYP2E1活性的影响,分别给大鼠腹腔注射1mg/kgd的MMC(分1d,连续3d及6d用药三组),3mg/kg的MMC1d,3Gyγ射线全身照射,3Gyγ射线全身照射加1d3mg/kgMMC,另设空白对照和溶剂对照。各组处理结束后24h,处死大鼠取肝脏,制备微粒体,测P450含量、CYP2B1、CYP2E1活性。实验结果表明,给MMC1mg/kgd,1d后P450含量、CYP2B1活性变化无统计学差异(p>0.05),CYP2E1活性明显上升(p<0.01);连续3d或6d后,P450含量、CYP2B1、CYP2E1活性均无明显变化(p>0.05)。给3mg/kg的MMC1d,对P450含量、CYP2B1活性影响无统计学差异(p>0.05),CYP2E1活性上升明显(p<0.01);3Gyγ射线全身照射后,P450含量、CYP2B1活性无明显变化(p>0.05),CYP2E1活性下降(p<0.05);分析发现,3mg/kgMMC与3Gyγ射线之间没有交互作用。结果提示,γ射线可以抑制雄性SD大鼠肝脏CYP2E1活性,MMC对CYP2E1活性有诱导作用,但多次刺激使其耐受,P450含量、CYP2B1活性对γ射线、MMC不敏感。 展开更多
关键词 γ照射 丝裂霉素c P450 cYP2b1 cYP2e1
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γ射线合并丝裂霉素C对大鼠肝脏微粒体CYP2B1、CYP2E1活性影响的体外研究 被引量:2
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作者 严敏芬 郝福荣 +4 位作者 许立明 童顺高 季华钧 沈芝芬 金一尊 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期312-315,共4页
研究不同剂量γ射线照射及γ射线和丝裂霉素C(MitomycinC,MMC)联合用药对雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠肝脏微粒体中CYP2B1、CYP2E1的影响。从空白组(未经苯巴比妥诱导)和经苯巴比妥(PB)诱导组大鼠的肝脏中提出微粒体,分别进行2Gy、8Gy和1... 研究不同剂量γ射线照射及γ射线和丝裂霉素C(MitomycinC,MMC)联合用药对雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠肝脏微粒体中CYP2B1、CYP2E1的影响。从空白组(未经苯巴比妥诱导)和经苯巴比妥(PB)诱导组大鼠的肝脏中提出微粒体,分别进行2Gy、8Gy和16Gyγ射线单纯照射;50μmol/LMMC单纯处理;γ射线照射后加MMC联合作用,不作任何处理的作为正常对照组,然后测定CYP2B1、CYP2E1活性。实验结果显示,无论是空白组,还是PB诱导组的微粒体,在各剂量γ射线照射后,CYP2B1、CYP2E1活性变化都没有统计学差异(p>0.05);50μmol/LMMC作用后,CYP2B1活性没有明显变化(p>0.05),但使CYP2E1活性下降明显(p<0.01)。两因素析因分析发现对于微粒体中CYP2B1、CYP2E1活性,γ射线照射和MMC作用之间没有交互作用。说明在体外试验中,γ照射对大鼠肝脏微粒体CYP2B1、CYP2E1活性没有影响,50μmol/LMMC的作用对CYP2B1活性也没有影响,但可以抑制CYP2E1活性。 展开更多
关键词 γ照射 丝裂霉素c cYP2b1 cYP2e1
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维生素E及其与维生素C和/或B_2联用对小鼠免疫功能的影响 被引量:10
5
作者 刘军 宫德正 +2 位作者 姜丽平 宋淑云 仲来福 《中国公共卫生学报》 1998年第5期289-291,共3页
给雌性小鼠灌胃维生素E(VE)(100mg/kg)、VE+维生素C(VC)(300mg/kg)、VE+VC+维生素B2(VB2)(10mg/kg),每天1次,连续30天,结果显示:维生素E明显增高了胸腺和脾脏重量,增... 给雌性小鼠灌胃维生素E(VE)(100mg/kg)、VE+维生素C(VC)(300mg/kg)、VE+VC+维生素B2(VB2)(10mg/kg),每天1次,连续30天,结果显示:维生素E明显增高了胸腺和脾脏重量,增高了脾细胞对伴刀豆球蛋白A(T细胞有丝分裂原)和脂多糖(B细胞有丝分袭原)的增殖反应,以及增高了天然杀伤细胞和巨噬细胞对肿瘤细胞的毒性。VE与VC联用,小鼠胸腺重量明显大于仅给予VE组,但未观察到VC或VB2对VE的上述免疫增强效应有明显的协同作用。本研究还发现,联用VB2组脾脏重量明显低于仅用VE组,并且与对照组间无明显差别。 展开更多
