hBAFF-R-Fc融合分子的构建、表达与鉴定

目的构建人hBAFF-R-Fc基因的真核表达质粒,并表达有生物学活性的人hBAFF-R-Fc融合蛋白。方法化学合成法合成人hBAFF-R膜外区cDNA编码基因,酶切测序证实后,与hIgG4.Fc/Leu235Glu突变体一起导入线性化pSec/WG真核表达载体,阳性重组体酶切测序证实后,采用脂质体法稳定转染CHO细胞,用夹心ELISA检测其表达;收集的蛋白经蛋白A亲和纯化,以SDS-PAGE与Western blot进行鉴定并检测hBAFF-R-Fc的活性。结果测序证实构建的hBAFF-R膜外区与hBAFF-R-Fc cDNA阅读框完整,ELISA证实转染hBAFF-R-Fc基因的CHO细胞培养上清中含有hBAFF-R-Fc蛋白,SDS-PAGE与Western blot鉴定证实其为hBAFF-R-Fc蛋白。hBAFF-R-Fc蛋白对活化后的B细胞有抑制增殖的作用。结论成功构建了人hBAFF-R-Fc真核表达载体,并使有生物学活性的hBAFF-R-Fc蛋白在CHO细胞上获得了稳定表达。为进一步研究该蛋白在狼疮性肾炎等自身免疫性疾病治疗中的作用奠定了基础。

人BAFF-R-IgG4mut融合蛋白对BXSB狼疮鼠CD4^+T细胞增殖活性的影响

目的观察人BAFF-R-IgG4mut融合蛋白对BXSB狼疮鼠CD4+T淋巴细胞增殖活性的影响。方法体外分离、纯化BXSB狼疮鼠脾脏CD4+T细胞,流式细胞技术检测CD4+T细胞BAFF-R表达,MTT法观察不同剂量BAFF-R-IgG4mut融合蛋白对BAFF刺激的CD4+T细胞增殖活性的影响。结果台盼蓝染色分离后的BXSB狼疮鼠脾脏CD4+T细胞活性率为(93.6±3.2)%;流式细胞技术检测BXSB狼疮鼠脾脏CD4+T细胞表达BAFF-R;100ng/ml、200ng/ml、400ng/ml BAFF-R-IgG4mut蛋白作用于BAFF和CD3抗体刺激的CD4+T细胞后,CD4+T细胞增殖抑制率分别是56.24%、67.07%和75.45%,较单纯BAFF+CD3抗体组差异有统计学意义(P<0.05)。结论 BAFF-R-IgG4mut融合蛋白可体外抑制BXSB狼疮鼠CD4+T细胞增殖活性。

BLyS及其受体BAFF-R在SLE患者中的表达及与SLEDAI和血清IgG的相关性研究

目的:通过在基因和蛋白水平上检测系统性红斑狼疮(SLE)患者BLyS及其受体BAFF-R的表达水平,探讨BLyS及BAFF-R与SLE发病机制的相关性。方法:实时荧光定量聚合酶链反应(Realtime PCR)检测60例SLE患者(其中病情活动期34例,稳定期26例)、50例健康人群外周血单个核细胞(PBMC)的BLyS mRNA、BAFF-R mRNA的表达水平,ELISA方法检测其血清BLyS的表达,并分析其与SLE活动指数(SLEDAI)、血清免疫球蛋白IgG的相关性。结果:SLE患者PBMC中BLyS、BAFF-R mRNA及血清中BLyS蛋白表达水平均明显高于健康对照组(t值分别为14.02、14.6、9.56,P值均<0.01);活动期BLyS mRNA及BLyS蛋白表达水平明显高于稳定期(t值分别为2.26、3.96,P值均<0.05),BAFF-R mRNA表达在活动期和稳定期之间没有差别(t=1.49,P>0.05)。SLE患者BLyS mRNA及BLyS蛋白水平均与SLEDAI积分和血清IgG水平呈正相关(P值均<0.01),BAFF-R mRNA水平则与SLEDAI、IgG均无相关性(P值均>0.05)。结论:SLE患者BLyS mRNA、BAFF-R mRNA、BLyS蛋白表达水平升高,BLyS在一定程度上反映了病情的活动,表明BLyS及其受体可能参与SLE的发生和发展,并为监控SLE的病情和治疗效果提供了新的辅助方法。

