重组人B7-H4IgV融合蛋白的表达、纯化及活性

目的表达、纯化重组人B7-H4IgV融合蛋白,并检测其活性。方法将人B7-H4胞外片段IgV区基因插入pQE-30原核表达载体,转化大肠杆菌,IPTG诱导表达。表达产物经Ni2+-NTA柱亲和层析纯化,并进行Westernblot鉴定。用纯化的rhB7-H4IgV蛋白免疫昆明小鼠,经ELISA、流式细胞术测定小鼠抗血清的活性;免疫SP2/0荷瘤小鼠,观察对肿瘤细胞生长的抑制作用。结果表达的rhB7-H4IgV蛋白约占菌体总蛋白的25%,纯化后蛋白纯度为93%,浓度约为0.5mg/ml,与抗His单抗可产生特异性反应条带。免疫昆明小鼠产生的抗血清效价可达1∶10000,可与SP2/0肿瘤细胞结合。rhB7-H4IgV蛋白对SP2/0移植瘤生长具有一定的抑制作用。结论已成功表达并纯化了重组人B7-H4IgV融合蛋白,纯化蛋白可诱发小鼠体内免疫应答,产生的抗体能与表达B7-H4的肿瘤细胞SP2/0结合,rhB7-H4IgV蛋白在一定程度上能抑制SP2/0移植瘤的生长。

动脉灌注化疗联合细胞因子诱导杀伤细胞治疗晚期卵巢癌疗效及对患者血清癌胚抗原、糖类抗原125、可溶性B7-H4蛋白水平的影响

目的:探讨卵巢癌动脉灌注化疗联合细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)治疗晚期卵巢癌疗效及对患者血清癌胚抗原(CEA)、糖类抗原125(CA125)、可溶性B7-H4蛋白(sB7-H4)水平的影响。方法:选择103例晚期卵巢癌患者,随机分为两组,对照组(n=52)行动脉灌注化疗,观察组(n=51)行动脉灌注化疗联合CIK治疗。评价两组患者治疗效果,比较治疗前后卵巢血流参数指标搏动指数(PI)、阻力指数(RI)、收缩期峰值流速(PSV)变化及血清癌胚抗原CEA、CA125、sB7-H4水平变化,随访3年,记录两组患者3年生存率。结果:观察组总有效率88.23%高于对照组的61.54%(P<0.05)。治疗后观察组PI、RI值较对照组升高,RSV值较对照组降低(均P<0.05)。治疗后观察组血清CEA、CA125、sB7-H4水平低于对照组(均P<0.05)。观察组3年生存率为78.43%高于对照组3年生存率为57.69%(P<0.05)。结论:卵巢癌患者行髂内动脉灌注化疗联合CIK治疗是一种安全、有效的治疗手段,但对于化疗中药物的使用及剂量大小仍需进一步研究,以确定选择最优药物和制定最佳治疗方案。

重组B7-H1IgV融合蛋白的表达、纯化及活性鉴定

目的以B7-H1为靶点,研制肿瘤免疫治疗蛋白疫苗。方法将人B7-H1胞外片段IgV区基因插入pQE-30原核表达载体,转化大肠杆菌,经IPTG诱导表达。Ni2+-NTA亲和层析纯化蛋白,Westernblot鉴定。用纯化的rhB7-H1IgV蛋白免疫昆明小鼠,经ELISA、流式细胞术、免疫组化技术和CDC试验测定融合蛋白及其抗血清的生物学活性。结果所构建的pQE-30-TT-B7-H1IgV表达载体,能稳定表达rhB7-H1IgV蛋白,经纯化后免疫昆明小鼠,可获得高滴度抗B7-H1抗血清。经流式细胞术和免疫组化检测显示,其抗血清可与HT-29/B7-H1+及SP2/0肿瘤细胞结合,且在CDC试验中,可依赖补体杀伤HT-29/B7-H1+及SP2/0肿瘤细胞。结论rhB7-H1IgV融合蛋白不仅可引发小鼠体液免疫应答,而且其抗体还能与表达B7-H1的肿瘤细胞相结合,并介导补体依赖的体外杀伤作用。