关键词 维生素e 维生素c 维生素b2 免疫功能
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前列腺癌组织中泛素偶联酶E2C、蛋白激酶B表达及其与预后相关性 被引量:3
6
作者 邓兰 廖堃 +2 位作者 付琴 徐苓傈 何其英 《安徽医药》 CAS 2022年第10期1964-1968,共5页
目的探讨前列腺癌组织中泛素偶联酶E2C(UBE2C)、蛋白激酶B(AKT1)表达及其预后相关性。方法选取2014年1月至2016年12月四川大学华西医院泌尿外科研究所收集的92例前列腺癌组织(前列腺癌组)、70例良性前列腺增生组织(良性前列腺增生组)进... 目的探讨前列腺癌组织中泛素偶联酶E2C(UBE2C)、蛋白激酶B(AKT1)表达及其预后相关性。方法选取2014年1月至2016年12月四川大学华西医院泌尿外科研究所收集的92例前列腺癌组织(前列腺癌组)、70例良性前列腺增生组织(良性前列腺增生组)进行研究,根据随访结果将前列腺癌组分为两组,预后良好组(68例)、预后不良组(24例)。采用免疫组织化学法检测不同组织中UBE2C、AKT1表达情况进行比较,并分析其与病人临床病理特征关系;采用COX回归模型分析前列腺癌病人预后影响因素。结果与良性前列腺增生组相比,前列腺癌组UBE2C[84.78%(78/92)比22.86%(16/70)]、AKT1[78.26%(72/92)比28.57%(20/70)]阳性表达率均较高(P<0.05);前列腺癌组UBE2C表达与年龄、TNM分期、术前前列腺特异抗原(PSA)水平均无关(P>0.05),与Gleason评分、淋巴结转移均有关(P<0.05),AKT1表达与年龄、淋巴结转移无关(P>0.05),与Gleason评分、TNM分期、术前PSA水平均有关(P<0.05);与预后良好组相比,预后不良组UBE2C[100.00%(100/100)比79.41%(54/68)]、AKT1[95.83%(23/100)比72.06%(49/68)]阳性表达率均较高(P<0.05);COX回归模型分析结果显示,Gleason评分≥7分、Ⅲ/Ⅳ期、伴淋巴结转移、术前PSA水平>10µg/L、UBE2C高表达、AKT1高表达均是影响前列腺癌病人预后状况的独立危险因素(P<0.05)。结论前列腺癌病人病灶组织UBE2C、AKT1均为高表达,且与病人临床病理特征及预后状况密切相关,可能为评估病情及预后提供临床参考依据。 展开更多
关键词 前列腺肿瘤 泛素偶联酶e2c 蛋白激酶b 前列腺特异抗原 预后
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维生素E、C、B_2联用降血脂50例 被引量:2
7
作者 徐振羽 张亚玲 +1 位作者 吕奇志 刘丽宏 《中国冶金工业医学杂志》 2003年第2期97-97,共1页
关键词 维生素e 维生素c 维生素b2 降血脂 不良生活方式
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猪瘟病毒E2蛋白B/C抗原区基因在毕赤酵母中的表达与鉴定
8
作者 徐学清 郑其升 +2 位作者 曹瑞兵 苏小运 陈溥言 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 2004年第9期53-57,共5页
基于猪瘟病毒主要保护性抗原———E2囊膜糖蛋白有两个相对独立的抗原结构单位———B C抗原区和A D抗原区 ,设计引物扩增编码猪瘟病毒E2蛋白B C抗原区的基因 ,将大小为2 61bp的PCR产物插入含有强启动子PAOX1和α MF信号肽序列的巴斯德... 基于猪瘟病毒主要保护性抗原———E2囊膜糖蛋白有两个相对独立的抗原结构单位———B C抗原区和A D抗原区 ,设计引物扩增编码猪瘟病毒E2蛋白B C抗原区的基因 ,将大小为2 61bp的PCR产物插入含有强启动子PAOX1和α MF信号肽序列的巴斯德毕赤酵母 (Pichiapastoris)表达载体pPICZαC中 ,构建成重组质粒pPICZα BC ,酶切线性化后电穿孔导入巴斯德毕赤酵母菌X3 3 中 ,经ZeocinTM 筛选得到 3株高拷贝转化子 ,甲醇诱导表达 ,SDS PAGE和Westernblot及ELISA试验表明 ,酵母培养上清液中含有具有良好反应原性的E2蛋白。 展开更多
关键词 c抗原 e2蛋白 b/c 表达 基因 膜糖蛋白 D抗原 猪瘟病毒 株高 诊断抗原
