10B38含硼冷镦钢的研制与开发

采用高温拉伸试验方法,研究了不同高温条件下10B38含硼冷镦钢的强度和塑性。试验结果表明,在热强性方面,700~950℃时抗拉强度由124.8 MPa大幅下降到22.9 MPa;950~1150℃时抗拉强度为12.7~25.5 MPa。在热塑性方面,700~750℃时试验钢的断面收缩率为56%~72%;800~1050℃时,试验钢的断面收缩率≥75%;1050~1150℃时,断面收缩率>65%。根据以上试验数据,将连铸二次冷却水强度由比水量1.35 L/kg优化为1.25 L/kg,优化后连铸坯裂纹指标有明显降低。测定了10B38含硼冷镦钢的过冷奥氏体连续冷却转变曲线,试验结果表明,当冷却速率为0.2~1℃/s,试验钢以较软的铁素体组织为主;当冷却速率为3~10℃/s,试验钢以珠光体组织为主;当冷却速率为20、30℃/s时,试验钢为板条马氏体+珠光体组织;当冷却速率为50℃/s时,室温时形成完全马氏体组织。试验及生产试制结果表明,降低冷却速率到0.5~2℃/s,能获得理想的铁素体和珠光体热轧组织。

番荔枝内生真菌Hypoxylon sp.B38的代谢产物研究

从番荔枝内生真菌Hypoxylon sp.B38的固体平板发酵提取物中分离到5个化合物,通过NMR和MS等方法把它们分别被鉴定为Lachnellin D(1)、D ienetriol 9(2)、Lachnellin C(3)、Lachnellin B(4)和Benzo[d][1,3]d ioxol-5-ylm ethanol(5)。

栅藻B38营养成分分析及蛋白质营养价值评价

对栅藻B38的营养成分进行了全面分析,结果表明,栅藻藻粉中油脂含量14%,总糖含量13.86%,粗纤维3.52%,灰分4.28%,蛋白质49.0%,为高蛋白质类微藻。栅藻B38中含有23种脂肪酸。栅藻B38中氨基酸总量为852.58 mg/g,必需氨基酸占总氨基酸的47.45%,必需氨基酸指数为85.42%。两种模式的氨基酸比值系数分较接近,均在65以上;待评价物质的氨基酸品质与模式蛋白的贴近度接近1(0.93和0.88)。栅藻B38中共检测出23种矿物质元素,其中钠、钾、钙、镁、铁、铝含量较为丰富。重金属的含量均低于国家食品卫生标准。栅藻B38中维生素B3(106.02 mg/100 g)和维生素E(540.77 mg/100 g)的量较高。综上,栅藻B38的营养较丰富,可以进一步开发利用。

Unisys A系列与B38构成的Client/Server系统

“Client/Server”慨念自提出以来,日益受到广泛的重视,被认为是计机系统设计的最新意念和结构模式。世界上的著名专用系统及开放系统供应商均极力标榜其产品在Client/server 方面的特性,但unisys A 系列用户对这方面是相对陌生的,因为 unisys 对此没有太多的宣传。那么,对 U-nisys A 系列用户来说,Client/server 结构的应用系统是什么呢?其实,在 Client/Server被提出之前,有几个概念如分布处理、协处理、事件驱动等已被使用了很长的时间,Client/SERVER

