血清SOD1、BACE1水平与认知功能障碍的相关性

目的 拟探讨血清β分泌酶(BACE)1、超氧化物歧化酶(SOD)1水平与认知功能障碍的相关性。方法 选取2018年1月至2020年10月在新疆医科大学第一附属医院老年病科就诊、年龄≥60岁、诊断为阿尔茨海默病(AD)的老年患者57例,轻度认知障碍(MCI)患者92例,另选同期健康体检者为对照104例。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上述3组间蛋白水平。结果 AD组血清BACE1、SOD1水平明显低于MCI组、对照组(P<0.05);AD组男性患者血清BACE1水平明显低于MCI组(P<0.05)。Pearson相关性分析表明:血清BACE1水平与MCI呈正相关(P<0.05)。多因素有序Logistic回归分析表明:年龄、腹围、总胆固醇水平是认知功能障碍的独立危险因素(P<0.05),头围、高密度脂蛋白(HDL)可能是认知功能障碍的保护因素(P<0.05)。结论 低水平的血清BACE1、SOD1可能与认知功能障碍相关。

血栓通对阿尔茨海默症模型小鼠认知功能及神经异常兴奋性的作用及其机制研究

目的探究血栓通[主要有效成分为三七皂苷(panax notoginseng,PNS)]对阿尔茨海默症(Alzheimer’s disease,AD)模型小鼠认知功能及神经兴奋性的影响,并探讨其潜在分子机制。方法用APP/PS1小鼠作为AD研究动物模型,在小鼠淀粉样蛋白尚未检测到阶段(2月龄)开始每日以60 mg/kg对血栓通组(APP/PS1+PNS)行灌胃给药,每日1次,连续给药6个月(给药至8月龄);对照组小鼠予同等体积的0.9%氯化钠(APP/PS1+vehicle)灌胃处理,同月龄野生型小鼠予0.9%氯化钠灌胃处理作为正常对照组(WT+vehicle),每组各15只。6个月后,新物体识别实验、Morris水迷宫实验检测小鼠的认知功能;EEG脑电检测、Western blot、细胞表面生物素化试验以检测各组小鼠皮质与海马中BACE1的活性、Nav1.1α的分布、表达以及Navβ2的表达与酶解情况(Navβ2的酶解片段Navβ2 full length及Navβ2-CTF表达检测)。结果新物体识别实验显示,与对照组APP/PS1小鼠相比,血栓通用药后APP/PS1小鼠的辨别指数(discrimination index,DI)上升(P<0.05);Morris水迷宫检测结果发现,血栓通灌胃6个月后小鼠在探索实验中逃避潜伏期缩短(P<0.05),撤除平台后在目标象限停留时间增加(P<0.05)、穿梭平台次数增加(P<0.05);EEG脑电检测结果发现,血栓通给药后减少了APP/PS1小鼠棘波放电出现的频率(P<0.05)。血栓通给药后显著降低了BACE1蛋白水平的表达(P<0.05),而全长片段Navβ2的蛋白水平显著上升(P<0.05),并纠正了Nav1.1α在神经元内外的异常分布(P<0.05)。结论血栓通可以改善AD模型小鼠的学习记忆能力、纠正大脑异常兴奋性,其作用机制可能与抑制BACE1的活性从而减少Navβ2由APP/PS1诱导的过度酶解,纠正皮质、海马神经元Nav1.1α的异常表达与分布,调节神经元的兴奋性有关。