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HPLC法同时测定大鼠CYP2B、2C、2E酶活性及其应用
9
作者 代晶 吕红霞 +2 位作者 王丽聪 涂碎萍 吴丹 《中国测试》 北大核心 2014年第4期63-66,共4页
建立同时测定大鼠肝微粒体中CYP2B、2C、2E酶活性的HPLC法,并用该方法评价氯胺酮对这3种酶的影响。以盐酸安非他酮、甲苯磺丁脲、氯唑沙宗作为CYP2B、CYP2C、CYP2E的特异性底物。以非那西丁为内标,色谱柱为Welchrom C18,流动相为甲醇:0.... 建立同时测定大鼠肝微粒体中CYP2B、2C、2E酶活性的HPLC法,并用该方法评价氯胺酮对这3种酶的影响。以盐酸安非他酮、甲苯磺丁脲、氯唑沙宗作为CYP2B、CYP2C、CYP2E的特异性底物。以非那西丁为内标,色谱柱为Welchrom C18,流动相为甲醇:0.01 mol/L乙酸铵(pH 5.0)=55∶45,流速为1 mL/min,检测波长为220,247,250,280 nm,柱温为30℃,进样量为40μL。体外孵育反应的蛋白浓度为3.75mg/mL,孵育时间为30min。采用上述方法测定3种底物在对照组和氯胺酮给药组中的代谢速率,结果显示,各底物在线性范围内线性关系良好,相关系数r】0.9991;日内RSD【12.1%,日间RSD【12.5%;方法回收率为84.4%~114.3%,提取回收率为93.65%~100.7%。本方法灵敏、准确、简单,可用于大鼠肝微粒体中CYP2B、2C、2E酶活性的测定。 展开更多
关键词 cYP2b cYP2c cYP2e 高效液相色谱法 肝微粒体 氯胺酮
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维生素E及其与维生素C,维生素B_2联用对小鼠抗氧化体系机能的影响 被引量:7
10
作者 成彩莲 彭承秀 +2 位作者 韦罗生 夏瑞明 刘静 《武汉科技大学学报》 CAS 2000年第3期313-315,共3页
研究了维生素 E(VE)及其与维生素 C(VC) ,维生素 B2 (VB2 )联用对小鼠机体抗氧化机能的影响。结果表明 ,对小鼠单独饲喂 VC或 VE,VC,VB2 联合饲喂 ,均能显著提高小鼠心、肝组织超氧化歧化酶 (SOD)的活性作用 ;单独饲喂 VE,VC或 VE,VC,V... 研究了维生素 E(VE)及其与维生素 C(VC) ,维生素 B2 (VB2 )联用对小鼠机体抗氧化机能的影响。结果表明 ,对小鼠单独饲喂 VC或 VE,VC,VB2 联合饲喂 ,均能显著提高小鼠心、肝组织超氧化歧化酶 (SOD)的活性作用 ;单独饲喂 VE,VC或 VE,VC,VB2 联合饲喂 ,其肝脏丙二醛 (MDA)含量均低于对照组 ,差异非常显著 ,肝脏 SOD/ MDA和 GSH-Px/ MDA比值升高 ;单独饲喂 VC组 GSH-Px/ MDA比值升高尤为明显 ;饲喂VE或 VC,VE,VB2 联合饲喂时 ,小鼠肝组织中谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH-Px)活力有增强趋势。这表明 3种维生素联合使用时 ,可产生协同抗氧化、调血脂作用 ,这种作用有利于预防动脉粥样硬化的发生与发展。 展开更多
关键词 维生素e 维生素c 维生素b2 抗氧化作用
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UBE2C基因沉默对膀胱癌5637细胞增殖、侵袭能力的影响及其机制 被引量:1
11
作者 韩俊岭 汤栋栋 +1 位作者 李振辉 宋东奎 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第32期23-26,共4页
目的探讨人类泛素偶联酶E2C(UBE2C)基因沉默对膀胱癌5637细胞增殖和侵袭能力的影响及作用机制。方法将对数生长期的膀胱癌5637细胞随机分为5组,其中UBE2C siRNA1、2、3组及阴性对照组分别采用瞬时转染法转染3条UBE2C小干扰RNA(UBE2C siR... 目的探讨人类泛素偶联酶E2C(UBE2C)基因沉默对膀胱癌5637细胞增殖和侵袭能力的影响及作用机制。方法将对数生长期的膀胱癌5637细胞随机分为5组,其中UBE2C siRNA1、2、3组及阴性对照组分别采用瞬时转染法转染3条UBE2C小干扰RNA(UBE2C siRNA1、2、3)和阴性对照-siRNA,空白对照组不进行转染。