miR-17-5p靶向B7-H3对结直肠癌细胞生物学特性及免疫调节作用的影响

目的:探究miR-17-5p对B7-H3的调控以及在结直肠癌发展中的免疫调节作用。方法:收集25例人结直肠癌组织及相邻正常组织,通过实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹和免疫组化实验分析miR-17-5p、B7-H3和PD-L1的表达水平。将人结直肠癌HCT-116细胞分为4组:miR-NC组、miR-17-5p mimic组、si-NC组、si-B7-H3组。通过细胞集落形成实验、Transwell实验和流式细胞术分析HCT-116细胞生长、侵袭能力和凋亡率。通过荧光素酶报告基因实验分析miR-17-5p对B7-H3的调控作用。通过ELISA实验分析细胞培养液中IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ及TNF-α的细胞因子水平。结果:与癌旁组织比较,结直肠癌组织中miR-17-5p表达下降,B7-H3表达升高。miR-17-5p mimic和si-B7-H3能够降低HCT-116细胞集落形成数量和侵袭数量,促进HCT-116细胞凋亡,并能降低培养液中IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ及TNF-α水平。此外,miR-17-5p mimic和si-B7-H3能够抑制HCT-116细胞PD-L1表达。结论:miR-17-5p能够靶向抑制B7-H3表达,影响结直肠癌发展中的免疫调节作用,并能抑制结直肠癌细胞的转移,促进结直肠癌细胞凋亡。

B7-H3在结直肠癌中的表达特征分析和临床意义

目的探讨B7同源物3(B7-H3)在结直肠癌(CRC)组织中的表达特征及临床意义,探究其与肿瘤糖酵解过程以及与肿瘤微环境中免疫细胞浸润的相关性。方法从肿瘤基因组图谱数据库(TCGA)下载CRC转录组数据和临床病理数据,分析B7-H3的表达情况和临床意义。基于TCGA数据分析CRC内糖酵解相关基因表达与B7-H3表达的相关性。使用通过估计RNA转录物相对子集的细胞类型鉴定(CIBERSORT)算法探究B7-H3表达与22种免疫细胞浸润的关系。收集51例CRC患者的手术标本及癌旁正常组织标本,应用免疫组织化学染色方法对数据库分析结果进行验证。结果B7-H3在CRC组织中的表达上调,且与肿瘤浸润深度、TNM分期晚期和不良预后密切相关。此外,B7-H3表达与CRC内糖酵解相关基因上调密切相关。免疫细胞浸润分析显示共有16种免疫细胞的浸润水平与B7-H3表达密切相关,进一步发现B7-H3表达与CD8+T细胞浸润在转录水平上呈负相关,但两者在蛋白水平上不相关。结论B7-H3在CRC组织中高表达,与CRC疾病进展和患者的不良预后密切相关。此外,B7-H3与糖酵解相关基因以及免疫细胞浸润之间的相关性,提示B7-H3在调控肿瘤糖酵解和肿瘤免疫中起到关键作用。

B7-H3在肿瘤生长、耐药性生成及免疫治疗中的研究进展

B7H3(也称为CD276)是一种新近发现的免疫协同刺激分子,是免疫协同刺激分子B7家族中的一员。由于B7-H3的受体目前还没有被确认,所以有关于其免疫功能以及胞内信号传递的具体作用机制尚未明确。B7-H3在诸多恶性肿瘤中都有着极高的表达,这代表着其不但可以作为诸多恶性肿瘤的肿瘤标志物辅助临床诊断,而且可以作为肿瘤靶向治疗的有效靶点。本篇综述主要介绍协同刺激分子B7-H3发展的历史,在各种恶性肿瘤发生发展与产生抗肿瘤药物的耐药性中可能发挥的作用,以及目前以B7-H3为靶点的治疗手段。