藏红花素缓解野百合碱诱导动脉型肺动脉高压大鼠右心室损伤的机制研究

目的:观察藏红花素能否缓解野百合碱(MCT)诱导动脉型肺动脉高压(PAH)大鼠的右心室损伤,并探讨其可能的作用机制。方法:40只雄性SD大鼠随机分为normal组、PAH组、crocin组及sildenafil组,每组10只。PAH组、crocin组及sildenafil组大鼠皮下注射MCT(50 mg/kg)建立PAH模型。自注射MCT之日起,crocin组大鼠给予藏红花素(200 mg/kg)、sildenafil组大鼠给予西地那非(30 mg/kg)、PAH组及normal组大鼠给予等量生理盐水每日1次灌胃。4周后,测定各组大鼠右心室收缩压(RVSP)、平均肺动脉压(mPAP)、右心室肥大指数(RVHI)和右心室质量指数(RVMI);组织染色观察右心室病理变化;检测右心室炎性因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)、p38 MAPK/NF-κB炎性通路、CCL2、CCR2及巨噬细胞标记物CD68的表达。结果:与PAH组相比,crocin组及sildenafil组大鼠RVSP、mPAP、RVHI和RVMI降低(P<0.05);右心室炎症细胞浸润和胶原纤维增生不明显;p38 MAPK/NF-κB通路和炎性因子(IL-1β、IL-6和TNF-α)的表达下调(P<0.05);CCL2/CCR2通路表达及CD68+巨噬细胞浸润减少(均P<0.05)。结论:藏红花素可显著缓解MCT诱导PAH大鼠的右心室损伤,其作用与本实验剂量下西地那非的作用相当;藏红花素的部分保护机制可能与其对炎症的调节作用有关。

游泳运动对慢性非细菌性前列腺炎大鼠p38MAPK/NF-κB信号通路的影响

目的:探讨游泳运动对慢性非细菌性前列腺炎(CAP)大鼠p38MAPK/NF-κB信号通路的影响。方法:雄性SD大鼠分为运动组、CAP模型组、正常组,每组10只,注射消痔灵制备大鼠模型,运动组每天游泳运动1次,时间为50min,6d/周,共游泳运动4周,模型组和正常组不开展游泳运动;末次游泳运动结束后2h,股动脉取血处死大鼠,采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测大鼠血清p38MAPK、NF-κB p65、IL-1β、IL-4、TNF-α含量,观察三个组别大鼠前列腺组织病理学改变。结果:4周游泳运动结束后,模型组和运动组大鼠血清内p38MAPK、NF-κB p65、IL-1β、IL-4、TNF-α含量显著高于正常组(P<0.05),运动组大鼠血清内上述观察指标显著低于模型组(P<0.05);相关分析显示,CAP大鼠血清内IL-1β、IL-4、TNF-α水平与p38MAPK、NF-κB p65表达呈显著正相关(P<0.01),p38MAPK与NF-κB p65呈显著正相关(P<0.01);病理观察显示,与正常组比较,模型组大鼠前列腺组织慢性炎症病变明显,与模型组比较,运动组大鼠前列腺血管扩张程度、炎细胞浸润数量及范围、管腔狭窄及间质水肿纤维化的情况均有所减轻。结论:游泳运动能够抑制CAP大鼠血清内p38MAPK、NF-κB p65表达,下调IL-1β、IL-4、TNF-α水平,对大鼠CAP炎症发挥缓解作用。

南星平喘汤治疗激素抵抗型哮喘大鼠的影响及其机制研究

目的:观察南星平喘汤治疗激素抵抗型哮喘大鼠的疗效及机制研究。方法:采用随机数字表将SPF级70只SD大鼠分为对照组,模型组,氨溴索组,南星平喘汤低(3.5 g/kg)、中(7 g/kg)、高剂量(14 g/kg)组,以及南星平喘汤(7 g/kg)联合氨溴索(氨溴索注射液15μg/g)组(简称联合组),每组10只。建模成功后,对照组及模型组予生理盐水7μL/g灌胃,各药物组以相应药物干预,1次/d,持续14 d。采用大鼠肺功能仪检测用力肺活量(forced vital capacity,FVC)、第三秒用力呼气容积(forced expiratory volume in 0.3 seconds,FEV_(0.3))、呼气峰值流量(peak expiratory flow,PEF);采用瑞氏-吉姆萨染色法检测大鼠肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中白细胞、中性粒细胞、淋巴细胞及嗜酸性粒细胞数目;采用酶联免疫吸附法检测大鼠白细胞介素(interleukin,IL)-10、IL-14、IL-17、干扰素γ(interferon-γ,IFN-γ)的水平;采用苏木精—伊红染色法检测大鼠肺组织病理学形态;采用Western Blot法检测大鼠p38丝裂原活化蛋白激酶(p38-MAPK)、核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)蛋白。结果:与模型组及氨溴索组对比,南星平喘汤低、中剂量组和联合组FEV_(0.3)、FVC、PEF均升高,联合组升高显著,差别有统计学意义(P<0.05);肺泡灌洗液BALF中,南星平喘汤低、中剂量组和联合组炎症细胞数量均降低,以联合组降低显著(P<0.05);南星平喘汤低、中剂量组及联合组大鼠IL-10降低,L-14、IFN-γ水平升高,差别有统计学意义(P<0.05);肺组织p38-MAPK、NF-κB水平降低,南星平喘汤联合氨溴索组改善更显著(P<0.05)。治疗组的肺组织病理学形态较模型组炎症细胞渗出、结构损坏不同程度改善。结论:南星平喘汤可有效降低激素抵抗型哮喘大鼠炎症反应,与抑制激活p38-MAPK、NF-κB信号通路有关,南星平喘汤联合氨溴索疗效较佳。