采用RT-PCR法和Western blotting法检测各组UBE2C mRNA及蛋白相对表达量,UBE2C siRNA1、2、3组细胞UBE2C mRNA及蛋白相对表达量均低于阴性对照组、空白对照组,UBE2C siRNA2组明显低于UBE2C siRNA1、3组(P均<0.05);证实UBE2C siRNA2组沉默效果最好。收集UBE2C siRNA2组和阴性对照组、空白对照组细胞,采用MTT法检测培养0、24、48、72、96 h的细胞增殖能力(以OD490表示),Transwell侵袭实验检测侵袭能力(以穿过小室膜的细胞数表示),Western blotting法检测细胞外调节蛋白激酶B(Akt)和磷酸化Akt(p-Akt)蛋白相对表达量。结果随着培养时间的延长,UBE2C siRNA2组、阴性对照组和空白对照组OD490呈升高趋势;UBE2C siRNA2组培养48、72、96 h的OD490均明显低于阴性对照组和空白对照组(P均<0.01)。UBE2C siRNA2组、阴性对照组和空白对照组穿过小室膜的细胞数分别为(58.3±2.2)、(129.3±3.1)、(162.7±5.1)个,组间两两比较P均<0.01。三组细胞Akt蛋白相对表达量比较差异均无统计学意义(P均>0.05),UBE2C siRNA2组p-Akt蛋白相对表达量低于阴性对照组和空白对照组(P均<0.01)。结论 UBE2C基因沉默后膀胱癌5637细胞增殖和侵袭能力降低,抑制Akt信号转导通路可能是其作用机制。 展开更多
关键词 膀胱癌 人类泛素偶联酶e2c 细胞增殖 侵袭 细胞外调节蛋白激酶b
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奈达铂与鼻咽癌相关蛋白P53、Bcl-2、caspase的表达水平与相关性分析 被引量:4
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作者 李燕 李嵘 《河北医药》 CAS 2017年第9期1285-1288,共4页
目的观察奈达铂对鼻咽癌CNE-2细胞增殖和凋亡的影响,探讨奈达铂与鼻咽癌相关蛋白P53、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、caspase的表达水平与相关性分析。方法分析不同浓度的奈达铂(0μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml)和作用不同时间(12 h、2... 目的观察奈达铂对鼻咽癌CNE-2细胞增殖和凋亡的影响,探讨奈达铂与鼻咽癌相关蛋白P53、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、caspase的表达水平与相关性分析。方法分析不同浓度的奈达铂(0μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml)和作用不同时间(12 h、24 h、36 h、48 h)对鼻咽癌CNE-2细胞增殖和凋亡的影响;分析不同浓度的奈达铂对CNE-2细胞P53、Bcl-2、caspase蛋白表达水平的影响。结果使用MTT法检测不同浓度的奈达铂对CNE-2细胞增殖的影响,随奈达铂浓度的升高OD值逐渐降低(P<0.05),且随着奈达铂作用时间的延长OD值逐渐降低(P<0.05)。形态学可见:奈达铂浓度0μg/ml时CNE-2细胞增值迅速、细胞饱满,形态规则;奈达铂作用下细胞增值减慢,细胞变圆、边缘模糊;使用流式细胞仪检测不同浓度的奈达铂对CNE-2细胞凋亡率可见随着奈达铂浓度的升高细胞凋亡率逐渐升高(P<0.05);使用免疫组化光密度定量检测不同浓度的奈达铂对CNE-2细胞P53、Bcl-2、caspase蛋白表达水平的影响,可见随着奈达铂浓度的升高P53、Bcl-2蛋白表达水平逐渐降低(P<0.05),caspase蛋白表达水平逐渐升高(P<0.05)。结论奈达铂能够明显抑制鼻咽癌CNE-2细胞增殖和促进凋亡,其可能与抑制P53、Bcl-2蛋白表达和促进caspase蛋白表达有关。 展开更多
关键词 奈达铂 鼻咽癌cNe-2细胞 细胞增殖 细胞凋亡 P53 bcL-2 cASPASe
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泛素连接酶E4B介导PM20D2、PABPC1和TACO1蛋白质的泛素化验证 被引量:2
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作者 刘香男 范宇宸 +3 位作者 王亚楠 陆瑶 赵博 武正华 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期31-36,共6页