载阿霉素B7-H3免疫长循环脂质体的制备及其对MCF-7细胞活力的抑制作用

目的以阿霉素(DOX)为模型药物,以B7-H3免疫脂质体为载体,构建载DOX免疫长循环脂质体(BPDL),并评价其在SD大鼠体内的药动学行为以及对人乳腺癌MCF-7细胞的毒性作用。方法采用薄膜分散法制备包载DOX的脂质体BPDL,通过透射电镜观察其微观形态,激光粒度仪测定粒径分布及zeta电位。采用透析法考察其体外释药情况,并以SD大鼠为模型评价体内药动学,比较DOX、DOX-Lips和BPDL在体外对人乳腺癌MCF-7细胞的毒性作用。结果BPDL呈类球状分布,平均粒径为152.27 nm,电位为-25.9 mV,载DOX量为8.16%±0.08%。BPDL在磷酸缓冲溶液中释放96 h时,DOX的累积释放率为60.15%。与原料药比较,BPDL脂质体的MRT、C_(max)、CLz升高,其中的DOX的t_(1/2)比游离药物组延长3.59倍(P<0.05);细胞毒性实验中BPDL中DOX的浓度为160μg·mL^(-1)时,给药72 h条件下,对MCF-7抑制率达到97.48%。结论本研究制备的偶联B7-H3抗体的免疫长循环脂质体可延长药物在血液中的循环时间,对人乳腺癌细胞具有较强的抑制效果,为开发化疗联合免疫治疗方法提供了新的科研思路。

复方斑蝥胶囊联合紫杉醇、卡铂治疗晚期非小细胞肺癌疗效观察及对血清NRP-1、B7-H3水平的影响

目的:观察复方斑蝥胶囊联合紫杉醇、卡铂治疗晚期非小细胞肺癌的临床疗效及对血清神经纤毛蛋白1 (NRP-1)、B7-H3水平的影响。方法:选取80例晚期非小细胞肺癌患者,按照随机数字表法分为对照组和研究组各40例。对照组给予紫杉醇加卡铂化疗方案,研究组在对照组基础上加用复方斑蝥胶囊治疗。比较2组临床疗效,简易智能精神状态检查量表(MMSE)、日常生活能力量表(ADL)评分,CD3^(+)、CD4^(+)和自然杀伤(NK)细胞以及血清NRP-1、B7-H3水平。结果:研究组总有效率为75.00%,对照组为40.00%,2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,2组MMSE、ADL评分均较治疗前升高(P<0.05),且研究组2项评分均高于对照组(P<0.05)。治疗后,2组CD4^(+)、NK细胞水平均较治疗前升高(P<0.05),CD8^(+)水平较治疗前降低(P<0.05);且研究组CD4^(+)、NK细胞水平高于对照组(P<0.05),CD8^(+)水平低于对照组(P<0.05)。治疗后,2组血清NRP-1、B7-H3水平均较治疗前降低(P<0.05),且研究组2项水平均低于对照组(P<0.05)。结论:复方斑蝥胶囊联合紫杉醇加卡铂化疗治疗晚期非小细胞肺癌疗效显著,可有效改善患者免疫功能,下调血清NRP-1、B7-H3水平,提高患者认知功能与生活能力。