ACE2类似酶B38-CAP调节新型冠状病毒肺炎患者RAS系统平衡的作用分析

截止2020年4月7日,全球累计报告感染新型冠状病毒肺炎患者1 259 440例,累计死亡71 108例,涉及123个国家,其中美国累计确诊337 971例,死亡9 654例,西班牙累计确诊135 032例,死亡12 055例。全球死亡比例高达5.65%。新型冠状病毒传染性强,目前尚无特效药。缓解患者临床症状、降低患者死亡率是重要的临床问题。西湖大学周强教授团队研究发现了新型冠状病毒S蛋白和ACE2受体的复合结构,发现新型冠状病毒通过S蛋白与人细胞受体ACE2结合。冠状病毒与ACE2受体结合后致ACE2减少、RAS系统激活进而致病。提高ACE2表达可能对缓解新型冠状病毒肺炎患者临床症状有一定疗效,但这是否会增加新型冠状病毒感染风险目前争议颇大。B38-CAP是一种ACE2类似酶,与ACE2作用类似,可水解Ang II,抑制RAS系统,保护肺和心血管系统。同时B38-CAP不与新型冠状病毒结合,不会增加新型冠状病毒感染风险。这可能为药物治疗新型冠状病毒肺炎提供新的思路。

超分子水杨酸对兔耳痤疮模型p38MAPK/NF-κB信号通路的影响

目的:探究超分子水杨酸对兔耳痤疮模型p38MAPK/NF-κB信号通路的影响机制。方法:将30只实验兔随机分成正常对照组、2%超分子水杨酸(Salicylic acid,SA)组、30%SA组、夫西地酸组、模型对照组,每组6只,并予以相应外用药物干预,连续4周,并分别于用药2周后、用药4周后检测p38MAPK、NF-κB、IL-1β、IL-8蛋白的表达。结果:结果显示,随着用药时间的延长,各组的p38MAPK、NF-κB、IL-1β、IL-8均呈下降趋势。用药前,各组间p38MAPK、NF-κB、IL-1β、IL-8蛋白表达均差异无统计学意义(P>0.05)。用药2周后,2%SA组、30%SA组、夫西地酸组p38MAPK、NF-κB、IL-1β、IL-8低于模型对照组(P<0.001);三个用药组之间p38MAPK、NF-κB、IL-1β两两比较差异无统计学意义(P>0.05);2%SA组IL-8低于30%SA组、夫西地酸组(均P<0.05);30%SA组与夫西地酸组IL-8差异无统计学意义(P>0.05)。用药4周后,三个用药组p38MAPK、NF-κB、IL-1β、IL-8低于模型对照组(P<0.05);2%SA组、30%SA组p38MAPK、NF-κB、IL-8低于夫西地酸组(P<0.05),2%SA组IL-8低于30%SA组(P<0.05);2%SA组与30%SA组p38MAPK差异无统计学意义(P>0.05);2%SA组、30%SA组与夫西地酸组IL-1β均差异无统计学意义(均P>0.05);2%SA组IL-1β低于30%SA组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:超分子水杨酸可通过抑制p38MAPK/NF-κB信号通路来发挥抗炎作用,且随着用药时间的延长疗效也在逐渐增加,并优于夫西地酸。