泛素连接酶E4B通过U-box基序可将经泛素活化酶(Ubiquitin-activating enzyme, E1)和泛素结合酶(Ubiquitin-conjugating enzyme, E2)传递的泛素(Ubiquitin, UB)标记至底物蛋白质。探究3个蛋白质:金属蛋白酶M20家族蛋白质2(Peptidase M20 ... 泛素连接酶E4B通过U-box基序可将经泛素活化酶(Ubiquitin-activating enzyme, E1)和泛素结合酶(Ubiquitin-conjugating enzyme, E2)传递的泛素(Ubiquitin, UB)标记至底物蛋白质。探究3个蛋白质:金属蛋白酶M20家族蛋白质2(Peptidase M20 domain-containing protein 2,PM20D2)、多腺苷酸结合蛋白质1(Polyadenylate-binding protein 1,PABPC1)、细胞色素C氧化酶Ⅰ翻译激活剂(Translational activator of cytochrome C oxidase Ⅰ,TACO1)是否可被E4B介导泛素化。从HEK293细胞中提取总RNA,反转录为cDNA,以其为模板调取底物基因并构建重组质粒,利用大肠杆菌表达系统表达并纯化泛素化过程所需的各个相关蛋白质,通过蛋白质体外泛素化实验,对3个蛋白质进行泛素化验证。结果表明3个蛋白质均可以在蛋白质水平被E4B泛素化,证明3个蛋白质都是E4B的底物,为进一步在细胞中研究其泛素化的机理奠定基础。 展开更多
关键词 泛素化 泛素连接酶e4b 金属蛋白酶M20家族蛋白质2 多腺苷酸结合蛋白质1 细胞色素c氧化酶Ⅰ翻译激活剂
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EFFECTS OF HBV preS AS A HUMORAL ENHANCER ON THE ABILITIES OF HCV E2 PROTEIN TO INDUCE IMMUNE RESPONSESIN THE DNA-IMMUNIZED MICE
14
作者 谢尧 陶其敏 高建恩 《Chinese Medical Sciences Journal》 CAS CSCD 2003年第1期14-19,共6页
Objective.To study whether the abilities of hepatitis C virus(HCV)E2 gene immunization to induce humoral and cellular immune responses to E2 protein were affected by hepatitis B virus(HBV)preS gene when they were fuse... Objective.To study whether the abilities of hepatitis C virus(HCV)E2 gene immunization to induce humoral and cellular immune responses to E2 protein were affected by hepatitis B virus(HBV)preS gene when they were fused in DNA-immunized mice.Methods.Mice were immunized with E2,preS-E2(preS gene was upstream of E2 gene),and E2-preS(preS gene was downstream of E2 gene)gene by their eukaryotic expression vectors,respectively.The anti-E2 or anti-preS antibodies were detected using the E2 and preS antigens.The cellular immune response to E2 pro-tein in immunized mice was presented by its survival time after injecting SP2/O myeloma cells expressing HCV E2 protein into the abdominal cavity.Results. Chimeric E2 and preS gene immunization can induce mice to develop anti-preS and anti-E2 antibodies.The number of