血清sB7-H3、TFF1、LCN-2联合检测对乳腺癌的诊断价值

目的:探讨乳腺癌(BC)患者血清中可溶性B7同源体3(sB7-H3)、三叶因子1(TFF1)、脂质运载蛋白2(LCN-2)的水平对疾病诊断的临床价值。方法:选取黄河三门峡医院2020年3月—2023年3月收治的196例BC初诊患者作为研究对象,设为BC组;同期84例乳腺良性病变患者和行76例体格检查健康者分别作为良性病变组和对照组;同时收集临床资料。采用ELISA法检测各组血清sB7-H3、TFF1、LCN-2水平,并分析其与BC患者临床病理特征的关系;Spearman法分析影响BC患者血清sB7-H3、TFF1、LCN-2水平与临床病理特征的相关性;绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估血清sB7-H3、TFF1、LCN-2水平对BC的诊断价值。结果:与对照组相比,良性病变组、BC组血清sB7-H3、TFF1、LCN-2水平明显升高(P<0.05),且BC组血清sB7-H3、TFF1、LCN-2水平明显高于良性病变组(P<0.05);肿瘤直径>2 cm、TNM分期为Ⅲ/Ⅳ期、淋巴结转移和ER表达为阴性的BC患者血清sB7-H3、TFF1、LCN-2水平明显升高(P<0.05),且血清sB7-H3、TFF1、LCN-2水平与肿瘤直径(r=0.463、0.442、0.481,P<0.001)、TNM分期(r=0.474、0.394、0.562,P<0.001)及淋巴结转移呈正相关(r=0.567、0.488、0.409,P<0.001),与ER表达呈负相关(r=-0.575、-0.534、-0.538,P<0.001);血清sB7-H3、TFF1、LCN-2单独诊断BC的AUC分别为0.817、0.814、0.830,联合诊断效果优于单独诊断(AUC=0.911,95%CI=0.871~0.942)。结论:BC患者血清中sB7-H3、TFF1、LCN-2水平明显升高,三者联合诊断BC的临床价值较高。

联合B7-H3和HPT预测脓毒症患者预后不良及列线图预测模型构建

目的 分析血清B7-H3、触珠蛋白(HPT)水平与脓毒症患者病情及预后关系,并分析预后不良的影响因素,构建列线图预测模型。方法 选取汉中市三二〇一医院2018年7月—2021年7月收治的325例脓毒症患者,根据是否休克分为脓毒症休克组(105例)和脓毒症非休克组(220例),观察脓毒症患者住院治疗28 d的生存情况,并分为生存组(200例)和死亡组(125例),记录患者一般资料,检测患者入院第1天血清指标,采用酶联免疫吸附法动态监测患者血清B7-H3和HPT表达水平。采用Logistic回归分析模型和R软件构建列线图预测患者预后不良模型。使用Hosmer-Lemeshow拟合优度检验、校准曲线、ROC曲线对本研究构建的列线图模型预测效能进行评估。结果 入院1、2、7、14 d动态监测患者血清B7-H3、HPT发现,休克组高于非休克组,死亡组高于生存组,差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,中性粒细胞百分比(NEU)、C-反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)、血肌酐(SCr)、序贯器官衰竭评分(SOFA)、白细胞计数(WBC)、血小板(PLT)及B7-H3、HPT是脓毒症患者预后不良的影响因素(P<0.05);入院第1天B7-H3、HPT水平联合预测脓毒症患者预后不良的AUC明显优于各指标单独预测(P<0.05),校准曲线及Hosmer-Lemeshow拟合优度检验脓毒症患者预后不良预测模型(M2),校准曲线斜率接近1(P>0.05)。结论 脓毒症患者血清中B7-H3、HPT异常高表达,与患者病情及预后密切相关,二者联合提高预测脓毒性患者预后不良的准确性。

血清CCL18、sB7-H3水平对子宫内膜异位症的诊断价值

目的观察子宫内膜异位症(EMs)患者血清趋化因子18(CCL18)、共刺激分子可溶性B7-H3(sB7-H3)水平,并探讨二者对EMs的诊断价值。方法选取2022年5月至2023年9月在该院就诊的97例EMs患者作为EMs组。根据EMs分期标准将97例EMs患者分为Ⅰ~Ⅱ期组和Ⅲ~Ⅳ期组;根据视觉模拟评分法将97例EMs患者按照痛经严重程度分为轻度组、中度组和重度组。另选取同期于该院进行健康体检的91例健康者作为对照组。收集所有研究对象的临床资料,包括年龄、体质量指数(BMI)、孕次、产次、糖类抗原125(CA125)、抗子宫内膜抗体(EMAb)、雌二醇、孕酮及促卵泡激素(FSH)水平等。采用酶联免疫吸附试验检测血清CCL18、sB7-H3水平。采用多因素Logistic回归分析发生EMs的危险因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清CCL18、sB7-H3单独及联合检测对EMs的诊断价值。结果EMs组血清CCL18、sB7-H3水平均显著高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Ⅰ~Ⅱ期组纳入41例患者,Ⅲ~Ⅳ期组纳入56例患者。与Ⅰ~Ⅱ期组相比,Ⅲ~Ⅳ期组患者血清CCL18、sB7-H3水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。轻度组纳入35例患者,中度组纳入39例患者,重度组纳入23例患者。不同痛经程度患者血清CCL18、sB7-H3水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);与轻度组相比,中度组和重度组血清CCL18、sB7-H3水平显著上升,差异有统计学意义(P<0.05);与中度组相比,重度组血清CCL18、sB7-H3水平显著上升,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,EMs组血清CA125、EMAb水平显著升高,雌二醇、FSH水平均显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,高水平CCL18及高水平sB7-H3是EMs发生的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清CCL18、sB7-H3单独及联合检测诊断EMs的曲线下面积(AUC)分别为0.759、0.798和0.882,血清CCL18、sB7-H3联合检测对EMs的诊断价值高于单独检测(Z=2.875、2.075,P<0.05)。结论EMs患者血清CCL18、sB7-H3水平升高,且二者单独及联合检测对EMs均具有一定诊断价值。