NF-κB抑制剂和IFN-γ对BAFF-R基因启动子活性的影响

目的:探讨IFN-γ和NF-κB抑制剂对人BAFF-R基因启动子活性的影响。方法:以人全血基因组DNA为模板,PCR方法扩增得到BAFF-R基因转录起始点上游5’端-1562^+261 bp的片段,与荧光素酶报告基因载体pGL3-Basic连接构建8个序列缺失质粒。将重组质粒瞬时转染人多发性骨髓瘤细胞株KM3,通过检测荧光素酶的相对活性,确定启动子活性最强的区域;分别用NF-κB抑制剂(BAY11-7082)和IFN-γ对活性最强的启动子进行干预,测定并比较荧光素酶的相对活性;同时RT-PCR检测干预前后BAFF-R基因mRNA的表达水平。结果:IFN-γ对BAFF-R基因启动子活性有促进作用并且可以上调BAFF-R mRNA的表达,NF-κB抑制剂(BAY11-7082)对BAFF-R基因启动子活性有抑制作用并且可以下调BAFF-R mRNA的表达。结论:IFN-γ和NF-κB信号通路参与了BAFF-R基因的转录调控,为进一步研究BAFF-R的调节机制提供了基本的依据。

人BAFF-R基因启动子活性的初步研究

目的以B淋巴细胞刺激因子受体BAFF-R基因5'上游区序列为研究对象,初步鉴定、分析该基因的启动子所在区域。方法克隆BAFF-R基因5'侧翼区1823 bp序列,构建8个含有不同长度启动子序列的荧光素酶报告基因表达质粒pGL3-B1～B8,将这8个序列缺失重组质粒与psv-β-gal质粒共转染细胞,检测荧光素酶的相对活性,确定启动子所在区域。结果8个重组质粒中pGL3-B2、pGL3-B3、pGL3-B5、pGL3-B6启动子的活性较低;pGL3-B7启动子的活性最强,pGL3-B8启动子活性最低。结论BAFF-R基因5'端-288～-430、-712～-868和-1420～-1562三个区段可能存在转录沉默子元件,-617～-712和-1277～-1420区段存在转录增强子元件,BAFF-R基因的核心启动子可能位于-1420～+261区域。

多发性骨髓瘤中BAFF-R表达及其对细胞存活影响的研究

目的 研究多发性骨髓瘤（MM）中B淋巴细胞刺激因子受体（BAFF-R）基因、蛋白表达水平;并进一步研究BAFFR对MM细胞生长存活的影响.方法 应用RT-PCR,ELISA,Western Blot等技术检测BAFF-R在MM细胞中的表达;WST-1,TUNEL凋亡实验,Western Blot检测BAFF-R对MM细胞增殖、凋亡的影响.结果 BAFF-R mRNA和蛋白表达于MM细胞中;与对照组相比,BAFF-R阻断性抗体（1,5,15 μg/ml）可抑制KM3细胞增殖,t值分别为79.78,72.21,76.88;P值均为0.000,即BAFF-R促进KM3细胞增殖;同时,BAFF-R阻断性抗体组（15 μg/ml）细胞凋亡明显高于对照IgG组;BAFF-R阻断性抗体组抗凋亡蛋白Bcl-2表达降低18％,促凋亡蛋白Bax表达增加43％,说明BAFF-R能够抑制MM细胞凋亡.结论 BAFF-R对MM细胞生长存活有一定影响,BAFF-R对多发性骨髓瘤的发生发展发挥一定作用.

原发性干燥综合征患者唇腺组织与外周血BAFF/BAFF-R检测及临床意义

目的:检测原发性干燥综合征(pSS)患者外周血B淋巴细胞活化因子(BAFF)和外周血B细胞/唇腺组织中BAFF受体(BAFF-R)的表达,进一步观察和研究BAFF在SS发病过程中的作用,并探讨将唇腺组织BAFF-R水平检测作为SS病理诊断指标的可能性。方法:选取确诊pSS患者唇腺组织及外周血样本35例,并选择35例非SS颌面部手术患者的正常唇腺组织及外周血作为对照。同步采用免疫组化技术检测唇腺组织BAFF-R表达情况,以流式细胞术检测外周血CD19+细胞表面BAFF-R的表达水平,和采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定外周血清中可溶性BAFF的水平。结果与对照组35例唇腺组织BAFF-R弱阳性着色相比,32/35例(91.4%)pSS患者唇腺组织中BAFF-R特异性染色呈强阳性;SS患者外周血中CD19+B淋巴细胞膜表面BAFF-R表达(24.6±8.3%vs 3.8±2.2%,),以及其血清中可溶性BAFF的表达(8.2±1.1 ng/ml vs 1.9±0.7 ng/ml,)均显著高于对照组。结论:pSS患者唇腺组织与外周血中B细胞膜表面BAFF-R,以及血清可溶性BAFF的表达水平均上调,可能通过激活自身反应性B淋巴细胞参与pSS的发病过程;检测唇腺组织B细胞膜表面BAFF-R可能有助于pSS的诊断和疾病活动的判定。