人4IgB7-H3-Fc融合蛋白的表达及其生物学活性的研究

为获得人4IgB7-H3-Fc融合蛋白,研究其对T细胞的共刺激作用,采用PCR技术分别从pMD18-T/4IgB7-H3和pMD18-T/hIgG1(Fc)重组载体中扩增出人4IgB7-H3胞外段基因和人IgG1重链Fc恒定区基因,通过RT-PCR技术插入逆转录病毒载体pGEZ-Term,重组逆转录病毒载体与两个辅助病毒载体经脂质体法共转染包装细胞293T,收集含有完整病毒颗粒的293T细胞的培养上清反复感染L929细胞,利用Zeocin筛选获得能稳定分泌4IgB7-H3-Fc融合蛋白的基因转染细胞。基因转染细胞经无血清培养后,收集的上清用Dot blot检测,超滤浓缩并经Protein G柱纯化,再用SDS-PAGE、Western blot鉴定。以4IgB7-H3-Fc蛋白检测活化T细胞表面未知受体的表达,通过MTT方法分析4IgB7-H3-Fc融合蛋白对T细胞的共刺激作用。结果显示,成功地构建了pEGZ-Term/4IgB7-H3-Fc重组逆转录病毒载体,经转染包装细胞293T后,筛选获得能稳定分泌4IgB7-H3-Fc蛋白的L929基因转染细胞株;纯化后的4IgB7-H3-Fc蛋白能够与活化T细胞表面结合,并对T细胞有显著的促增殖作用。为探讨人4IgB7-H3-Fc融合蛋白对T细胞的共刺激作用和寻找其未知受体奠定良好的物质基础。

人B7-H4-Fc融合蛋白的表达及其应用研究

B7-H4分子是近年发现的一个新的协同刺激分子，它通过抑制T细胞的增殖、细胞因子的分泌以及细胞周期的进行，进而下调T细胞的免疫功能。为获取人B7．H4IgG融合蛋白，研究其对T细胞的调节效应，采用PCR法分别从pEGZ—Term／PD—L1-Fc和含人B7．H4基因序列的重组质粒中扩增出人IgGFc恒定区基因及人B7＋H4基因的胞外段序列，将两者插入逆转录病毒载体pEGZ—Term中，构建pEGZ．Term／B7．H4一Fc逆转录病毒重组载体，用脂质体法与两个辅助病毒载体共转染293T包装细胞，用含病毒颗粒的培养上清反复感染CHO细胞。用Zeocin筛选能稳定分泌人B7-H4-Fc融合蛋白的基因转染细胞并亚克隆之，经大量培养增殖，裂解细胞后收集裂解上清用ProteinG柱纯化，再经Westernblot鉴定。以体外T细胞活化体系观察其对T细胞活化的抑制作用。结果表明，成功地构建了表达人B7-H4-Fc融合蛋门的重组逆转录病毒载体；获得的CHO／B7-H4-Fc细胞能稳定分泌人B7-H4-Fc融合蛋门，该融合蛋白可以有效地抑制T细胞的活化。