复发性口腔溃疡患者血清CCL19、sB7-H3、sPD-1水平变化及其对复发的预测价值

目的探究复发性口腔溃疡(ROU)患者血清趋化因子配体19(CCL19)、可溶性共刺激分子B7-H3(sB7-H3)、可溶性程序性死亡蛋白1(sPD-1)水平变化及其对复发的预测价值。方法选取2021年4月至2022年4月该院收治的ROU患者320例为ROU组,同期在该院体检无口腔疾病的健康志愿者320例为对照组,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中CCL19、sB7-H3、sPD-1水平。采用Pearson法分析ROU患者血清中CCL19、sB7-H3、sPD-1水平与白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析ROU患者血清中CCL19、sB7-H3、sPD-1水平对复发的预测价值。结果与对照组相比,ROU组血清中CCL19、sPD-1水平显著升高,sB7-H3水平显著降低(P<0.05)。ROU组血清IL-6、IL-10、TNF-α水平均显著高于对照组(P<0.05)。相关性分析结果显示,ROU患者血清中CCL19、sPD-1水平与IL-6、IL-10、TNF-α水平呈正相关,sB7-H3水平与IL-6、IL-10、TNF-α水平呈负相关(P<0.05)。与未复发组相比,复发组血清中CCL19、sPD-1水平显著升高,sB7-H3水平显著降低(P<0.05)。血清CCL19、sB7-H3、sPD-1三者联合预测ROU患者复发的曲线下面积(AUC)高于各指标单独预测(Z_(CCL19-三者联合)=3.294,P=0.001;Z_(sB7-H3-三者联合)=4.348,P<0.001;Z_(sPD-1-三者联合)=4.990,P<0.001)。结论ROU患者血清中CCL19、sPD-1呈高表达,sB7-H3呈低表达,三者对预测ROU患者的复发有一定的价值。