the mice developing anti-E2 antibody and the antibody titers in preS-E2 gene-injected group were higher than those in E2-preS gene-immunized group.However,the mice injected with E2 gene did not develop the detectable anti-E2 antibodies until 12 weeks after DNA immunization.After the mice was injected with target cells,the average survival time of the mice in the group immunized with E2 gene alone was longer than that of the group injected with E2 gene fused with HBV preS and was significantly longer than that of the control(P< 0.05).Conclusion.HBV preS might be a humoral enhancer that can affect the abilities of HCV E2 protein to in-duce immune responses in DNA-immunized mice. 展开更多
关键词 hepatitis c virus e2 protein hepatitis b virus preS protein
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纳米CeO_2对激光熔覆Fe/Cr_3C_2复合涂层组织与磨损性能的影响 被引量:5
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作者 肖轶 顾剑锋 +1 位作者 张俊喜 杨有利 《材料导报》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第22期65-69,84,共6页
采用扫描电镜(SEM)、能谱分析仪(EDS)、X射线衍射仪(XRD)、显微硬度仪及滑动磨损试验,研究了1%纳米CeO_2(质量分数)对低碳钢表面激光熔覆Fe/Cr_3C_2复合涂层的组织结构和耐磨性能的影响。结果表明,Fe+Cr_3C_2+1%CeO_2复合涂层的主要组... 采用扫描电镜(SEM)、能谱分析仪(EDS)、X射线衍射仪(XRD)、显微硬度仪及滑动磨损试验,研究了1%纳米CeO_2(质量分数)对低碳钢表面激光熔覆Fe/Cr_3C_2复合涂层的组织结构和耐磨性能的影响。结果表明,Fe+Cr_3C_2+1%CeO_2复合涂层的主要组成相是α-Fe、γ-Fe、Cr_3C_2、Cr_(23)C_6及Cr_7C_3等化合物相;加入1%纳米CeO_2后,复合涂层组织明显细化,未熔Cr_3C_2数量显著减少,初生碳化物由粗大杆状向块状转变,数量增加,分布均匀,有效抑制和消除了裂纹的形成;复合涂层硬度和耐磨性能显著提高,Fe+30%Cr_3C_2+1%CeO_2涂层截面显微硬度提高105HV,增幅达到15.4%,且涂层沿深度方向硬度分布均匀性得到明显改善。 展开更多
关键词 纳米ceO2 激光熔覆 Fe基合金 cR3c2 复合涂层 组织 耐磨性
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C2B电子商务的概念、商业模型与演进路径 被引量:43
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作者 戴国良 《商业时代》 北大核心 2013年第17期53-54,共2页
真正的C2B模式是先有消费者需求产生而后有企业生产,是商业本质的回归。C2 B的发展在宏观层面受社会个性解放程度影响,在微观层面受交易成本、柔性生产成本、个性需求支付能力和消费者成熟度影响,消费者的成熟度对C2B的业务模式起着关... 真正的C2B模式是先有消费者需求产生而后有企业生产,是商业本质的回归。C2 B的发展在宏观层面受社会个性解放程度影响,在微观层面受交易成本、柔性生产成本、个性需求支付能力和消费者成熟度影响,消费者的成熟度对C2B的业务模式起着关键作用。C2B首先发展群体定制,其次发展个人定制;首先定制价格,其次定制产品;最后将发展为混合型。 展开更多