小鼠B7-H3-Fc融合蛋白的表达及其生物学活性的研究

目的:制备B7-H3-Fc融合蛋白,研究其对T细胞的共刺激作用。方法:首先采用PCR技术分别从pMD19-T/小鼠B7-H3和pMD19-T/hIgG1(Fc)重组载体中扩增出小鼠B7-H3胞外段基因和人IgG1重链Fc恒定区基因。通过重叠PCR技术将2段基因连接成B7-H3-Fc,经EcoR I和BglII双酶切后插入真核表达载体pIRES2-EGFP构建成pIRES2-EG-FP/B7-H3-Fc重组载体。脂质体法转染CHO细胞,经G418加压筛选能稳定分泌表达小鼠B7-H3-Fc融合蛋白的基因转染细胞,并经Western blot鉴定。该转基因细胞无血清培养后,收集细胞上清、超滤浓缩后行经Protein G柱纯化,获得纯品B7-H3-Fc融合蛋白。通过CCK-8以及ELISA方法检测小鼠B7-H3-Fc融合蛋白对T细胞体外增殖及细胞因子分泌的影响。结果:成功地构建了能稳定表达B7-H3-Fc融合蛋白基因的CHO转基因细胞株,该融合蛋白能够剂量依赖性地促进T细胞体外增殖及IL-2和IFN-γ等细胞因子分泌。结论:本研究提示B7-H3作为重要的共刺激分子,在调节T细胞免疫应答中发挥了正性共刺激作用。

B7-H4蛋白在卵巢上皮性肿瘤组织中的表达及其临床意义

目的:研究B7-H4蛋白在卵巢上皮性肿瘤组织中的表达,探讨其与卵巢上皮性肿瘤临床病理学特征的关系及与CA125表达的相关性。方法:采用免疫组织化学法检测B7-H4蛋白和CA125在70例卵巢上皮性癌(卵巢浆液性囊腺癌41例、卵巢黏液性囊腺癌11例、卵巢子宫内膜样癌9例和卵巢透明细胞癌9例)、30例卵巢良性上皮性肿瘤及10例正常卵巢组织中的表达。结果:①B7-H4蛋白在卵巢上皮性癌组织中的阳性表达率(84.3%)显著高于卵巢良性上皮性肿瘤(23.3%,P<0.05),在正常卵巢组织中呈阴性表达。②B7-H4蛋白在卵巢浆液性囊腺癌、卵巢子宫内膜样癌和卵巢透明细胞癌组织中的阳性表达率(100%、77.8%和88.9%)均显著高于卵巢黏液性囊腺癌(27.3%,P<0.01)。③B7-H4蛋白在卵巢上皮性癌晚期组(Ⅲ和Ⅳ期)的阳性表达率(92.9%)显著高于卵巢上皮性癌早期组(Ⅰ和Ⅱ期)(71.4%,P<0.05)。④B7-H4蛋白在卵巢上皮性癌低分化组(G3)的阳性表达率(100%)显著高于卵巢上皮性癌高、中分化组(G1和G2)(67.6%,P<0.01)。⑤除卵巢黏液性囊腺癌外,CA125在卵巢黏液性癌、卵巢子宫内膜样癌和卵巢透明细胞癌组织中的阳性表达率均显著低于B7-H4的阳性表达率,CA125与B7-H4表达率呈正相关关系(r=0.277,P<0.05)。结论:B7-H4蛋白在卵巢上皮性癌组织中的阳性表达与卵巢上皮性癌的病理类型、临床分期和病理分级相关,B7-H4可以作为诊断卵巢癌新的肿瘤标志物之一。

B7-H4蛋白在卵巢子宫内膜样腺癌组织中的表达及临床病理意义

目的探讨B7-H4蛋白在卵巢子宫内膜样腺癌组织中表达及临床病理意义。方法应用免疫组织化学Elivision法检测30例卵巢子宫内膜样腺癌、15例卵巢子宫内膜交界瘤、30例卵巢子宫内膜异位症及20例正常卵巢组织中B7-H4蛋白表达,分析其表达差异与患者临床病理特征关系及与患者术前血清CA125水平相关性。结果B7-H4蛋白在卵巢子宫内膜样腺癌、交界瘤、内膜异位症及正常卵巢组织中阳性表达率分别为96.7%(29/30)、53.3%(8/15)、30.0%(9/30)和5.0%(1/20),阳性率逐级下降,差异有统计学意义(P=0.000<0.05);B7-H4蛋白表达与卵巢子宫内膜样腺癌患者年龄无关(P>0.05),表达强度与临床分期、病理分级相关(P<0.05),并与术前血清CA125水平呈正相关,B7-H4蛋白高表达患者术后易发生癌灶残留。结论 B7-H4蛋白在卵巢子宫内膜样腺癌组织中弥漫性高表达,表达强度与肿瘤发展阶段及级别相关,提示B7-H4分子在卵巢子宫内膜样腺癌发生、发展中起重要作用;B7-H4蛋白表达强度与患者术前血清CA125水平呈正相关。B7-H4蛋白检测有助于卵巢子宫内膜样腺癌早期诊断。