溃疡性结肠炎患儿血清sB7-H3、GRP78水平及与病情、预后的关系

目的探究溃疡性结肠炎(UC)患儿血清可溶性B7同源体3(sB7-H3)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)水平及与病情、预后的关系。方法选取2019年8月至2020年8月在本院诊治的UC患儿78例作为研究组,选取同时期在本院进行健康体检的儿童75例作为对照组。根据研究组病情严重情况分为轻度组29例,中度组32例,重度组17例。对研究组进行3年随访,根据预后情况分为预后不良组22例,预后良好组56例。采用酶联免疫吸附法测定血清sB7-H3、GRP78及炎症因子干扰素-r(IFN-r)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-33(IL-33)的水平;根据血压测量仪检测舒张压和收缩压水平。Pearson法分析血清sB7-H3和GRP78分别与炎症因子的相关性;Logistic回归分析影响UC患儿预后发生不良的因素;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清sB7-H3和GRP78水平预测UC患儿预后发生不良的临床价值。结果研究组血清sB7-H3、GRP78、IFN-r、IL-1β、IL-33水平显著高于对照组(P<0.05)。随着UC患儿病情越严重,血清sB7-H3、GRP78、IFN-r、IL-1β、IL-33水平越高(P<0.05)。血清sB7-H3和GRP78分别与IFN-r、IL-1β、IL-33呈正相关(P<0.05)。不良组血清sB7-H3、GRP78、IFN-r、IL-1β、IL-33水平显著高于良好组(P<0.05)。血清sB7-H3、GRP78、IL-33是影响UC患儿预后发生不良的危险因素(P<0.05)。血清sB7-H3、GRP78及二者联合检测UC患儿预后发生不良的曲线下面积(AUC)为0.874、0.884、0.969,二者联合检测明显高于单独检测(Z二者联合-sB7-H3=1.878,Z二者联合-GRP78=1.931,P<0.05)。结论UC患儿血清sB7-H3、GRP78水平升高,其随病情越严重水平越高,二者联合可较好预测UC患儿预后发生不良的情况。

类风湿性关节炎患者的免疫分子sB7-H3表达变化及临床意义分析

目的探讨类风湿性关节炎(RA)患者的血清可溶性B7-H3(sB7-H3)表达变化及临床意义。方法选择78例RA患者作为RA组,选择同期体检的50例健康人员作为对照组。检测两组血清sB7-H3、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平。比较RA组与对照组血清sB7-H3、TNF-α、IL-6水平;比较RA组中不同Steinbrocker影像学分级及不同RA活动度患者血清s B7-H3、TNF-α、IL-6水平,分析RA患者血清s B7-H3与TNF-α、IL-6水平的相关性。结果RA组患者血清s B7-H3、TNF-α、IL-6水平分别为(23.76±3.65)ng/ml、(41.86±11.74)pg/ml、(19.68±10.55)ng/ml,均明显高于对照组的(15.47±2.04)ng/ml、(19.72±6.61)pg/ml、(3.65±1.82)ng/ml(P<0.05)。随着Steinbrocker影像学分级的升高,RA患者血清sB7-H3、TNF-α、IL-6水平逐渐升高,不同Steinbrocker影像学分级患者血清sB7-H3、TNF-α、IL-6水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。随着疾病活动程度的升高,RA患者血清sB7-H3、TNF-α、IL-6水平逐渐升高,RA组中不同疾病活动程度患者血清sB7-H3、TNF-α、IL-6水平比较差异有统计学意义(P<0.05)。直线相关分析显示,RA患者血清sB7-H3水平与血清TNF-α、IL-6水平呈正相关性(r=0.658、0.517,P=0.000、0.000<0.05)。结论RA患者存在血清s B7-H3表达明显升高,并与疾病的活动程度密切相关,可作为RA治疗的预后评估的标志物及潜在靶点。

脾氨肽口服冻干粉治疗肺炎支原体肺炎患儿效果及对血清Gal-3、sB7-H3表达影响

目的探讨脾氨肽口服冻干粉治疗肺炎支原体肺炎(MPP)患儿效果及对血清半乳糖凝集素-3(Gal-3)、可溶性B7-H3(sB7-H3)表达的影响。方法选取2022年8月至2023年2月厦门大学附属第一医院杏林分院收治的MPP患儿80例,采用随机数表法将其分为对照组(n=40)和研究组(n=40)。对照组行常规治疗,研究组行常规治疗+脾氨肽口服冻干粉治疗,比较两组临床疗效、症状改善情况、血清Gal-3和sB7-H3表达水平以及不良反应发生率。结果研究组治疗总有效率(95.00%)明显高于对照组(72.50%),差异有统计学意义(P<0.05);研究组临床症状消失时间、平均住院时间及血白细胞计数恢复正常时间均明显短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,研究组血清Gal-3、sB7-H3水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组不良反应总发生率(12.50%vs.15.00%)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论脾氨肽口服冻干粉可显著提高MPP患儿临床疗效,改善其临床体征,降低患儿血清Gal-3、sB7-H3表达水平,且安全性较高。