艾灸早期干预对SAMP8小鼠学习记忆行为及APP、BACE1表达影响研究

目的观察艾灸早期干预对衰老小鼠认知功能的影响,并观察艾灸对APP代谢途径相关蛋白及基因表达的影响,探讨艾灸的作用机制。方法以快速衰老的SAMP8小鼠作为研究模型,24只SAMP8随机分为两组(每组12只):艾灸组、模型组。12只雄性SAMR1系小鼠作为空白对照。艾灸组进行8周艾灸干预,每次10 min,每周5次,共8周,模型组及空白组进行假灸对照。采用Morris水迷宫法检测各组小鼠学习记忆能力,Western Blot、RT-PCR检测APP、BACE1表达。结果Morris水迷宫检测显示,第1~4天,被动逃避实验结果显示:在第1天和第2天,模型组小鼠逃避潜伏时明显高于正常组(P=0.01,0.003),艾灸组显著低于模型组(P=0.03,0.05),第3天和第4天,各组间差异没有统计学意义(P>0.05)。第5天空间探索实验结果显示,模型组小鼠穿越平台次数显著低于正常组(P=0.01),艾灸组显著高于模型组(P=0.04),平台象限游泳路程方面,模型组均明显低于正常组(P=0.02),艾灸组略高于模型组,差异没有统计学意义(P>0.05)。Western Blot结果显示:与正常组小鼠相比,模型组小鼠海马APP、BACE1表达显著升高(P=0.002,P<0.001),艾灸组小鼠海马APP、BACE1表达显著低于模型组(P=0.003,P=0.02)。RT-PCR结果表明:模型组APP、BACE1表达显著高于正常组(P=0.003,P=0.004),艾灸组APP、BACE1低于模型组,差异没有统计学意义(P=0.41,P=0.36)。结论艾灸早期干预对衰老小鼠认知功能的影响,此效应与调节APP代谢途径相关基因、蛋白的影响相关。

BACE1抑制剂分子水平高通量筛选体系的建立

目的建立体外分子水平β-分泌酶(BACE1)抑制剂高通量筛选体系。方法采用均相时间分辨荧光法(HTRF),通过优化反应时间、酶浓度、检测仪器等实验条件,建立BACE1抑制剂高通量筛选体系,根据待测样品对BACE1活性抑制程度筛选其抑制剂。结果采用HTRF法建立了BACE1抑制剂高通量筛选体系,其中反应时间确定为6h、BACE1浓度为670U/L,采用VICTOR3酶标仪测得信噪比为649.6,信背比为44.6,Z′因子为0.91,变异系数小于10%,并筛选到一系列IC50小于10-6mol/L的化合物。结论采用HTRF法建立的BACE1抑制剂筛选体系灵敏度高、特异性和稳定性好,可用于BACE1抑制剂的高通量筛选。

中药单体及其有效成分经BACE1途径防治阿尔茨海默氏病实验研究进展

随着老龄化社会进程的加速,阿尔茨海默氏病的发病率逐年升高,防治AD的新药开发愈来愈紧迫,中药在AD防治研究中的地位凸显。多种致病因素中,β-分泌酶在Aβ代谢过程中的作用日益受到重视,本文对近年来中药单体和中药有效成分通过抑制BACE1防治AD的研究进行综述,以期为进一步研究提供思路。

携带ApoEε4、BACE1基因SNP患者发生全麻后认知功能障碍与增龄的关系

目的研究携带ApoEε4、BACE1基因单核苷酸多态性(SNP)患者发生全麻后认知功能障碍与增龄的关系。方法应用PCR技术检测ApoE、BACE1基因单核苷酸多态性,通过基因筛查,选择携带ApoEε4及BACE1 G/C等位基因的老年组、中青年组各50例患者,接受静吸复合麻醉后,用简易精神量表对其术后3 d认知功能进行MMSE评分(评分<25被认为有认知功能障碍),将评分进行统计学分析。结果中青年组患者术前、术后MMSE评分均高于25,而老年组患者术后3 d的MMSE评分较术前及中青年组同时间的MMSE评分均明显降低(P<0.01);老年组患者术后第一天MMSE评分≤25的患者人数占该组总人数的比例明显多于中青年组(96%vs 18%,P<0.01);老年组术后3 d出现认知功能障碍的人数为48例,而中青年组只有9例,两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论年龄与携带ApoEε4、BACE1基因SNP患者发生全麻后认知功能障碍有密切关系,老年人是易患人群。

ERK1/2信号通路介导大蒜素对β-分泌酶亚基Bace1的调控作用

本文应用细胞免疫荧光、Western blot、Real-Time PCR和ELISA等实验方法检测ERK1/2信号通路介导大蒜素对β-分泌酶亚基Bace1的调控作用。结果发现,SH-SY5Y细胞经大蒜素处理后,Bace1表达较对照组降低,而给予大蒜素和ERK1/2通路抑制剂PD98059共同处理后的SH-SY5Y细胞中Bace1表达又明显升高,表明大蒜素可以通过ERK1/2通路下调Bace1的表达;ELISA结果显示,大蒜素处理组SH-SY5Y细胞中Aβ1-40和Aβ1-42的表达减少,而大蒜素和PD98059处理组的SH-SY5Y细胞中Aβ1-40和Aβ1-42的表达较单纯大蒜素处理组有所升高。基于此结果,说明大蒜素可以抑制β-分泌酶的活性,下调Bace1的表达,进而提示大蒜素通过减少Aβ的生成,对神经元起到一定的保护作用。

