肠癌细胞BAI1基因表达的检测及其抗肿瘤作用

目的:探讨大肠癌细胞和组织中BAIl基因的表达情况及BAIl对血管和肿瘤生长的抑制作用。方法:提取大肠癌细胞总RNA,按RT-PCR试剂盒的步骤反转录成cDNA,PCR产物行20g/L脂糖凝胶电泳分析,BAIl对血管和肿瘤生长的抑制作用应用微血管数量(MVQ)和肿瘤移植实验的方法进行。结果:大肠癌细胞、癌组织中大多数BAIl不表达或表达下降,在全部转移的淋巴结中不表达,在小鼠CC95大肠癌细胞移植肿瘤内注射Ad-hBAIl表达载体可以有效的影响肿瘤的血管生成(P<0.05),并抑制肿瘤的生长(P<0.01)。结论:BAIl在肠癌细胞、组织及转移的淋巴结中表达降低,该Ad-hBAIl表达载体可抑制肿瘤新生血管的形成并抑制肿瘤的生长。

BAI1基因在肠癌细胞的表达及抗血管生成作用

目的 探讨大肠癌细胞和组织中BAI1基因的表达情况及BAI1对血管生长和肿瘤生长的抑制作用。方法 采用异硫氰酸胍一步法提取大肠癌细胞总RNA,按RT-PCR试剂盒的步骤反转录成cDNA,PCR产物行2％琼脂糖凝胶电泳分析。BAI1对血管生长和肿瘤生长的抑制作用应用肿瘤移植实验MVQ的方法进行。结果 大肠癌癌组织中大多数BAI1不表达或表达下降,在全部转移的淋巴结中不表达,而在小鼠CC95大肠癌细胞移植肿瘤的周围注射Ad-bBAI1表达载体可以有效的抑制肿瘤的生长,影响肿瘤的血管生成。结论BAI1在肠癌组织及细胞表达降低,该基因可抑制肿瘤的新生血管并抑制肿瘤的生长。

BAI1基因在肝癌抗血管生成中的作用

目的:探讨BAI1基因在肝癌抗血管生成中的作用。方法:利用CRISPR/Cas9技术构建BAI1基因敲除的PLC/PRF/5细胞系。采用Sanger测序和蛋白质印迹法验证BAI1基因敲除结果。通过CCK8法检测BAI1基因敲除对肝癌细胞增殖的影响。将PLC/PRF/5细胞系与血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)共培养,检测BAI1基因对细胞成管能力的影响。构建裸鼠皮下移植瘤模型,在体内研究BAI1基因对肝癌生长和肿瘤血管生成的影响。结果:Sanger测序结果显示BAI1基因目的区域成功敲除,敲除后细胞系中BAI1蛋白表达缺失。BAI1基因敲除后PLC/PRF/5细胞增殖显著加快,与HUVEC共培养后细胞成管数量显著增多。BAI1基因过表达的Hep3B细胞在裸鼠体内生长速度减慢,肿瘤组织中CD31阳性表达降低。结论:利用CRISPR/Cas9基因编辑技术成功构建BAI1基因敲除的PLC/PRF/5细胞系。BAI1基因可以抑制肝癌细胞的增殖和血管生成。