关键词 c2b customer—to—business 电子商务ebusiness ecommerce团购
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杭州流通业:全面玩转B2C
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作者 熊辛 《电子商务世界》 2007年第8期86-87,共2页
杭州也算得上历史悠久的流通中心,数百年前就是稻米和丝绸中转的重要枢纽,那么今天的杭州流通业在E时代,又蜕变出怎样的全新的面貌呢? 记者带着这个饶有兴味的问题,走访了杭州不同规模不同性质的几家流通企业。有意思的是,不管... 杭州也算得上历史悠久的流通中心,数百年前就是稻米和丝绸中转的重要枢纽,那么今天的杭州流通业在E时代,又蜕变出怎样的全新的面貌呢? 记者带着这个饶有兴味的问题,走访了杭州不同规模不同性质的几家流通企业。有意思的是,不管是从计划经济体制转轨的家电省级代理公司百诚集团,还是在数码产品流通中已经称霸一方市场的民营颐高数码连锁, 展开更多
关键词 流通业 杭州 b2c 经济体制转轨 流通企业 产品流通 e时代 数码
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Bcl2相互作用蛋白3在子宫内膜组织中的表达及其在子宫内膜异位症发病中的意义 被引量:7
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作者 严必红 曾为红 《安徽医药》 CAS 2020年第1期136-140,共5页
目的探究Bcl2相互作用蛋白3(BCL2 Interacting Protein 3,BNIP3)表达变化与正常子宫内膜周期的关系及在子宫内膜异位症(EMs)发病中的意义。方法从GEO数据库获得GSE51981、GSE6364、GSE4888、GSE25628的基因表达谱,通过生物信息学手段比... 目的探究Bcl2相互作用蛋白3(BCL2 Interacting Protein 3,BNIP3)表达变化与正常子宫内膜周期的关系及在子宫内膜异位症(EMs)发病中的意义。方法从GEO数据库获得GSE51981、GSE6364、GSE4888、GSE25628的基因表达谱,通过生物信息学手段比较正常子宫内膜周期组增殖期到分泌期基因表达变化,分析基因富集情况以及BNIP3在正常子宫内膜月经周期中的表达变化;比较数据集中正常子宫内膜周期组人群与内异症病人差异趋势表达基因以及各样本中BNIP3的表达,总结其在EMs发病中的意义;取23例Ⅲ⁃ⅣEMs病人正位及异位子宫内膜组织,以及25例因子宫肌瘤行子宫切除术病人的子宫内膜组织作为正常对照,通过实时荧光定量qRT⁃PCR及蛋白质印迹法(Western Blot)检测BNIP3在各组织中的表达,验证BNIP3表达变化同EMs发病的关系。结果GSE4888、GSE6364、GSE51981数据集中,BNIP3在增殖期与分泌期相对表达量分别为100.22±16.54、332.80±32.29,487.68±100.09、1425.83±157.47,8.36±0.69、9.82±0.71,均差异有统计学意义(P<0.0001);GSE25628数据集中,BNIP3在正常子宫内膜组织、EMs病人正位、EMs病人异位子宫内膜组织中的表达量分别为(10.11±0.72)、(9.19±0.56)、(8.52±0.57),三组间对比差异有统计学意义;临床样本中,正常内膜组织、EMs正位内膜组织、EMs异位内膜组织中BNIP3的mRNA表达量分别为1.15±0.57、0.56±0.19、0.36±0.08,三组间对比差异有统计学意义;BNIP3蛋白在正常子宫内膜组织、EMs正位内膜组织、EMs异位内膜组织中的表达水平分别为1.00±0.41、0.58±0.20、0.38±0.12,三组间对比均差异有统计学意义。结论BNIP3在子宫内膜组织中的表达降低与EMs的发生具有相关性。 展开更多
关键词 凋亡调节蛋白质类 子宫内膜异位症 原癌基因蛋白质cbcl⁃2 生物信息学 bcl2/腺病毒e1b相互作用蛋白3 凋亡
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黄芩素通过Nrf2/NF-κB/NFATc1信号通路对牙周病大鼠破骨细胞形成和牙槽骨吸收的影响 被引量:5
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作者 毕磊 刘辉 武燃 《广西医学》 CAS 2021年第5期600-606,共7页