乳腺癌组织中免疫共刺激分子B7-H1与受体酪氨酸激酶EphA4蛋白的表达及意义

目的探讨乳腺癌组织中免疫共刺激分子B7-H1与受体酪氨酸激酶Eph A4蛋白的表达及意义。方法 82例病理诊断为乳腺癌患者,乳腺癌TNM分期Ⅰ期23例、Ⅱ期38例、Ⅲ期15例、Ⅳ期6例,分析B7-H1、Eph A4蛋白与乳腺癌TNM分期的相关性。以同期良性乳腺病变55例患者为对照,观察B7-H1、Eph A4蛋白的阳性率。结果与乳腺良性病变患者相比,乳腺癌患者B7-H1阳性率高(P<0.05)、Eph A4蛋白阳性率低(P<0.05)。Spearman分析发现B7-H1与TNM分期呈正相关(r=0.4682,P<0.05),Eph A4蛋白与TNM分期呈负相关(r=-0.3402,P<0.05)。结论 B7-H1促进肿瘤细胞免疫逃逸、Eph A4蛋白抑制癌细胞活化增殖能力降低,均参与了乳腺癌病理发展,均可作为乳腺癌诊断和治疗的潜在靶点。

MSCT联合血清sB7-H4、YKL-40诊断胃癌淋巴结转移的临床价值

目的探讨多层螺旋CT(MSCT)联合血清可溶性B7-H4(B7-H4)、甲壳质酶蛋白40(YKL-40)对胃癌淋巴结转移的诊断价值。方法选取2021年1月至2023年1月确诊的胃癌患者114例,根据患者是否发生淋巴结转移分为转移组54例和未转移组60例,对患者进行MSCT检查,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清sB7-H4、YKL-40水平;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清sB7-H4、YKL-40水平对胃癌淋巴结转移的诊断价值;采用Kappa一致性检验分析各方法与病理结果一致性。结果转移组血清sB7-H4、YKL-40水平及强化程度显著高于未转移组(P<0.05)。血清sB7-H4、YKL-40水平诊断胃癌淋巴结转移的曲线下面积(AUC)分别为0.794、0.811。MSCT、血清sB7-H4、YKL-40单独及联合检查与病理结果一致性分别为较高、中度、中度、极高,Kappa值分别为0.721、0.473、0.408、0.859(P<0.05)。MSCT联合血清sB7-H4、YKL-40诊断胃癌淋巴结转移的特异度、阳性预测值显著高于三者单独诊断,准确度、阴性预测值显著高于血清sB7-H4、YKL-40单独诊断,敏感度高于血清sB7-H4单独诊断(P<0.05)。结论MSCT联合血清sB7-H4、YKL-40对于诊断胃癌淋巴结转移有较高的应用价值。

B7-H4蛋白在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义

目的探讨B7-H4蛋白在上皮性卵巢肿瘤中的表达及临床意义。方法用链毒菌抗生物素蛋白过氧化物酶免疫组织化学染色的方法检测B7-H4蛋白在正常卵巢、良性上皮性卵巢肿瘤、交界性上皮性卵巢肿瘤、上皮性卵巢癌组织中的表达,并分析其与各临床病理特征的关系。结果 B7-H4蛋白在卵巢癌组阳性表达率显著高于正常组、良性组、交界组,差异有统计学意义(P<0.01),其余各组间差异无统计学意义(P>0.05)。B7 H4的表达与病理分期、分级、类型相关,差异有统计学意义(P<0.05)。上皮性卵巢癌分期越晚、分化越差B7 H4表达越高,浆液性癌B7-H4表达高于黏液性癌。结论 B7-H4在卵巢癌中的高表达及其与病理类型、临床分级、分期的关系,提示其可能与肿瘤发生发展有关,可为卵巢恶性肿瘤诊断及治疗提供靶位点。