Ywhab通过靶向Hsp90aa1抑制小鼠B细胞淋巴瘤38B9细胞生长

目的:研究Ywhab在小鼠B细胞淋巴瘤发生发展中的作用,并探讨其可能的分子机制。方法:使用生物信息学分析Ywhab与弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的相关性。在小鼠B细胞淋巴瘤38B9细胞中感染逆转录病毒构建Ywhab基因过表达细胞系,并采用RT-qPCR和Western blot验证Ywhab的mRNA及蛋白(14-3-3β)水平;通过细胞计数法、CCK-8法和小鼠皮下成瘤实验检测Ywhab过表达对38B9细胞在体内外生长的影响;RT-qPCR和Western blot检测细胞凋亡相关蛋白的表达;应用蛋白质免疫共沉淀联合蛋白质谱(CoIP-MS)筛选与14-3-3β特异性结合的蛋白并采用Western blot及分子对接分析进行验证。结果:Ywhab基因在DLBCL中低表达,其低表达预示DLBCL患者的临床预后较差。与正常小鼠骨髓B细胞相比,Ywhab在38B9细胞中低表达。Ywhab过表达能在体内外诱导38B9细胞凋亡,促进凋亡蛋白Puma、Noxa和Bax的mRNA及蛋白表达,抑制抗凋亡蛋白Bcl2的mRNA及蛋白表达(P<0.05)。14-3-3β蛋白能特异性结合Hsp90aa1蛋白并抑制其表达,从而促进38B9细胞凋亡。结论:Ywhab能够显著诱导小鼠B细胞淋巴瘤38B9细胞凋亡,其机制可能是通过靶向抑制Hsp90aa1蛋白表达来实现的。

复方五凤草液负压滴灌治疗Ⅲ-Ⅳ期压力性损伤的疗效及其作用机制

目的观察复方五凤草液负压滴灌治疗(NPWTi)Ⅲ-Ⅳ期压力性损伤(PI)的临床疗效,并初步探索其作用机制。方法(1)临床研究:选取2019年1月-2022年10月于南京市中西医结合医院瘰疬科病区及伤口护理门诊就诊的60例PI患者,随机分为生理盐水NPWTi组与复方五凤草液NPWTi组,每组30例。两组均在全身基础治疗的前提下进行NPWTi,分别于治疗前及治疗第1、2、3周拆除负压装置后统计PI愈合计分量表(PUSH)评分、创面细菌培养检出率及创面愈合时间,并用ELISA法检测创面组织血管内皮生长因子(VEGF)的含量。(2)动物实验:24只SD大鼠随机分为空白组、模型组、生理盐水NPWTi组与复方五凤草液NPWTi组,每组6只,通过局部组织缺血/再灌注损伤法建立PI大鼠模型,每天治疗结束后将负压装置拆除。分别于治疗前及治疗3、7、10 d观察各组大鼠创面形态,HE染色观察创面组织病理情况,免疫组化检测创面组织CD34阳性细胞百分比,并用ELISA法及RT-qPCR分别检测各组大鼠血液、创面组织中p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、核因子-κB p65(NF-κB p65)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、精氨酸酶-1(Arg-1)、转化生长因子-β(TGF-β)的表达水平。结果(1)临床研究:两组均能有效降低PUSH评分和创面细菌培养检出率,缩短创面愈合时间,促进创面组织VEGF表达,复方五凤草液NPWTi组优于生理盐水NPWTi组(P<0.05)。(2)动物实验:与空白组相比,模型组大鼠创面炎症反应及组织损伤明显,CD34阳性细胞百分比,以及血液和创面组织p38 MAPK、NF-κB p65、iNOS、TNF-α水平明显升高,Arg-1、TGF-β水平明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与模型组相比,生理盐水NPWTi组与复方五凤草液NPWTi组治疗7 d后创面形态评分明显降低,组织病理学形态明显改善,CD34阳性细胞百分比明显升高,血液及创面组织p38 MAPK、NF-κB p65、iNOS、TNF-α水平明显降低,Arg-1、TGF-β水平明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05),且复方五凤草液NPWTi组优于生理盐水NPWTi组(P<0.05)。结论复方五凤草液NPWTi可有效促进PI创面的愈合,其作用机制可能是通过抑制p38 MAPK/NF-κB信号通路的活化及表达,进而调节M1/M2巨噬细胞极化平衡。