CXC趋化因子配体8、核转录因子κB、可溶性B7-H3在肺炎支原体肺炎患儿中的临床意义及预后评估价值

目的分析CXC趋化因子配体8(CXCL8)、核转录因子κB(NF-κB)、可溶性B7-H3(sB7-H3)在肺炎支原体肺炎(MPP)患儿中的临床意义及预后评估价值。方法选择在广州医科大学附属妇女儿童医疗中心增城院区小儿内科综合三区2022年10月至2024年3月就诊的160例MPP患儿作为MPP组,选择同期接受健康体检的100例儿童作为健康组。所有患儿均接受对症治疗,于治疗7d后随访,根据预后结局分为预后良好组(n=115)、预后不良组(n=45)。比较健康组、MPP组NF-κB、CXCL8、sB7-H3水平,比较不同预后情况MPP患儿的临床资料及NF-κB、CXCL8、sB7-H3动态变化情况;采用多因素logistic分析MPP患儿预后的影响因素,并使用受试者工作特征(ROC)曲线分析NF-κB、CXCL8、sB7-H3对MPP患儿预后的预测价值。结果MPP组NF-κB、CXCL8、sB7-H3水平高于健康组(P<0.05);预后不良组、预后良好组急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分比较有差异(P<0.05);预后不良组治疗前后NF-κB、CXCL8、sB7-H3水平均高于预后良好组(P<0.05);多因素logistic回归分析结果显示,APACHEⅡ评分、NF-κB、CXCL8、sB7-H3为MPP患儿预后的独立影响因素(P<0.05);ROC曲线分析结果显示,NF-κB、CXCL8、sB7-H3联合检测预测MPP患儿预后的曲线下面积(0.825)及灵敏度、特异度(81.37%、80.65%)均高于各项单一检测(P<0.05)。结论血清NF-κB、CXCL8、sB7-H3与MPP患儿预后存在密切关系,以上指标联合检测对预测MPP预后的价值较高。

胃充盈超声造影联合血清CCL11、sB7-H3对胃癌淋巴结转移的预测价值

目的分析胃充盈超声造影联合血清CC型修饰趋化因子11(CCL11)、可溶性B7-H3(sB7-H3)对胃癌淋巴结转移的预测价值。方法选取2021年2月至2023年2月郑州市中医院收治的60例胃癌患者为胃癌组,另选取于本院进行健康体检的50例志愿者为对照组,两组均行血清CCL11、sB7-H3水平检测及胃充盈超声造影检查。结果胃癌组充盈超声造影参数增强时间(ET)、达峰时间(TP)短于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。淋巴结转移胃癌患者充盈超声造影参数ET、TP短于淋巴结未结转移胃癌患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。胃癌组血清CCL11、sB7-H3水平高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。淋巴结转移胃癌患者血清CCL11、sB7-H3水平高于淋巴结未转移胃癌患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线显示,三项联合对胃癌淋巴结转移的预测价值高于血清CCL11、sB7-H3、胃充盈超声造影单项检测,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论胃充盈超声造影联合血清CCL11、sB7-H3对胃癌淋巴结转移具有较高的预测价值。

MiR-29a下调共刺激分子B7-H3的表达及其对脑胶质瘤细胞侵袭的影响

目的:探讨miR-29a调控共刺激分子B7-H3在脑胶质瘤中的表达及其对脑胶质瘤细胞侵袭能力的影响。方法:通过Real-time PCR检测miR-29a和B7-H3在正常脑组织、脑胶质瘤组织及人胶质瘤细胞株U87中的表达,并利用脂质体将miR-29a的模拟物(mimics)和抑制剂(inhibitors)转入U87细胞,流式术验证miR-29a对B7-H3表达的调节效果;采用CCK-8和Transwell实验观察miR-29a对U87细胞的增殖和侵袭能力的影响,并通过流式术分析miR-29a干预前后U87细胞上与细胞侵袭相关的化学趋化因子的表达变化,以miRtarbase等软件预测miR-29a与CXCR4的结合能力。结果:胶质瘤组织及细胞株中miR-29a低表达而B7-H3 mRNA高表达,且均与瘤组织病理分级相关。转染miR-29a mimics可以有效下调U87细胞中B7-H3 mRNA的表达。转染miR-29a mimics可以显著抑制U87细胞的侵袭能力(P<0.05),但对细胞增殖并无显著影响。miR-29a过表达可同时下调U87细胞中CXCR4的表达,但软件分析CXCR4基因上并不存在miR-29a的结合位点。结论:miR-29a可有效下调B7-H3分子的表达,进而抑制脑胶质瘤细胞的侵袭能力,其作用机制可能与CXCR4途径相关。