BAFF-R-IgG4mut融合蛋白对BXSB狼疮鼠B淋巴细胞的影响

目的研究BAFF-R-IgG4mut融合蛋白对BXSB狼疮鼠B淋巴细胞的影响。方法体外观察BAFF-R-IgG4mut融合蛋白对BAFF刺激的B细胞活性的影响;100μl的PBS、200μg人IgG4和100μg BAFF-R-IgG4mut融合蛋白分别经腹腔注射10周龄雄性BXSB狼疮鼠,每周注射3次,共注射5周。分别检测狼疮鼠外周血BAFF水平、外周血和脾脏组织中B220+CD5-、CD3+CD4-、CD8+T和CD3+、CD4+、CD8-T细胞的表达以及狼疮鼠的存活率。结果BAFF-R-IgG4mut融合蛋白组外周血BAFF以及外周血、脾脏组织中B220+CD5-细胞较对照组下降(P<0.01),实验组狼疮鼠存活率较对照组延长(P<0.01)。结论BAFF-R-IgG4mut融合蛋白可抑制BXSB狼疮鼠B细胞活性。

外周血中BAFF、BAFF-R及Bcl-xL的表达与B细胞非霍奇金淋巴瘤疾病进展的相关性研究

目的研究B细胞性非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)患者外周血B cell-activating factor(BAFF)、其受体BAFF-R及Bcl-xL基因的表达,探讨其与B-NHL疾病进展的相关性。方法应用实时荧光定量PCR法检测36例B-NHL患者外周血单个核细胞(PBMC)BAFF、BAFF-R、Bcl-xL mRNAs的相对表达水平,以7例健康献血员作为对照,并据性别、淋巴瘤国际预后指数(IPI)、年龄、临床分期、是否耐药进行分组比较。结果 B-NHL患者PBMC BAFF、BAFF-R及Bcl-xL的mRNAs表达较正常对照组显著升高(P<0.05),Ⅲ/Ⅳ期高于Ⅰ/Ⅱ期,耐药B-NHL组高于非耐药组(P<0.05)。结论外周血单个核细胞BAFF、BAFF-R、Bcl-xL mRNAs的表达水平与B-NHL临床分期有关,在耐药B-NHL外周血中明显升高,提示BAFF/BAFF-R介导的信号通路可能参与B-NHL的临床进展及耐药机制。

BAFF-R胞内区与TRAF3相结合关键分子结合域的确定

目的:研究BAFF-R胞内区与TRAF3相互作用的关键结合域。方法:分别钓取BAFF-R胞内区和TRAF3的c DNA片段,克隆到酵母双杂交系统中,验证两者之间的相互作用。利用缺失PCR和重叠PCR的方法获取11个TRAF3的突变体,验证TRAF3的11个突变体和BAFF-R胞内区的相互作用。结果:TRAF3与BAFF-R胞内区发生相互作用时,有三个关键的分子结合域,分别是N端的螺旋结构382-400位氨基酸、中间的428-463位氨基酸以及TRAF3 C端的543-560位氨基酸。结论:在体内得到了BAFF-R胞内区与TRAF3相互作用的三个关键分子结合域,有助于展开对BAFF-R胞内区与TRAF3相互作用的进一步研究。