BACE1作为阿尔茨海默病一种潜在的生物标志物

目前诊断阿尔兹海默病（Alzheimer’s disease，AD）主要依靠临床标准。这一领域极度缺乏生物学标志物来辅助诊断AD以及验证治疗效果。作为AD生物学标志物需要满足几项基本要求，包括能够反映AD的病理学特点以及拥有80％敏感性以区分于其它痴呆症，另外需可靠性和可重复性，易于操作和分析，相对便宜。在AD的发病机制中BACE1（beta-site APP—cleaving enzyme 1）是关键酶。那么是否可以通过测定外周的BACE1的水平和β-分泌酶活力做为AD的生物学标志物，其效果与直接检测大脑和脑脊液中的BACE1相等同。然而，是否外周的BACE1参与了AD病理改变以及能否反映出AD的病变进程知之甚少。本文根据国外最新有关文献，就BACE1在不同组织中作为AD的分子生物学标志物的可行性进行了阐述。

BACE1基因RNA干扰质粒的构建及干扰效果的鉴定

目的构建BACE1基因干扰质粒,并研究其在neuro-2a细胞中的表达,为以其为靶点的基因治疗提供稳定转染的质粒。方法选择人、小鼠和大鼠的BACE1基因共有序列为干扰靶点,设计3组连接有GFP的干扰质粒,将构建好的质粒转染neuro-2a细胞,通过Real time RT-PCR及Western-blotting的方法分别在RNA及蛋白质水平上检测BACE1的表达,以分析其干扰的效率。结果经酶切及测序证实,插入的DNA片段序列与设计序列完全一致。与空质粒对照组相比,3个干扰靶点对BACE1基因的表达均有不同程度的抑制作用。其中pYr-1.1-siBACE1在mRNA水平及蛋白质水平干扰效果均最好。结论成功构建了BACE1基因的干扰质粒pYr-1.1-siBACE1,并能有效抑制neuro-2a细胞内源性BACE1基因表达,为靶向BACE1基因的治疗提供了有力的工具。

中药海尔福、元首复方制剂对麦芽酚铝染毒小鼠β-淀粉样蛋白裂解酶1活性影响的实验研究

探讨中药复方海尔福、元首制剂对麦芽酚铝染毒小鼠β-淀粉样蛋白裂解酶1活性的影响。方法:选择50只SPF级KM品种小鼠为实验小鼠。前期试验阶段,实验小鼠随机分为十组,每组5只,除空白对照编号1、编号2组外,其余八组小鼠用30mmol/L浓度的麦芽酚铝溶液进行腹腔注射,每次按48mg/kg·d腹腔注射(30g体重小鼠每只0.2mL),每连续注射3天休息1天。建立模型30天后,进入后期实验,将小鼠分为正常组、模型组、治疗1组、治疗2组。治疗1组用中药复方海尔福制剂灌胃治疗,治疗2组用中药复元首制剂灌胃治疗,每天一次,连续30天。实验前期,所有组的小鼠进行水迷宫实验训练,确保全部小鼠熟练上岸,建立记忆。实验中、后期不再训练,直接进行连续3天水迷宫测定,每天三次,直至实验结束。记录所有小鼠游水时间和错误次数,以此来测定模型建立前、模型建立后和治疗后水迷宫游水时间和错误次数,作为小鼠记忆力变化的判断。实验结束,处死动物,体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中小鼠β位淀粉样前体蛋白裂解酶1(BACE1)的活性。结果:依正常组、模型组、治疗1组、治疗2组顺序,脑β-淀粉样蛋白裂解酶1(BACE1)活力分别为(30.14±3.00)、(32.86±3.75)、(27.00±4.10)▲▲、(28.38±4.16)▲。方差分析:F=2.872,P=0.052,与模型组比较,▲P<0.05,▲▲P<0.01,差异有统计学意义。结论:中药复方海尔福、元首制剂对麦芽酚铝染毒小鼠β-淀粉样蛋白裂解酶1活性存在影响,治疗后明显降低。

