肾移植急性排斥反应时B7-2/CD28信号通路的表达

背景:以往动物研究表明,在器官移植急性排斥反应时共刺激分子的表达与急性排斥反应密切相关。目的:观察急性排斥反应时患者移植肾脏组织和外周血中B7-2/CD28信号通路的表达。方法:对53例同种异体肾移植患者于移植前1d、移植后1,3,7,14,21,28d分别取外周血以及在临床诊断急性排斥反应当天和抗排斥治疗1周后额外采血,用流式细胞仪检测共刺激分子B7-2/CD28在外周血淋巴细胞中的表达;同时,行经皮肾穿刺活检供肾修整结束时、移植后7d、1个月、6个月、1年或以上获取活检肾脏组织,用免疫组织化学方法检测活检组织中B7-2/CD28的表达情况。结果与结论:移植后1,3d内所有患者外周血中CD28+,CD4+/CD28+,CD8+/CD28+细胞比率均有显著下降(P<0.05),一二周后恢复到术前水平;移植后7d未发生急性排斥反应的患者肾脏组织B7-2阳性表达率显著上升(P<0.05),1个月后下降至移植前水平(P>0.05)。移植后发生急性排斥反应的患者外周血CD28+,CD4+/CD28+,CD8+/CD28+细胞比率及肾脏组织B7-2阳性表达率明显上升(P<0.05),经抗排斥治疗1周后均好转。结果证实,在肾移植后出现急性排斥反应时,肾脏组织以及外周血中共刺激分子B7-2/CD28的表达上调与急性排斥反应的发生密切相关。

舒普深和特治星对肾移植患者围术期感染的预防效果及对共刺激分子B7-2/CD_(28)表达的影响

目的:探究头孢哌酮-舒巴坦(舒普深)、哌拉西林-他唑巴坦(特治星)对肾移植患者围术期感染的预防效果,分析二者对共刺激分子B7-2/CD_(28)表达水平的影响。方法:前瞻性选取2020年03月—2022年01月于本院接受肾移植的64例患者为对象,根据术后预防感染用药分为舒普深组(n=35)和特治星组(n=29)。比较两组术后感染发生率和不良反应发生情况,蛋白电泳法检测血清α_(1)球蛋白区带指标,免疫荧光标记法检测外周血淋巴细胞中共刺激分子B7-2、CD_(28)的表达水平。结果:术后2周,舒普深组6例感染(17.14%),特治星组7例感染(24.14%),感染类型均以肺部感染为主,两组患者的感染发生率、感染类型比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。术前、术后2周,舒普深组和特治星组患者的血清α_(1)酸性蛋白(α_(1)-AG)、α_(1)抗胰蛋白酶(α_(1)-AT)和α_(1)脂蛋白水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。用药期间,舒普深组的不良反应总发生率明显低于特治星组(P<0.05)。术前、术后2周,舒普深组和特治星组患者的外周血淋巴细胞中CD^(+)_(28)、CD^(+)_4/CD^(+)_(28)、CD^(+)_8/CD^(+)_(28)和CD_(86)的表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:舒普深、特治星预防肾移植围术期感染的效果确切,二者对共刺激分子B7-2/CD28表达的影响相当,而舒普深的安全性较特治星更有优势。

过敏性紫癜患儿外周血单个核细胞共刺激分子B7-1、B7-2与CD28的表达及意义

目的探讨免疫共刺激分子B7-1、B7-2和CD28在过敏性紫癜患儿外周血单个核细胞(PBMC)中的表达及其意义。方法应用流式细胞仪(FCM)从蛋白质水平检测了38例过敏性紫癜(HSP)患儿(其中11例诊断为紫癜性肾炎)和20例正常儿童PBMC中B7-1、B7-2和CD28的表达,并分析其与24 h尿微量白蛋白的关系。结果过敏性紫癜患儿B7-2蛋白和CD28蛋白的表达水平(相对平均荧光强度,RMFI)均高于正常对照组(P<0.05),各组间B7-1蛋白表达水平的差别无显著性意义(P>0.05)。18例24 h尿微量白蛋白(24h UMA)增高的HSP患儿共刺激分子B7-2、CD28蛋白的表达与24 h UMA呈等级正相关。结论过敏性紫癜患儿PBMC共刺激分子B7-2、CD28表达异常增加,可能参与HSP的起病,而且B7-2、CD28蛋白的表达与24 h尿微量白蛋白呈等级正相关,提示可以作为监测HSP患儿病情以及检测早期肾脏损害的免疫学指标。

EHF疫苗接种者IL-12、sICAM-1、CD28分子及B7-2基因检测

目的 探讨EHF疫苗接种机体后细胞免疫应答的机制。方法 EHF双价灭活疫苗接种健康志愿者,采集接种前后静脉血分离血清和淋巴细胞。ELISA法检测免疫前后血清中IL 12、sICAM 1表达水平;IFA测定免疫前后淋巴细胞上CD2 8的表达;PCR SSP检测免疫前淋巴细胞的B7 2基因。结果 免疫后血清IL 12、sICAM 1表达水平升高,单因素方差分析有统计学差异;免疫前后淋巴细胞上CD2 8表达,χ2 检验示有显著性差异;PCR SSP方法检测免疫前淋巴细胞B7 2基因阳性5人,其中汉族3人,侗族1人和布依族1人。结论 EHF灭活疫苗接种健康志愿者后,显示机体产生了Th细胞介导的免疫应答。