解毒祛瘀滋肾方对MRL/lpr狼疮小鼠BAFF/BAFF-R信号通路的影响

目的:通过研究解毒祛瘀滋肾方对mBAFF刺激后MRL/lpr狼疮小鼠BAFF/BAFF-R信号通路的影响,探讨解毒祛瘀滋肾方治疗系统性红斑狼疮增效减毒的机制。方法:将MR L/l pr狼疮小鼠随机分为4组:空白组(C)、mBAFF刺激组(R)、mBAFF+强的松组(G)、mBAFF+解毒袪瘀滋肾方组(J),Balb/c小鼠设为正常对照组。干预8周后,计算各组小鼠脾脏、胸腺指数,RT-PCR实验检测各组小鼠脾脏和胸腺BAFF、BAFF-R、NF-κB、Bcl-2、IL-10 mRNA的表达,流式细胞术检测各组小鼠脾脏淋巴细胞的凋亡。结果:在mBAFF刺激之后,MRL/lpr狼疮小鼠脾脏、胸腺指数以及脾脏、胸腺的BAFF、BAFF-R、NF-κB、Bcl-2、IL-10 mRNA的表达水平均显著上调(P<0.05),同时MRL/lpr狼疮小鼠脾脏淋巴细胞的凋亡率也随之下降;解毒祛瘀滋肾方和GC分别干预后,MRL/lpr狼疮小鼠脾脏及胸腺指数均有显著下降(P<0.05),脾脏淋巴细胞凋亡率也伴随着BAFF、BAFF-R、NF-κB、Bcl-2、IL-10 mRNA表达的降低而升高。结论:解毒祛瘀滋肾方治疗SLE增效减毒的机制可能是通过调控异常活化的BAFF/BAFF-R信号通路来实现的。

B细胞活化因子及其特异性受体BAFF-R在B细胞性非霍奇金淋巴瘤中的表达及其意义

目的探讨B细胞活化因子（BAFF）及其特异性受体BAFF-R在B细胞性非霍奇金淋巴瘤（B-NHL）中的表达及其意义。方法ELISA及荧光定量-聚合酶链反应（RTQ-PCR）测定临床标本BAFF及其特异性受体BAFF-R蛋白与mRNA的表达水平；RT—PCR、Western blot、荧光免疫细胞化学法和激光共聚焦技术鉴定人Burkitt’s 淋巴瘤细胞Raji中BAFF及BAFF-R的表达与定位；运用免疫组化的方法分析B—NHL患者肿瘤组织中BAFF的表达；WST细胞增殖试验及TUNEL法检测BAFF及其受体BAFF-R对B—NHLRaji细胞生长、存活与凋亡的影响。直线相关分析LDH浓度与BAFF蛋白及mRNA表达水平的关系。结果（1）B-NHL患者BAFF蛋白或mRNA表达水平显著高于正常对照组（P〈0．01）；（2）Raji细胞表达BAFF及其受体BAFF-R，并定位表达于Raji细胞的质膜上；（3）BAFF在B—NHL患者的表达量与B—NHL组织亚型有关，BAFF在小B细胞恶性淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、黏膜相关淋巴瘤和滤泡性淋巴瘤中表达量较高，而在套细胞淋巴瘤中表达量较低。（4）BAFF促进Raji细胞的生长与存活；（5）直线相关分析显示乳酸脱氢酶（LDH）与BAFF蛋白及mRNA表达水平呈显著相关性。结论BAFF及其特异性受体BAFF-R对于B—NHL的发生、发展起着重要的作用。

类风湿关节炎患者RANK、RANKL、caspase-1、IL-18、IL-33及BAFF-R水平表达情况

目的:探讨类风湿关节炎(RA)患者核因子κB受体活化因子(RANK)及其配体(RANKL)、半胱氨酸蛋白酶-1(caspase-1)、白介素-18(IL-18)、IL-33及B淋巴细胞表面表达的B淋巴细胞刺激因子受体(BAFF-R)水平表达情况。方法:临床纳入RA患者72例,同时纳入70例健康体检者作为研究的对照组。分别检测RA组患者以及对照组外周血RANK、RANKL、caspase-1、IL-18、IL-33及BAFF-R等水平。结果:(1)RA组RANK、RANKL表达率差异无显著性;但RA组RANK在CD3+T淋巴细胞、CD14+单核细胞、中性粒细胞上的表达强度要明显低于对照组,差异有显著性;RA组与对照组RANKL表达强度差异无显著性;(2)RA组caspase-1及其下游因子IL-18、IL-33水平均明显高于对照组,差异有显著性;相关性分析显示,caspase-1与IL-18、IL-33呈现正相关;(3)RA组BAFF-R水平明显高于对照组,差异有显著性。结论:通过对RA患者进行外周血RANK、RANKL、caspase-1、IL-18、IL-33及BAFF-R水平检测,能够综合评估病情的进展。另外,RA的发生及发展是多种机制共同作用的结果。

B淋巴细胞刺激因子及其受体介导的免疫细胞信号转导

肿瘤坏死因子家族成员B淋巴细胞刺激因子(BLyS)与其受体BAFF-R、BCMA和TACI特异性结合后,启动下游MAPK和NF-κB等抗凋亡信号通路,是维持免疫细胞生存、分化以及成熟的重要因素。该文就BLyS/BLyS-受体介导信号转导通路调节免疫细胞功能,参与免疫性疾病的发生以及各信号通路间的相互调控予以综述。