积雪草乙酸乙酯提取物对快速老化模型小鼠SAMP8记忆行为及脑内基因APP和BACE1表达影响的研究

目的:探讨积雪草乙酸乙酯提取物对快速老化模型小鼠SAMP8记忆行为和大脑淀粉样肽前体蛋白(APP)、淀粉蛋白前β位分解酶1(BACE1)基因表达的影响。方法:将SAMP8随机分为模型对照组、积雪草乙酸乙酯提取物高、中、低剂量组(以生药量计为40、20、10 g·kg-1)和石杉碱甲组(0.386 mg·kg-1),8只/组,各药物组按设计剂量连续给药2个月,模型对照组给予等体积双蒸水灌服。采用Morris水迷宫(MWM)方法观察SAMP8行为学改变,应用半定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定SAMP8脑内APP和BACE1 m RNA含量的变化。结果:Morris水迷宫测试中,与模型对照组比较,积雪草乙酸乙酯提取物高、中剂量组和石杉碱甲组的逃避潜伏期显著缩短(p<0.01)、停留时间显著延长(p<0.01)及平台象限百分比显著增大(p<0.01或p<0.05),积雪草乙酸乙酯提取物中剂量组和石杉碱甲组的寻求次数比模型对照组明显增多(p<0.01);RT-PCR结果显示积雪草乙酸乙酯提取物高、中剂量组和石杉碱甲组SAMP8大脑的APP和BACE1 m RNA表达水平显著降低(p<0.05)。结论:积雪草乙酸乙酯提取物对SAMP8学习记忆功能有明显改善作用,并能降低脑内APP和BACE1 m RNA的表达。

α4β2亚型烟碱受体激动抑制SH-EP1-α4β2 nAChR-hAPP695细胞BACE1基因启动子活性

目的：为了在构建的共表达α4β2烟碱亚型受体（nAChR）基因和淀粉样蛋白前体蛋白（APP695）基因的SH-EP1-α4β2 nAChR—hAPP695细胞模型进行高通量药物筛选，探索用基因启动子活性分析作为在此细胞模型进行亚型特异性药物筛选的简捷节省的方法。方法：用荧光定量PCR的方法，探测在SH-EP1-α4β2 nAChR-hAPP695细胞模型α4β2 nAChR激动对BACE1和PSEN1 mRNA水平的影响；

高压氧通过调节BACE1蛋白水平改善APP/PS1模型小鼠Aβ相关病理改变及认知功能

目的:探索高压氧(HBO)治疗对阿尔茨海默病APP/PS1转基因(TG)小鼠脑β-淀粉样蛋白(Aβ)相关病理改变及认知障碍的治疗作用。方法:取4月龄的APP/PS1转基因小鼠30只随机分为2组(TG组和TG+HBO组),野生对照小鼠15只(WT组),分别进行高压氧治疗和对照治疗6个疗程。治疗结束后用水迷宫实验检测各组小鼠认知功能;取小鼠脑标本进行免疫荧光检测小鼠脑老年斑表达情况;高尔基染色检测树突棘密度;通过酶联免疫吸附实验检测Aβ40和Aβ42的水平;Western blot法检测Sirt1、BACE1、APP、α/β-CTF和synaptophysin的蛋白表达水平。结果:与TG组相比,高压氧治疗能减少TG+HBO组小鼠脑中Aβ的产生和老年斑的形成(P<0.01);与TG组相比,高压氧治疗能增加TG+HBO组小鼠脑中Sirt1的蛋白水平,降低BACE1的蛋白水平,从而减少β-CTF的产生(P<0.01);与TG组相比,HBO治疗能增加TG+HBO组小鼠脑神经棘突数量与synaptophysin蛋白水平(P<0.01),从而明显改善APP/PS1转基因小鼠的学习记忆功能。结论:高压氧治疗能通过增加Sirt1蛋白表达、降低BACE1蛋白水平而减少APP裂解产生Aβ及老年斑形成,进而减轻Aβ的神经毒性损伤,最终发挥神经保护作用。