基于B7-1/2/CD28/CTLA-4通路探讨扶正祛毒汤干预急性髓系白血病完全缓解患者CD34~+细胞诱导成树突细胞激发T细胞的影响

目的探讨扶正祛毒汤治疗急性髓系白血病完全缓解的可能作用机制。方法12只新西兰大白兔随机分为正常组以及扶正祛毒汤低、中、高剂量组,每组3只。扶正祛毒汤低、中、高剂量组兔分别给予扶正祛毒汤浓缩煎剂5、10、20g/(kg·d)灌胃3d,正常组兔给予等体积蒸馏水灌胃,末次灌胃后心脏取血获得正常血清和扶正祛毒汤低、中、高剂量血清。将急性髓系白血病完全缓解患者骨髓稀释后分离提纯CD34~+细胞,将扩增后的CD34^(+)细胞分为空白组、细胞因子组、正常血清组和扶正祛毒汤低、中、高剂量血清组。除空白组外,其余各组均添加细胞因子诱导9d成为树突细胞。流式细胞术(FCM)检测各组树突细胞表面抗原分子CD83、CD1a、HLA-DR的表达,以及共刺激分子B7-1、B7-2的表达。诱导成熟后的树突细胞分别激发自体和异体T细胞,免疫印迹试验(WB)和RT-qPCR法检测T细胞中特异性表面糖蛋白CD28(CD28)和细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4(CTLA-4)蛋白和mRNA的表达。MTT比色法检测激发后的T细胞在不同效靶比时对人髓系白血病细胞株K562的杀伤作用。结果与空白组相比较,细胞因子组、正常血清组和扶正祛毒汤低、中、高剂量血清组树突细胞表面抗原分子CD83、CD1a、HLA-DR的表达明显升高(P<0.05),共刺激分子B7-1、B7-2的表达明显升高(P<0.05);与细胞因子组和正常血清组相比较,扶正祛毒汤低、中、高剂量血清组树突细胞表面抗原分子CD83、CD1a、HLA-DR的表达明显升高(P<0.05),共刺激分子B7-1、B7-2的表达明显升高(P<0.05)。与空白组、细胞因子组和正常血清组相比较,扶正祛毒汤低、中、高剂量血清组CD28蛋白及mRNA表达均明显增加(P<0.05),CTLA-4蛋白及mRNA表达均明显降低(P<0.05),T细胞对K562细胞的杀伤率明显增加(P<0.05),且杀伤作用随效靶比的增加而增强,但正常人T细胞与患者T细胞对K562细胞的杀伤作用无明显差异(P>0.05)。结论扶正祛毒汤治疗急性髓系白血病完全缓解的机制可能与该方能够有效促进急性髓系白血病完全缓解患者骨髓CD34^(+)细胞源树突细胞的成熟,从而抑制共刺激分子B7-1、B7-2与CTLA-4结合,且促进B7-1、B7-2与CD28结合,调控B7-1/2/CD28/CTLA-4信号通路有关。

吸烟对大鼠肺组织B_(7-1)/B_(7-2)及其相关配体表达的影响

目的通过研究吸烟对大鼠肺组织B7-1/B7-2及其相关配体表达的影响,探讨专职抗原提呈细胞(APC)在吸烟所致肺部慢性炎症发生发展中的作用。方法将30只健康雄性Wistar大鼠随机分为不吸烟组、吸烟6周组和吸烟12周组,每组10只。采用免疫组化半定量法测定大鼠气道周围肺间质中慢性炎症细胞胞膜B7-1、B7-2、CD28和CTLA-4的表达水平。结果吸烟6周组与吸烟12周组大鼠肺组织B7-1、B7-2、CD28和CTLA-4表达量较不吸烟组均显著增高(P<0.01),吸烟12周组较吸烟6周组表达量也均增高(P<0.01),随吸烟时间的延长各指标表达量均呈上升趋势。结论吸烟可引起大鼠肺组织B7/CD28/CTLA-4表达水平的增高,提示APC可能在吸烟所致肺部慢性炎症发生发展中起重要作用。

X射线全身照射对免疫细胞共刺激分子表达的影响

目的 探讨低剂量电离辐射对免疫细胞表面分子的影响。方法 用流式细胞术FITC CD2 8 PE CTLA 4双染法观察了小鼠胸腺和脾细胞的CD2 8和CTLA 4表达变化 ,用免疫细胞化学(ABC)法观察了小鼠腹腔巨噬细胞B7 1和B7 2的表达变化。结果 低剂量电离辐射和较高剂量电离辐射均能增强腹腔巨噬细胞B7分子的表达 ;同时发现 ,低剂量电离辐射显著增强胸腺和脾细胞CD2 8的表达 ,而CTLA 4的表达降低 ,脾细胞较胸腺细胞更明显。较高剂量电离辐射显著增强胸腺和脾细胞CTLA 4的表达 ,同时抑制两种细胞CD2 8的表达 ,以脾细胞为更显著。结论 共刺激分子CD2