抗奥合剂通过p38 MAPK/NF-κB信号通路和ACE2/Ang1-7/Mas轴缓解急性肺损伤研究

目的探讨抗奥合剂(KAHJ)治疗小鼠急性肺损伤(ALI)的作用及机制,为其可能作为缓解新型冠状病毒(COVID-19)感染后症状的药物提供依据。方法采用网络药理学方法预测KAHJ治疗ALI的主要活性成分、潜在靶点和相关信号通路。将C57BL/6J小鼠随机分为对照组、LPS组和LPS+KAHJ组。LPS+KAHJ组小鼠灌胃KAHJ(4.76 g·kg^(-1)·d^(-1),8.8 mL·kg^(-1)·d^(-1)),其余组小鼠灌胃生理盐水(8.8 mL·kg^(-1)·d^(-1))。14 d后,腹腔注射LPS(5 mg·kg^(-1))诱导ALI模型。收集小鼠血清和肺组织,通过组织病理学观察肺组织的病理变化。采用Western blot、qPCR、ELISA和IHC等方法评估KAHJ对ALI的改善作用。结果通过网络药理学筛选出疾病和药物共同的70个核心靶基因,并显示与多个信号通路密切相关,如MAPK、NF-κB、Apoptosis、COVID-19和肾素-血管紧张素系统(Ras)信号通路等。此外,通过实验验证发现KAHJ能改善小鼠ALI后的炎症和细胞凋亡,减少肺损伤和肺水肿,抑制肺纤维化。同时,KAHJ的作用机制与p38 MAPK和NF-κB的磷酸化以及ACE2/Ang1-7/Mas轴的调控也有着密切关系。结论KAHJ可能通过抑制p38 MAPK/NF-κB信号通路和调控ACE2/Ang1-7/Mas轴缓解ALI,为缓解COVID-19感染后症状提供了补充和替代药物。

热处理工艺对10B38钢组织性能的影响

研究了热处理工艺对10B38钢微观组织、力学性能以及低温冲击韧性的影响。结果表明：随淬火温度的升高,淬火硬度呈先上升后降低的趋势,在870℃时,淬火硬度最大;随着回火温度的升高,马氏体晶界及晶面逐渐有碳化物析出,组织中碳化物由片状连续不均匀分布变为颗粒状弥散分布;抗拉强度与屈服强度都随回火温度的升高而下降,断面收缩率及断后伸长率随回火温度的升高而增加;在350~450℃温度区间,冲击功随回火温度升高稳定增加,回火温度在550℃以上时,冲击功急速升高,10B38钢经油淬后在550~650℃区间回火能够同时满足强度和冲击功的要求。

TPPU通过抑制p38 MAPK/NF-κB p65信号通路对阿尔茨海默病细胞模型的抗神经炎症作用

目的在Aβ25-35诱导的阿尔茨海默病(AD)小胶质细胞(BV2细胞)模型中,采用对BV2细胞进行干预,探讨1-三氟甲氧基苯基-3-(1-丙酰哌啶-4-基)脲(TPPU),TPPU是否具有抗神经炎症作用及其可能的抗炎机制。方法利用Aβ25-35作用BV2细胞构建AD细胞模型,CCK8法分别检测不同浓度Aβ25-35和TPPU处理对BV2细胞活性的影响,最终选择20μM Aβ25-35诱导BV2细胞48 h作为造模组,0.1μM TPPU预处理BV2细胞3h,20μM Aβ25-35诱导BV2细胞48 h作为治疗组进行后续实验。利用ELISA法检测丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,倒置荧光显微镜检测活性氧(ROS)产生,real-time PCR检测小胶质细胞M1表型促炎因子肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素-1β(IL-1β)基因mRNA表达水平和检测M2表型抗炎因子IL-10及标志物Arg1基因mRNA表达水平。通过Western blot法检测细胞中炎症因子TNF-α蛋白及p38 MAPK/NF-κB p65信号通路相关蛋白表达水平。结果与对照组相比,模型组BV2细胞活力降低(P<0.05),ROS显著升高(P<0.05),MDA含量显著增多(P<0.05),SOD活性显著下降(P<0.05),TNF mRNA、IL-1βmRNA表达水平明显上调(P<0.05),IL-10 mRNA、Arg1 mRNA表达水平明显下调(P<0.05),TNF-α蛋白及p-p38 MAPK、p-NF-κB p65蛋白表达明显上调(P<0.05)。与模型组相比,经TPPU预处理后,BV2细胞活力明显升高(P<0.05),ROS显著降低(P<0.05),MDA含量显著下降(P<0.05),SOD活性显著提高(P<0.05),TNF mRNA、IL-1βmRNA表达水平明显下调(P<0.05),IL-10 mRNA、Arg1 mRNA表达水平明显上调(P<0.05),TNF-α蛋白及p-p38 MAPK、p-NF-κB p65蛋白表达明显下调(P<0.05)。结论TPPU抑制Aβ25-35诱导的BV2细胞炎症反应,促进BV2细胞由M1表型向M2表型极化,其机制可能与抑制p38MAPK/NF-κB p65信号通路激活有关。

