一起柯萨奇病毒B5型暴发的流行病学调查

目的查清柯萨奇病毒B5型暴发的原因和流行状况,并采取针对性的控制措施。方法采用现场流行病学调查方法开展调查,并依据血清学、病原学以及分子生物学进行实验结果确认。结果从2005年5月19日开始出现以发热、头痛、头昏、咽痛、恶心、呕吐等为主要症状的病例,病程一般10d左右,疫情历时34d,共发病49例,14岁以下儿童罹患率为13.57%;有15例病人住院治疗,其中10例临床诊断“病毒性脑炎”;病例全部为1岁～12岁儿童,无死亡和后遗症病例出现。应用逆转录PCR方法从病人的2份血清和2份脑脊液标本中扩增出肠道病毒特异性基因片段,并从8份粪便中培养出柯萨奇病毒,血清分型为B5型。结论本次暴发为柯萨奇B5病毒引起病毒性脑炎暴发。

帕萨特B5型轿车空气流量传感器故障诊断与分析

帕萨特B5型轿车的空气流量传感器为热膜式。热膜式空气流量传感器的工作原理如图1所示，它是由热线电阻R2、温度补偿电阻R4、精密电阻R1和电桥电阻R3组成的惠斯顿电桥电路。

柯尼SMV4531TB5型正面吊刹车液压系统频繁充压故障分析

1刹车液压系统刹车液压系统是柯尼SMV4531TB5正面吊的重要组成部分,它不仅关系着其行走控制是否安全可靠,还关联着起升下降、大臂伸缩的液压伺服控制回路。某公司的该型号正面吊运行2年后出现频繁充压故障（平均充压时间不到10 s,正常为4～5 min）,本文通过对系统原理的分析,说明刹车液压系统频繁充压故障原因及处理方法。

这辆帕萨特B5型车急加速时自动变速器为何打滑

故障现象：一辆帕萨特B5型轿车，行驶里程为2．8万公里。此车在一次行驶时，感到动力不足，特别是在急加速时，出现自动变速器打滑现象。

奥迪Q5 0B5型7挡S tronic双离合变速器

Audi Q5采用OB5型7挡S tronic双离合器变速器（图1），该变速器与常时四驱机构配合使用纵置在车辆上。该变速器将自动变速器的优点（驾驶舒适、换挡时无牵引力中断）和手动变速器的优点（运动性和高传动效率）结合在了一起，换挡时间短且采用直接动力传递，使得驾驶员能获得一种特殊的驾驶体验。

帕萨特B5型轿车防抱死制动系统故障2例

例1 ABS警告灯和制动系统警告灯常亮故障现象：一辆帕萨特B5型轿车，在打开点火开关或起动发动机后，仪表板上的防抱死制动系统（ABS）警告灯和制动系统警告灯（红色惊叹号警告灯）一直点亮，同时仪表板发出报警声，车辆在行驶时其防抱死制动功能失效。

该帕萨特B5型汽车自动变速器为何偶尔加不上速

故障现象：一辆帕萨特B5型汽车，使用01N型变速器。该车在正常行驶时使用制动后．再加油就会出现发动机空转的现象．当上坡时也会出现发动机空转的现象，但在平路上行驶时加速正常。

这辆帕萨特B5型轿车空调制冷效果为啥不明显

故障现象：一辆上海大众帕萨特B5型轿车，打开A／C开关时，空调制冷效果不明显，出风温度接近自然风；即使调大风量，出风口温度变化也不大。

帕萨特B5型轿车转向及报警灯信号电路剖析

对轿车转向及报警信号电路工作原理最难于理解的就是转向和双闪两种不同状态时双闪开关内部8个触点开关的切换过程,文章以双闪开关实际产品为例,对这8个触点开关的切换过程作了详细的阐述,电路图及元器件的参数都是根据产品实物绘制,对汽车电器的维修和教学具有一定的参考价值。