MSCT扫描联合血清TFF3、sB7-H4对食管癌的术前分期评估中的价值分析

目的探讨多层螺旋CT(MSCT)扫描联合血清三叶因子3(TFF3)、可溶性B7-H4蛋白(sB7-H4)在食管癌患者术前分期评估中的临床价值。方法选取2022年8月~2023年9月本院确诊的116例食管癌患者为研究对象,患者均进行MSCT扫描检查,并依据术后病理结果进行分期。采用ELISA法检测血清TFF3、sB7-H4水平,绘制ROC曲线分析血清TFF3、sB7-H4水平对食管癌术前分期的评估价值。结果食管癌患者T分期中T1~T2、T3、T4血清TFF3、sB7-H4水平依次升高,N分期中N0、N1、N2血清TFF3、sB7-H4水平依次升高(P<0.05)。血清TFF3、sB7-H4水平评估T分期中T1~T2与T3的AUC分别为0.758、0.827,截断值分别为10.35 ng/mL、41.89μg/L;评估T分期中T3与T4的AUC分别为0.752、0.812,截断值分别为14.41 ng/mL、48.75μg/L。血清TFF3、sB7-H4水平评估N分期中N0与N1的AUC分别为0.827、0.853,截断值分别为10.94 ng/mL、42.38μg/L;评估N分期中N1与N2的AUC分别为0.825、0.805,截断值分别为15.03 ng/mL、50.19μg/L。MSCT扫描评估食管癌患者T分期的总诊断正确率为84.48%,N分期的总诊断正确率为83.62%。MSCT扫描联合血清TFF3、sB7-H4水平评估食管癌患者T分期的总诊断正确率为94.83%,高于MSCT扫描单独评估(P<0.05);N分期的总诊断正确率为93.97%,高于MSCT扫描单独评估(P<0.05)。结论MSCT扫描联合血清TFF3、sB7-H4水平,可有效提高评估食管癌患者分期的诊断正确率,应用价值较高。

血清人附睾蛋白4和共刺激分子B7-H3水平对宫颈癌术后患者预后的评估价值

目的:分析血清人附睾蛋白4(HE4)、共刺激分子B7-H3(B7-H3)水平对宫颈癌术后患者预后的评估价值。方法:选取行腹腔镜宫颈癌根治术患者300例为宫颈癌组,280例宫颈上皮内瘤变患者为良性组,选择同期体检健康女性280例为对照组;观察宫颈癌组、良性组术后非月经期、对照组在非月经期间体检时的血清HE4、B7-H3水平,分析不同临床特征宫颈癌术后患者(年龄、月经状态、肿瘤直径、病理类型、FIGO分期、分化程度、淋巴结转移及浸润深度)的HE4、B7-H3水平;宫颈癌术后患者随访5年,分析生存状况、比较死亡与存活患者血清HE4、B7-H3表达水平,采用受试者工作特征(ROC)曲线下面积(AUC)分析HE4、B7-H3单独或联合检测对宫颈癌术后患者预后的评估价值。结果:宫颈癌组和良性组患者血清HE4、B7-H3水平高于对照组(P<0.05),宫颈癌组HE4、B7-H3表达水平高于良性组(P<0.05);不同FIGO临床分期、淋巴结转移、肿瘤分化程度的宫颈癌术后患者血清HE4、B7-H3表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);300例宫颈癌术后患者持续随访5年,死亡率42.67%(128/300),存活率57.33%(172/300),死亡组血清HE4、B7-H3水平高于存活组(P<0.05);HE4、B7-H3单一指标检测对宫颈癌术后患者预后的评估价值低于2项指标联合检测。结论:血清HE4联合B7-H3检测可有效提高宫颈癌术后患者预后评估的灵敏度与准确度。