姜黄素通过激活PPARγ和抑制BACE1减少神经细胞内β淀粉样蛋白的产生

目的:本课题旨在研究姜黄素处理体外培养的神经细胞后BACE1、PPARγ及Aβ40和Aβ42的变化,探讨其抑制β淀粉样蛋白作用的可能机制。方法:通过LipofectaminTM2000将质粒APPswe与BACE1-mychis瞬时共转染入SHSY5Y细胞,然后用姜黄素分浓度组与时间组处理细胞,通过RT-PCR测定BACE1及PPARγ的mRNA水平;通过Western Blotting检测BACE1及PPARγ的蛋白表达;通过ELISA检测Aβ40和Aβ42的变化。结果:RT-PCR及Western blot结果显示转染细胞经姜黄素处理后BACE1的mRNA及蛋白表达水平显著减少,呈浓度和时间依赖性(P<0.05);而PPARγ的mRNA及蛋白表达水平增加,也呈浓度和时间依赖性(P<0.05)。ELISA结果显示Aβ40和Aβ42的产生随处理浓度及时间的增加显著降低(P<0.05)。结论:姜黄素可显著抑制体外培养的神经元中Aβ40和Aβ42的产生,且该作用与其激活PPARγ和抑制BACE1密切相关。

督脉电针对APP/PS1双转基因痴呆小鼠皮层细胞形态及APP、BACE1蛋白表达的影响

目的:观察督脉电针对阿尔茨海默病(AD)小鼠皮层细胞形态和APP、BACE1表达的影响,探讨针刺疗法抗痴呆的作用机制。方法:7月龄雄性APP/PS1小鼠共30只,随机分为模型组、电针组和药物组(药物组选用JNK特异性阻断剂SP600125),每组10只。以相同遗传背景的C57BL/6小鼠10只作为正常对照组,选取“百会”“印堂”“人中”穴,隔天针刺干预1次。治疗15次后运用苏木精-伊红(HE)染色法观察各组小鼠皮层细胞形态学的变化,采用免疫蛋白印迹法(Western blot)观察各组小鼠皮层APP、BACE1蛋白表达水平。结果:与对照组比较,模型组皮层区细胞排列紊乱,核固缩现象明显,APP、BACE1表达增多(均P<0.01);与模型组比较,电针组和药物组核固缩现象均改善,且电针组APP、BACE1表达减少(均P<0.05),药物组APP表达减少,差异无统计学意义(P>0.05),BACE1表达减少(P<0.05)。结论:督脉电针干预可能通过改善细胞核固缩现象,减少APP、BACE1的表达,降低Aβ沉积,缓解APP/PS1痴呆小鼠的学习记忆障碍。

右美托咪定对脾切除术后老年大鼠海马长链非编码RNA BACE1-AS的影响

目的探讨右美托咪定对脾切除术后老年大鼠海马长链非编码RNA BACE1-AS的影响。方法选取健康雄性SD大鼠180只,18月龄,体质量400~540g,采用随机数字表法将其分为5组(n=36):对照组(C组)、假手术组(D组)、手术组(O组)、生理盐水组(S组)、右美托咪定组(Y组)。C组不作任何处理,D组麻醉后切皮但不实施手术,O组麻醉后行脾切除术,Y组切除脾脏前5min给予50μg/kg腹腔注射右美托咪定;S组于切除脾脏前5min给予腹腔注射等量生理盐水。采用Morris水迷宫法记录大鼠逃避潜伏期和游泳路径,采用HE染色观察海马CA3区病理学变化,实时荧光定量PCR法测定lncRNA BACE1-AS和BACE1mRNA的表达。采用蛋白印迹法(Western Blot)检测Aβ、APP及BACE-1的表达。结果与C组、D组比较,O组、S组和Y组大鼠术后逃避潜伏期和游泳路径延长,海马lncRNA BACE1-AS、BACE1mRNA、Aβ、APP及BACE-1的表达上调,与O组、S组比较,Y组大鼠术后逃避潜伏期和游泳路径缩短,海马lncRNA BACE1-AS、BACE1mRNA、Aβ、APP及BACE-1的表达下调。与术前比较,O组、S组和Y组术后1、3、7d大鼠术后逃避潜伏期和游泳路径延长。结论右美托咪定可改善老龄大鼠围术期神经认知障碍,其机制可能与抑制老年大鼠海马长链非编码RNA BACE1-AS表达有关。