柯萨奇病毒B组5型TaqMan一步法RT-qPCR检测方法的建立

目的建立柯萨奇病毒B组5型(coxsackievirusB5,CV-B5)特异的TaqMan一步法实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测方法。方法根据CV-B5的VP1序列,设计特异性引物和TaqMan探针。将目的基因插入pMD18^(TM)载体,在DH5α感受态细胞中扩增,大肠杆菌体外转录后获得RNA标准品并建立标准曲线,最后对检测方法的重复性、敏感度和特异性进行评价。结果该方法在10^(3)~10^(11)拷贝/微升的模板范围内具有良好的线性关系(r^(2)>0.99),扩增效率E=100.9%,敏感度达1×10^(3)拷贝/微升,只对CV-B5有特异性扩增曲线,且重复性较好。结论本实验建立的TaqMan一步法RT-qPCR检测方法有较高的敏感度、特异性和重复性,有良好的抗干扰性,可用于CV-B5的临床样本检测和绝对定量分析。

辽宁省首株柯萨奇病毒B组5型全基因组序列分析

研究引起辽宁地区手足口病的柯萨奇病毒B组5型(coxsackievirus B5,CV-B5)基因组特征。对2018年从辽宁省688份肠道病毒核酸阳性的标本中分离到的1株CV-B5进行高通量测序,并对其全基因组进行遗传进化分析。结果表明,CV-B5辽宁分离株与国内流行株的全基因组核苷酸序列同源性为78.5%~97%,氨基酸序列同源性为75.3%~96.7%。基于全基因组的进化分析将CV-B5流行株分为A~D四个基因型,辽宁分离株属于D基因型。通过重组分析发现其在P3区的3D区段发生重组。首次在辽宁地区手足口病患儿中分离出CV-B5,辽宁省分离株(LN2018-23-21/CHN/2018)可能为重组株。

一起柯萨奇病毒B5型感染暴发的调查

河南省信阳市西湾村三面环水，地理环境比较封闭。2005年春末夏初，该村儿童陆续发生了以发热、头痛、头昏为主要症状的不明原因发热病例。经现场流行病学调查和实验室检测，证实是由柯萨奇B5型病毒引起病毒性脑炎暴发。

2011年河南省脑炎患者柯萨奇病毒B5型分离株基因组序列分析

目的分析河南省柯萨奇病毒B5（CVB5）分离株全基因序列，了解其遗传特性。方法采集2例脑炎患者临床标本，分离病毒，提取病毒阳性分离物RNA，进行RT-PCR扩增，产物直接测序。利用DNAStar5．01和Mega5．05软件进行全基因序列拼接及亲缘进化分析。结果获得2株CVB5分离株（03001N和17Y）全基因组序列，核苷酸长度分别为7408bp和7404bp，两者核苷酸同源性为97％，同2010年河南CVB5分离株同源性最高，分别为98％和99％。5’-UTR分别为747bp和743bp；3’-UTR区均为103bp；病毒基因组编码区全长同为6558bp，编码含2185个氨基酸残基的多聚蛋白，氨基酸同源性为99％。VPl区系统发生树分析显示，2株CVB5分离株进化关系较近，同近年来国内其他分离株成一簇，而2009年的河南省CVB5分离株同山东省CVB5分离株成一簇。结论河南省内存在不同CVB5株传播链的流行，此次分离株为近几年内的主要流行株。

柯萨奇病毒B组5型非结构蛋白抑制NF-κB信号通路的作用机制研究

目的 柯萨奇病毒B组5型(CVB5)是手足口病的重要病原体之一,可导致发热、皮疹或疱疹等临床症状,重症者出现神经系统疾病,甚至死亡。天然免疫应答是机体抗病毒入侵的第一道防线,其中核因子κB (NF-κB)是宿主天然免疫反应中的重要蛋白质,然而关于CVB5感染后调控NF-κB介导信号通路的研究尚鲜有报道。方法 本研究通过检测启动子活性、促炎因子水平以及通路中关键蛋白表达等,阐明CVB5对NF-κB信号通路的调控作用机制。结果 CVB5感染可抑制促炎因子表达和p65的磷酸化。CVB5非结构蛋白(NSP)可抑制促炎因子表达以及重要蛋白p65和IκBα的磷酸化。经STRING11.1数据库预测表明,CVB5 3CD蛋白与宿主多聚胞嘧啶结合蛋白1 (PCBP1)具有相互作用,且PCBP1可促进IκBα和p65的磷酸化,抑制病毒复制。结论 CVB5 NSP可负调控NF-κB信号通路,且与3CD相互作用的PCBP1蛋白可通过调控NF-κB通路抑制CVB5复制。本研究探索病毒与宿主天然免疫应答的调控作用,从而为研制抗CVB5感染的药物提供作用靶点。