黄芪甲苷调控p38 MAPK/NF-κB信号通路改善甲亢大鼠细胞凋亡的机制

目的:通过分析黄芪甲苷干预p38MAPK/NF-κB信号通路,分析其改善甲亢模型大鼠甲状腺组织细胞凋亡的机制。方法:将60只SPF级Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、甲巯咪唑组和黄芪甲苷低、高剂量组,每组12只。空白组不做处理,其他组制备甲亢大鼠模型后进行干预治疗。比较5组大鼠干预前后基础代谢情况;放疫法检测血清三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)和促甲状腺激素(TSH)的浓度;ELISA法检测大鼠血清中IL-1β、IL-6、TNF-α及VEGF含量变化;HE染色观察各组大鼠甲状腺组织病理学改变;TUNEL法检测各组甲状腺组织中的细胞凋亡情况;Western Blot及实时荧光定量PCR法检测各组甲状腺组织中NF-κBp65、p38MAPK蛋白及mRNA表达水平。结果:造模后,与空白组比较,模型组大鼠进食及进水量增加,体质量减少,T3、T4、TSH及IL-1β、IL-6、TNF-α、VEGF含量水平增高(均P<0.05),组织病理损害程度增加,细胞凋亡水平增高,甲状腺组织中NF-κBp65、p38MAPK蛋白及mRNA表达升高(P<0.05)。与模型组比较,甲巯咪唑组及黄芪甲苷干预组大鼠,进食及进水量减少,体质量明显增加,T3、T4、TSH及IL-1β、IL-6、TNF-α及VEGF含量水平降低(均P<0.05),组织病理损害程度明显改善,细胞凋亡水平降低,甲状腺组织中NF-κBp65、p38MAPK蛋白及mRNA表达明显降低(P<0.05),其中黄芪甲苷高剂量组改善程度显著优于黄芪甲苷低剂量组(P<0.01)。结论:黄芪甲苷能够有效改善甲亢大鼠甲状腺组织细胞凋亡,降低炎症因子表达,其机制可能与黄芪甲苷能够调控p38MAPK/NF-κB信号通路表达有关。

ROS-NF-κB-p38MAPK通路探索榄香烯联合硼替佐米抗多发性骨髓瘤的机制研究

目的:基于ROS-NF-κB-p38MAPK信号通路探讨榄香烯(ELE)联合硼替佐米(BTZ)抗多发性骨髓瘤的作用机制。方法:CCK-8法检测细胞活性。SPF级裸鼠构建人源性骨髓瘤移植瘤模型,设立对照组(NC组)、BTZ组、ELE组及联合处理组。Tunel染色观察肿瘤组织凋亡,Western Blot检测Caspase-3、Bcl-2、NF-κB及p38 MAPK表达,流式细胞术检测人源性骨髓瘤U266细胞周期、凋亡及活性氧(ROS)表达。结果:当4.0μmol/L ELE联合50 nmol/L BTZ处理U266时,细胞活性均显著低于其他组。BTZ组、ELE组及联合组裸鼠肿瘤体积明显小于NC组(P<0.05),联合组体积最小;Tunel染色显示NC组凋亡水平低于BTZ组、ELE组及联合组(P<0.05),联合组最低;Western Blot结果显示BTZ组、ELE组及联合组Caspase-3及p38 MAPK表达显著高于NC组,Bcl-2及NF-κB表达显著低于NC组。BTZ组、ELE组及联合组细胞凋亡水平及细胞内ROS表达显著高于NC组(P<0.05)。结论:ELE可能通过调控ROS/NF-κB/p38 MAPK信号通路增强BTZ促骨髓瘤细胞凋亡,从而实现其抗肿瘤作用。