共刺激分子B7-H1、B7-H3和B7-H4在血液系统恶性肿瘤细胞株中的表达水平和分布特征

目的:探讨3种共刺激分子B7-H1、B7-H3和B7-H4在人类血液系统恶性肿瘤细胞株中的表达及分布特征。方法:分别采用RT-PCR、q PCR、Western blot和流式细胞术检测13株血液肿瘤细胞中B7-H1、B7-H3和B7-H4的表达及亚细胞定位情况,设12例志愿者外周血单个核细胞(PB MNC)为对照。结果:3种共刺激分子的mRNA在12例志愿者PB MNC和13株血液肿瘤细胞中广泛表达,其中B7-H4表达水平相对偏低;3种共刺激分子分别在Maver、Z138和HL-60中表达最高,B7-H3和B7-H4在CZ1中不表达。3种共刺激分子的胞核及胞浆蛋白仅在恶性血液肿瘤细胞中异常高表达,分别在U937、Z138和Raji细胞中表达最高,B7-H3和B7-H4在CZ1细胞中不表达。在同一肿瘤来源的细胞株中,3种共刺激分子的mRNA和胞核及胞浆蛋白表达均存在差异,且差异不全一致。B7-H3膜蛋白在U937、M aver和Z138中表达丰度较高;B7-H1和B7-H4的膜蛋白在13株细胞中呈不表达或低表达。结论:共刺激分子B7-H1、B7-H3和B7-H4在mRNA水平均广泛表达,但蛋白水平仅在血液肿瘤细胞中异常高表达,且亚细胞定位多在胞核及胞浆,膜蛋白水平普遍低表达或不表达。同一肿瘤来源的细胞株中3种共刺激分子的表达可存在差异。

小鼠B7-H3-Fc融合蛋白的表达及其生物学活性的研究

目的:制备B7-H3-Fc融合蛋白,研究其对T细胞的共刺激作用。方法:首先采用PCR技术分别从pMD19-T/小鼠B7-H3和pMD19-T/hIgG1(Fc)重组载体中扩增出小鼠B7-H3胞外段基因和人IgG1重链Fc恒定区基因。通过重叠PCR技术将2段基因连接成B7-H3-Fc,经EcoR I和BglII双酶切后插入真核表达载体pIRES2-EGFP构建成pIRES2-EG-FP/B7-H3-Fc重组载体。脂质体法转染CHO细胞,经G418加压筛选能稳定分泌表达小鼠B7-H3-Fc融合蛋白的基因转染细胞,并经Western blot鉴定。该转基因细胞无血清培养后,收集细胞上清、超滤浓缩后行经Protein G柱纯化,获得纯品B7-H3-Fc融合蛋白。通过CCK-8以及ELISA方法检测小鼠B7-H3-Fc融合蛋白对T细胞体外增殖及细胞因子分泌的影响。结果:成功地构建了能稳定表达B7-H3-Fc融合蛋白基因的CHO转基因细胞株,该融合蛋白能够剂量依赖性地促进T细胞体外增殖及IL-2和IFN-γ等细胞因子分泌。结论:本研究提示B7-H3作为重要的共刺激分子,在调节T细胞免疫应答中发挥了正性共刺激作用。

