慢病毒介导的B7同源性3基因RNA干扰对胰腺癌细胞侵袭转移的影响

目的观察敲减B7同源性3（B7一H3）基因对胰腺癌Patu8988细胞侵袭转移的影响。方法将人B7-H3基因的RNA干扰（RNAi）慢病毒载体感染胰腺癌Patu8988细胞，建立稳定低表达B7一H3的细胞株。细胞分为3组：空白对照组、阴性对照组和实验组。实时定量聚合酶链反应（Real—timePCR）和流式细胞仪检测B7．H3表达水平，Transwell小室检测细胞侵袭力。3组细胞皮下成瘤后，分别以1mm。的瘤组织移植入胰包膜下建立胰腺癌原位模型，6周后处死，观察肿瘤腹腔转移情况。结果RNAi慢病毒感染后，对B7-H3mRNA和蛋白敲减效率分别达91．6％和88．1％，Transwell实验中实验组每高倍视野过膜细胞数明显少于空白对照组[（37±9）个比（86±17）个，F=22．01，P〈0．05]。裸鼠模型中，实验组腹腔转移瘤重低于空白对照组[（0．26±0．13）g比（1．33±0．38）g，F=48．60，P〈0．01）。结论敲减B7-H3基因表达抑制了胰腺癌细胞的侵袭转移。

肺炎支原体感染患儿miR-29c靶向B7-H3作用机制

目的探究在肺炎支原体感染患儿中的miR-29c-3p(miR-29c)靶向B7同源性3(B7-H3)作用机制。方法选择成都儿童专科医院2018年2月-2020年10月收治的230例肺炎支原体感染患儿以及在医院体检100名健康儿童作为研究对象。测定所有儿童miR-29c、B7-H3及相关细胞因子水平;体外细胞实验确定miR-29c靶向B7-H3作用具体机制。结果研究组患儿miR-29c低于对照组,而B7-H3、IL-4、IL-17高于对照组(P<0.05);与空白对照组比较,miR-29c沉默组IL-4水平上升,IL-17、干扰素(IFN)-γ、磷酸化信号转导与转录激活因子3(p-STAT3)蛋白、B7-H3蛋白水平下降(P<0.05),miR-29c过表达组IL-4水平下降,IL-17、IFN-γ、STAT3蛋白、B7-H3蛋白水平上升(P<0.05);与“miR-29c+荧光素酶空载”组、“miR-29c+B7-H3-mut-3’-UTR”组比较,“miR-29c+B7-H3-3’-UTR”组荧光素酶表达量下降(P<0.05);与CD_(4)^(+)T细胞组比较,空白病毒巨噬细胞+CD_(4)^(+)T细胞组、miR-29c沉默巨噬细胞+CD_(4)^(+)T细胞组视黄酸相关的孤儿受体(ROR-γt)、T-bet下降,GATA3上升(P<0.05);与空白病毒巨噬细胞+CD_(4)^(+)T细胞组比较,miR-29c沉默巨噬细胞+CD_(4)^(+)T细胞组ROR-γt、T-bet下降,GATA3上升(P<0.05)。结论miR-29c通过上调B7-H3水平影响支原体肺炎感染患儿机体炎症反应,这一作用可能与miR-29c调节B7-H3水平影响巨噬细胞极化,促进CD_(4)^(+)T细胞分化有关。