大黄蛰虫胶囊对糖尿病大鼠视网膜炎症的抑制作用

目的探讨大黄蛰虫胶囊抑制糖尿病大鼠视网膜炎症的作用机制。方法随机选取10只大鼠作为空白组,其余50只均采用链佐脲菌素(STZ)腹腔注射建立糖尿病大鼠模型,造模成功后随机分为模型组及大黄蛰虫胶囊低、中、高剂量组(0.17、0.34、0.68 g/kg),给予相应药物干预。第1个月每2周记录大鼠体质量及空腹血糖,随后每4周记录1次。给药12周后,HE染色观察视网膜病理学改变,ELISA法检测血清TNF-α、IL-6水平,RT-qPCR法检测视网膜组织VEGF、NF-κB、p38 MAPK mRNA表达,Western blot法检测视网膜组织TLR4、p-p38 MAPK、p38 MAPK、NF-κB p65蛋白表达。结果空白组大鼠体质量随实验周期延长保持正常增长,空腹血糖维持在正常水平;模型组大鼠体质量增长缓慢,造模4周后,体质量逐渐下降,空腹血糖持续保持在较高水平。与空白组比较,模型组大鼠视网膜可观察到明显病理性损伤,血清TNF-α、IL-6水平、视网膜VEGF mRNA表达及TLR4、NF-κB p65、p-p38 MAPK/p38 MAPK蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,大黄蛰虫胶囊各剂量组均可改善视网膜病理损伤,抑制血清TNF-α、IL-6水平、视网膜VEGF mRNA表达及TLR4、NF-κB p65、p-p38 MAPK/p38 MAPK蛋白表达(P<0.05,P<0.01),且中剂量组作用优于高、低剂量组(P<0.05,P<0.01)。结论大黄蛰虫胶囊可减轻糖尿病大鼠视网膜病理损伤,其可能是通过抑制TLR4/p38 MAPK/NF-κB信号通路发挥抗炎作用。

倒心盾翅藤抗炎活性部位对马兜铃酸肾病大鼠肾脏的保护作用

目的筛选倒心盾翅藤抗炎活性成分,考察其对马兜铃酸肾病大鼠肾脏的保护作用。方法采用CCK-8法评价倒心盾翅藤各个极性部位对RAW2647细胞的毒性,确定适宜的给药剂量。利用脂多糖(LPS)诱导RAW2647细胞复制炎症模型,给予药物干预后,Griess法检测NO水平,筛选出具有抗炎活性的部位。采用灌胃关木通水提液的方法复制大鼠马兜铃酸肾病模型,给予不同剂量倒心盾翅藤提取物(相当于生药15、30、60 g/kg)干预后,BCA法检测大鼠24 h尿蛋白量,ELISA法检测血清白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,HE染色观察肾组织病理变化,Western blot法检测肾组织p-p38 MAPK、p-NF-κB p65蛋白表达。结果倒心盾翅藤二氯甲烷部位在125~200μg/mL质量浓度范围内对RAW2647未产生细胞毒性。25、50、100μg/mL二氯甲烷部位能抑制LPS诱导RAW2647细胞释放NO(P<005,P<001)。倒心盾翅藤二氯甲烷部位各剂量组均降低马兜铃酸肾病大鼠24 h尿蛋白量和血清IL-6、IL-1β、TNF-α水平(P<001),减轻肾脏病变程度,下调p-p38、p-p65蛋白表达(P<001)。结论倒心盾翅藤二氯甲烷部位具有抗炎作用,可下调p38 MAPK/NF-κB p65信号通路蛋白表达,抑制马兜铃酸肾病过程中的炎症反应,对肾脏发挥保护作用。