2014年山东省柯萨奇病毒B5型的分子流行病学研究

为了解山东省柯萨奇病毒B5型(Coxsackievirus B5,CV-B5)的分子进化特征,本研究对山东省2014年1~12月无菌性脑膜炎(Aseptic meningitis,AM)病例标本和环境污水监测标本进行肠道病毒(Enterovirus,EV)分离,阳性分离物采用分子生物学方法鉴定型别,并对CV-B5的VP1区序列进行系统进化树分析。结果显示,2014年AM病例中分离到69株CV-B5,占EV分离株43.95%;环境污水中分离到159株CV-B5,占非脊髓灰质炎EV分离株34.49%。上述CV-B5分离株具有季节性特征,夏秋季高峰明显。系统进化树分析表明,本研究分离株属于A、B两个基因簇,各簇之内AM和环境污水分离株之间有密切的亲缘关系,且环境污水分离株具有一定的地域聚集性。A、B基因簇的组内遗传距离分别为0.026、0.030,A基因簇与B基因簇组间遗传距离为0.085,提示CV-B5在山东地区存在2个传播链共循环,同时可能存在CV-B5跨地区传播和流行。本研究结果证明环境监测具有对EV相关疾病的预警能力。

一例重症手足口病死亡患儿柯萨奇病毒B5型VP4区基因特征分析

目的:对一例重症手足口病死亡患儿肠道病毒型别进行鉴定,分析VP4区基因特征,了解其变异情况。方法:提取病毒RNA,用肠道病毒VP4区分型引物进行半巢式RT-PCR(RT-nPCR),通过测序和Blast比对确定肠道病毒型别;并对其VP4区进行序列和进化分析。结果:RT-nPCR扩增目的片段测序结果经Blast比对确定为柯萨奇病毒B5型(CoxB5),命名为BJ09-237(Genbank登录号为JF430480)。其VP4区全长207bp,与CoxB5参考序列在VP4区的核苷酸同源性为79%～98%,氨基酸同源性为95%～100%,与广东株HQ005438及俄罗斯株GQ281602在同一进化树分支上。BJ09-237在VP4区无氨基酸的缺失和插入,未发现其所特有的氨基酸置换。结论:该重症手足口病死亡患儿CoxB5的VP4区基因序列未发生明显变异。

柯萨奇B_5型病毒引起类脊髓灰质炎麻痹2例

柯萨奇Ｂ_５型病毒引起类脊髓灰质炎麻痹２例汕头大学医学院第二附属医院传染科邱杰文，周小辉，谢若男，袁广卿［病例１］男性，１３岁。因不规则发热、在下肢无力７天于１９９３年１０月９日入院。患孩一贯身体健康，从未服用脊髓灰质炎糖丸。入院检查：Ｔ３８℃，Ｒ３?..

一株柯萨奇病毒B组5型(Cox.B5)病毒的分离及VP1基因分析

目的研究2009年昆明市无菌性脑膜炎的病原柯萨奇B5(coxsackie virus B5,CVB5)分离株(KMA193-09)的VP1基因特征。方法采用RD细胞、Hep-2细胞对患者粪便标本进行病毒分离,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增病毒VP1基因并进行序列测定,用Mega 4.0等软件分析处理。结果从无菌性脑膜炎患者粪便标本中,分离到CVB5,其VP1区的核苷酸长度均为831bp,未发现核苷酸插入与丢失。与浙江COXB5/ZHEJIANG/12/02(CFS)株、山东02336/SD/CHN/2002/CB5株及浙江COXB5/ZHEJIANG/13/02株氨基酸同源性最高为98.19%,与国外毒株的同源性为95.67%～97.83%。在进化树上与YZ081/SD/CHN/2005/CB5株显示在同一个分支上。结论分离的肠道病毒为柯萨奇病毒B组5型(CVB5),分离株(KMA193-09)VP1区变异较小。