多发性骨髓瘤患者骨髓中BAFF的含量及B细胞表面BAFF受体表达的研究

本研究旨在分析多发性骨髓瘤(MM)患者骨髓中B细胞活化因子(BAFF)、增殖诱导配体(APRIL)的含量,B细胞、初始B细胞和记忆B细胞表面BAFF受体的表达,以探讨MM骨髓中B细胞的特点。采用流式细胞术检测19例初治MM(初治组)、17例平台期MM(平台期组)、10例对照组骨髓中B细胞(CD19+)、初始B细胞(CD19+IgD+)、记忆B细胞(CD19+CD27+)的表面BAFF受体(BAFF-R、TACI)的表达,ELISA法测定各组骨髓上清中BAFF、APRIL的含量。分析各组结果数据的差异及它们之间的相互关系。结果表明,初治组患者CD19+细胞表面BAFF-R受体表达明显高于平台期组和对照组;初治组患者CD19+IgD+细胞表面BAFF-R受体表达与平台期组无差别,但明显高于对照组;初治组患者CD19+CD27+细胞表面BAFF-R受体表达明显高于平台期组和对照组;各种B细胞表面BAFF-R受体表达在平台期组与对照组之间无差别;TACI受体表达总体水平低,初治组患者与平台期组、对照组比较,CD19+细胞、CD19+IgD+细胞、CD19+CD27+细胞表面TACI受体表达均无明显差异;初治组骨髓上清中BAFF含量明显高于平台期组和对照组,但平台期组与对照组间无明显差异;各组骨髓中APRIL的含量均无明显差异。结论:MM患者骨髓中BAFF含量增高,CD19+细胞、CD19+IgD+细胞和CD19+CD27+细胞表面BAFF受体的表达均增加,这可能有助于促进B细胞的增殖,因而可能与MM发病机制有关。

Tα146-162-iMDC对实验性自身免疫性重症肌无力中B细胞活化的影响

目的通过测定B淋巴细胞激活因子(BLyS)及TNF家族B细胞活化因子受体(BAFF-R)在实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)小鼠模型脾脏及淋巴结中的表达,探讨不成熟树突状细胞(iMDC)负载免疫优势肽段Tα146-162对MG中B细胞活化的影响。方法诱导小鼠骨髓细胞分化为iMDC并以其负载Tα146-162。将C57BL/6J小鼠随机分为发病组(A)、干预组(B)、正常对照组(C),每30d以电鳗来源的乙酰胆碱受体(TAChR)免疫A组和B组,共3次,每次免疫后3d以Tα146-162-iMDC皮下注射B组。第90天终止实验,用RT-PCR法检测脾脏BLyS、BAFF-R mRNA的表达。结果(1)A组模型成功率75%,平均临床评分1.67分,B组分别为25%和0.33分,差异有统计学意义(P<0.01)。(2)脾脏中BLyS mRNA的表达水平A组较C组明显上调(P<0.01),B组亦高于C组(P<0.05),但相对A组降低(P<0.01)。(3)脾脏中BAFF-R mRNA的表达水平A组及B组相对C组下调(P<0.05),且A组显著低于B组(P<0.05)。结论应用Tα146-162-iMDC干预能降低EAMG的发病率及发病程度,其机制可能与BLyS/BAFF-R调控的B细胞活化密切相关。

BAFF及其特异性受体BAFF—R对多发性骨髓瘤细胞增殖及凋亡的影响研究

目的探讨B淋巴细胞刺激因子（BAFF）及其特异性受体BAFF—R对多发性骨髓瘤（MM）细胞增殖及凋亡的影响。方法采用流式细胞术（FCM）、RT—PCR、WesternBlot、荧光免疫细胞化学技术检测BAFF及其受体BAFF—R的表达与定位；wsT细胞增殖实验及TUNEL法检测BAFF及其受体BAFF—R对MM肿瘤细胞生长、存活与凋亡的影响。结果①MM细胞能够表达BAFF及其特异性受体BAFF—R；②BAFF及其受体BAFF—R定位表达于KM3细胞的浆膜上；③BAFF及其受体BAFF—R促进MM细胞的增殖、存活，抗细胞凋亡。结论BAFF及其受体BAFF—R对于骨髓瘤发生、发展可能起着重要的作用。