负性协同刺激分子B7-H1和B7-H3在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨负性协同刺激分子B7-H1、B7-H3在乳腺癌组织中的表达及其与患者临床病理参数、预后及CD3+T淋巴细胞浸润程度的相关性。方法:选取2003年3月至2004年1月在苏州大学附属第三医院乳腺外科接受手术治疗的女性乳腺癌患者49例(均经病理诊断确认为浸润性导管癌)的乳腺癌组织标本,免疫组织化学方法检测乳腺癌组织中协同刺激分子B7-H1、B7-H3的表达以及CD3+T淋巴细胞浸润程度。结果:(1)乳腺癌组织中B7-H1阳性表达率为53.06%(26/49),其表达水平与肿瘤大小呈正相关(P<0.05)、与Her2/neu表达水平呈正相关(P<0.05)、与CD3+T淋巴细胞浸润程度呈负相关(P<0.05);(2)乳腺癌组织中B7-H3阳性表达率为59.18%(29/49),其表达水平与病理分期呈正相关(P<0.05)、与患者预后呈负相关(P<0.05);(3)乳腺癌组织中B7-H1和B7-H3的表达水平呈正相关(r=0.3316,P<0.05)。结论:负性协同刺激分子B7-H1和B7-H3在乳腺癌中的表达水平与临床病理因素及预后密切相关,对该两分子的检测在乳腺癌诊断和预后判断中具有潜在的临床应用价值。

HBV相关原发性肝癌患者血清B7-H3与IL-21的表达及其临床意义

目的:探讨血清B7-H3与IL-21在HBV相关原发性肝癌患者中的表达及临床意义。方法:收集HBV相关肝病121例,其中原发性肝癌50例作为肝癌组,良性组71例包括急性肝炎12例、慢性中至重度肝炎21例,肝硬化代偿期20例,肝硬化失代偿期18例;同期20例体检健康人员作为正常组。B7-H3和IL-21采用ELISA法检测,HBV-DNA定量运用实时荧光PCR检测。结果:肝癌患者血清B7-H3和IL-21含量分别为(207.60±57.16)ng/ml和(2 357.28±805.01)pg/ml,均高于正常组(P<0.001)。相对正常对照而言,良性组中不同临床类型患者二者含量均升高明显(P<0.001)。在HBV相关肝病患者血清中,B7-H3与IL-21呈正相关;B7-H3与HBV DNA无相关性,而IL-21与HBV DNA是否复制有关,但与其复制水平高低无关。结论:B7-H3、IL-21在HBV相关肝癌患者血清中表达水平高。机体B7-H3、IL-21持续地高表达可能与患者疾病的发展、预后有关。

共刺激分子B7-H3在人原发性肝癌中的表达及临床意义

背景与目的:B7-H3是近年来新发现的协同刺激分子B7家族成员,但目前其在人原发性肝癌中的表达及作用尚不明确。本研究旨在通过检测人肝癌组织中B7-H3分子的表达,探讨B7-H3在肝癌发生、发展中的临床意义。方法:采用免疫组织化学法、半定量逆转录聚合酶链式反应(reverse transcription PCR,RT-PCR)检测71例肝癌组织、对应癌旁组织及正常肝组织中B7-H3分子的蛋白、mRNA表达以及CD8+T淋巴细胞的浸润程度。结果:肝癌组织中B7-H3蛋白的阳性表达率为93.0%(68/71),而B7-H3在癌旁及正常肝组织中几乎不表达。肝癌组织中B7-H3 mRNA表达水平比癌旁组织和正常肝组织显著升高(P<0.05)。B7-H3的表达与患者AFP水平、TNM分期及肝内有无转移差异有统计学意义(P<0.05),与肿瘤组织中CD8+T淋巴细胞浸润程度呈负相关(P<0.05),与患者预后呈负相关(P<0.05)。结论:B7-H3在肝癌中高表达,和多项临床病理因素具有明显的关联。肝癌中B7-H3分子表达可能参与了抑制肝癌组织内CD8+T细胞功能,促进肝癌细胞逃避免疫监视,提示B7-H3在肝癌早期诊断、判断预后及靶向治疗中具有潜在的临床应用价值。