胸腔积液中B7-H4蛋白联合ADA和CEA水平检测在胸腔积液鉴别诊断中的应用价值

目的:检测肺癌性胸腔积液(LC-MPE)和结核性胸腔积液(TPE)中B7-H4蛋白、腺苷脱氨酶(ADA)和癌胚抗原(CEA)水平,评价其单独或联合检测对LC-MPE与TPE的鉴别诊断价值。方法:收集120例肺癌患者(LC-MPE组)和82例结核性胸膜炎患者(TPE组)共202例胸腔积液(PE)样本。采用酶速率法、电化学发光法和ELISA法检测2组患者PE中ADA、CEA和B7-H4蛋白水平,采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析以确定单项指标以及联合模式的诊断效能指标[灵敏度、特异度、约登指数(YI)和ROC曲线下面积(AUC)]。结果:TPE组患者PE中ADA水平高于LC-MPE组(P<0.05);LC-MPE组患者PE中B7-H4蛋白和CEA水平高于TPE组(P<0.05);ROC曲线分析,ADA、CEA和B7-H4蛋白单项检测的灵敏度分别为93.30%、83.33%和79.90%,特异度分别为86.59%、96.34%和72.50%,AUC分别为0.927、0.925和0.836;平行试验检测,3项指标联合模式有最高的诊断价值,灵敏度为93.90%,特异度为97.50%,YI为0.914,AUC为0.989。结论:联合检测PE中ADA、CEA和B7-H4蛋白水平的诊断效能优于各指标单项评估,联合检测可提高LC-MPE和TPE的鉴别诊断效能。

前列腺癌组织B7-H4蛋白表达水平及其与患者不良预后的关系

目的:探讨B7-H4在前列腺癌组织中的表达及其预后意义。方法:采用免疫组织化学染色检测72例前列腺癌和50例良性前列腺增生组织B7-H4蛋白表达水平,Kaplan-Meier检验计算B7-H4表达与前列腺癌总体生存率的关系,Cox比例风险模型分析影响患者预后的因素。结果:前列腺癌组织B7-H4高表达率为83.3%(60/72),前列腺增生组织为32.0%(16/50),前列腺癌组织B7-H4高表达率明显高于前列腺增生组织(χ~2=33.105,P<0.001)。B7-H4在Gleason评分8～10分中的阳性表达率明显高于2～7分组,Ⅲ—Ⅳ组B7-H4阳性表达率明显高于Ⅰ—Ⅱ组,淋巴结转移组B7-H4阳性表达率明显高于无淋巴结转移组(P<0.05)。Gleason评分越高,中位生存期越短;Ⅲ—Ⅳ期中位生存期明显低于Ⅰ—Ⅱ期,淋巴结转移的患者中位生存期更短,B7-H4高表达越高中位生存期明显低于B7-H4低表达(均P<0.05);Gleason评分、TNM分期、淋巴结转移、B7-H4蛋白是影响前列腺癌患者预后的独立危险因素(均P<0.05)。结论:前列腺癌组织中B7-H4呈高表达,可以作为前列腺癌预后评估的分子标志物之一。