益肾活络逐痛汤对膝骨关节炎大鼠软骨损伤及骨微结构的影响

目的探讨益肾活络逐痛汤对膝骨关节炎大鼠软骨损伤和骨微结构的作用及机制。方法通过剪断大鼠右后膝关节前交叉韧带建立膝骨关节炎大鼠模型,假手术组只切开皮肤不剪断前交叉韧带,将造模成功的大鼠分为模型组、塞来昔布组及益肾活络逐痛汤低、中、高剂量组,各给药组灌胃给予相应剂量药液,假手术组和模型组灌胃给予生理盐水。给药前后测定大鼠行为学变化。给药结束后,检测大鼠血清IL-6、TNF-α水平,HE染色、甲苯胺蓝染色、番红固绿染色及Mankin评分评价关节软骨损伤情况,免疫组化染色分析关节软骨COL-Ⅱ、MMP-13、p-p38和NF-κB p65蛋白表达,Micro-CT分析骨微结构。结果益肾活络逐痛汤可改善膝骨关节炎大鼠行为学变化(P<0.05,P<0.01);降低血清IL-6、TNF-α水平(P<0.05,P<0.01);降低软骨组织MMP-13、p-p38和NF-κB p65蛋白表达(P<0.05,P<0.01),升高COL-Ⅱ蛋白表达(P<0.01);升高软骨下骨BMD、Tb.Th、Tb.N、BV/TV值(P<0.05,P<0.01),降低Tb.Sp数值(P<0.01);增加软骨细胞数量,减轻软骨表层磨损,使软骨下骨结构趋近正常,并呈剂量依赖性。结论益肾活络逐痛汤可抑制膝骨关节炎大鼠软骨p38 MAPK/NF-κB信号通路活化及MMP-13表达,降低血清IL-6、TNF-α释放,减少COL-Ⅱ降解,改善软骨病变及骨微结构。

黄连温胆汤对慢性间歇性低氧代谢综合征大鼠p38MAPK/NF-κB信号通路的影响

目的观察黄连温胆汤对慢性间歇性低氧代谢综合征(MS)大鼠p38MAPK/NF-kB信号通路的影响。方法将70只大鼠随机分为造模组60只、对照组10只,利用15%果糖水和高脂饲料联合链尿佐菌素构建MS大鼠模型。造模结束后将造模成功的51只大鼠随机分为代谢综合征组(MS组)、慢性间歇性低氧MS组(CIH-MS组)、p38MAPK抑制剂SB203580组(INH组)、黄连温胆汤高剂量组(HLWDT-H组)、黄连温胆汤低剂量组(HLWDT-L组),分别进行相关的干预处理;对照组(CON组)不做任何处理。干预4周后取材,Western-blot法测定各组大鼠主动脉p38MAPK、IκB、p-p38MAPK、p-IκB蛋白表达情况。ELISA法检测各组大鼠血清IL-6、TNF-α、VCAM-1、ICAM-1水平。结果与CON组相比,MS组和CIH-MS组p-p38MAPK、p-IκB显著增高(P<0.01),且CIH-MS组的表达量较MS组高(P<0.01);HLWD-H组、HLWD-L组、INH组p-p38MAPK、p-IκB较CIH-MS组比较表达量减少(P<0.01);HLWD-H组优于HLWDT-L组(P<0.05)。ELISA结果显示,CIH-MS组和MS组IL-6、TNF-α较CON组表达量增高(P<0.01),且CIH-MS组的表达量较MS组高(P<0.01);HLWD-H组、HLWT-L组、INH组IL-6、TNF-α较CIH-MS组比较表达量减少(P<0.01);HLWD-H组优于HLWD-L组(P<0.05)。结论CIH-MS可能通过活化p38MAPK/NF-κB通路造成血管内皮炎症损伤;黄连温胆汤可能通过抑制p38MAPK/NF-κB通路来减轻CIHMS引发的大鼠血管内皮炎症损伤。