具有新型核心结构的肽类BACE1抑制剂的设计、合成及活性评价

BACE1(β-Site APP cleaving enzyme 1,β-secretase 1,Asp2,memapsin 2)抑制剂可能成为防治老年痴呆症的突破口之一,KMI-008是羟甲羰基(Hydroxymethylcarbonyl,HMC)类BACE1抑制剂中的先导化合物,其核心结构Pns(Phenylnorstatine)与BACE1的催化中心通过氢键和疏水作用,模拟了酶与底物形成的四面体过渡态,从而抑制BACE1.为寻找新结构的BACE1抑制剂,本研究以KMI-008为先导化合物,分别或同时引入4-羟基或氨基取代的脯氨酸及苯丙氨酸,筛选功能基的优势构象使其与酶形成氢键,并模拟Pns的疏水作用,进而模拟BACE1与底物形成的四面体过渡态,寻找新的核心结构.设计并合成了19条肽序列,用时间分辨荧光法测定目标肽体外对BACE1的抑制作用.所合成化合物对BACE1有一定的抑制作用,其中两个化合物LK-MX-41和LK-MX-42与先导化合物的活性相近,其核心结构由L-Phe-D-Pro组成,可以模拟BACE1的催化中心与底物相互作用的过渡态;含有该结构的肽序列,有望成为研究肽类BACE1抑制剂的另一途径.应用Autodock 4将所合成化合物与BACE1进行对接,结合体外活性测试结果,对构效关系进行了初步探讨.先导化合物及目标肽用固相法合成,经RP-HPLC测定纯度,ESI-MS确定分子量.

N端为含氮杂环的新型羟乙基胺类BACE1抑制剂的设计、合成与活性评价

目的开发一类N端含氮杂环结构的新型羟乙基胺(hydroxyethylamine,HEA)类BACE1抑制剂,筛选对抑制活性有贡献的新型N端结构。方法设计并合成了8个N端为含氮杂环的HEA类化合物并鉴定其结构,同时,以儿茶酚类化合物(-)-表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)作为阳性对照,分别测定它们对BACE1的抑制活性。结果所有化合物均通过核磁共振氢谱和质谱确证其结构。BACE1抑制活性评价结果表明,其中N端为吲哚结构的化合物Ⅰ6表现出明显的抑制活性。结论含取代基的吲哚结构与BACE1的S2口袋具有一定的相互作用,有利于提高这类化合物对BACE1的抑制活性,可作为进一步研究的先导结构。

醒脑液对PAP双转基因痴呆小鼠NEP和BACE1 mRNA表达的影响

目的:探讨中药醒脑液(XNY)对PAP双转基因痴呆小鼠大脑组织中中性内肽酶(NEP)和β分泌酶(BACE1)mRNA表达的影响。方法:采用实时荧光定量PCR技术分别观测正常对照组、模型组、西药对照组、XNY高剂量组、XNY中剂量组和XNY低剂量组小鼠大脑组织中NEP和BACE1 mRNA的表达。结果:与模型组相比,XNY高剂量组脑内NEP mRNA含量表达上调(P<0.05);XNY高、中剂量组BACE1 mRNA含量表达下降(P<0.01)。结论:醒脑液对双转基因痴呆小鼠大脑组织中NEP和BACE1 mRNA表达有较好的调控作用,说明醒脑液对防治老年性痴呆能起到良好效果。

基于作用机制的氨基恶唑啉呫吨类BACE1抑制剂的分子设计

天冬氨酰蛋白酶(β-site amyloid precursor protein cleaving enzyme 1,BACE1)作为治疗阿尔兹海默症的潜在靶点,其抑制剂的开发已成为医学领域的重要研究方向。本文以59个氨基恶唑啉呫吨类BACE1抑制剂为研究对象,运用比较分子相似性指数(comparative molecular similarity index,Co MSIA)和分子对接方法,深入挖掘影响抑制剂活性的特征结构,以及抑制剂与BACE1间的结合模式和作用力类型,并以此为基础设计新型抑制剂并预测其活性。Co MSIA模拟结果表明,由立体场、静电场、疏水场和氢键供体场4个场组合建立的构效关系模型具有较强的预测能力,交叉验证相关系数Q2=0.48,非交叉验证相关系数Rncv2=0.94,外部预测相关系数Rpre2=0.85;通过分子对接,发现抑制剂占据了靶标的S3、S1和S2'位点,与BACE1之间的结合主要是通过氢键作用力和π-π堆积作用实现的;占据S2'位点的R取代基是立体场、静电场和疏水场影响的敏感区域,氨基恶唑啉核心官能团是氢键供体场的敏感区域。基于以上分析获得的抑制剂特征结构信息及其与蛋白质受体的作用机制,成功设计出了新的分子并预测了抑制活性。实验所得模型和信息,为后续新型BACE1抑制剂的结构优化和改造提供了重要理论依据。