索拉非尼对不同人肝癌细胞株中B7-H3和B7-H4蛋白表达的影响

目的研究索拉非尼对不同人肝癌细胞株Hep G2、Hep3B、BEL-7402、BEL-7404、BEL-7405、QGY-7701、QGY-7703、SMMC-7721、MHCC97H、MHCC97L、HCCLM3、HCCLM6中B7-H3和B7-H4蛋白表达的影响。方法免疫印迹法和溴化噻唑蓝四氮唑(MTT)比色法检测索拉非尼在不同人肝癌细胞株中对B7-H3和B7-H4蛋白表达的影响及索拉非尼对不同人肝癌细胞株的抑制作用。结果不同人肝癌细胞株中B7-H3和B7-H4蛋白表达较正常人肝细胞(HL-7702)均显著上调(P<0.01)。索拉非尼对Hep3B、BEL-7404、MHCC97H、HCCLM3和HCCLM6肝癌细胞株的细胞毒活性IC_(50)值分别为14.56、9.14、9.46、17.21、9.29μmol/L。分别以5、10、20μmol/L剂量索拉非尼处理Hep3B、BEL-7404、MHCC97H、HCCLM3、HCCLM6后,B7-H3和B7-H4蛋白表达均较对照组显著下调(P<0.01)。结论 B7-H3和B7-H4蛋白在不同人肝癌细胞株中通常过表达,可影响肿瘤免疫逃逸,可能是未来肝癌防治的一个新靶点。

肿瘤减灭术后静脉腹腔联合化疗治疗晚期上皮性卵巢癌效果及对患者血清B7-H4蛋白、E-选择素水平的影响

目的:研究了肿瘤减灭术后静脉腹腔联合化疗治疗晚期上皮性卵巢癌(EOC)的效果及对血清B7-H4蛋白、E-选择素水平的影响。方法:纳入晚期EOC患者150例,均行肿瘤减灭术和静脉腹腔联合化疗。记录治疗有效率、治疗前后B7-H4蛋白、E-选择素水平。使用二元Logistic回归分析影响晚期EOC患者治疗反应的危险因素。使用ROC曲线分析B7-H4蛋白、E-选择素对晚期EOC患者治疗反应的预测价值。结果:肿瘤减灭术后静脉腹腔联合化疗对晚期EOC患者的治疗有效率为77.33%。治疗后患者B7-H4蛋白和E-选择素水平均明显低于治疗前(均P<0.05)。治疗前B7-H4蛋白水平、治疗前E-选择素水平、肿瘤减灭术后残余病灶直径≥1 cm均为晚期EOC患者治疗反应的独立影响因素(均P<0.05)。ROC曲线显示,B7-H4蛋白和E-选择素对晚期EOC患者治疗反应的预测中,AUC分别为0.727(95%CI:0.617~0.837)和0.799(95%CI:0.707~0.892)。结论:肿瘤减灭术后静脉腹腔联合化疗对晚期EOC患者的治疗有效率为77.33%,治疗前B7-H4蛋白、E-选择素水平均为晚期EOC患者治疗反应的独立影响因素,并可作为晚期EOC患者治疗反应预测的有效指标。

可溶性B7-H4蛋白、溴结构域蛋白4、S100钙结合蛋白A4在非小细胞肺癌中的表达及与患者预后的关系

目的探讨可溶性B7-H4蛋白(sB7-H4)、溴结构域蛋白4(BRD4)、S100钙结合蛋白A4(S100A4)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及与患者预后的关系。方法取98例NSCLC患者的肿瘤组织和50例肺良性病变患者的正常肺组织,免疫组化法检测sB7-H4、BRD4及S100A4蛋白的表达情况。随访2年,记录两组患者的预后情况,NSCLC患者预后的影响因素采用多因素Logistic回归分析;绘制受试者工作特征(ROC)曲线,计算曲线下面积(AUC),评估sB7-H4、BRD4、S100A4单独及联合检测对NSCLC患者预后的预测价值。结果肿瘤组织中sB7-H4、BRD4及S100A4蛋白高表达率均明显高于正常肺组织(P﹤0.01)。随访2年,98例NSCLC患者生存73例,死亡25例。死亡NSCLC患者肿瘤组织中sB7-H4、BRD4及S100A4蛋白高表达率均高于生存患者(P﹤0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,有远处转移、分化程度为低中分化、TNM分期为Ⅲ+Ⅳ期、sB7-H4蛋白高表达、BRD4蛋白高表达、S100A4蛋白高表达均是NSCLC患者预后生存的独立危险因素(P﹤0.01)。ROC曲线显示,sB7-H4+BRD4+S100A4联合检测预测NSCLC患者死亡的AUC为0.890(95%CI:0.751~1.000),高于三者单独检测的0.809、0.850、0.764。结论sB7-H4、BRD4及S100A4蛋白在NSCLC患者中高表达,且高表达是影响NSCLC患者预后生存的独立危险因素,三指标联合检测对患者的预后评估有重要价值。