类风湿关节炎患者B细胞亚群分析及表没食子儿茶素没食子酸酯对B细胞亚群的影响

目的·探讨类风湿关节炎(rhumatoid arthritis,RA)患者B细胞亚群特点及表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechingallate,EGCG)对RA患者B细胞亚群的调节作用。方法·纳入年龄、性别匹配的RA患者和健康对照各29例,运用配对t检验分析2组外周血中B细胞亚群的差异;根据28关节疾病活动评分(disease activity score in 28 joints,DAS28)的值将RA患者分为活动组(2.6≤DAS28<5.1)和高度活动组(DAS28≥5.1),运用t检验分析2组外周血中B细胞亚群的差异。在0、10、100μmol/L EGCG和2.5μg/L葡萄球菌A蛋白共刺激条件下,体外培养RA患者外周血单个核细胞,24 h后应用实时聚合酶链反应检测B细胞活化因子受体(B-cell-activating factor receptor,BAFF-R)的表达水平,48 h后用流式细胞术检测B细胞亚群。结果·RA患者的总B细胞、未分化B细胞、记忆B细胞和浆母细胞占淋巴细胞比例和数量均高于健康对照(P<0.05),而CD19^+IL-10^+调节性B细胞(regulatory B cell,Breg)占淋巴细胞比例和数量与健康对照相比差异无统计学意义(P>0.05)。10例活动组与19例高度活动组RA患者的总B细胞及各B细胞亚群(除CD19^+IL-10^+Breg外)占淋巴细胞比例和数量的差异无统计学意义(P>0.05),6例活动组与12例高度活动组RA患者CD19^+IL-10^+Breg占淋巴细胞比例和数量的差异也无统计学意义(P>0.05)。RA患者外周血总B细胞所占比例与IgG型类风湿因子呈弱正相关(r=0.308)。EGCG能显著提高CD19^+IL-10^+Breg占淋巴细胞比例(P<0.05),且100μmol/L EGCG能显著降低总B细胞中BAFF-R mRNA的表达水平(P=0.000);但其对未分化B细胞、记忆B细胞和浆母细胞占淋巴细胞比例无显著影响(P>0.05)。结论·B细胞可能在RA发病中发挥辅助作用,RA患者CD19+IL-10+Breg数量反馈性增加,EGCG可促进Breg增殖,降低BAFF-R mRNA表达水平。

BR3胞外区保守结构域附近刚性区域分析

目的:分析BR3胞外区保守结构域附近刚性区域在BR3结合BAFF过程中的作用。方法:将BR3胞外区分成包含Dx L结构域的BR3-1和其C端相邻的BR3-2,构建BR3-1-Fc和BR3-2-Fc重组质粒。将正确的BR3-1-Fc和BR3-2-Fc重组子转入大肠杆菌BL21中,诱导表达,并用蛋白A凝胶亲和层析柱纯化获得相应蛋白。ELISA检测其结合BAFF,BR3-1/2小肽对BR3-1-Fc与BAFF结合活性的影响。结果:表达纯化出纯度高达90%的BR3-1-Fc和BR3-2-Fc融合蛋白。融合蛋白可与BAFF结合,且具有剂量依赖性。BR3-2小肽在高浓度条件下对BR3-1-Fc与BAFF的结合起促进作用,300μg/ml时,促进作用达20%。结论:BR3受体胞外区保守Dx L结构域相邻的BR3-2刚性结构区域也可与BAFF结合,在BR3与BAFF的高亲和性能中起作用,为进一步设计高亲和性能BAFF拮抗肽奠定了理论基础。

IFN-γ对多发性骨髓瘤细胞上B细胞活化因子受体表达的影响及相关机制研究

目的 探讨IFN-γ对多发性骨髓瘤（multiple myeloma,MM）细胞上B细胞活化因子受体（BAFF-R）的表达变化影响及相关机制.方法 应用RT-PCR和ELISA法检测IFN-γ诱导多发性骨髓瘤细胞BAFF-R的表达水平,观察NF-κB特异性抑制剂BAY11-7082对其mRNA和蛋白表达水平的影响;应用Western blot检测NF-κB在IFN-γ诱导的多发性骨髓瘤细胞反应中的活化程度.结果 IFN-γ以时间和剂量依赖方式上调多发性骨髓瘤细胞BAFF-R表达.BAY11-7082以剂量依赖方式在基因转录和翻译水平显著抑制IFN-γ诱导的BAFF-R表达.结论 NF-κB信号通路参与了多发性骨髓瘤细胞BAFF-R的表达,如何参与有待进一步研究.