目的探讨黄芩素通过核因子E2相关因子(Nrf2)/核因子κB(NF-κB)/活化T细胞核因子c1(NFATc1)信号通路对牙周病大鼠破骨细胞形成和牙槽骨吸收的影响。方法将40只SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组、黄芩素低剂量组、黄芩素高剂量组,各10... 目的探讨黄芩素通过核因子E2相关因子(Nrf2)/核因子κB(NF-κB)/活化T细胞核因子c1(NFATc1)信号通路对牙周病大鼠破骨细胞形成和牙槽骨吸收的影响。方法将40只SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组、黄芩素低剂量组、黄芩素高剂量组,各10只。除对照组外,其他组制备牙周病大鼠模型。造模1周后,于黄芩素低剂量组、黄芩素高剂量组大鼠创伤处分别注射2.5 mg/(kg·d)、5.0 mg/(kg·d)的黄芩素,于模型组和对照组大鼠相同部位注射等量生理盐水。连续给药7 d后,检测大鼠牙槽骨吸收情况,观察大鼠牙周组织病理变化,计数大鼠牙周组织的破骨细胞数量,并检测大鼠血清白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平、超氧化物歧化酶(SOD)和活性氧活性、谷胱甘肽和丙二醛水平,以及牙周组织Nrf2、NF-κB、NFATc1蛋白表达水平。结果与对照组相比,其他组大鼠牙周组织上皮增生,胶原纤维排列紊乱,有大量炎症细胞浸润,牙槽骨吸收度、牙周组织破骨细胞数、牙周组织NF-κB和NFATc1蛋白表达水平、血清IL-1β、TNF-α水平以及活性氧活性升高,血清谷胱甘肽水平及SOD活性、牙周组织Nrf2蛋白表达水平降低,模型组和黄芩素低剂量组大鼠血清IL-6、丙二醛水平升高(均P<0.05)。模型组、黄芩素低剂量组、黄芩素高剂量组牙槽骨吸收度、牙周组织破骨细胞数、牙周组织NF-κB和NFATc1蛋白表达水平、血清IL-1β、IL-6、TNF-α、丙二醛水平及活性氧活性依次降低,血清SOD活性、牙周组织Nrf2蛋白表达水平依次升高,且黄芩素低剂量组与黄芩素高剂量组的血清谷胱甘肽水平均高于模型组(均P<0.05)。结论黄芩素可能通过调节Nrf2/NF-κB/NFATc1信号通路抑制机体炎症和氧化应激反应,从而减少破骨细胞形成,进而减少牙槽骨吸收。 展开更多
关键词 牙周病 黄芩素 核因子e2相关因子2/核因子κb/活化T细胞核因子c1通路 破骨细胞 牙槽骨 炎症反应 氧化应激 大鼠
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Two New C-glucoside Flavonoids from Leaves of Crataegus pinnatifida Bge.var.major N.E.Br. 被引量:4
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作者 PeiChengZHANG SuiXuXu 《Chinese Chemical Letters》 SCIE CAS CSCD 2002年第4期337-340,共4页
Two new C-glucoside flavonoids, namely 8-C-b-D-(2-O-acetyl) glucofuranosyl apigenin and 3-O-acetylvitexin, were isolated from leaves of Crataegus pinnatifida Bge. var. major N. E. Br.. Their structures were elucidated... Two new C-glucoside flavonoids, namely 8-C-b-D-(2-O-acetyl) glucofuranosyl apigenin and 3-O-acetylvitexin, were isolated from leaves of Crataegus pinnatifida Bge. var. major N. E. Br.. Their structures were elucidated by the spectroscopic means and chemical evidence. 展开更多
关键词 crataegus pinnatifida bge. var. major N. e. br. ROSAceAe 8-c-b-D-(2-O-acetyl) gluco furanosyl apigenin 3-O-acetylvitexin.
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