OPN和B7-H4在上皮性卵巢肿瘤中的表达及意义

背景与目的:上皮性卵巢癌的发生涉及多方面的因素。近年的研究表明骨桥蛋白(osteopontin,OPN)与多种肿瘤的发生发展有关,但其在卵巢癌中的研究较少;而B7-H4是新近发现的肿瘤标志物,其在卵巢癌中的研究也很少。本研究旨在探讨卵巢上皮性肿瘤中OPN和B7-H4的表达及其临床意义。方法:采用免疫组化法检测15例正常卵巢组织、20例卵巢良性肿瘤组织、20例卵巢交界性肿瘤组织、40例卵巢癌组织标本中OPN和B7-H4的表达情况,分析两者表达与卵巢癌临床病理特征的关系。结果:OPN和B7-H4在上皮性卵巢癌组织中的表达高于卵巢交界性及良性、正常卵巢组织,各组之间的差异有统计学意义(P<0.05)。OPN和B7-H4在低分化卵巢癌中的阳性率均显著高于高、中分化卵巢癌(P<0.05),Ⅲ～Ⅳ期卵巢癌中的阳性率亦显著高于Ⅰ～Ⅱ期卵巢癌(P<0.05)。OPN阳性者伴有较高的淋巴结转移率(P<0.05),而与年龄、组织学类型无关;B7-H4在卵巢浆液性癌中的阳性率显著高于黏液性癌(P<0.05),而与年龄、淋巴结转移等无关。结论:OPN、B7-H4在上皮性卵巢癌中表达升高,可为卵巢恶性肿瘤的诊断提供参考。

卵巢浆液性癌B7-H4的表达及临床病理意义

目的：探讨B7-H4在卵巢上皮性肿瘤浆液性癌中的表达及其临床病理意义。方法：用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）技术及免疫组织化学染色的方法检测6例良性卵巢上皮性肿瘤、10例交界性卵巢上皮性肿瘤、41例卵巢浆液性癌、5例内膜样癌、2例透明细胞癌和10例粘液性癌标本中B7-H4mRNA及蛋白表达，并结合临床病理资料对其中41例卵巢浆液性癌中B7-H4蛋白的表达进行分析。结果：B7-H4mRNA在74例卵巢上皮性肿瘤中均有表达，B7-H4蛋白在良性卵巢上皮性肿瘤、交界性卵巢上皮性肿瘤、恶性卵巢上皮性肿瘤中的表达阳性比例分别为2／6、6／10、52／58，恶性标本阳性率明显高于非恶性标本，差异有统计学意义（P〈0．05）；58例恶性卵巢上皮性癌标本中浆液性癌、内膜样癌、透明细胞癌、黏液性癌的B7-H4蛋白阳性比例分别为41／41、5／5、2／2、4／10，前三种病理类型B7-H4蛋白阳性率明显高于最后一种，且差异有统计学意义（P〈0．05）；41例卵巢浆液性癌标本中B7-H4蛋白阳性细胞比例在〈10％，〉10％～50％，〉50～80％，〉80～100％4组中的分布差异无显著性（P〉0．05），且其蛋白表达与临床分期及病理分级有关（P〈0．05），而与患者年龄、腹水细胞学、淋巴结转移无关（P〉0．05）。结论：B7-H4在卵巢浆液性癌的高表达及其与临床分级分期的关系，提示其可能与肿瘤发生发展有关，可为卵巢恶性肿瘤诊断及治疗提供靶位点。